叶酸拮抗高同型半胱氨酸血症大鼠Bcl-2基因低甲基化研究

目的探讨叶酸对蛋氨酸饮食诱导高同型半胱氨酸血症(Hhcy)大鼠主动脉组织Bcl-2基因甲基化水平影响。方法健康6周龄雄性wistar大鼠36只,体重(160±10)g,适应性喂养一周后随机分为对照组、高同型半胱氨酸组、叶酸干预组、每组12只。对照组给予AIN-93G配方饲料,高同型半胱氨酸组饲以含1.7%蛋氨酸的AIN-93G配方饲料,叶酸干预组饲以含1.7%蛋氨酸和0.008%叶酸的AIN-93G配方饲料。喂养18周后,全自动生化仪测定血浆Hcy浓度、叶酸浓度和维生素B12浓度;免疫组化检测大鼠主动脉组织Bcl-2表达;巢式降落式PCR联合甲基化特异性PCR检测Bcl-2基因启动子区甲基化水平,荧光RT-PCR检测主动脉组织Bcl-2基因mRNA表达。结果 18周蛋氨酸饮食可以诱导大鼠高同型半胱氨酸血症(P<0.01),叶酸摄入可以拮抗血浆同型半胱氨酸水平升高(P<0.01);与对照组比较,高Hcy组大鼠主动脉组织Bcl-2阳性细胞数目增加,Bcl-2基因启动子区甲基化水平降低(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达增加(P<0.05)。叶酸干预后,主动脉组织Bcl-2阳性细胞数目减少,Bcl-2基因启动启动子区甲基化水平高于高Hcy组(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达低于高Hcy组(P<0.05)。结论叶酸摄入可以拮抗高同型半胱氨酸血症大鼠主动脉组织Bcl-2低甲基化,使Bcl-2表达减弱,可能是其参与抗动脉粥样硬化形成的分子机制之一。     

葛根素对糖尿病P-选择素及主动脉血管细胞粘附分子mRNA表达调节的实验研究

目的观察葛根素对糖尿病大鼠P-选择素及主动脉血管细胞粘附分子(VCAM)mRNA表达的调节。方法利用链脲佐菌素腹腔注射法诱导建立1型糖尿病大鼠模型,将实验用SD大鼠随机分正常对照组、糖尿病组、葛根素3个剂量组[20、40和80mg/(kg.d)ip]。处理16周,观察处理后大鼠的胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、P-选择素、糖化低密度脂蛋白、氧化低密度脂蛋白,分离主动脉,HE染色观察主动脉病理形态改变及原位杂交检测主动脉内膜VCAMmRNA表达。结果(1)造模4组大鼠均出现血脂异常及主动脉病理形态改变。(2)葛根素能降低糖尿病大鼠的P-选择素、胆固醇、低密度脂蛋白、氧化低密度脂蛋白(P<0.05),升高高密度脂蛋白(P<0.05);葛根素降低主动脉VCAMmRNA(P<0.05)表达,且呈一定的剂量-反应关系。结论葛根素通过降低黏附分子的表达,起到确切的主动脉保护作用。     

阿托伐他汀与吡格列酮对糖尿病动脉粥样硬化大鼠主动脉组织因子的影响

目的观察阿托伐他汀与盐酸吡格列酮对糖尿病大血管病变中组织因子(TF)表达的影响,进一步探讨其作用机制。方法用RT-PCR法检测阿托伐他汀组、吡格列酮组、联用组的糖尿病动脉粥样硬化大鼠主动脉TFmRNA的表达。结果糖尿病动脉粥样硬化大鼠主动脉有TF表达;阿托伐他汀与吡格列酮单独及联合作用下,主动脉TFmRNA表达均明显降低(P<0.05)。结论阿托伐他汀与吡格列酮单独应用与联合应用均能抑制糖尿病动脉粥样硬化大鼠主动脉TFmRNA的表达,提示阿托伐汀与吡格列酮可能具有稳定斑块的作用。     

茵陈五苓散对胆汁淤积幼龄大鼠肝功能保护作用

目的探讨茵陈五苓散对胆汁淤积幼龄大鼠肝功能的保护作用及可能机制。方法幼龄SD大鼠随机分为对照组、模型组、熊去氧胆酸组(UDCA, 0.10 g/kg)、茵陈五苓散高、中、低剂量组(100.0、200.0、400.0 g/kg),每组12只,雌雄各半。给药6 d后,采用0.5%α–萘异硫氰酸酯(ANIT, 50 mg/kg)花生油溶液灌胃,建立胆汁淤积模型。造模后继续给药2 d,最后一次给药12 h后,收集大鼠胆汁,生化法检测血清碱性磷酸酶(ALP)、γ–谷氨酰转移酶(γ-GT)、总胆汁酸(TBA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平和肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;苏木精–伊红染色(HE)观察各组大鼠肝组织病理变化;Western blot检测肝组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、还原型辅酶/醌氧化还原酶(NQO1)和血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清ALP、γ-GT、TBA、ALT、AST水平均显著升高(P 0.05);胆汁流量、肝组织中SOD、CAT、GSH-Px水平显著降低,MDA水平明显增加(P 0.05);肝细胞索排列紊乱,细胞肿大伴点状坏死,有空泡样改变,大量炎性细胞浸润;肝组织Keap1蛋白表达显著升高,Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达显著降低(P 0.05)。与模型组比较,UDCA组、茵陈五苓散高、中剂量组大鼠血清ALP、γ-GT、TBA、ALT、AST水平均显著降低(P 0.05);胆汁流量、肝匀浆中SOD、CAT、GSH-Px水平均显著升高,MDA水平明显降低(P 0.05);肝组织病理损伤减轻,Keap1蛋白表达明显降低,Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达明显升高(P 0.05)。结论茵陈五苓散对ANIT诱导幼龄大鼠胆汁淤积型肝损伤具有保护作用,其机制可能与抑制Keap1表达,上调Nrf2表达,提高机体的抗氧化能力,减轻氧化应激损伤有关。     

镇肝熄风汤对原发性高血压大鼠模型主动脉纤维化的影响

目的探讨镇肝熄风汤对原发性高血压大鼠模型主动脉纤维化的治疗作用。方法以SHR大鼠为实验模型,以卡托普利为阳性对照药,观察镇肝熄风汤对原发性高血压的降压作用以及检测大鼠主动脉中TGF-β1、Ⅰ型胶原、CTGF基因相对表达量与Smad2蛋白表达。结果造模阶段与空白组比较各组血压均升高,差异有统计学意义(P0.05),给药阶段与模型组相比各用药组血压均降低,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,镇肝熄风汤和卡托普利均能降低血压并抑制主动脉中TGF-β1、Ⅰ型胶原、CTGF基因相对表达量,并降低Smad2蛋白的表达。结论镇肝熄风汤可降低大鼠血压并抑制主动脉纤维化,其作用可能是通过抑制主动脉中TGF-β1、Ⅰ型胶原、CTGF基因相对表达量,并降低Smad2蛋白的表达来实现的。     

黄芪对单侧输尿管梗阻大鼠肝细胞生长因子和转化生长因子β1的调控

目的动态观察黄芪(AM)对单侧输尿管梗阻(UUO)所致肾小管间质纤维化大鼠肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法54只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和模型+黄芪治疗组。在造模后第3、7和14天处死动物,观察肾脏病理改变。采用免疫组化方法检测肾组织中TGF-β1、HGF表达。用实时荧光定量RT-PCR检测大鼠HGF mRNA和TGF-β1mRNA表达量。用Western blot检测大鼠HGF和TGF-β1蛋白表达量。结果与假手术组相比,各时间点的模型组大鼠肾脏病理损害进行性加重,黄芪治疗后可明显减轻模型组大鼠的肾小管损伤及肾间质纤维化程度(P<0.05)。随着梗阻时间的延长,模型组大鼠肾组织TGF-β1表达逐渐增加;HGF表达呈现先升高后下降的表达规律,在UUO术后第7天达高峰,此后大幅回落;与模型组各对应时间点比较,黄芪治疗后可使肾组织中的HGF表达显著增高,TGF-β1表达明显降低(P<0.05)。结论黄芪可能通过诱导HGF表达上调及抑制TGF-β1表达,减轻肾间质纤维化。     

补阳还五汤对矽肺大鼠肺组织Smad3、Smad7蛋白质表达的影响

目的观察补阳还五汤对矽尘染毒肺纤维化大鼠肺组织Smad3、Smad7蛋白质表达的影响。方法 2017年9月将实验室饲养一周的144只雄性健康SD大鼠随机分成对照、模型、给药干预组(包括泼尼松组、补阳还五汤高、中、低剂量组),每组24只。以矽尘混悬液注入大鼠气管染毒造模,造模后第2d起,各药物干预组给予相应药物灌胃。造模后第7、14、28d分3批次处死大鼠,每组8只。分离肺组织制备病理切片,观察病理变化;采用免疫组化染色法(S-P法)检测大鼠肺组织Smad3、Smad7蛋白质的表达情况。结果 (1)与对照组相比,各组大鼠肺组织Smad3蛋白质的表达升高(P0.01),Smad7的表达下降(P 0.01),其中模型组smad3和smad7的IOD值分别为(450.97±14.39)×103、(217.61±20.32)×103,变化最为明显;(2)与模型组相比,各给药干预组大鼠肺组织Smad3蛋白的表达水平均有不同程度的下降(P 0.01或0.05),Smad7表达增高(P 0.01或0.05);(3)与泼尼松组相比,补阳还五汤中、低剂量组大鼠肺组织Smad3蛋白的表达有所下降(P 0.01或0.05),Smad7的表达有所增高(P 0.05)。结论补阳还五汤可以有效控制TGF-β/Smad信号通路中可致纤维化的Smad3蛋白质的增高,同时促进该通路中Smad7蛋白的增加以发挥负性调控效应。     

OX40L对变应性鼻炎大鼠PI3K/Akt信号通路及T细胞亚群的影响

目的 观察OX40L对变应性鼻炎（AR）大鼠PI3K/Akt信号通路相关蛋白及T细胞亚群的影响。方法将40只SPF级SD大鼠随机分为4组，各10只，各组采用既定方式造模，造模完成后对照组和模型组给予生理盐水鼻黏膜内注射干预，抗OX40L组给予抗OX40L单克隆抗体鼻黏膜内注射干预，OX40L-Ig组给予OX40L-Ig融合蛋白鼻黏膜内注射干预。造模完成后测定各组大鼠外周血OX40L表达，干预结束后观察PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达，检测T细胞亚群Th1、Th2、Th17、Treg细胞数量。结果 模型组、抗OX40L组和OX40L-Ig组造模后未干预大鼠OX40L表达水平明显高于对照组（P<0.01）。模型组、抗OX40L组和OX40L-Ig组均可见杯状细胞化生、炎性细胞浸润、水肿、血管扩张等表现。对照组、抗OX40L组大鼠鼻黏膜组织p-PI3K、p-Akt表达明显低于模型组（P<0.05），抗OX40L组上述指标水平低于OX40L-Ig组（P<0.05）,OX40L-Ig组上述指标水平高于模型组（P<0.05）。模型组血清Th1、Treg含量明显低于对照组...     

尼克酰胺对糖尿病大鼠肾脏核转录因子影响

目的 了解实验性糖尿病大鼠肾组织中核转录因子-kappa B(NF-kB)表达与肾功能损害关系,观察尼克酰胺对NF-kB的影响.方法 45只Wistar大鼠中随机选取30只进行糖尿病造模,造模成功24只,随机分为糖尿病组和糖尿病尼克酰胺处理组(干预组),各12只,从未造模15只大鼠中随机选取12只作为对照组.收集糖尿病大鼠24h尿样,测定尿白蛋白排泄率(UAE);采用电泳迁移率变动分析技术检测肾组织NF-kB活性;透射电镜检测肾小球基底膜厚度及系膜基质密度;免疫组织化学染色法观察尼克酰胺对糖尿病大鼠肾脏NF-kB表达的影响,分析NF-kB表达与肾小球内粘附分子(ICAM-1)蛋白表达、单核细胞浸润及肾脏功能和结构损害的关系.结果 糖尿病大鼠中.肾小球NF-kB表达较正常肾组织增高(P＜0.01),NF-kB阳性细胞数(9.18±2.42)与肾小球ICAM-1蛋白表达(0.3973±0.0312)、单核细胞浸润(8.14±3.43)显著相关,相关系数(r)值分别为0.57(P＜0.05)和0.68(P＜0.01).用尼克酰胺干预后,肾组织NF-kB表达和肾小球基底膜厚度(337.1±67.9nm)及系膜基质密度(39.58±6.21)μm2.μm2明显下降(P＜0.01),肾功能各指标及肾组织病理学损害改善.结论 尼克酰胺对糖尿病大鼠肾脏的保护作用可能与抑制NF-kB活化.下调受NF-kB调控的ICAM-1表达、减轻单核细胞浸润有关.     

何首乌饮对衰老大鼠卵巢细胞凋亡的影响

目的:探讨何首乌饮对亚急性衰老大鼠卵巢细胞凋亡相关基因P53和Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法:采用D-半乳糖连续腹腔注射致亚急性衰老大鼠模型,在造模后以何首乌饮灌胃作为延缓衰老组;造模后应用逆转录聚合酶链反应测定各组P53的mRNA水平;Western Bloting法检测卵巢细胞Bcl-2和Bax f蛋白的表达情况。结果:与正常对照组比较,D-半乳糖致衰老的模型组大鼠卵巢细胞中P53基因和Bax蛋白表达明显上升,Bcl-2蛋白表达显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);何首乌饮延缓衰老组较模型组P53基因和Bax蛋白表达明显下降(P<0.01),并上调Bcl-2蛋白的表达,呈现量效关系,以何首乌饮高剂量组效果作用最佳。结论:何首乌饮方剂可能是通过调节卵巢细胞凋亡相关基因和蛋白表达,来延缓衰老大鼠卵巢细胞凋亡的发生。     

酸化豆粉对大鼠降血脂和抗氧化作用的影响

目的研究酸化豆粉对大鼠降血脂和抗氧化作用的影响。方法将SD雄性大鼠根据体重和血胆固醇水平分为3组,普通饲料对照组、高脂饲料组及10%酸化豆粉组,饲养6周后,测定大鼠空腹血脂、载脂蛋白及抗氧化指标水平的变化。结果酸化豆粉可显著降低大鼠血清低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇、甘油三脂及血清载脂蛋白B浓度,增高高密度脂蛋白胆固醇及血清载脂蛋白A水平,同时增高载脂蛋白A/载脂蛋白B比值;酸化豆粉组大鼠血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶及血清硒水平显著升高,脂质过氧化产物水平显著降低。结论酸化豆粉预防大鼠高血脂及抗氧化作用明显,提示酸化豆粉有成为心血管保健食品的潜力和意义。     

邻苯二甲酸二乙基己酯对大鼠睾丸睾酮合成、GATA-4 mRNA表达的影响

目的研究邻苯二甲酸二乙基己酯对大鼠睾丸睾酮合成、GATA-4 mRNA表达的影响。方法雄性SD大鼠32只,随机分成4组,每组8只,设3个染毒剂量组(10,100,500mg/kg.d DEHP溶媒为玉米油)和1个对照组(玉米油),饲养1个月后处死。酶联免疫吸附法测定血清中睾酮含量;RT-PCR法检测睾丸组织GATA-4 mRNA表达的含量。结果实验组血清中睾酮含量和睾丸组织的GATA-4 mRNA含量均低于对照组。结论邻苯二甲酸二乙基己酯可使大鼠睾丸Leyd ig细胞变性,血清睾酮合成降低,其机制可能与降低GATA-4 mRNA表达有关。     

GDM大鼠胎盘脂联素基因表达水平与胎鼠出生体重的关系

目的:探讨妊娠期糖尿病大鼠胎盘脂联素与胎鼠出生体重的关系。方法:育龄雌性SD大鼠受孕后随机分为正常妊娠组、妊娠期糖尿病组、共轭亚油酸治疗组。腹腔内注射45mg/kg链尿佐菌素,建立妊娠期糖尿病大鼠模型。注射药物3天后用共轭亚油酸3.0g/(kg·d)灌胃至孕19天,建立共轭亚油酸治疗组大鼠模型。孕19天后解剖大鼠,计数胚胎存活数并测量胎鼠体重。采用葡萄糖氧化酶法测定血糖;采用放射免疫法测定血清胰岛素;采用ELISA试剂盒检测大鼠血清脂联素和胎盘组织脂联素浓度;采用RT-PCR技术检测脂肪组织脂联素和过氧化物增殖物激活受体γmRNA的表达和胎盘组织脂联素mRNA的表达,并进行半定量分析。结果:①共轭亚油酸可降低妊娠期糖尿病大鼠血糖和胰岛素水平,增加脂肪组织中过氧化物增殖物激活受体-γmRNA、脂联素mRNA的表达和胎盘组织中脂联素mRNA的表达水平,相应地,妊娠期糖尿病大鼠血清中和胎盘组织中脂联素的浓度也升高。②3组大鼠的胚胎存活数无统计学差异。③胎盘脂联素mRNA表达水平与胎鼠出生体重呈显著负相关关系。结论:①共轭亚油酸可降低妊娠期糖尿病大鼠血糖水平,并改善血糖升高后刺激胰岛素大量分泌的状态,改善胰岛素抵抗。②共轭亚油酸可通过激活过氧化物增殖物激活受体γ来提高妊娠期糖尿病大鼠脂联素水平。③胎盘组织有脂联素基因的表达,妊娠期糖尿病病理状态可影响脂联素基因在胎盘的表达水平,共轭亚油酸可上调脂联素mRNA的表达水平,并且胎盘组织中脂联素浓度升高。④妊娠期糖尿病病理状态对胚胎存活数影响不大,但胎鼠出生体重增加。⑤胎盘来源的脂联素可能参与了胎儿生长发育的调节。     

β-雌二醇纳米粒抗肝纤维化的效果及对TGF—β1和CTGF的影响

目的研究自行制备的肝靶向聚氰基丙烯酸正丁酯β-雌二醇纳米粒（E2-PBCA—NP）抗肝纤维化的效果，以及对猪血清诱导的肝纤维化动物模型肝脏TGF—β1、CTGF表达的影响。方法将SD大鼠随机分成5组，除正常对照外，其余4组均腹腔注射猪血清（0．5ml／次，2次／周）构建大鼠免疫性肝纤维化模型。β-雌二醇治疗组、β雌二醇纳米粒治疗组、空白纳米粒组在第9周给予腹腔注射干预药物，2次／周；在12周末处死老鼠，Masson染色观察肝脏纤维化改变，RT—PCR检测肝组织中TGF-β1和CTGFmRNA的含量，免疫组化观察TGF-β1及CTGF蛋白的表达。结果与模型组比较，β-雌二醇纳米粒和β-雌二醇治疗组均能显著逆转猪血清诱导的肝纤维化，肝纤维化分期好转（P〈0．05）；β-雌二醇纳米粒治疗组与β-雌二醇治疗组2组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；β-雌二醇纳米粒治疗组与β-雌二醇治疗组肝组织TGF—β1、CTGFmRNA和蛋白的表达下降（P〈0．01），但β-雌二醇和β-雌二醇纳米粒治疗组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论纳米化后的β-雌二醇仍具有抗肝纤维的作用，与无纳米化β-雌二醇比较，抗肝纤维的作用更强。β-雌二醇纳米粒能够抑制TGF—β1及其下游信号CTGF的表达。     

The effects of berberine on hyperhomocysteinemia and hyperlipidemia in rats fed with a long-term high-fat diet

ABSTRACT: BACKGROUND: The study was undertaken to examine the effects of berberine (BBR) on serum homocysteine, lipids and the aortic lesion in Sprague-Dawley (SD) rats fed with a long-term high-fat diet (HFD). METHODS: Healthy male SD rats weighing 190-210 g received randomly standard diet or a high-fat diet for 24 weeks. After 8 weeks of feeding, rats fed with HFD were randomized to receive berberine (200 mg * kg-1 * day-1) or vehicle by gavage for 16 weeks. After overnight fasting, all rats were sacrificed and total blood samples were also collected for determinant of fasting serum homocysteine (Hcy), total cholesterol (TC) and low density lipoprotein cholesterol (LDL-c) levels. The aorta was stained with hematoxylin and eosin (HE) and Sudan Sha to evaluate aortic lesion. The livers were dissected out and snap-frozen in liquid nitrogen for hepatic TC content and molecular analysis. 3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-CoA reductase (HMGR), Lipoprotein receptors and apolipoproteins gene expression in the liver were determined by real-time PCR. RESULTS: Intragastrical administration with berberine for 16 weeks lowered serum Hcy in rats fed with a high-fat diet. In parallel, it also decreased body weight and improved serum TC and LDL-c. Berberine also tended to decrease hepatic cholesterol. Consistently, berberine also upregulated LDL receptor (LDLR) mRNA level and suppressed HMGR gene expression. Meanwhile, upon berberine-treated rats, there was a significant increase in apolipoprotein E (apoE) mRNA, but no change in apoAI and scavenger receptor (SR) mRNA in the liver. Further, no atherosclerotic lesions were developed in berberine-treated rats for 16 weeks. CONCLUSION: Berberine can counteract HFD-elicited hyperhomocysteinemia and hyperlipidemia partially via upregulating LDLR and apoE mRNA levels and suppressing HMGR gene expression.     

醋酸铅暴露对雄性大鼠心血管系统功能的影响

目的探讨醋酸铅经口暴露对雄性大鼠心血管系统功能的影响。方法 40只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为低、中、高3个醋酸铅剂量组灌胃法染毒(分别给予45、90、180 mg/kg醋酸铅),对照组(灌服等量蒸馏水),每组10只,每周5次,共染毒60 d。每组随机选取6只大鼠,尾袖法测定末次染毒12 h后血压和心率水平;末次染毒24 h后摘眼球收集血液,脱颈处死大鼠,分离心脏和胸主动脉。石墨炉原子吸收光谱法测定全血血铅水平;全自动生化分析仪测定外周血血清心肌酶水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血血清氧化应激指标GSH、SOD和MDA水平;HE染色法观察大鼠心脏和胸主动脉组织病理学变化。结果染毒之初各组大鼠体重差异无统计学意义,随染毒时间增加,与对照组相比,各染毒组大鼠体重增长量呈下降趋势;各染毒组大鼠血铅水平均显著高于对照组(P0.05),且与染毒剂量呈显著正相关(r=0.614,P0.05);染毒组大鼠收缩压(SBP)水平均显著高于对照组(P0.05),舒张压、平均动脉压和心率在各组间差异无统计学意义(P0.05);中、高剂量染毒组大鼠CKMB和C反应蛋白(CRP)水平显著高于对照组,各染毒组大鼠外周血血清LDH和HBDH水平均显著高于对照组(P0.05),MDA水平显著高于对照组(P0.01),低、中剂量染毒组大鼠GSH水平低于对照组(P0.05);病理组织学检查发现,随醋酸铅染毒剂量的增加,大鼠心肌细胞肥大,胞核染色变深,变形、聚集,排列紊乱,心肌间质增宽,并出现炎细胞浸润,心肌纤维多处肿胀断裂,肌横纹消失;胸主动脉未见明显病理变化。结论醋酸铅暴露可引起雄性大鼠的血压升高、心肌酶谱改变及氧化损伤,直接损伤心肌组织。     

小鼠动脉粥样硬化斑块中RGS5等基因的表达改变及黄芩素干预的实验研究

目的观察黄芩素对小鼠动脉粥样硬化(AS)模型斑块内RGS5等基因表达的影响。方法选用APOE-/-小鼠30只,体重18～22 g,随机分别对照组、模型组和干预组,每组10只,对照组给予APOE-/-普通饮食,模型组以高脂饲料喂养,干预组在高脂饮食中添加黄芩素(0.5%)。造模给药12周后,检测血脂,用Real Time-PCR方法检测对照组、模型组和用药组主动脉壁粥样硬化斑块中RGS5、PPARδ、MCP-1、NF-κB mRNA的表达。结果模型组血脂升高,斑块中RGS5 mRNA表达下调,PPARδ、MCP-1、NF-κB mRNA表达升高(P0.01)。黄芩素降低了高脂血症并逆转了上述基因表达,延缓了AS进程,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论 RGS5等基因在AS的进程中具有重要的调控作用,黄芩素通过降低RGS5的表达,延缓AS的发生。     

Hepatoprotective effects on alcoholic liver disease of fermented silkworms with Bacillus subtilis and Aspergillus kawachii

The purpose of this study was to investigate the protective effect of Bacillus subtilis fermented silkworm powder (BFSP) and Aspergillus kawachii fermented silkworms powder (AFSP) on alcohol-induced hepatotoxicity in Sprague-Dawley rats. Alcohol-feeding rats were fed with diets containing silkworm powder (SP) or both BFSP and AFSP at the 5% (w/w) levels for 4 weeks. Alcohol administration resulted in a significant increase in the activities of liver marker enzymes, aspartate aminotransferase (AST), γ-glutamyl transpeptidase (γ-GTP) and lactate dehydrogenase (LDH). Administration of BFSP markedly prevented alcohol-induced elevation of serum AST, γ-GTP and LDH activities, and the levels of blood alcohol and acetaldehyde. Interestingly, in comparison with both SP and AFSP, BFSP administration drastically increased both hepatic alcohol dehydrogenase (ADH) and acetaldehyde dehydrogenase (ALDH) activities, suggesting that BFSP was more effective in the reduction of blood alcohol and acetaldehyde. BFSP administration showed the highest induction of hepatic ADH expression in alcohol-feeding rats. Also, alcohol treatment resulted in increasing lipid peroxidative index (thiobarbituric acid-reactive substances) and decreasing antioxidant status (reduced glutathione) in the liver. Thus, these results suggest that BFSP treatment improved the antioxidant status of alcoholic rats by decreasing the levels of lipid peroxidative index and by increasing the levels of antioxidant status in the liver and serum. Specially, the concentrations of serum total cholesterol, free fatty acid and hepatic triglyceride were increased, but these parameters were significantly influenced by the BFSP in the alcohol treatment. Unlike the action of alcohol treatment on fatty liver, BFSP administration attenuated lipid droplet accumulation in hepatocytes. A high level of ADH was also observed in AFSP administered rats; on the other hand, a significant change in ALDH was not observed. Therefore, the SP can be a promising candidate in the prevention alcohol-induced hepatotoxicity and oxidative stress.     

Antioxidant activity of vitamin B6 delays homocysteine-induced atherosclerosis in rats

Elevated plasma homocysteine is a risk factor for atherosclerotic disease. In the present study, we have examined whether the oxidative stress due to a low level of vitamin B6 accelerates the development of homocysteine-induced atherosclerosis in rats. First, the effect of homocysteine thiolactone intake (50 mg/kg per d) on vascular integrity, lipid peroxide concentration, endothelial NO synthase (eNOS) expression and biochemical profiles was examined at day 1, day 21 and day 42 (five rats per group). The histochemical staining of the rat aorta showed no change at day 1 and day 21, but the subendothelial space was observed to be enlarged in rat aorta at day 42 with exposure to homocysteine thiolactone. Expression of eNOS was observed in rat aorta at day 42, but not at day 1 and day 21. Serum lipid peroxide concentration and biochemical profiles including glucose cholesterol and triacylglycerol showed no change at any day. Second, the effect of homocysteine thiolactone intake in the presence and absence of vitamin B6 on vascular integrity was examined at day 1 and day 14 (five rats per group). Aortic lesions were observed in vitamin B6-deficient rat aorta at day 14 but not in vitamin B6-supplemented rats. The expression of eNOS was also observed in vitamin B6-deficient rat aorta at day 14. Serum lipid concentrations of the vitamin B6-deficient group significantly increased compared with concentrations of the vitamin B6-supplemented group, though serum concentration of homocysteine did not change between both groups. These results suggest that the oxidative stress caused by a low level of vitamin B6 accelerates the development of homocysteine-induced atherosclerosis in rats.