小鼠常压低氧舱的制作与应用

<正> 低氧动物模型可广泛用于航空航天研究、水下作业,高原环境所致的低压低氧性疾病、心脑血管疾病和肺疾病等常压低氧性疾病的研究。国内制作低氧动物模型的低氧舱费用较为昂贵,操作也比较烦琐。本着实用的原则,我们设计制作了一种简易的小鼠常压低氧舱。     

低温低氧环境下心肌缺血家兔的血压、心率效应

目的探讨家兔心肌缺血后在低温低氧状态下心率、血压反应。方法将心肌缺血家兔置于-10±2℃和氧含量为8.5%的冰柜中使动物处于低温和低氧状态30min,然后测量心肌缺血家兔在低温低氧环境中的收缩压和舒张压及心率变化。结果冷刺激加低氧的急性情况下,心肌缺血家兔收缩压比常温常氧组低(P<0.01),但又比单纯低温低氧组高(P<0.05),舒张压均比对照组和单纯低温低氧组低(P均<0.01);心率比对照组稍慢,但差异无显著性(P>0.05),比单纯低温低氧组快(P<0.01)。结论低温低氧对心肌缺血家兔可引起收缩压升高,舒张压降低和心率加快。     

血管紧张素转换酶在低氧诱导的肺动脉高压大鼠肺组织中的表达

目的：观察血管紧张素转换酶（ ACE）在低氧诱导的肺动脉高压大鼠肺组织中的表达。方法将20只雄性SD大鼠随机分为对照组和低氧组,每组10只。低氧组大鼠经低氧处理建立肺动脉高压模型,对照组大鼠未低氧处理;导管插入法检测右心室收缩压,Western blot 分析法检测肺组织中ACE蛋白表达。结果低氧处理5个月后,低氧组大鼠右心室收缩压较对照组明显升高（P＜0．05）;Western blot 分析法结果显示ACE在低氧组大鼠肺组织中的蛋白表达明显增加。结论慢性低氧导致肺动脉高压改变,并且可刺激ACE在肺动脉高压病变的肺组织中表达增加。     

低氧血症的氧气疗法

<正>各种原因所致的低氧血症对机体可产生不同程度的损害,氧气是治疗低氧血症的有效疗法。近年来国内外对氧气疗法的装置及     

灯盏花素对大鼠低氧性肺动脉高压治疗作用及血清一氧化氮和内皮素-1的影响

为探讨灯盏花素对大鼠慢性低氧性肺动脉高压的治疗作用及机制,应用灯盏花素腹腔注射,观察其对大鼠不同低氧时间肺动脉平均压(mPAP)、血清一氧化氮（Nitricoxide,NO）及内皮素-1（Endothelin-1,ET-1）含量的影响,并与单纯低氧组对照。结果显示单纯低氧组大鼠mPAP和血清内皮素-1含量在低氧5、14和28d均明显增高（P<0.01）,血清一氧化氮明显降低（P<0.01）;灯盏花素治疗组肺动脉平均压和血清内皮素-1含量在低氧5、14和28d均较单纯低氧组明显降低（P<0.01）,血清一氧化氮含量明显升高（P<0.01）。灯盏花素明显降低大鼠慢性低氧性肺动脉高压,可能是通过增加血清NO、降低ET-1含量发挥其作用的,可用于慢性肺动脉高压的治疗。     

SIN—1和维拉帕米对低氧收缩离体猪冠脉的影响

低氧（营养液通入９５％Ｎ２＋５％ＣＯ２）可收缩离体猪冠状动脉。氧化氮（ＮＯ）供体ＳＩＮ—１０．１、１和１０μｍｏｌ·Ｌ－１可浓度依赖性地抑制低氧收缩作用。钙通道阻断剂维拉帕米（Ｖｅｒａｐａｍｉｌ）０．１和１μｍｏｌ·Ｌ－１亦可浓度依赖性地抑制低氧收缩离体猪冠脉的作用。     

竹节人参提取物对低氧模型小鼠的影响

目的 观察竹节人参提取物对低氧模型小鼠的保护作用.方法 分别采用异丙肾上腺素、亚硝酸钠、小鼠断头等方法制备低氧模型,观察竹节人参提取物对低氧小鼠耗氧量、存活时间和张口呼吸时间的影响.结果 灌胃给予竹节人参提取物0.3 mg/kg可降低异丙肾上腺素所致心肌低氧小鼠的耗氧量,延长低氧存活时间;增加离体鼠头的张口呼吸次数并延长呼吸维持时间.结论 竹节人参提取物对异丙肾上腺素所致心肌低氧小鼠具有保护作用.     

短期低氧训练前、后脑电α节律变化的研究

目的:探讨低氧适应的量化指标,改进飞行员航空生理低氧训练方法。方法:以模拟3.5km高空低氧环境吸入前1天为训练前,连续低氧吸入15天后的次日为训练后,于低氧训练前、后分别记录受训者在模拟7.5km高空环境下脑电图α节律能量状态。结果:急性低氧训练前,模拟7.5km低氧环境下每个时段脑电α节律能量升高明显强于急性低氧训练后每个时段。结论:经过模拟3.5km高空低氧训练15天后大脑抵御缺氧环境的能力明显提高,产生了低氧适应;模拟7.5km高空环境下脑电α节律能量可作为测定大脑低氧适应的量化指标。航空生理训练中的低氧耐力训练建议增加低氧适应性训练。     

内皮素受体拮抗剂对低氧性肺动脉高压的影响

为了探讨内皮素(ET)在低氧性肺动脉高 压发病中的作用和评价ETA受体拮抗 剂的预防效应,将30只Wistar大鼠分为对照组、低氧组和低氧＋BQ-123组,以常压低氧复 制 大鼠肺动脉高压模型,采用微导管法测定肺动脉平均压,放射免疫法检测血浆ET-1含量, 对 肺组织切片进行图象分析。结果发现：低氧3周后,大鼠形成明显的肺动脉高压、肺小动脉 管壁增厚和右心室肥厚,WT%和WA%均明显升高,低氧大鼠血浆ET-1含量为192.3±43.1pg/m l,明显高于对照组的128.2±28.1pg/ml (P＜0.01);经BQ－123处理,可明显减轻低氧 所致的 肺动脉压升高、肺血管壁增厚和右心室肥厚。提示慢性低氧可导致肺动脉高压和血浆ET-1 水平升高,ETA受体拮抗剂对低氧性肺动脉高压具有显著的预防效应。     

EGCG对低氧诱导下胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对低氧培养下人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法 将人胃癌细胞株SGC7901进行传代培养,并采用氯化钴（CoCl2）建立低氧模型,实验设空白对照组（常氧组）、低氧对照组及低氧加不同浓度的EGCG组。分别采用MTT法检测细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR和Western blotting检测细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子-A（VEGF-A）的表达。结果 低氧条件下,低浓度EGCG短时间内（24 h）对SGC7901细胞生长无明显抑制作用（P>0.05）;但随着浓度的升高和作用时间的延长,EGCG可抑制低氧SGC7901细胞的增殖（P<0.01）,100 μg/mL EGCG作用72 h后,其抑制率可达（76.3±2.9）%。流式细胞仪检测显示,EGCG在低氧环境下可呈时间—剂量依赖性地诱导胃癌细胞凋亡（P<0.05或P<0.01）。EGCG可明显抑制低氧诱导的HIF-1α和VEGF-A蛋白的表达（P<0.05或P<0.01）,并下调VEGF-A mRNA表达（P<0.05或P<0.01）,但对HIF-1α mRNA的转录无明显影响（P>0.05）。结论 低氧条件下,EGCG可抑制胃癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调低氧诱导的HIF-1α和VEGF-A的表达有关。     

腺苷通过NHE-1/CaN途径拮抗大鼠低氧性右心室心肌肥厚

目的观察腺苷及其激动剂拮抗右心室肥厚的作用,并探讨其作用机制。方法 56只Sprague-Dawley大鼠随机分成常氧对照组、低氧对照组、低氧处理组(低氧+腺苷组、低氧+腺苷A1受体激动剂(CPA)、低氧+腺苷A2受体激动剂(NECA)、低氧+CPA+A1受体阻滞剂(DPCPX)、低氧+NECA+A2b受体抑制剂MRS1754组)。大鼠置于低氧仓(氧浓度为9.5%~10.5%)连续低氧21 d。各处理组于低氧第7天使用植入式胶囊渗透压泵给药,持续时间为14 d,实验终点时,测定大鼠右心室肥厚程度,采用PCR法检测右心室心肌组织中NHE-1 mRNA、CnAβmRNA的相对含量。结果 1、慢性低氧对照组大鼠RV/(LV+S)为0.369±0.033、RV/BW比值为0.75±0.095,均明显高于常氧组(0.271±0.010,0.59±0.039)(均P<0.001)及低氧腺苷处理组(0.281±0.022,0.650±0.077)(P<0.001,P=0.025)低氧+CPA组(0.313±0.021,0.66±0.067)(均P<0.001)、低氧+NECA组(0.333±0.019,0.68±0.074)(均P<0.001);2、右心室心肌NHE-1 mRNA、CnAβmRNA表达在低氧组均高于常氧组(均P<0.001)及腺苷处理组低氧+CPA、低氧+NECA组(均P<0.001)。结论腺苷及其受体激动剂可通过NHE-1/CaN信号通路拮抗低氧性右心室心肌肥厚。     

低氧微环境下siRNA靶向沉默HIF 2α基因对前列腺癌PC 3细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察体外低氧条件下缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)在人前列腺癌细胞PC-3中的表达情况,并研究siRNA沉默HIF-2α基因对前列腺癌PC-3细胞生长及凋亡的影响.方法 在体外培养的PC-3细胞中加入化学诱导剂CoCl2建立低氧模型,采用逆转录PCR(RT-PCR)和Western印迹法检测CoCl2诱导HIF-2αmRNA和蛋白表达的时-效和量-效关系.合成HIF-2αsiRNA片段并转染前列腺癌PC-3细胞,采用RT-PCR及Western印迹法检测HIF-2αsiRNA对HIF-2α基因表达的影响,采用MTT法检测转染HIF-2αsiRNA后对PC-3细胞生长的抑制情况,采用流式细胞仪检测RNA干扰对PC-3细胞凋亡的影响.结果 (1)低氧可诱导PC-3细胞的HIF-2αmRNA表达,与常氧组比较,低氧12,24及48 h组的HIF-2αmRNA和蛋白表达量逐渐升高(P<0.05).100μmol/L的CoCl2作用48 h可作为最佳前列腺癌细胞PC-3低氧模型.(2)低氧+HIF-2αsiRNA干扰组的HIF-2αmRNA和蛋白表达水平明显低于低氧+阴性对照组和低氧组(P<0.05),而低氧+阴性对照组与低氧组的HIF-2αmRNA和蛋白表达水平无显著性差异(P>0.05).低氧+HIF-2αsiRNA干扰组细胞增殖受抑制、细胞凋亡增加(P<0.05),而常氧组、低氧组、低氧+阴性对照组细胞增殖活力和凋亡差别均无统计学意义(P>0.05).     

MicroRNA-181c 通过调控TRIM2 在慢性脑缺血/ 低氧损伤致认知障碍中发挥作用

目的：通过观察慢性脑缺血/ 低氧对miR-181c 及其下游TRIM2 表达的影响,探讨miR-181c 在慢性脑缺血/ 低氧导致认知障碍中的作用及其可能的分子机制。方法：体内实验利用双侧颈总动脉永久性结扎（2-VO）术制备大鼠脑血流低灌注模型,体外采用原代培养海马神经元及SH-SY5Y 细胞。采用各种分子生物学、细胞生物学及病理学方法检测各生化指标及形态学改变。结果：①慢性脑缺血/ 低氧损伤抑制miR-181c 表达,促进TRIM2 蛋白的表达水平升高;② TRIM2 是miR-181c 下游靶基因;③过表达miR-181c 可改善慢性脑缺血/ 低氧导致认知水平下降;④miR-181c 可促进树突分支并增加树突棘密度;⑤miR-181c 可抑制NF-L 的泛素化,促进NF-L 的表达;⑥miR-181c 调控NR1 表达以及胞内定位;⑦miR-181c 可提高细胞活性,减少细胞凋亡;⑧miR-181c 可影响CaMKⅡ磷酸化以及胞内钙离子浓度。结论：慢性脑缺血/ 低氧抑制miR-181c 表达,促进TRIM2 蛋白的表达水平升高,进而影响神经元树突形态及神经元活性,导致认知功能下降。过表达miR-181c 可通过上述机制改善慢性脑缺血/ 低氧诱导的认知损害。     

低氧对骨髓间质细胞表达VEGF的影响

目的:研究低氧对骨髓间质细胞(MSCs)分泌VEGF及促血管内皮细胞(VECs)增殖的影响。方法:用VEGF ELISA试剂盒和Micro BCA蛋白质定量试剂测定正常氧和低氧培养的MSCs的上清液中VEGF与总蛋白的含量的比值(pg·μg-1)。用不同成份配制的1%FBS的DMEM培养基培养VECs,实验分成5组:低氧MSCs组(低氧培养的MSCs的上清液)、VEGF组(与低氧MSCs组等浓度VEGF)、antibody-低氧MSCs组(低氧MSCs组中加入10μg·ml-1anti-VEGF)、antibody-VEGF组(VEGF组中加入10μg·ml-1anti-VEGF)和对照组(不加其它成份)。用MTT法检测VECs的增殖程度。结果:在低氧条件下培养的MSCs分泌的VEGF明显高于正常氧条件下培养的MSCs分泌的VEGF(P<0.01)。促进VECs增殖的程度依次为低氧MSCs组>VEGF组>antibod-y-低氧MSCs组>antibody-VEGF组=control组。结论:MSCs在低氧条件下比在正常氧条件下具有更强的分泌VEGF的能力。MSCs可分泌VEGF和其它细胞因子共同促进VECs增殖,但VEGF发挥主要作用。     

常压急性低氧动物模型的制备

常压低氧动物模型可广泛用于低氧情况下心脑血管疾病和肺疾病等常压低氧性疾病的研究。利用常压低氧舱可以成功复制低氧动物模型,为肺心病及其他低氧性疾病的防治提供理想的实验动物模型。国内制作低氧动物模型的低氧舱费用较为昂贵,机构复杂,操作也比较繁琐。本实验采用潘殿柱的方法制作的简易低氧舱系统成功复制急性低氧家兔模型,操作简单,费用低廉,现报道如下。     

低氧对肾小管上皮细胞表达VEGF的影响

目的探讨低氧条件下对培养肾小管上皮细胞(HKCs)表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法在3%氧浓度下培养肾小管上皮细胞,用细胞生长曲线及四甲基偶氮唑盐(MTT)比色试验研究细胞活力;用原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡情况;分别用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法检测HKCs在正常和低氧条件下,VEGF mRNA及其蛋白质的表达.结果MTT比色试验较细胞生长曲线更敏感地检测出低氧对细胞代谢的影响,用TUNEL法可检测细胞凋亡率随低氧时间延长而增加,低氧条件下HKCs表达VEGF并无明显增高.结论低氧条件下,检测不到HKCs的VEGF表达增加,可能与低氧诱导HKCs凋亡和代谢率降低有关.     

低氧对大鼠睾丸支持细胞形态结构与存活率的影响

目的 探讨低氧对体外培养大鼠睾丸支持细胞的影响.方法 应用大鼠睾丸支持细胞与生精细胞共培养系统,观察低氧条件下支持细胞的存活数,考马斯亮蓝染色后细胞骨架变化以及生精细胞脱落数.结果 在低氧条件下,支持细胞存活率显著降低,支持细胞细胞骨架出现松弛、回缩等现象;脱落生精细胞数随低氧时间的延长而增加,有明显时间-效应关系.结论 低氧可引起大鼠睾丸支持细胞形态结构及功能的损伤.     

高原低氧对大鼠消化吸收碳水化合物功能的影响

目的：目前,对于低氧条件下碳水化合物的消化吸收功能变化缺乏系统研究,尚不清楚低氧时碳水化合物的消化吸收有哪些变化特点。文中探讨高原低氧对大鼠消化吸收碳水化合物功能的影响及其机制。方法：清洁级SD大鼠32只,随机分为平原对照组（N）和模拟5 000m海拔低氧处理组（H）,低氧组下设3、24、72 h 3个时相点,分别为低氧3 h组（H3h）、低氧24 h组（H24h）和低氧72 h组（H24h）,每组8只,共4组。低氧组大鼠放入低压氧舱模拟海拔5 000m高度低氧环境,分别在低氧处理3、24、72 h后处死,取血清和小肠组织,测定血清淀粉酶（AMS）、过氧化氢酶（CAT）活性,检测小肠组织中双糖酶、超氧化物歧化酶（SOD）活性和谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）的含量;并用RT-PCR检测小肠组织中葡萄糖转运蛋白2（GLUT2）mRNA的表达水平。结果：模拟高原低氧处理3 h后,血清AMS和小肠组织双糖酶活性明显下降,与平原对照组有明显差异（P〈0.05）;小肠组织GLUT2 mRNA表达水平在低氧处理24 h后显著降低（P〈0.05）;而血清CAT、小肠组织SOD活性及GSH含量在低氧处理3 h后也明显降低（P〈0.05）;自由基产物MDA含量在低氧24 h时显著升高（P〈0.05）。结论：高原低氧可导致大鼠消化吸收碳水化合物能力下降,并可能与低氧引起的氧化应激损伤有关。     

L精氨酸对大鼠低氧性肺动脉高压的防治作用

观察Ｌ－精氨酸对大鼠常压低氧性肺动脉高压的预防和治疗作用。结果表明，Ｌ－精氨酸（２００ｍｇ／ｋｇ·ｄ）可明显预防低氧所致的肺动脉高压和右心室肥厚，Ｌ－精氨酸预防组平均肺动脉压（ｍＰＡＰ）（２．６１±０．０９ｋＰａ）明显低于低氧处理组（３．５８±０．０６ｋＰａ），两组间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；右心室／（左心室＋室间隔）重量比值（０．２６±０．０１）明显低于低氧组（０．３４±０．０１），两组间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。大鼠形成肺动脉高压后，经静脉灌注３００ｍｇ／ｋｇ的Ｌ－精氨酸可明显降低其ｍＰＡＰ，提示Ｌ－精氨酸对低氧性肺动脉高压可能具有一定的防治作用。     

银杏苦内酯B降低低氧性肺动脉高压的研究

分别以银杏苦内酯以Ｂ（ＢＮ５２０２１）、低氧、低氧加ＢＮ５２０２１处理Ｗｉｓｔａｒ大鼠，另设对照，观察特异性血小板激活因子（ＰＡＦ）受体拮抗剂ＢＮ５２０２１对低氧性肺动脉高压的作用。结果显示：ＢＮ５２０２１对正常大鼠肺血流动力学无明显影响；低氧３周后大鼠肺动脉平均压（４．０５±０．５６ｋＰａ）及肺血管阻力（９６５２±１４９０ｋＰａ·ｓ／Ｌ）明显高于对照组（２．２２±０．２４ｋＰａ及２５７８±７０４ｋＰａ·ｓ／Ｌ）．并发生右心室肥厚和肺血管重建；用ＢＮ５２０２１后可明显减轻低氧所致的上述改变（肺动脉平均压为２．９７±０．３３ｋＰａ）。以上结果提示：ＰＡＦ在低氧性肺动脉高压和肺血管重建过程中起一定的作用，而某些ＰＡＦ拮抗剂有可能成为防治低氧性肺动脉高压的新药。