Beclin1在银杏酮酯改善衰老大鼠学习记忆中的作用

目的:观察自噬相关基因Beclin1在银杏酮酯(Ginkgo biloba extract,GBE50)改善衰老大鼠学习记忆中的作用。方法:采用出生24 h内乳鼠的海马组织,提取海马神经元,H2O2建立神经元衰老模型,免疫荧光方法鉴定神经元纯度,并用GBE50和阳性对照药银杏叶提取物(EGB761)预处理,免疫印迹方法检测Beclin1蛋白水平。21月龄大鼠随机分为模型组、GBE50组和EGB761组,1月龄大鼠作为正常组,其中正常组和模型组用1%羧甲基纤维素钠灌胃,GBE50组和EGB761组分别每日予100 mg/kg的药物灌胃。疗程60 d,结束后避暗实验检测大鼠学习记忆,Real-time PCR方法检测海马Beclin1 mRNA表达,Western blot方法检测海马Beclin1、LC3-Ⅱ和SynapsinⅠ蛋白表达。结果:(1)细胞实验结果显示,光镜下观察培养6~7 d时海马神经元逐渐成熟,免疫荧光鉴定神经元纯度达到90%以上;GBE50组和EGB761组的衰老海马神经元中Beclin1蛋白表达明显增加(P0.05)。(2)动物实验结果显示,GBE50组和EGB761组大鼠避暗实验潜伏期明显较模型组延长,海马Beclin1mRNA和蛋白表达及LC3-Ⅱ和SynapsinⅠ蛋白表达均明显高于模型组(P0.05)。结论:GBE50改善衰老相关学习记忆的作用,可能与其上调海马Beclin1表达有关。     

葛根异黄酮对衰老模型大鼠学习记忆能力及海马神经元形态的影响

目的:观察葛根异黄酮对衰老模型大鼠学习记忆能力及海马神经元形态的影响。方法:大鼠随机分为对照组,衰老模型组,药物低、中、高剂量组,采用1%D-半乳糖100mg/kg颈背部皮下注射6周造衰老模型。造模后药物低、中、高剂量组每天分别给予40mg/kg、80mg/kg、160mg/kg葛根异黄酮灌胃给药8周。用药后水迷宫法测试大鼠学习记忆能力,后随将大鼠处死取海马组织,制作石蜡切片,苏木素伊红染色,光学显微镜观察神经元形态结构。结果:用药组与模型组比较,中、高剂量组逃避潜伏期明显缩短、所占距离百分比明显增高;光镜下,模型组与对照组相比锥体细胞明显减少,细胞排列稀疏,细胞核体积明显减少,结构不清楚;药物高剂量组与模型组比较结构、形态基本正常,细胞脱失现象较少。结论:葛根异黄酮对衰老模型大鼠学习记忆能力具有改善作用,对海马神经元具有保护作用。     

大鼠纹状体边缘区与海马学习记忆功能的行为学比较研究

目的 探讨MrD与海马这两个不同脑区在大脑学习记忆功能上的区别和作用地位。方法 在Y迷宫训练大鼠后即刻或24h后化学损毁大鼠双侧MrD或切断双侧穹窿海马伞(fornix/fimbria，FF)，训练后6d再观察化学损毁双侧MrD组、MrD对照组、切断双侧FF组和FF对照组大鼠在Y迷宫中学习记忆的行为表现；或在化学损毁大鼠双侧MrD或切断双侧FF下后7d，在Morris水迷宫中检测上述各组的学习记忆能力。结果 在Y迷宫测试的正确反应次数方面，训练后即刻或24h后损毁双侧MrD组与MrD对照组比较均明显减少；训练后即刻切断双侧FF组与FF对照组比较也明显减少，但训练24h后切断双侧FF组与FF对照组比较则无显著意义的差别。在Morris水迷宫试验中，损毁双侧MrD组和切断双侧FF组与各自的对照组比较，平均逃避潜伏期延长，穿环次数减少，但两者之间则无显著意义的差别。结论 MrD与海马均与大鼠的空间学习记忆功能有密切关系；但在Y迷宫逃避性学习方面，海马仅参与陈述性记忆的早期阶段，而MrD则与早、晚两个阶段均有关。提示MrD和海马在学习记忆功能方面可能不同，MrD可能涉及更复杂的记忆过程。     

小剂量梭曼对大鼠学习记忆和海马脑片LTP的影响

目的　研究长期给予小剂量梭曼 (Soman)对大鼠空间学习记忆和大鼠海马脑片LTP的影响。方法　采用连续 14d皮下注射小剂量梭曼 (6～ 10 μg·kg 1 ,s c ,sig× 14 )为慢性中毒模型 ,Morris水迷宫试验进行行为检测 ,电生理学方法研究大鼠海马脑片CA1区长时程增强现象 (long termpotentiation ,LTP)的变化。结果　Morris水迷宫试验中大鼠的逃避潜伏期延长 ,穿过原平台位置次数和在原平台象限探索时间百分率下降 ;大鼠海马脑片LTP诱出率、PS幅值增加百分率均明显低于生理盐水对照组。结论　长期给予小剂量梭曼可降低大鼠的空间学习记忆能力 ,降低海马突触可塑性     

银杏酮酯对大鼠坐骨神经损伤后神经生长因子蛋白表达的影响

目的研究银杏酮酯对大鼠坐骨神经损伤后神经生长因子（nerve growth factor,NGF）蛋白表达的影响。方法SD大鼠78只,随机分成正常组、损伤对照组与实验组,后两组切断右侧坐骨神经并缝合。实验组给予银杏酮酯每日200mg／kg溶于1mL生理盐水中灌胃,损伤对照组给予生理盐水1mL灌胃,正常组不做处理。分别于术后1、3、7、14、21及28d取吻合口远段的神经、相应节段的脊神经节及脊髓,应用免疫组织化学和图像分析的方法研究所取组织中NGF的表达并进行定量分析。结果实验组坐骨神经、脊神经节及脊髓中NGF蛋白免疫阳性区域面积和平均灰度值在术后7、14、21和28d明显高于对照组（P〈0．05,P〈0．01）。结论大鼠坐骨神经损伤后用银杏酮酯治疗,在早期可促使坐骨神经及相应节段脊神经节和脊髓组织中的NGF蛋白表达增加。     

幼年Wistar大鼠空间学习记忆与海马CA3区苔藓纤维分布

目的探讨空间学习记忆与海马CA3区苔藓纤维可塑性的关系.方法Morris水迷宫内对正常幼年Wistar大鼠进行定位航行试验后,用Timm显影染色方法,观察海马CA3区苔藓纤维分布的可塑性变化.结果大鼠在14天学习训练间,其逃避潜伏期逐日缩短,由平均(57.4±29.3)s下降到(7.9±3.5)s.苔藓纤维主要集中在门区和CA3透明层,但学习和对照两组大鼠海马CA3区始层都多少不等地存在苔藓纤维终扣分布,两组苔藓纤维分布面密度分别为0.03432±0.01516,0.03694±0.01657.经t检验,P＞0.05,差异无显著性.结论幼年Wistar大鼠Morris水迷宫14天空间学习记忆训练没能引起海马CA3区始层苔藓纤维分布的变化.     

颞叶癫痫大鼠海马病理变化对学习记忆障碍影响的研究进展

癫痫（ spontaneous recurrent seizure ，SRS）是常见的中枢神经系统变性疾病之一，反复自发发作是其主要症状。长期反复发作可对患者认知功能，包括语言、记忆、计算等造成严重损害，加重患者精神心理负担，45％的癫痫患者有记忆障碍等行为异常，10％～20％的癫痫儿童需要特殊教育［1］。癫痫所造成的危害不仅在于癫痫发作本身，还在于反复发作的慢性癫痫所致的智能障碍。因此，研究癫痫造成学习记忆障碍的机制和筛选寻找治疗这种学习记忆障碍的药物较为迫切。而颞叶癫痫在成人的各种类型癫痫中预后最差，约有60％～70％患者发展为难治性癫痫，且颞叶癫痫并发精神障碍比其他类型癫痫高4～12倍，多为痴呆或精神分裂症样特征，尤其是引起视觉空间损伤，但机制却不清楚［2］。颞叶癫痫发作大多由颞叶、海马等病变引起，而内侧颞叶、海马与学习记忆的形成密切相关，细胞凋亡、神经胶质细胞增生和神经肽Y分泌减少等机制亦越来越受到重视［3］。     

银杏叶提取物与阿司匹林抗血栓栓塞作用的比较研究

目的 探讨银杏叶提取物(Ginkgo biloba extracts,GBE)对血栓栓塞的作用及机制,与小剂量阿司匹林对比研究.方法 通过在体电刺激颈动脉制备大鼠血栓栓塞模型,动态观察颈动脉栓塞形成程度同时观察血管栓塞显微照片,研究评价在相当人临床用量的GBE和小剂量阿司匹林对血栓栓塞的抑制作用;采用放免法测定血栓形成大鼠血浆前列环素和血栓素的含量,研究探讨GBE抑制血栓形成的机制.采取冷应激法制备大鼠血液流变学病理模型,测定全血粘度、血浆粘度、血沉和细胞压积指标,研究和评价GBE和小剂量阿司匹林对血液流变学的影响.结果 6.7 mg/kg GBE、20 mg/kg GBE和9 mg/kg阿司匹林均使大鼠颈动脉栓塞程度明显减轻,明显对抗电刺激引发的血栓素升高和前列环素水平下降;20 mg/kg GBE和9 mg/kg阿司匹林均明显减轻应激状态全血粘度、血浆粘度和细胞压积指标的增高,6.7 mg/kg GBE仅能抑制细胞压积的增高.通过对比分析,9 mg/kg阿司匹林抑制血栓栓塞和血液流变学异常增高作用,强于6.7 mg/kg GBE组,与20 mg/kg GBE组基本相当.结论 相当人临床用量的GBE对大鼠血栓栓塞有抑制作用,明显弱于小剂量阿司匹林,可对抗血浆前列环素和血栓素的异常变化,对多种血液流变学指标异常增高的影响不明显;剂量提高3倍的GBE,对抗大鼠血栓栓塞和血液流变学异常增高作用,与小剂量阿司匹林基本相当.     

银杏叶提取物对大鼠慢性肝损伤的保护作用

目的：观察银杏叶提取物对大鼠慢性肝损伤的保护作用。方法：随机分为正常组、模型组、银杏天宝组和秋水仙碱组,银杏天宝和秋水仙碱以灌胃的方式给药。对比观察银杏天宝和秋水仙碱对四氯化碳所致慢性肝损伤大鼠的肝功能、肝纤维化、肝病理组织学及肝组织氧化指标的影响。结果：银杏天宝组大鼠肝功能指标丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸转移酶（AST）、白蛋白（ALb)、碱性磷酸酶（AKP）较模型组明显改善（P＜0．05或P＜0．01）;肝纤维化血清学指标透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）和肝组织羟脯氨酸（Hyp)含量明显低于模型组（P＜0．05或P＜0．01）;肝组织中丙二醛（MDA）含量较模型组降低,过氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px)活性明显高于模型组（P＜0．05或P＜0．01）;HE染色示肝组织纤维化程度较模型组明显减轻（P＜0．05）;银杏天宝综合效果优于秋水仙碱。结论：银杏叶提取物对慢性肝损伤有良好的保护作用,抗氧化作用可能是其主要的作用机制之一。     

银杏叶提取物对老年大鼠的抗衰老研究

目的 研究银杏叶提取物(GBE)对老年大鼠抗衰老的作用.方法 GBE连续胃饲老年大鼠30 d后取血液、肝脏、脑组织,测定其超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、丙二醛(MDA)含量及单胺氧化酶(MAO)活力.结果 与老年对照组比较,老年实验组血液和肝脏中SOD、GSH-Px活力显著增高,MDA含量显著降低,其中GBE低剂量组与老年对照组比较P＜0.05,高剂量组与老年对照组比较P＜0.01,MAO活力未见显著差异;老年实验组脑组织中MDA含量和MAO活力显著降低,其中GBE低剂量组与老年对照组比较P＜0.05,GBE高剂量组与老年对照组比较P＜0.01.结论 GBE可显著增高老年大鼠血液、肝脏和脑组织中SOD、GSH-Px活力,使血液、肝脏和脑组织中MDA含量显著降低,具有一定的抗衰老作用.     

银杏叶提取物对大鼠实验性结肠炎COX-2表达的影响

目的观察银杏叶提取物对结肠炎大鼠结肠组织环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）表达的影响。方法应用三硝基苯磺酸（TNBS）灌肠制备大鼠实验性结肠炎模型。实验设正常对照组,三硝基苯磺酸模型组,阳性药物对照组（5-ASA group,100 mg/kg）,银杏叶提取物（EGB）组（200 mg/kg）4组。评估大鼠结肠黏膜大体形态和组织学评分。免疫组化检测肠组织环氧合酶-2（COX-2）蛋白的表达。结果与模型组相比,EGB组结肠组织COX-2表达明显减少,EGB能明显减轻大鼠实验性结肠炎模型组大体形态和组织学评分。结论EGB可能通过抑制炎性细胞因子（TNF-α,NF-κBp65,IL-6）的表达,从而抑制COX-2生成,对大鼠实验性结肠炎具有保护作用。     

银杏叶提取物对实验性肝纤维化逆转的影响

目的 研究银杏叶提取物对大鼠肝纤维化逆转的影响及其可能的机制。方法 应用CCI4诱导大鼠肝纤维化模型。造模完成后给予银杏叶提取物干预肝纤维化的逆转，应用H＆E、Masson和Gordon-Sweet染色观察肝组织病理纤维化分级，生化法检测肝功能指标。RT-PCR法测定肝组织中基质金属蛋白酶-13（MMP-13）表达，免疫组化法检测肝组织中αSMA表达。结果 给予银杏叶提取物可以促进肝纤维化的逆转（P〈0．05），改善肝功能（P〈0．05）．增加恢复过程中肝组织MMP-13的表达（P〈0．05），使αSMA阳性细胞数减少（P〈0．05）。结论 银杏叶提取物可促进CCh肝纤维化的逆转，可能与银杏叶提取物增加肝组织中MMP-13表达、抑制肝脏星状细胞活化、促进活化星状细胞凋亡有关。     

银杏叶提取物对拟血管性痴呆大鼠海马CA1区的保护作用

目的观察银杏叶提取物对拟血管性痴呆大鼠海马CA1区神经细胞的保护作用。方法反复夹闭再通大鼠双侧颈总动脉同时腹腔注射硝普钠制造拟血管性痴呆大鼠模型，采用Morris水迷宫和尼氏染色方法分别观察大鼠空间学习记忆能力及海马CA1区细胞形态学改变和细胞数目。结果模型组大鼠在1个月、2个月和4个月不同时间点测得的Morris水迷宫逃避潜伏期（EL）均较假手术组明显延长（P〈0．01），药物组EL显著均短于模型组，但仍长于假手术组（P〈0．05或0．01）；各时间点模型组海马CA1区锥体细胞及其树突丢失，药物组锥体细胞数多于模型组。结论EGb761对海马CA1区的保护作用可能是其改善VD大鼠学习记忆障碍的重要机制。     

银杏叶提取物对一氧化氮影响的研究进展

随着银杏叶提取物(EGb)作用机制的阐明,银杏叶广泛用于心、脑血管等疾病的治疗。EGb清除一氧化氮(NO)和调节一氧化氮合酶(NOS)的效用在很多实验中得以证实。EGb具有双向调节的作用机制,对于NO减少导致的疾病,EGb可以改善NO的生成,调节核因子κB的核移位。但对大多数NO异常生成过多的疾病,EGb清除NO和自由基,抑制iNOSmRNA和蛋白的表达,减少NO生成和降低iNOS的活性,并通过减弱核因子κB活性的抗氧化效应产生效应。     

瘦素诱导肝星状细胞增殖及银杏叶提取物调控作用的研究

目的:观察银杏叶提取物(GbE)对外源性瘦素(Leptin)诱导肝星状细胞(HSC)增殖功能的影响。方法:分别以不同浓度瘦素(0、10、50、100、200、400μg/L)在不同时相(6、12、18、24h)对复苏后处于对数生长期的HSC-T6细胞进行刺激,同时采用银杏叶提取物(20、40、80、160mg/L)对100μg/L瘦素刺激的HSC-T6细胞作用,设常规培养组为对照,均用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞的增殖情况。结果:不同剂量瘦素在不同时间点对HSC-T6细胞增殖呈现剂量、时间依赖性(P<0.05)。银杏叶提取物能明显抑制瘦素刺激的HSC-T6的增殖(P<0.05)。结论:瘦素可明显刺激HSC的增殖,GbE对瘦素刺激的HSC的活化途径的抑制,可能是其抗肝纤维化的重要机制。     

银杏叶提取物对轻度认知功能损害的影响

目的：观察银杏叶提取物对轻度认知功能损害（MCI）的影响。方法：MCI患者245例,随机分为治疗组（n=123）与对照组（n=122）,两组均予基础治疗,治疗组加用银杏叶提取物40mg,1天3次,口服。两组治疗前、治疗6个月及1年行简易精神状态检查（MMSE）与画钟试验（CDT）。监测治疗前后两组红细胞乙酰胆碱（RBC-Ach）及红细胞乙酰胆碱酯酶（RBC—AchE）活性。结果：治疗6个月及1年,治疗组MMSE、CDT积分均显著提高,且均高于同期对照组（P〈0．01）;与治疗前比较,治疗1年治疗组RBC—Ach含量显著升高（P〈0．01）,且高于对照组（P〈0．01）;治疗组RBC—AchE活性水平显著下降（P〈0．01）,且低于对照组（P〈0．01）。结论：银杏叶提取物能显著改善MCI患者认知功能,降低AD转化率,可能与其改善中枢胆碱能系统功能有关。     

银杏叶提取物抑制左旋多巴神经毒性作用实验研究

观察左旋多巴神经毒性作用，探讨银杏叶提取物、左旋多巴联合治疗帕金森病大鼠可行性。采用帕金森病大鼠模型，通过细胞凋亡、免疫组织化学、行为学、Nissl染色方法，选择帕金森病大鼠模型成功后10d,12d,14d为观察时点，比较左旋多巴（Levodopa,L-dopa)治疗和银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract,EGb)，L－dopa联合治疗（E－D组）帕金森病大鼠的.结果：与L－dopa治疗组比较，E－D组大鼠黑质细胞凋亡数、旋转行为减少，而尼氏细胞计数、bFGF蛋白表达则增加（P＜0．05）。表明EGb可减轻L－dopa的神经毒性作用，EGb,L-dopa联合治疗帕金森病是可行的，且疗效优于单用L-dopa。