知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型体外活性研究

目的:对知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的活性进行研究.方法:采用MTT比色法测定知母宁对Vero细胞的毒性作用.采用中性红染色法,以阿昔洛韦为阳性对照药物,考察不同给药方式与不同药物处理时间下知母宁体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-ⅠSm44)的活性.结果:MTT法测得Vero细胞对知母宁的最大耐受浓度与半数中毒浓度(TC50)分别为0.29与3.66mg*ml-1.不同加药方式下,知母宁与阿昔洛韦均对HSV-ⅠSm44表现出综合抑制作用并能抑制病毒吸附后的复制增殖过程,这些作用总体上随药物浓度升高而增强,其中知母宁抗病毒有效率(ER%)最高达76.42%.知母宁预防HSV-Ⅰ病毒吸附的作用较弱,但其在高浓度(2.08mg*ml-1以上)对HSV-Ⅰ具强的直接杀伤作用,最高ER%值为98.86%.随药物处理时间延长,低浓度知母宁抗HSV-Ⅰ的ER%值递减,2.08mg*ml-1以上知母宁的ER%值变化小.在不同药物处理时间下,知母宁及阿昔洛韦组病毒的感染性均较平行设置的病毒对照组减弱,且知母宁组的感染力较阳性药物组更弱.知母宁组病毒感染力下降值△lgTCID50随处理时间增加而增加.结论:知母宁在体外从多个作用点较强地抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型活性.     

病毒宁体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的活性研究

目的研究中药制剂病毒宁体外抗单纯疱疹病毒（HSV-1）作用,确定病毒宁体外抗HSV-1活性。方法药物对细胞毒性进行测定。结果病毒宁在1．5—0．1875g／L稀释度时,对HSV-1有明显杀灭作用（P〈0．05）;病毒宁在1．5～0．375g／L稀释度时,能显著阻断HSV-1对细胞感染,并显著抑制病毒在细胞内的增殖（P〈0．05）。结论中药制剂病毒宁在体外具有明显的抗HSV-1作用,其最大无毒浓度1．5g／L,最佳稀释浓度为1．5～0．375g／L。     

薄荷油体外抗Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒活性的研究

薄荷油是从辣薄荷Mentha piperita L.叶中提取的挥发油。作者对薄荷油的体外抗HSV-1和HSV-2的作用进行了研究。     

皱瘤海鞘抗单纯疱疹病毒Ⅰ型活性的初步研究

目的探讨皱瘤海鞘醇提物在体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)的作用。方法以阿昔洛韦为阳性对照,利用Vero细胞体外增殖模型,通过细胞病变效应法(CPE)和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活性,测定皱瘤海鞘醇提物抑制HSV-Ⅰ对Vero细胞感染的作用。结果皱瘤海鞘醇提物TC50值(半数致病变浓度)为7.778 mg/mL,综合药效IC50(半数抑病毒浓度)为0.230 mg/mL,治疗指数TI为33.8,具有高效低毒性;对HSV-Ⅰ具有很好的直接杀伤作用,对HSV-Ⅰ生物合成的抑制作用较小。结论皱瘤海鞘醇提物在体外具有良好的抗HSV-Ⅰ活性。     

白颖苔草提取物体外抗疱疹科病毒作用实验研究

目的探讨白颖苔草正丁醇提取物对疱疹科病毒的体外抑制作用。方法采用有机溶剂分步浸提得正丁醇提取物,以HSV-1-HEK293,HSV-2-HEK293,MCMV-3T3体外感染模型进行试验,通过显微镜观察细胞病变,分光光度计测定中性红染色A540值,计算治疗指数（TI）评价抗病毒效果。结果白颖苔草正丁醇提取物可抑制HSV-1,HSV-2,MCMV的细胞病变效应,TI分别为161．63,115．63,38．67。结论白颖苔草对疱疹科病毒具有抑制活性。     

刺参糖胺聚糖对单纯疱疹病毒Ⅰ型抑制作用的实验研究

目的 探讨刺参糖胺聚糖对单纯疱疹病毒(herpes simplex virus,HSV)I型的抑制作用以及对感染小鼠的保护作用.方法 以Vero细胞为靶细胞,接种HSV-1SM44毒株,同时分别加入不同浓度的刺参糖胺聚糖,观察细胞病变和定量PCR检测刺参糖胺聚糖的抗病毒作用;体内实验以HSV-1SM44毒株颅内接种感染小鼠,4h后以不同剂量的刺参糖胺聚糖灌胃,观察刺参糖胺聚糖对感染病毒小鼠的保护作用.结果 刺参糖胺聚糖浓度在1.6mg·mL-1以上时,表现出对Vero细胞的毒性作用;在0.25～0.2mg·mL-1浓度范围表现出抗病毒活性,且具有一定的量效关系.对细胞无毒性作用.动物实验表明颅内感染小鼠刺参糖胺聚糖灌胃后,存活时间延长,死亡数明显减少;且呈一定正相关.结论 刺参糖胺聚糖具有抗HSV-I、保护HSV-I感染小鼠的作用.     

牛膝多糖硫酸酯抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的实验研究

以细胞培养技术对牛膝多糖（Ａｃｈｙｒａｎｔｈｅｓｂｉｄｅｎｔａｔａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，Ａｂｐｓ）硫酸酯抗Ⅰ型单纯疱疹病毒药效的实验进行研究。受试药物Ａｂｐｓ硫酸酯（Ａ－５、Ａ－６、Ｂ－３、Ｂ－４、Ｂ－５、Ｃ－６、Ｃ－７、Ｃ－８）和对照药物环胞苷（ＣＣ）、亚膦酰乙酸（ＰＡＡ）按照综合药效指数评价时，排列顺序为Ａ－６（２．１７）＞ＣＣ（２．１１）＞ＰＡＡ（２．０４）＞Ｂ－３（２．０２）＞Ｂ－５（１．９０）＞Ａ－５（１．６０）＞Ｃ－８（１．３８）＞Ｃ－７（１．３２）＞Ｂ－４（０．８４）＞Ｃ－６（０．８０）。由此可见，８种受试的化学合成药牛膝多糖硫酸酯中Ａ－６为抗Ⅰ型单纯疱疹病毒效果较佳新药，本品优于环胞苷和亚膦酰乙酸。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型在眼部发病途径的研究进展

随着研究的深入，对于单纯疱疹病毒Ⅰ型在眼部发病途径有了一些新的认识，综述近来HSV传播途径的研究进展(特别是HSV如何从前房、玻璃体到视网膜)和潜伏部位的研究进展(包括角膜、虹膜、睫状体、视网膜，睫状神经节)，并对现在存在的问题提出一些思考。     

夏枯草提取物对HSV-Ⅰ及单纯疱疹病毒性角膜炎的作用

目的考察夏枯草提取物对单纯性疱疹病毒性角膜炎的疗效。方法建立单纯性疱疹病毒Ⅰ型(herpes simplex virus-Ⅰ,HSV-Ⅰ)感染Vero细胞的体外模型,以细胞病变效应、治疗指数为观察指标,了解不同浓度夏枯草提取物体外抗病毒效果;采用单纯性疱疹病毒HSV-Ⅰ感染家兔角膜建立体内病毒感染模型,家兔分别用夏枯草提取物、阿昔洛韦、生理盐水治疗15 d,眼角膜每天经荧光素钠染色后,裂隙灯下观察药物对家兔病毒性角膜炎模型的治疗作用。结果体外试验表明夏枯草提取物对感染HSV-Ⅰ病毒的Vero细胞具有明显的抗病毒作用,最大无毒质量浓度TC0为516mg.L-1,治疗指数TI为28.03;体内试验结果显示,与模型组相比,夏枯草提取物和阿昔洛韦组均能有效地治疗单纯疱疹病毒性角膜炎,减轻角膜病变程度,缩短平均治愈时间,其疗效与阿昔洛韦组相似。结论夏枯草提取物对单纯疱疹病毒性角膜炎有显著的疗效,可实施新药研发。     

Ⅰ型单纯疱疹病毒潜伏感染及其应激复发

Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)是常见的病原体,人是其唯一自然宿主。原发感染后,HSV-1在上皮细胞大量复制,然后沿轴突逆行至感觉神经节并潜伏下来。当机体在一定的应激负荷下,潜伏感染的病毒重新激活,从而造成复发性疾病。因此,阐明病毒潜伏感染及应激复发的相关机制,将对Ⅰ型单纯疱疹病毒预防、治疗和控制带来新的启示。该文就HSV-1潜伏感染与应激复发的相关机制进行综述。     

大青叶提取物抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的体外实验研究

目的 检测大青叶提取物体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-Ⅱ） 的作用. 方法 以Vero 细胞为宿主细胞,阿昔洛韦为阳性对照药物,通过观察细胞病变效应（CPE）和改良MTT比色法来测定药物的细胞毒性、药物对HSV-Ⅱ的直接灭活作用,以及药物抗HSV-Ⅱ对细胞的吸附和对 HSV-Ⅱ在细胞内复制增殖的抑制,算出药物抗HSV-Ⅱ的治疗指数. 结果 大青叶提取物在体外对HSV-Ⅱ无直接灭活作用,也无抗HSV-Ⅱ吸附细胞的作用,但能抑制HSV-Ⅱ在细胞内的复制增殖,其治疗指数达3.56. 结论 大青叶提取物在体外有一定的抗HSV-Ⅱ感染效果,主要是通过抑制病毒在细胞内的复制增殖而发挥作用.     

单纯疱疹病毒Ⅰ型在正常人眼视网膜潜伏的初步研究

目的研究正常人视网膜是否有单纯疱疹病毒Ⅰ型潜伏。方法采用正常健康志愿者捐献的新鲜眼球15个。1／3眼球组织进行免疫组化染色，排除HSV-1急性感染。取出剩余的视网膜，每个眼球1／3视网膜组织进行离心，取上清液与Vero细胞共培养，另外2／3视网膜组织提取DNA作PCR和凝胶电泳检测HSV-1的DNA和LAT。结果15个标本免疫组化染色皆阴性，Vero细胞与视网膜组织上清液共培养结果为阴性，未观察到细胞病理学改变，PCR检测15个标本中10、11号标本的HSV-1DNA阳性，HSV-1LAT阴性，其他13个标本PCR枪测HSV-1DNA阴性．HSV-1LAT阴性．结论正常人视网膜存左HSV-1DNA．     

生殖器疱疹患者单纯疱疹病毒Ⅰ/Ⅱ型IgM/IgG的检测分析

目的 分析皮肤性病门诊就诊者单纯疱疹病毒(HSV)Ⅰ和Ⅱ型感染情况.方法 应用酶联免疫吸附试验检测就诊者血清中HSV Ⅰ和Ⅱ型IgM/IgG.结果 296例皮肤病门诊就诊者检出HSV Ⅰ型IgM和IgG分别为19例(7.09％)和240例(90.23％):而HSVⅡ型IgM和IgG分别为32例(11.03％)和55例(19.16％).结论 检测血清中HSV Ⅰ型IgM和HSV Ⅱ型IgM/IgG作为生殖器疱疹筛查试验,有利于无症状以及症状不典型HSV感染者的检出,提高HSV的检出率.     

扇贝裙边糖胺聚糖体外抗I型单纯疱疹病毒实验研究

目的研究扇贝裙边糖胺聚糖(glycosaminoglycan from Scallop Skirt,SS-GAG)体外抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)的作用。方法运用单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-ⅠSM44株),并以非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)为宿主细胞,通过观察病毒感染后的细胞变性反应(cytopathic effect,CPE)和运用MTT比色法,检测不同浓度药物SS-GAG对Ⅰ型单纯疱疹病毒是否有直接的灭活作用、对HSV-Ⅰ感染复制的抑制活性以及对HSV-Ⅰ感染细胞的综合作用等,并观察药物对Vero细胞的毒性作用。结果与病毒对照组相比,SS-GAG各浓度组(100、50、25mg.L-1)能有效地保护经HSV-Ⅰ感染的Vero细胞,使细胞活性增强(P<0.01);并减弱HSV-Ⅰ导致的病变效应,抑制病毒的复制。此作用随着药物浓度的增加而增强。但是SS-GAG对HSV-Ⅰ没有直接的灭活作用;SS-GAG在50~1600mg.L-1浓度范围内对Vero细胞无明显的细胞毒性。结论SS-GAG在体外实验系统中显示出明显的保护宿主细胞抵抗HSV-Ⅰ病毒感染的活性作用。     

新型抗生素S632A对单纯疱疹病毒Ⅰ型感染小鼠的治疗作用

目的研究新型抗生素S632A对单纯疱疹病毒Ⅰ型感染小鼠的治疗作用。方法建立小鼠单纯疱疹病毒性脑炎(HSE)模型，观察给药后小鼠存活率和平均存活时间，并检测给药后不同时间小鼠脑组织病毒滴度，以及HE染色观察给药组小鼠脑组织病变程度。结果实验结果显示28mg／kg治疗剂量的S632A能够明显降低小鼠死亡率，延长其平均存活时间，降低脑组织病毒滴度，减轻脑组织病变程度，且与阳性对照药物阿昔洛韦(ACV)治疗效果类似，统计学上无显著差异。结论一定剂量的S632A在小鼠体内具有类似于ACV的治疗作用，值得进一步研究和开发。     

载脂蛋白E4通过脑内CD1-NKT促进单纯疱疹病毒Ⅰ型感染诱导的Aβ沉积和炎症反应

目的阿尔茨海默病(AD)是一种老年人常见的神经退行性疾病,其发病机制尚不清楚。载脂蛋白Eε4(APOE4)等位基因是目前唯一公认的散发性AD的高风险遗传因素。流行病学和临床研究提示,单纯疱疹病毒I型(HSV-1)感染与AD发病有关,并且HSV-1感染在APOE4基因携带者AD患病风险最高,提示APOE4基因型影响HSV-1感染诱发AD发病。本课题旨在研究APOE4对HSV-1经鼻感染诱发的脑内HSV-1病毒载量、Aβ沉积及神经免疫的影响。方法 HSV-1分别经鼻感染9月龄雌性APOE4-和APOE3-TR小鼠,分别应用PCR技术和Western蛋白印迹法检测并比较小鼠脑内HSV-1DNA,HSV 1病毒g C包膜糖蛋白水平;应用Western蛋白印迹法和ELISA检测并比较脑内淀粉样前体蛋白(APP)、β-淀粉样蛋白(Aβ)及TNF-α,IL-6等炎症因子的表达;应用DAB免疫组化和免疫荧光染色检测小胶质细胞,免疫荧光染色检测脑内NKT细胞,Western蛋白印迹法和流式细胞技术分别检测小鼠脑内CD1d蛋白和CD1阳性细胞。结果小鼠HSV-1经鼻感染7 d后,在嗅球、皮质、海马等脑组织均能检测到病毒DNA和g C蛋白,并且APOE4-TR小鼠脑内HSV-1病毒载量明显多于APOE3-TR小鼠;APOE4-TR小鼠脑内APP的表达和Aβ蛋白水平也明显高于APOE4-TR小鼠。免疫组化及ELISA检测显示,HSV-1感染后小鼠脑内小胶质细胞激活,TNF-α和IL-6炎症因子水平明显增加,并且APOE4-TR小鼠脑内炎症因子水平增加更为明显;而HSV-1感染后APOE3-TR小鼠脑内CD1水平的增加比APOE4-TR更为明显,APOE3-TR小鼠脑内也更易在检测到NK T细胞存在。结论 APOE4促进脑组织内HSV-1病毒载量、Aβ沉积及小胶质细胞分泌炎症因子,却减弱脑内CD1和NK T细胞参与的免疫应答反应。提示APOE4促进HSV-1感染诱发AD可能与CD1和NK T细胞参与的免疫应答异常有关。     

二羟丙氧甲基乌嘌呤抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的实验研究

二羟丙氧甲基鸟嘌岭(DHPG),在组织培养中对单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)KOS株抑制50%空斑形成的浓度(IC_(50))为0.1μg/ml。DHPG与环胞苷联合应用的抗HSV活性呈协同作用;DHPG分别与无环鸟苷、酞丁安合用有相加作用。0.1和0.05%DHPG溶液滴眼对家兔实验性浅层单纯疱疹病毒角膜炎有显著治疗作用,浓度降低至0.025和0.0l%无明显疗效。对实质层型单疱角膜炎,0.1%DHPG溶液滴眼治疗有效。     

菲索抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的体外实验研究

为了解菲索 (FESOL )在体外抗单纯疱疹病毒 型 (HSV-2 )的效果 ,以临床常用的无环鸟苷 (ACV)作对照药 ,采用细胞病变抑制法 (CPE)抑制法和 MTT法进行实验。结果显示 ,CPE抑制法测得 FESOL的 TC50 为 3 mg/ ml,IC50 为 0 .0 3 2 mg/ ml,治疗指数 TI为 93 .75 ;以 MTT法测得 FESOL的 TC50 为 2 .5 mg/ ml,IC50 为 0 .0 3 1mg/ ml,TI为 80 .65。与 ACV相比 ,FESOL在体外有明显抑制 HSV-2的作用     

蛇葡萄根提取物在细胞内抗单纯疱疹病毒的作用部位

蛇葡萄(Ampelopsis sinica)根通过提取得到不同提取物,用之进行细胞内抗单纯疱疹病毒的实验,发现其中除去鞣质后的水溶性部分具有抑制单纯疱疹病毒的活性作用。