复方温心汤预处理对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

为观察中药复方温心汤预处理对缺血再灌注损伤的心肌保护作用,采用家兔心肌缺血再灌注损伤模型,将56只家兔随机分成7组,即假手术组、缺血再灌注组、缺血预适应组、复方丹参组、硝酸异山梨酯组、温心汤低剂量组、温心汤高剂量组,以血清心肌酶学变化、再灌注心律失常发生率及心肌细胞超微结构改变作为观察指标。结果:①缺血预适应组、温心汤预处理组心肌酶水平与缺血再灌注组相比,差异均有非常显著意义(P&;lt;0.01);②缺血预适应组和温心汤预处理的再灌注心律失常发生率与缺血再灌注组相比,差异有非常显著意义(P&;lt;0.05);③缺血预适应和温心汤预处理可明显改善亚细胞结构损害。结论:缺血预适应和中药复方温心汤预处理可以降低心肌酶活性,缩小梗死面积,降低再灌注心律失常发生率,改善亚细胞结构损害,对心肌缺血再灌注损伤有保护作用。     

氯氨酮对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡和Fas蛋白、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨氯胺酮作用下大鼠实验性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡与Fas及Bcl-2蛋白表达的变化及与心肌组织损伤的关系,并分析心肌组织病理学损伤程度。方法:以穿线结扎或松扎左冠状动脉制备大鼠心肌缺血再灌注模型。32只大鼠随机分成假手术组(假手术4.5 h)、缺血再灌注组(缺血30min、再灌注4 h)、低剂量氯胺酮+缺血再灌注组(缺血30min、再灌注4h)及高剂量氯胺酮+缺血再灌注组(缺血30min、再灌注个4 h)。以缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡的变化,S-P免疫组化法分别检测Fas与Bcl-2蛋白水平变化,做病理组织切片检查心肌损伤情况。结果:心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡指数及Fas蛋白阳性染色指数与Bcl-2蛋白阳性染色指数均增加,氯氨酮可减少心肌凋亡,减少Fas和Bcl-2蛋白阳性细胞表达;心肌缺血再灌注后心肌组织呈大小不一的灶性坏死,坏死周围有炎性细胞浸润,氯胺酮作用后坏死减轻,低剂量氯胺酮作用更明显。结论:心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡、Fas基因的蛋白与Bcl-2蛋白表达量均增加,氯氨酮可减少心肌凋亡,减少细胞Fas和Bcl-2蛋白阳性表达,从而减轻心肌损伤,且低剂量氯氨酮作用更明显。     

不同剂量美托洛尔对家兔缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨不同剂量美托洛尔对家兔缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响.方法 48只家兔随机分为4组,假手术组、模型组、小剂量美托洛尔组、大剂量美托洛尔组.采用高脂饮食并免疫损伤制作动脉粥样硬化模型.用药4周后结扎家兔左冠状动脉前降支(LAD),建立家兔缺血再灌注动物模型.测定家兔血脂指标(TC、TC)及心率,取左心室病理,应用TTC染色的方法 检测各组心肌梗死面积,采用免疫组化染色半定量检测心肌核冈子KBp65(NF-KBp65)及Fas蛋白的表达量,采用TUNEL法计数心肌凋亡指数.结果 药物干预组心率较不用药组心率减慢(P＜0.01),大剂量美托洛尔组比小剂量美托洛尔组心率减慢(P＜0.05);手术组的凋亡指数、Fas和NF-κB蛋白表达较假手术组明显增加(P＜0.01),大小剂量美托洛尔组凋亡指数、Fas和NF-κB蛋白的表达较模型组明显减少(P＜0.01).大剂量美托洛尔组凋亡指数、Fas和NF-KB蛋白的表达较小剂量美托洛尔组明显减少(P＜0.05);大小剂量美托洛尔组心肌梗死面积较模型组明显减小(P＜0.01),大剂量美托洛尔组较小剂量美托洛尔组心梗面积明显减少(P＜0.01).结论 美托洛尔对缺血再灌注心肌有保护作用,减少心梗面积,可能与它减慢心率、减少心肌细胞Fas和NF-κB蛋白的表达抗凋亡有关,美托洛尔对缺血再灌注损伤心肌的保护作用呈剂量依赖性.     

参乌冠心颗粒剂对大鼠实验性缺血心肌细胞凋亡及Fas、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨中药复方参乌冠心颗粒剂防治冠心病心肌缺血的分子作用机制。方法采用异丙肾上腺素连续多点皮下注射,复制大鼠心肌缺血动物模型。运用DNA末端标记(TUNEL)法,观察复方参乌冠心颗粒剂对缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响,并运用免疫组化的方法观察其对细胞凋亡相关基因Fas、Bcl-2蛋白表达的影响。结果①参乌冠心颗粒剂有明显的抗心肌缺血作用。②参乌冠心颗粒剂可显著下调Fas基因的蛋白表达,上调Bcl-2基因的蛋白表达,明显抑制和阻断心肌细胞发生凋亡。③参乌冠心颗粒剂可能通过抑制和阻断心肌细胞过度凋亡的发生而起到保护心肌的作用。结论通过调节缺血心肌Fas、Bcl-2基因的蛋白表达从而抑制和阻断细胞凋亡的发生,说明中药复方参乌冠心颗粒剂具有防治冠心病心肌缺血损伤的分子作用机制。     

氟伐他汀预处理对缺血再灌注的大鼠心肌细胞Fas蛋白表达及心室重塑的影响

目的研究氟伐他汀预处理对缺血-再灌注损伤大鼠心肌细胞Fas蛋白表达及心室重塑的影响。方法将30只SD大鼠随机分成氟伐他汀组（Flu组）、缺血-再灌注组（I/R组）及缺血-预适应组（IPC组）,每组10只。分别用20mg/kg.d氟伐他汀、生理盐水灌胃给药。2周后均经历缺血-再灌注损伤。观察心室重塑和心肌细胞形态,并测定Fas蛋白阳性细胞OD值和心肌细胞凋亡指数。结果 IPC组及Flu组心肌细胞损伤及心室重塑程度明显减轻。Flu组、IPC组Fas蛋白阳性细胞OD值分别为0.20±0.07、0.27±0.11,与I/R组Fas蛋白阳性细胞OD值0.36±0.15比较,P〈0.05;Flu组、I/R组细胞凋亡指数分别为（26.66±9.94）%、（34.45±16.27）%,与I/R组（65.52±20.39）%比较,P〈0.01;而Flu组、IPC组Fas蛋白阳性细胞OD值、细胞凋亡指数比较,P〉0.05。结论氟伐他汀预处理能有效的通过Fas/FasL系统抑制缺血-再灌注损伤的细胞凋亡过程从而保护心肌细胞。     

七氟醚对大鼠缺血再灌注心肌凋亡相关基因表达的影响

目的探讨七氟醚预处理对大鼠心脏缺血再灌注过程中心肌细胞Bcl-2及Bax基因表达的影响。方法24只SD大鼠随机分成3组（n=8）：假手术对照组（C组）、缺血再灌注对照组（IR组）和七氟醚预处理组（s组）。IR组与S组接受左冠脉3h阻断和3h再灌注。七氟醚预处理组在缺血前吸入七氟醚,30min后洗脱15min。取心肌缺血区组织,RT-PCR测Bcl-2及Bax基因的mRNA表达,免疫印迹法（Western-blot）测蛋白表达。结果与C组相比较,IR组和S组Bcl-2的mRNA和蛋白表达均下调,而S组高于IR组;Bax的mRNA和蛋白表达IR及S组均高于C组,IR组则高于S组。结论七氟醚预处理抑制心肌细胞凋亡可能与上调Bd-2基因的表达、下调Bax基因的表达有关。     

阳离子脂质体转染Akt基因对缺血性心脏病细胞凋亡的影响

目的 研究转染基因Akt对心肌细胞凋亡的影响.方法 培养新生SD大鼠心肌细胞;提取人Akt质粒,用脂质体将其转染心肌细胞.实验分5组:空白对照(A)组、缺血-再灌注损伤对照(B)组、Akt基因(C)组、阳离子脂质体空载体(D)组和Akt抑制剂(E)组;各组进行模拟缺血-再灌注后测定乳酸脱氢酶(LDH)含量、细胞活性、细胞凋亡率及Akt、Bcl-2、NF-kB p65蛋白表达.结果 C组LDH含量较B组、D组和E组明显减少(P＜0.05),细胞活性高(P＜0.05),细胞凋亡率低(P＜0.05),Akt、Bcl-2与NF-kB p65蛋白表达增加(P＜0.05).结论 细胞凋亡参与了心肌缺血-再灌注损伤过程,转染Akt基因可减少缺血-再灌注损伤心肌细胞凋亡率.     

灯盏花素联合缺血预适应对兔心肌缺血再灌注细胞凋亡的保护机制

目的:探讨灯盏花素联合缺血预适应对心肌缺血再灌注细胞凋亡的保护作用机制。方法:采用在体兔结扎心肌左旋支建立缺血再灌注损伤模型。采用免疫组化法检测心肌梗死危险区组织细胞色素C、Caspace-3、bcl-2蛋白表达。结果:灯盏花素联合预适应组心肌酶释放较缺血再灌注组明显降低(P<0.01),bcl-2蛋白表达显著增加(P<0.01),细胞色素C及Caspace-3蛋白表达明显减少(P<0.01)。结论:灯盏花素联合缺血预适应可通过减轻细胞色素C的释放,上调Bcl-2表达,下调Capase-3表达从而抑制心肌细胞凋亡。     

白藜芦醇预处理对心肌细胞缺血/再灌注损伤的细胞凋亡的影响

目的观察白藜芦醇预处理对心肌细胞缺血再灌注损伤的细胞凋亡的影响。方法培养乳鼠心肌细胞,模拟I/R损伤,随机分为阴性对照组、缺血再灌组及白藜芦醇预处理组,采用TUNEL染色法及Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测心肌细胞凋亡;底物酶解法检测caspase-3活性;免疫组织化学法结合计算机图像分析检测心肌细胞Bcl-2/Bax蛋白的表达。结果Res预处理使得心肌细胞凋亡率由(39.7±5.4)%降至(8.3±0.8)%,caspase-3的相对活性由5.9±0.7降至2.8±0.4,P<0.05。Res预处理可使Bcl-2表达的光密度值由99.5±4.8升至138.9±8.4,Bax表达的光密度值由140.7±8.6降至125.3±5.8,P<0.05。结论白藜芦醇预处理可通过促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达、抑制促凋亡蛋白Bax的表达,抑制凋亡过程中关键酶caspase-3的活性,减少I/R引起的心肌细胞凋亡。     

瑞芬太尼预处理和缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注早期细胞凋亡的影响

目的观察瑞芬太尼预处理和缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤早期细胞凋亡的影响及其机制。方法SD大鼠72只,随机分为假手术组(S组),缺血再灌注组(IR组),瑞芬太尼预处理组(R组),缺血预处理组(IP组)。分别在再灌注1、3、5h处死6只大鼠,取左肝内叶组织免疫组织化学法分别测定各组Bcl-2和Bax的表达,原位细胞凋亡法测定肝细胞凋亡的情况,光镜、电镜观察肝脏组织病理变化。结果与S组相比,IR组细胞凋亡指数、Bax表达均增高(P<0.05),而瑞芬太尼预处理和缺血预处理组减弱了缺血再灌注上述指标的升高(P<0.05),二者没有区别;IR组Bcl-2表达减少(P<0.05),瑞芬太尼预处理和缺血再灌注组可增强其在肝组织的表达(P<0.05),二者没有区别。病理检查显示瑞芬太尼预处理和缺血预处理减轻肝缺血再灌注损伤。结论瑞芬太尼预处理及缺血预处理都有抑制大鼠肝脏缺血再灌注损伤早期细胞凋亡的作用,均与上调Bcl-2蛋白表达、下调Bax蛋白表达有关,瑞芬太尼可模拟缺血预处理的抗细胞凋亡作用。     

参七汤抑制再灌注心肌细胞凋亡模型小鼠的实验研究

目的:探讨中药参七汤抑制缺血再灌注心肌细胞凋亡的机制。方法:将小鼠随机分为参七汤(高、中、低剂量)组、消心痛对照组、空白对照组和模型组。参七汤组和消心痛组分别灌胃给药5d,空白对照组和模型组分别灌胃生理盐水5d,除空白对照组外,各组进行缺血再灌注造模,之后测定各组心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平,分析心肌细胞凋亡指数和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达水平。结果:与模型组比较,参七汤组SOD活性升高、MDA水平降低,Bcl-2表达指数升高,Bax表达指数降低。结论:参七汤对心肌缺血和缺血后再灌注导致的心肌细胞损伤均具有较好的保护作用。     

雷米普利对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的研究雷米普利(RAM)对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用。方法链脲佐菌素致糖尿病大鼠被随机分为缺血/再灌注(I/R)、缺血预适应(IPC)和RAM3组。RAM组每天用RAM(1mg·kg-1)灌胃,IPC和I/R组用等体积生理盐水灌胃。4wk后各组动物均经历心肌缺血/再灌注损伤,IPC组于缺血前行心肌缺血预适应。连续监测心电图,检测心肌梗死范围、心肌细胞凋亡、凋亡蛋白Bcl-2与Bax表达,光镜下观察心肌形态学改变。结果与I/R组比较,RAM及IPC组ST-段抬高幅度降低,室早出现时间推迟,持续时间缩短,室速、室颤发生率降低,心肌梗死范围缩小,心肌细胞凋亡减轻,Bcl-2/Bax比值升高。结论连续4wk应用RAM可减轻糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤。     

缺血预处理对体外循环后心肌细胞凋亡及P13K/Akt通路的影响

目的:观察缺血预处理对犬体外循环术后心肌细胞凋亡以及P13K/Akt通路的影响.方法:10只雄性健康家犬随机分为对照组和缺血预处理组.常规建立体外循环,对照组阻断主动脉60 min后开放;预处理组于阻断主动脉前,夹闭主动脉2 min后开放3 min,反复2次.于主动脉开放90 min后取心肌标本.使用TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化法检测磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)、凋亡相关蛋白BAX及Bcl-2表达情况.结果:缺血预处理可以明显减少体外循环后心肌细胞凋亡指数,降低再灌注90 min后凋亡蛋白BAX/Bcl-2比值,上调磷酸化Akt表达.结论:缺血预处理抑制犬体外循环后心肌细胞凋亡,并激活再灌注后P13K/Akt通路.     

细胞调亡在心肌缺血再灌注组织中的动态表达及意义

目的探讨心肌缺血再灌注组织中细胞凋亡的临床意义。方法建立家兔心肌缺血再灌注模型,采用原位杂交技术,免疫组化等技术,观察心肌缺血再灌注损伤后caspase-3mRNA变化规律、bcl-2mRNA动态表达对心肌细胞凋亡的影响。结果心肌缺血再灌注可诱导心肌基因表达谱发生改变,凋亡与存活基因二者共同调控着缺血再灌注损伤的应激性变化。结论凋亡是缺血再灌注损伤的表现形式,促进心肌重构,对心肌产生不利影响。     

乐尔脉胶囊对大鼠缺血再灌注后期大脑皮层细胞凋亡的干预作用

目的:研究乐尔脉胶囊(LEM)对大鼠局灶性脑缺血2h再灌注30d后所致大脑皮层神经细胞凋亡的干预作用。方法:以线栓阻断(MCAO)法制备大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,分为假手术、模型、盐酸氟桂利嗪及LEM高、低剂量组;应用免疫组化、凋亡细胞原位末端标记法(TUNEL)与逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测大鼠大脑细胞凋亡和细胞凋亡相关基因产物(Fas)、凋亡促进基因(Bax)mRNA的表达,并进行图像分析。结果:模型组凋亡细胞主要位于缺血侧大脑皮层缺血边缘区(半暗带区);缺血侧大脑皮层Fas、Bax mRNA的表达在缺血再灌注30d后仍有升高;LEM组Fas、Bax mRNA的表达显著低于模型组(P<0.01),凋亡细胞数也显著低于模型组(P<0.01)。LEM组可明显降低损伤侧脑组织Fas、Bax mRNA的表达,抑制细胞凋亡,减轻缺血再灌注对大鼠大脑皮层神经细胞的损伤。结论:LEM对大鼠脑缺血再灌注30d后的细胞凋亡有一定的干预作用。     

缺血后处理对大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-xl/s的影响

目的:从Bcl-xl/s基因和蛋白水平探讨缺血后处理抗大鼠心肌细胞凋亡的机制。方法:18只健康Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、缺血再灌注损伤(I/R)组、缺血后处理(PostC)组,每组6只。采用原位缺口末端标记(TUNEL)检测大鼠心肌细胞凋亡指数;免疫组化法检测BcL-xl/s蛋白表达水平;荧光实时定量PCR法检测心肌组织Bcl-xl/s基因表达水平。结果:与I/R组相比,PostC组再灌注后心肌细胞凋亡指数明显降低,PostC组Bcl-xl蛋白及mRNA表达水平明显上调,Bcl-xs蛋白及mRNA表达水平明显下调。结论:PostC能显著减少缺血再灌注后心肌细胞凋亡,凋亡相关基因Bcl-xl、Bcl-xsmRNA及蛋白参与了由缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡。     

缺血预处理对体外循环后心肌细胞凋亡及PI3K／Akt通路的影响

目的：观察缺血预处理对犬体外循环术后心肌细胞凋亡以及P13K／Akt通路的影响。方法：10只雄性健康家犬随机分为对照组和缺血预处理组。常规建立体外循环,对照组阻断主动脉60min后开放;预处理组于阻断主动脉前,夹闭主动脉2min后开放3min,反复2次。于主动脉开放90min后取心肌标本。使用TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化法检测磷酸化蛋白激酶B（P—Akt）、凋亡相关蛋白BAX及Bcl-2表达情况。结果：缺血预处理可以明显减少体外循环后心肌细胞凋亡指数,降低再灌注90min后凋亡蛋白BAX／Bcl-2比值,上调磷酸化Akt表达。结论：缺血预处理抑制犬体外循环后心肌细胞凋亡,并激活再灌注后PI3K／Akt通路。     

依那普利干预对缺血-再灌注大鼠模型心肌细胞凋亡Bcl-2和Bax基因蛋白表达的影响

目的探讨依那普利干预对缺血再灌注大鼠模型心肌细胞凋亡Bcl-2和Bax基因蛋白表达的影响。方法雄性Wistar大鼠45只,随机分成3组:①缺血-再灌注(I/R)组15只,结扎左冠状动脉45min,松解4h,结扎前15min以及再灌注1h分别静脉注射生理盐水2ml/kg。②依那普利组(L)组15只:结扎左冠状45min,松解4h,结扎前15min以及再灌注1h分别静脉注射依那普利10mg/kg(依那普利以5mg/kg溶于生理盐水)。③假手术(C)组15只,冠状动脉下穿线不结扎,持续4.75h股静脉注射生理盐水2ml/kg。于实验结束时,取出心脏于4%多聚甲醛固定、石蜡包埋切片,按TUNEL法检测凋亡细胞,以S-P免疫组化法检测Bcl-2和Bax基因蛋白表达。结果①I/R组和L组标本中分别有13例和11例心肌细胞发生凋亡,L组凋亡细胞百分数较I/R组明显减少,差异具有高度显著性(P<0.05)。C组15例样本中12例均未检测到TUNEL阳性细胞。②L组Bcl-2表达较I/R组和C组均增强,L组Bax阳性心肌细胞较I/R组明显减少(P<0.05)。结论缺血-再灌注心肌细胞存在明显的凋亡现象,且受Bax蛋白与Bcl-2基因蛋白下调影响,Bax蛋白与Bcl-2蛋白共同调节心肌细胞凋亡,依那普利干预可诱导心肌细胞表达Bcl-2,减少心肌细胞凋亡。     

美托洛尔对缺血再灌注心肌细胞凋亡及凋亡相关基因的影响

目的:研究美托洛尔对缺血再灌注过程中心肌细胞凋亡以及对凋亡相关基因的影响。方法:用末端标记原位细胞凋亡法和免疫组化法检测细胞凋亡程度。结果:缺血再灌注组与假手术组相比,心肌细胞凋亡程度明显增加,Bcl-2蛋白的表达都有明显增高,差异具极显著性(P<0.01);美托洛尔组与缺血再灌注组比较,心肌细胞凋亡程度明显降低,差异具极显著性(P<0.01);Bcl-2蛋白表达略增高,差异无显著性(P>0.05)、Fas-L蛋白表达略降低,差异无显著性(P>0.05)。结论:美托洛尔对缺血再灌注过程中心肌细胞凋亡有对抗作用。     

牛磺酸对心肌缺血损伤细胞凋亡与Fas/FasL基因表达变化的影响

目的探讨大鼠心肌缺血损伤心肌细胞凋亡与Fas/FasL基因表达变化及牛磺酸对其的影响。方法结扎冠状动脉制备心肌缺血模型,转移酶介导脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法检测心肌凋亡细胞,免疫组织化学法检测Fas/FasL蛋白水平,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分析Fas基因mRNA表达变化。结果心肌缺血后心肌细胞凋亡指数、Fas/FasL蛋白阳性染色细胞指数及Fas基因的mRNA表达水平均明显增加,心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量升高,Ca2+-ATP酶活性降低。牛磺酸能明显降低心肌细胞凋亡指数,Fas基因mRNA表达及Fas/FasL蛋白阳性染色细胞指数,抑制心肌组织MDA的生成,提高Ca2+-ATP酶活性。结论牛磺酸对心肌缺血的心肌细胞凋亡与Fas/FasL基因表达水平增高有较好的拮抗作用。