蒜氨酸、蒜酶及蒜氨酸+蒜酶对白假丝酵母菌生长的影响

目的 检测蒜氨酸、蒜酶及蒜氨酸+蒜酶对白假丝酵母菌的体外抑菌作用.方法 采用液体稀释法、平板计数法测定三者对白假丝酵母菌的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC),并采用菌落法绘制时间-杀菌曲线.结果 蒜氨酸和蒜氨酸+蒜酶均可抑制、杀伤白假丝酵母菌,MIC分别为50、1.56 mg·mL-1,MBC分别为100、3.12 mg·mL-1;而蒜酶单体无此作用.结论 蒜氨酸和蒜氨酸+蒜酶均对白假丝酵母菌有抑菌作用.     

蒜氨酸微丸-蒜酶肠溶双层片制备工艺优选及体外抗肿瘤作用评价

目的 优选蒜氨酸微丸-蒜酶肠溶双层片的制备工艺,并评价其体外抗肿瘤作用.方法 以蒜氨酸的累积释放率为评价指标,以崩解剂种类和用量、肠溶衣用量及微晶纤维素(MCC)与蒜氨酸的质量比为考察因素,采用单因素试验优选蒜氨酸微丸的制备工艺;以大蒜辣素产率为评价指标,以蒜酶层中MCC的用量、包衣温度为考察因素,采用单因素试验优选蒜...     

蒜氨酸+蒜酶抗肿瘤及其机制的研究

大蒜制剂、大蒜提取物和大蒜提取成分的抗肿瘤作用已有广泛的研究[1 ] 。蒜氨酸 (Alliin ,2 烯丙基半胱氨酸亚砜 )为大蒜活性成分的主要前体物质 ,蒜氨酸在蒜氨酸酶 (Alli inase ,EC 4 .4.1 .4)的催化作用下产生大蒜辣素 (Allicin ,二烯丙基硫代亚磺酸酯 )。本课题组发现蒜氨酸 +蒜氨酸酶生成的大蒜辣素 1 3h内基本稳定。据此 ,本文采用MGC 80 3和HeLa肿瘤细胞株 ,利用蒜氨酸 +蒜氨酸酶生成的大蒜辣素研究其体外的抗肿瘤作用及其作用机制。1　材料和方法1 .1　细胞培养及药物　细胞培养的传代接种见文献[2 ] 。蒜氨酸及蒜氨酸酶由新疆…     

蒜氨酸酶和无臭大蒜

采用正交试验法 ,确定大蒜在 PH3、80℃条件下漂烫 3分钟 ,蒜氨酸酶失去活性 ,可制得无臭大蒜     

高效液相色谱法考察蒜酶活力测定中的影响因素

目的考察底物蒜氨酸纯度对蒜酶活力测定数值的影响,比较催化温度为25,35,37℃时蒜酶活力测定数值的差异。建立可行的蒜酶活力检测方法。方法采用高效液相色谱法,以蒜氨酸的减少量计算蒜酶活力。结果进行蒜酶活力测定时,底物蒜氨酸的纯度应不小于90%,确定蒜酶催化反应温度为35℃。结论建立了以95%蒜氨酸为底物,催化温度为35℃的蒜酶活力测定条件。     

大蒜蒜氨酸酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

提取大蒜总RNA,经RT-PCR扩增出1 348 bp的成熟蒜氨酸酶基因,克隆到pET-28a(+)载体中,构建带有寡聚组氨酸纯化标签的融合蛋白表达质粒.将重组质粒转化入大肠杆菌,经IPTG诱导后的表达产物大部分为包含体,SDS-PAGE电泳和western blotting结果表明目标蛋白的相对分子质量约5.3×104,占菌体总蛋白的45.1%.含6 mol/L盐酸胍的溶液,经镍亲和色谱纯化和透析复性,每升摇瓶发酵液可得蛋白143.3 mg,得率为13.6%,纯度为97%,蒜氨酸酶的比活力为388 u/mg.     

刺梨乙醇提取物体外抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性的研究

目的 研究刺梨体外抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法 采用DPPH和ABTS氧化自由基清除试验对刺梨果肉乙醇提取物的抗氧化活性进行研究,并对其α-葡萄糖苷酶抑制活性进行了测定。结果 刺梨果肉乙醇提取物具有较强的DPPH氧化自由基清除能力[IC₅₀=(10.24±0.98)μg·mL^-1]和ABTS氧化自由基清除能力[IC₅₀=(4.92±0.31)μg·mL^-1]及α-葡萄糖苷酶抑制活性[IC₅₀=(5.75±0.71)μg·mL^-1]。结论 刺梨具有较好的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。     

HPLC法测定大蒜、蒜氨酸中间体及单体的蒜氨酸含量

目的：建立高效液相色谱测定大蒜、蒜氨酸中间体及单体中的蒜氨酸含量的方法。方法：采用Hypersil BDS C18（4．6mm×25cm，5μm）柱，分别以0．04％CF3 COOH水溶液和甲醇-0．02％CF3 COOH水溶液（5：95）为流动相，流速0．5mL·min^-1，检测波长214nm。结果：蒜氨酸在26．3～263．2μg·mL。呈良好线性关系，相关系数均为0．9999，方法灵敏、准确、重复性好，平均回收率（n=9）分别为99．1％和100．1％，日内精密度RSD（n=5）分别为0．56％和0．35％，日间精密度RSD（n=5）分别为0．57％和0．99％。结论：试验表明该方法简便、快速、适用性好。     

马齿苋多糖的抗氧化活性研究

目的研究马齿苋多糖(POP)的抗氧化作用。方法采用体外实验研究POP对超氧阴离子、羟自由基、DPPH的清除作用以及对H2O2诱导的红细胞氧化溶血和大鼠肝匀浆脂质过氧化的保护作用。结果 POP对超氧阴离子和羟自由基具有良好的清除作用,IC50分别为4.29和1.97μg/mL,对有机自由基DPPH的作用很弱。POP对自发性脂质过氧化和H2O2诱导的脂质过氧化具有良好的保护作用,但对H2O2诱导的红细胞氧化溶血作用较弱。结论 POP具有显著的体外抗氧化活性。     

大蒜蒜酶提取纯化及临床应用研究

目的:研究从鲜蒜中分离纯化蒜酶的方法和临床常用剂对酶活性的影响,为今后工艺的进一步放大、优化和合理临床应用提供必要理论参数。方法:以天然蒜氨酸作底物,采用丙酮酸法测定酶浓度;以牛血清白蛋白为标准,采用考马斯亮兰G-250法测定蛋白质浓度。结果:从鲜蒜中提取纯化蒜酶,其粗酶浸提液的最佳组成为Na2HPO4-KH2PO4缓冲溶液;硫酸铵沉淀酶蛋白的最适饱和度范围为0%~35%;选用超滤技术脱盐;蒜酶最佳调节等电点为4.9。在临床常用溶剂中,含氯化钠的注射液(不含葡萄糖)对蒜酶活力有显著的激活作用,而含葡萄糖的注射液则较强地抑制了蒜酶活力;75%和95%乙醇具有强烈的杀酶作用。结论:本研究为今后工艺的进一步放大与优化和蒜酶合理临床应用提供了指导。     

黄山杜鹃总黄酮的体外抗氧化活性研究

目的 研究黄山杜鹃总黄酮的抗氧化活性.方法 采用体外实验研究黄山杜鹃总黄酮的还原力、金属螯合性及对1,1-二苯基苦基苯肼自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O2-·)、亚硝酸钠的清除能力.结果 黄山杜鹃总黄酮提取液的浓度为505 mg· L-1,总黄酮提取液有很好的还原力和金属离子的螯合能力;总黄酮对DPPH·、O2-·和亚硝酸钠有清除作用,且存在量效关系.结论 黄山杜鹃总黄酮在体外具有抗氧化活性.     

蓼大青叶醇提物体内外抗氧化活性的研究

目的采用体内外试验方法研究蓼大青叶抗氧化活性。方法通过考察蓼大青叶体积分数95%甲醇提取液清除二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)活性以及对H2O2诱导小鼠红细胞氧化溶血的影响,评价其体外抗氧化活性;通过研究蓼大青叶体积分数95%甲醇提取液对CCl4所致急性肝损伤小鼠血浆中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、丙二醛(MDA)水平及肝匀浆液中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响,探讨蓼大青叶的体内抗氧化活性。结果蓼大青叶体积分数95%甲醇提取液质量浓度在25¹ 000 mg·L-1内可有效清除DPPH·,IC50为103.4 mg·L-1;蓼大青叶体积分数95%甲醇提取液质量浓度在251 000 mg·L-1内可有效清除DPPH·,IC50为103.4 mg·L-1;蓼大青叶体积分数95%甲醇提取液质量浓度在25¹00 mg·L-1内具有H2O2诱导红细胞氧化溶血抑制作用;剂量范围在3100 mg·L-1内具有H2O2诱导红细胞氧化溶血抑制作用;剂量范围在3¹2 g·kg-1内能减少小鼠血浆中MDA水平,增加T-SOD活性,提高肝匀浆液GSH-Px活性。结论蓼大青叶体积分数95%甲醇提取物具有一定的体内外抗氧化活性。     

清热合剂体外抗流感病毒的作用评价

目的:研究清热合剂对流感病毒A3的抑制作用。方法:采用鸡胚实验技术,通过红细胞凝集实验,以流感病毒血凝滴度为指标观察大鼠含药血清对流感病毒抑制作用。结果:大鼠按24g.kg-1剂量灌胃清热合剂后,1,2,3,4h含药血清有抗病毒作用,血凝滴度抑制率为86.37%,82.32%,80.72%和72.74%。按12g.kg-1剂量灌胃清热合剂后,1,2,3h含药血清有抗病毒作用,血凝滴度抑制率为71.53%,67.58%和66.14%。且发现清热合剂对流感病毒A3的抑制作用存在明显的量效关系。结论:清热合剂在鸡胚中对流感病毒A3有显著抑制作用。     

In vitro antioxidant activity of piperine

Oxygen radical injury and lipid peroxidation have been suggested as major causes of atherosclerosis, cancer, liver disease and the aging process. Piperine, having an antiinflammatory effect, has been demonstrated in in vitro experiments to protect against oxidative damage by inhibiting or quenching free radicals and reactive oxygen species and hydroxyl radicals. The effect on lipid peroxidation was also examined and IC50 values were calculated. Piperine was found to act as a hydroxyl radical scavenger at low concentrations, but at higher concentrations, it activated the fenton reaction resulting in increased generation of hydroxyl radicals. Whereas it acts as a powerful superoxide scavenger and IC50 is 1.82 mM, a 52% inhibition of lipid peroxidation was observed at a dose of 1400 microM with an IC50 of 1.23 mM. The results depict that piperine possesses direct antioxidant activity against various free radicals. This study also opens newer views on the potential efficacy of piperine in protecting tissues from peroxidative damage.     

蒜氨酸光学纯度和立体构型的研究

目的:研究国产蒜氨酸的光学纯度及其立体构型。方法:采用邻苯二甲醛/N-异丁酰基-L-半胱氨酸(OPA/IBLC)为柱前手性衍生化试剂,建立了柱前衍生化 RP-HPLC 法测定蒜氨酸的光学纯度,色谱条件为:SHIM-PACK CLC-ODS 柱(5μm,4.6mm×150mm),流动相为甲醇-醋酸盐缓冲液(1000 mL 水,加醋酸铵1 g 和冰醋酸1 mL)(50:50),UV/MS 检测,UV检测波长230 nm,MS 采用 SIM[M H]~ m/z 467检测;流速1.0 mL·min~(-1),UV 检测限约为0.4μg·mL~(-1),MS 检测限约为0.04μg·mL~(-1),采用高效液相色谱制备蒜氨酸工作对照品,测定其比旋度,确定其立体构型。结果:手性衍生化柱前 RP-HPLC 测定结果表明国产蒜氨酸中无光学异构体存在,自制蒜氨酸对照品比旋度测定结果与文献报道值一致。结论:国产蒜氨酸中无手性对映体杂质,其立体构型为( )S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜。     

Review on in vivo and in vitro methods evaluation of antioxidant activity

A good number of abstracts and research articles (in total 74) published, so far, for evaluating antioxidant activity of various samples of research interest were gone through where 407 methods were come across, which were repeated from 29 different methods. These were classified as in vitro and in vivo methods. And those are described and discussed below in this review article. In the later part of this review article, frequency of in vitro as well as in vivo methods is analyzed with a bar diagram. Solvents are important for extracting antioxidants from natural sources. Frequency of solvents used for extraction is also portrayed and the results are discussed in this article. As per this review there are 19 in vitro methods and 10 in vivo methods that are being used for the evaluation of antioxidant activity of the sample of interest. DPPH method was found to be used mostly for the in vitro antioxidant activity evaluation purpose while LPO was found as mostly used in vivo antioxidant assay. Ethanol was with the highest frequency as solvent for extraction purpose.     

柳兰鞣质含量动态分析及体外抗氧化作用研究

目的：通过测定不同生长期柳兰中鞣质的含量,分析柳兰中鞣质含量的动态积累规律并研究其体外抗氧化活性。方法：采用紫外分光光度法对不同生长期柳兰中鞣质进行含量测定,并采用DPPH自由基体系、超氧阴离子自由基体系,对其进行体外抗氧化活性进行研究。结果：柳兰中鞣质含量呈规律性变化,在花蕾期含量最高,含量为12．50％,果期含量最低,含量为5．32％;柳兰鞣质对DPPH自由基及超氧阴离子自由基均有抑制作用。结论：确定了柳兰鞣质含量的动态积累规律,其变化规律对确定药材的最佳采收期有指导意义;柳兰鞣质具有明显外抗氧化作用。     

刺玫果的体外抗氧化活性研究

目的比较研究刺玫果种子和果肉不同极性萃取物的体外抗氧化活性。方法以抗坏血酸为阳性对照,采用DPPH自由基清除法、邻苯三酚自氧化法和邻二氮菲亚铁法,测定种子和果肉不同极性萃取物对DPPH自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O-2·)和羟基自由基(·OH)的清除能力。结果种子和果肉不同极性萃取物均有一定的抗氧化能力,在一定质量浓度范围内,清除自由基的能力与其质量浓度呈正相关性。部分萃取物对DPPH·和·OH的清除能力较强,而对O-2·的清除能力较弱,其中果肉乙酸乙酯部分对DPPH·、O-2·和·OH的清除率最强,IC50分别为6.46,971.48和51.12μg·mL-1,总黄酮含量测定结果表明,该部分总黄酮含量为30.2%。结论果肉乙酸乙酯部分是一种很有潜力的天然抗氧化剂。