星形胶质细胞焦亡与抑郁症发生的相关性

目的研究星形胶质细胞焦亡在抑郁症发生发展中的作用。方法采用野生型(WT)、胱天蛋白酶1~(-/-)、GSDMD~(-/-)、星形胶质细胞过表达GSDMD-N的GSDMD~(-/-)等多种模式小鼠制备CMS模型,通过行为学、免疫组化、蛋白水平、多重染色等多种方法研究焦亡在抑郁症中的作用及机制。结果 CMS 2周小鼠海马脑区星形胶质细胞活化但未发生焦亡;CMS 4周小鼠海马脑区星形胶质细胞发生焦亡;CMS 6周小鼠海马脑区星形胶质细胞焦亡愈加明显;CMS6周小鼠海马脑区小胶质细胞及神经元不发生焦亡;CMS2,4和6周小鼠海马脑区胱天蛋白酶1、IL-1β表达量随着造模时间的延长也显著增加;FLX可改善CMS小鼠抑郁样行为;CMS小鼠海马区星形胶质细胞焦亡,FLX改善星形胶质细胞凋亡;FLX降低CMS小鼠海马脑区凋亡相关蛋白表达;胱天蛋白酶1敲除显著改善CMS小鼠糖水偏好、强迫游泳不动时间、悬尾不动时间及旷场运动总路线;胱天蛋白酶1敲除减轻CMS小鼠海马脑区星形胶质细胞凋亡;GSDMD敲除显著改善CMS小鼠糖水偏好、强迫游泳不动时间、悬尾不动时间及旷场总路线;GSDMD敲除缓解CMS小鼠海马区星形胶质细胞凋亡;GSDMD敲除小鼠海马星形胶质细胞特异性过表达GSDMD-N,恢复GSDMD敲除CMS小鼠抑郁样行为。结论 CMS小鼠海马区星形胶质细胞发生凋亡;GSDMD介导的星形胶质细胞凋亡参与抑郁的发生发展。     

免疫磁珠法结合条件培养基进行低密度条件下的神经元原代培养

目的利用免疫磁珠(IMB)细胞分选技术结合星形胶质细胞条件培养基(A-CM)进行低密度条件下原代神经元培养。方法取新生(24 h)内昆明小鼠取大脑半球,通过机械分离与胰酶消化制备细胞悬液进行原代培养。培养10 d后,利用恒温振荡法去除小胶质细胞等杂细胞,抗胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)抗体免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞纯度。利用达到纯度要求的细胞培养物制备A-CM。分别取新生(24 h)内昆明小鼠大脑皮质和海马,通过机械分离与胰酶消化制备细胞悬液,经IMB细胞分选获得高纯度神经元,加入A-CM进行低密度条件下神经元的原代培养。观察培养过程中神经元的形态学指标,以抗160 ku神经丝抗体免疫荧光染色鉴定神经元纯度。结果细胞免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞的纯度>95%。小鼠皮质和海马神经元形态学观察与细胞免疫荧光染色结果表明,神经元在低密度培养条件下生长良好,不同发育阶段的形态学特征明显,纯度较高。结论低密度条件下成功培养了小鼠大脑皮质和海马原代神经元。     

儿童自身免疫性甲状腺炎患者血清趋化因子CXCL10及其受体CXCR3的变化及其临床意义

目的 探讨血清趋化因子CXCL10及其受体CXCR3在儿童自身免疫性甲状腺炎（HT）患者中的水平变化及其临床意义.方法 采用ELISA检测42例儿童自身免疫性甲状腺炎患者血清CXCL10和CXCR3水平,并以42例健康体检儿童作为对照.结果 HT组患者血清CXCL10和CXCR3水平明显高于对照组（t=15.509、23.751,均P＜0.05）,且血清CXCL10和CXCR3水平在儿童HT发病初期及未缓解期高于缓解期（t=17.188、20.048、16.427、20.369,均P＜0.05）；血清CXCL10与CXCR3表达呈高度正相关（r=0.772,P＜0.01）.结论 CXCL10和CXCR3在儿童自身免疫性甲状腺炎的过度表达可能与其发生和发展有关,在儿童HT病程中存在着动态变化,可以作为预测儿章HT的疾病活动性的指标之一.     

二磷酸盐对骨癌痛模型小鼠趋化因子CXCL1及受体CXCR2表达影响的研究

目的分析趋化因子CXCL1及受体CXCR2在小鼠骨癌痛模型中的作用,并探讨二磷酸盐对小鼠骨癌痛模型的干预机制。方法 60只小鼠随机分为3组:对照组、模型组和治疗组。股骨远端骨髓腔注射NCTC2742细胞复制小鼠股骨痛模型,治疗组给予二磷酸盐治疗,对照组和模型组给予等量生理盐水。Real-time PCR分析各组中趋化因子CXCL1和CXCR2mRNA的表达,Western blot检测CXCL1、CXCR2蛋白及肿瘤坏死因子TNF-α以及细胞凋亡蛋白Bax/Bcl2以及Caspase-3的表达。结果模型组小鼠的机械缩爪阈值较对照组有显著的增高(P<0.05,P<0.01),而药物治疗组对模型组小鼠的升高的阈值有显著的改善作用(P<0.01);与对照组比较,骨癌痛模型小鼠趋化因子CXCL1及受体CXCR2表达明显增强(P<0.01),二磷酸盐可以显著抑制CXCL1及CXCR2的表达(P<0.01);与对照组比较,骨癌痛模型小鼠肿瘤坏死因子TNF-α、促细胞凋亡蛋白Bax及Caspase-3的表达明显增高,凋亡蛋白Bcl2的表达明显降低(P<0.01),而二磷酸盐可以显著改善上述指标表达(P<0.01)。结论二磷酸盐通过下调骨癌痛模型小鼠趋化因子CXCL1及受体CXCR2表达、促进细胞凋亡发挥治疗骨癌痛模型小鼠的作用。     

参乌胶囊对β-淀粉样肽大鼠模型脑内炎症反应的影响

目的:观察中药新复方参乌胶囊对Aβ25-35肽段海马注射大鼠模型脑内炎症反应的影响.方法:大鼠单侧(左侧)海马内注射Aβ25-35,用免疫组化方法观察海马内小胶质细胞和星形胶质细胞数量,放免法检测海马内炎性因子IL-1β和TNFα含量,用尼氏染色法检测海马神经元数量.结果:参乌胶囊灌胃给药2周,能够明显抑制Aβ模型大鼠海马内胶质细胞的活化状态,减少小胶质细胞和星形胶质细胞的数量和面积,并且减少炎性因子IL.1β和TNFα的产生,减轻神经元损伤.结论:参乌胶囊能够抑制Aβ引起的神经炎性反应,起到保护神经元的作用.     

2-（α-羟基戊基）苯甲酸钾盐（PHPB）对APP/PS1转基因小鼠海马神经元、突触和轴突损伤的保护作用

目的利用10月龄APP/PS1转基因小鼠考察2-(α-羟基戊基)苯甲酸钾盐(PHPB)对海马神经元、突触及轴突损伤的保护作用。方法 10月龄APP/PS1转基因小鼠及同龄野生型对照小鼠被随机分为3组:野生对照组(n=10),APP/PS1转基因组(n=10),PHPB治疗组(n=10)。PHPB治疗组每天灌胃给予30 mg·kg~(-1)PHPB,其余两组给予相同体积的生理盐水。连续给药3个月后,进行活体1H-MRS检测,之后取海马组织进行电镜观察,高尔基染色,免疫组化染色及Western蛋白印迹实验检测,考察病理改变及药物的改善作用。结果电镜结果显示,野生对照组小鼠海马CA1及CA3区神经元饱满,双层核膜清晰完整,核内染色质分布均匀。核周线粒体丰富,高尔基体和核糖体等细胞器形态基本正常。APP/PS1小鼠海马神经元呈现细胞皱缩,染色质聚集,线粒体肿胀,脊断裂,高尔基体变性扩张等病理改变,此外在轴突可见大量聚集的未成熟自噬囊泡。经PHPB给药后,上述病理改变均呈现不同程度的改善。此外,相比于野生对照组小鼠,APP/PS1小鼠CA1及CA3区的突触密度明显降低(P<0.01),突触后致密区厚度明显变薄(P<0.05),经PHPB给药后,该区域突触密度及PSD厚度显著提升(P<0.05)。高尔基染色结果显示,相比于同龄野生型小鼠,APP/PS1小鼠CA1区及DG区海马神经元二级和三级树突分枝上的树突棘密度明显降低(P<0.01),经PHPB治疗后可见明显提升(CA1:P=0.070;DG:P<0.05)。Sholl分析显示相比于同龄野生型小鼠,APP/PS1转基因小鼠海马DG区神经元分枝数目明显降低(P<0.05),PHPB治疗能够明显提升其树突分枝数量(P<0.05)。Western蛋白印迹实验结果显示,相比于同龄野生型小鼠,APP/PS1小鼠海马组织中PSD-95,SYP等突触相关蛋白的含量明显降低(P<0.01),自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值明显提升,而PHPB能够显著提升APP/PS1转基因小鼠海马组织中PSD-95的含量(P<0.05),并下调LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值(P<0.01),提示其对突触丢失及自噬异常的改善作用。免疫组化结果显示,相比于同龄野生型小鼠,APP/PS1小鼠海马区LC3-Ⅱ阳性染色面积显著增加,而经PHPB治疗后,阳性区域面积呈降低趋势(P=0.055),提示PHPB可以对LC3-Ⅱ阳性自噬囊泡聚集造成的轴突变性起到一定缓解作用。在体1H-MRS结果显示,相比于同龄野生型小鼠,APP/PS1小鼠海马NAA及Glu等代谢物含量明显降低(P<0.05),而经PHPB治疗后2种代谢物含量均呈上调趋势(NAA:P=0.077;Glu:P=0.066)。由于NAA主要存在于成熟神经元及轴突,而Glu作为兴奋性神经元的神经递质主要储存于突触,该结果进一步表明APP/PS1转基因小鼠海马的退行性病变,及PHPB对该区域神经元和突触的改善作用。结论 PHPB能够明显改善APP/PS1转基因小鼠海马神经元及细胞器微观结构,提升突触数量,PSD厚度,增加树突棘密度,上调突触相关蛋白含量,改善海马神经元自噬障碍及代谢异常,表现出对海马神经元、突触及轴突损伤的保护作用。     

胍丁胺对慢性应激大鼠海马神经元和星形胶质细胞的影响

目的在海马神经元和星形胶质细胞水平探讨胍丁胺抗抑郁作用机制。方法采用多种应激方式建立大鼠慢性应激抑郁模型,通过开场实验和蔗糖饮水实验观察模型组、阳性对照药氟西汀组(10 mg.kg-1,ig)和胍丁胺组(20 mg.kg-1,ig)大鼠的行为学变化;应用神经元标志物——微管相关蛋白2(microtubule-associated protein 2,MAP2)和星形胶质细胞标志物——胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidicprotein,GFAP)免疫组织化学染色,观察各组大鼠海马神经元和星形胶质细胞形态改变。结果慢性应激模型组大鼠开场实验水平运动得分和垂直运动得分明显降低,蔗糖偏嗜度明显降低,氟西汀和胍丁胺可逆转此变化;免疫组化结果显示,慢性应激模型组MAP2和GFAP表达明显减弱,表现为海马神经元突起长度和数目以及星形胶质细胞的数量和突起数量明显降低,氟西汀和胍丁胺可改善此病理变化。结论海马神经元和星形胶质细胞共同参与抑郁症发生,胍丁胺可逆转慢性应激引起的细胞形态结构改变,发挥抗抑郁作用。     

川芎嗪对沙鼠前脑缺血-再灌注损伤后学习记忆的影响

目的探讨川芎嗪对沙鼠前脑缺血-再灌注后学习记忆的影响及其机制。方法40只蒙古沙土鼠随机分为4组。假手术组、脑缺血组、对照组、川芎嗪治疗组,每组10只。阻断沙土鼠双侧颈总动脉造成前脑缺血模型,4-FFF（4-pellet taking test）旱路迷宫法对沙鼠前脑缺血-再灌注7d后的学习记忆功能进行评定,HE染色方法观察海马CA1区神经元形态变化,免疫组织化学法观察海马CA1区胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）阳性星形胶质细胞的反应。结果假手术组未见坏死神经元,神经元密度（27．6±4．3）HS,脑缺血组中坏死神经元显著增多,神经元密度明显下将（6．8±1．7）HS（P〈0．05）;与脑缺血组比较,川芎嗪治疗组坏死神经元显著较少,神经元密度增加（16．9±2．6）HS（P〈0．05）。CA1区星形胶质细胞活性在脑缺血组中（7．7±1．8）HS明显高于假手术组（3．9±1．2）HS（P〈0．05）;与脑缺血组比较,川芎嗪治疗组星形胶质细胞活性进一步增强（P〈0．05）。4-PTT旱路迷宫实验显示。脑缺血组中沙鼠参照记忆指标和工作记忆指标与对照组有明显的差异（P〈0．05）;川芎嗪治疗组上述指标显著改善（P〈0．05）。结论川芎嗪能改善前脑缺血沙鼠的学习记忆能力,与其对星形胶质细胞活性调节有关。     

水通道蛋白4在小鼠脑老化中的作用

水通道蛋白4(AQP4)主要分布在星形胶质细胞足突膜上,是脑内最重要的水通道亚型。已经发现,AQP4除参与调节脑内水平衡外,还参加学习记忆、脑外伤、脑缺血、脑肿瘤等一系列生理、病理过程。脑老化伴随着学习记忆下降,以及易发生脑缺血、脑肿瘤等老年相关性疾病,但AQP4在脑老化中的作用尚未见报道。目的观察AQP4在小鼠脑老化中的作用。方法对年轻(2～3个月)和老年(17～19个月)AQP4基因敲除小鼠(AQP4-/-)与野生型相应年龄的小鼠(AQP4+/+),观察AQP4基因敲除对老年小鼠自发活动、学习记忆、大体脑形态以及神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞密度等的影响。结果老年小鼠自发活动减少,在穿梭箱被动避暗实验中,测试时进入暗箱的潜伏期明显短于年轻鼠,但AQP4+/+和AQP4-/-小鼠间无明显差异。甲苯胺蓝染色显示,老年小鼠皮层神经元密度(Ⅲ～Ⅳ层)显著低于年轻小鼠(P<0.05),海马CA1区厚度无明显差异,AQP4+/+和AQP4-/-小鼠间无明显差异。免疫组化显示,老年小鼠海马CA1的星形胶质细胞(GFAP阳性)数量明显高于年轻小鼠(P<0.01),而小胶质细胞数量在老年和年轻小鼠间无明显差异。免疫荧光显示,老年小鼠星形教胶质细胞的面积变小,而AQP4-/-小鼠的星形胶质细胞突起少而短、细胞面积明显小于AQP+/+小鼠(P<0.05),神经元和小胶质细胞形态无明显变化。结论 AQP4参与脑老化过程中的星形胶质细胞变化,而与运动、学习记忆相关的脑功能及神经元、小胶质细胞等脑结构变化无明显关系。     

雷公藤氯内酯醇对大鼠海马背侧注射Aβ_(25-35)后胶质细胞及p38MAPK激活的抑制作用

目的探讨雷公藤氯内酯醇(T4)对海马背侧注射Aβ25-35后模型大鼠神经元损伤的保护作用及可能机制。方法通过Nissl和TUNEL染色法检测阳性神经元数量,采用免疫组化、蛋白印迹法观察ox-42、GFAP和p-p38MAPK的表达;ELISA法检测TNF-α、IL-1β的含量。结果 T4干预后(7 d),ox-42、GFAP、p-p38MAPK的表达减弱,Nissl阳性神经元增多,TUNEL阳性神经元减少,TNF-α、IL-1β的含量降低。结论 T4保护注射Aβ25-35后大鼠海马神经元损伤的机制可能与抑制小胶质细胞、星形胶质细胞和p38MAPK的激活有关。     

GSK-3β在铝致原代海马神经元网络电活动损伤的机制初探

目的初步探讨GSK-3β在铝致原代海马神经元网络电活动损伤中的作用及机制。方法24 h内新生的ICR小鼠海马原代神经元进行体外培养至第10天,进行麦芽酚铝[Al(mal)3)]染毒及干预,实验分组为空白对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、SB(GSK-3β抑制剂SB216763,1μmol/L)组、Al(20μmol/L)组、SB(1μmol/L)+Al(20μmol/L)组,于干预0和48 h点使用微电极阵列分析仪(Micro-Electrode Array,MEA)检测海马神经元网络电活动;染毒48 h后,免疫荧光观察神经元树突棘密度;Western blot法检测GSK-3β、p-GSK-3β、PSD95和Arc蛋白的表达水平。结果Al(mal)3作用0 h时间点,各组神经元未见明显差异,在48 h时间点,各组神经元均呈节律性簇发放电。空白对照组神经元自发放电频率、簇发放电频率、网络簇发放电频率、同步指数分别为172.82%±44.56%、134.65%±25.60%、209.48%±70.09%、120.10%±15.32%;与空白对照组相比,DMSO组及SB组未见明显差异(F=6.93,F=4.35,F=1.81,F=13.43,P>0.05),而Al组神经元网络电活动明显下降(P<0.05);与Al组相比,SB+Al组神经元网络电活动明显升高。与空白对照组相比,Al组的树突棘密度明显降低(F=16.82,P<0.05);与Al组相比,SB+Al组的树突棘密度明显增加(P<0.05)。与空白对照组相比,各干预组的GSK-3β蛋白表达水平均无明显变化(F=2.27,P>0.05);与空白对照组相比,SB组的p-GSK-3β蛋白表达水平明显升高(F=45.84,P<0.05),Al组和SB+Al组明显降低(P<0.05),但与Al组相比,SB+Al组的p-GSK-3β蛋白表达水平明显升高(P<0.05);Al组和SB+Al组的PSD-95、Arc蛋白表达水平与空白对照组相比均明显降低(F=37.61,F=37.13,P<0.05),但与Al组相比,SB+Al组的PSD-95、Arc蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论铝可明显抑制大鼠原代海马神经元的网络电活动,GSK-3β可能通过影响神经元突触结构进而参与铝致神经元的网络电活动损伤。     

脑舒胶囊对阿尔茨海默病大鼠神经炎症损伤的保护

目的：研究脑舒胶囊对阿尔茨海默病（AD）大鼠神经炎症损伤的保护。方法：双侧脑室注射Aβ25～35复制AD大鼠模型；放射免疫分析法检测血清及海马组织IL-1β和IL-6的含量；RT-PCR法测定海马IL-6和IL-1β mRNA表达；免疫组织化学(SABC)法检测大鼠海马星形胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)的阳性细胞表达。结果：与假手术组比较，模型组大鼠血清及海马组织中IL-1β和IL-6含量明显增加（P＜0.05）；海马星形胶质细胞GFAP和海马IL-6，IL-1β mRNA表达显著上调（P＜0.01）。与模型组比较，0.72 g?kg-1脑舒胶囊可降低血清、海马组织IL-1β和IL-6含量（P＜0.05）和海马星形胶质细胞GFAP阳性和海马IL-6，IL-1β mRNA的表达（P＜0.05）。结论：脑舒胶囊可通过抑制星形胶质细胞的过度激活，从而抑制中枢慢性炎症级联反应对海马神经元的损伤。     

脑舒胶囊对阿尔茨海默病大鼠神经炎症损伤的保护

目的：研究脑舒胶囊对阿尔茨海默病（AD）大鼠神经炎症损伤的保护。方法：双侧脑室注射Aβ25～35复制AD大鼠模型；放射免疫分析法检测血清及海马组织IL-1β和IL-6的含量；RT-PCR法测定海马IL-6和IL-1β mRNA表达；免疫组织化学(SABC)法检测大鼠海马星形胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)的阳性细胞表达。结果：与假手术组比较，模型组大鼠血清及海马组织中IL-1β和IL-6含量明显增加（P＜0.05）；海马星形胶质细胞GFAP和海马IL-6，IL-1β mRNA表达显著上调（P＜0.01）。与模型组比较，0.72 g?kg-1脑舒胶囊可降低血清、海马组织IL-1β和IL-6含量（P＜0.05）和海马星形胶质细胞GFAP阳性和海马IL-6，IL-1β mRNA的表达（P＜0.05）。结论：脑舒胶囊可通过抑制星形胶质细胞的过度激活，从而抑制中枢慢性炎症级联反应对海马神经元的损伤。     

脑舒胶囊对阿尔茨海默病大鼠神经炎症损伤的保护

目的：研究脑舒胶囊对阿尔茨海默病（AD）大鼠神经炎症损伤的保护。方法：双侧脑室注射Aβ25～35复制AD大鼠模型;放射免疫分析法检测血清及海马组织IL-1β和IL-6的含量;RT-PCR法测定海马IL-6和IL-1β mRNA表达;免疫组织化学(SABC)法检测大鼠海马星形胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)的阳性细胞表达。结果：与假手术组比较,模型组大鼠血清及海马组织中IL-1β和IL-6含量明显增加（P＜0.05）;海马星形胶质细胞GFAP和海马IL-6,IL-1β mRNA表达显著上调（P＜0.01）。与模型组比较,0.72 g?kg-1脑舒胶囊可降低血清、海马组织IL-1β和IL-6含量（P＜0.05）和海马星形胶质细胞GFAP阳性和海马IL-6,IL-1β mRNA的表达（P＜0.05）。结论：脑舒胶囊可通过抑制星形胶质细胞的过度激活,从而抑制中枢慢性炎症级联反应对海马神经元的损伤。     

脑舒胶囊对阿尔茨海默病大鼠神经炎症损伤的保护

目的：研究脑舒胶囊对阿尔茨海默病（AD）大鼠神经炎症损伤的保护。方法：双侧脑室注射Aβ25～35复制AD大鼠模型;放射免疫分析法检测血清及海马组织IL-1β和IL-6的含量;RT-PCR法测定海马IL-6和IL-1β mRNA表达;免疫组织化学(SABC)法检测大鼠海马星形胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)的阳性细胞表达。结果：与假手术组比较,模型组大鼠血清及海马组织中IL-1β和IL-6含量明显增加（P＜0.05）;海马星形胶质细胞GFAP和海马IL-6,IL-1β mRNA表达显著上调（P＜0.01）。与模型组比较,0.72 g?kg-1脑舒胶囊可降低血清、海马组织IL-1β和IL-6含量（P＜0.05）和海马星形胶质细胞GFAP阳性和海马IL-6,IL-1β mRNA的表达（P＜0.05）。结论：脑舒胶囊可通过抑制星形胶质细胞的过度激活,从而抑制中枢慢性炎症级联反应对海马神经元的损伤。     

脑舒胶囊对阿尔茨海默病大鼠神经炎症损伤的保护

目的：研究脑舒胶囊对阿尔茨海默病（AD）大鼠神经炎症损伤的保护。方法：双侧脑室注射Aβ25～35复制AD大鼠模型；放射免疫分析法检测血清及海马组织IL-1β和IL-6的含量；RT-PCR法测定海马IL-6和IL-1β mRNA表达；免疫组织化学(SABC)法检测大鼠海马星形胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)的阳性细胞表达。结果：与假手术组比较，模型组大鼠血清及海马组织中IL-1β和IL-6含量明显增加（P＜0.05）；海马星形胶质细胞GFAP和海马IL-6，IL-1β mRNA表达显著上调（P＜0.01）。与模型组比较，0.72 g?kg-1脑舒胶囊可降低血清、海马组织IL-1β和IL-6含量（P＜0.05）和海马星形胶质细胞GFAP阳性和海马IL-6，IL-1β mRNA的表达（P＜0.05）。结论：脑舒胶囊可通过抑制星形胶质细胞的过度激活，从而抑制中枢慢性炎症级联反应对海马神经元的损伤。     

高脂饮食小鼠脂肪组织胞外囊泡损伤海马神经元的研究

目的探讨高脂饮食小鼠脂肪组织分泌胞外囊泡对海马神经元以及小鼠认知行为的影响。方法C57BL/6J雄性小鼠20只,随机分为2组(n=10):正常饮食(normal diet,ND)组、高脂饮食(high-fat diet,HFD)组,分组喂养28周,每周记录小鼠体重。于第27周检测小鼠血糖、胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),第28周用Morris水迷宫实验检测小鼠学习和记忆能力。取小鼠脂肪组织,HE染色观察形态学差异,并提取其分泌的胞外囊泡,采用TEM及NTA进行鉴定。将PKH 67标记的脂肪组织胞外囊泡经尾静脉注射正常小鼠,30 h后检测脑组织海马神经元摄取脂肪组织胞外囊泡的情况;用相同蛋白量的胞外囊泡处理原代海马神经元,观察其对神经元细胞活性及细胞形态的影响。结果与ND组相比,HFD组小鼠体重明显增加,血糖及胰岛素水平升高,并出现胰岛素抵抗状态。HFD组小鼠逃避潜伏期显著延长,目标象限停留时间明显缩短。HFD组小鼠脂肪细胞明显增大,脂肪组织分泌的胞外囊泡明显增多。脂肪组织分泌的胞外囊泡可被原代海马神经元及正常小鼠脑组织海马神经元摄取。与ND组相比,HFD组小鼠脂肪组织胞外囊泡处理可明显减少海马神经元树突长度、初级树突数和次级树突数,并降低神经元细胞活性。结论长期高脂饮食可能通过影响脂肪组织胞外囊泡,损伤海马神经元。     

大鼠原代神经细胞放射性损伤敏感性与ROS含量关系及依达拉奉的保护作用

目的 探讨大鼠原代神经细胞培养体系放射性损伤敏感性与ROS含量关系以及依达拉奉的保护作用。方法 X射线单次照射来源于大鼠海马的原代神经元,星形胶质细胞以及星形胶质细胞-神经元共培养体系,对比评价正常培养或依达拉奉干预与否条件下细胞死亡、凋亡以及活性氧（ROS）含量变化。结果 X射线照射引起原代神经元培养体系ROS含量及细胞死亡率明显升高。共培养体系细胞损伤较轻,星形胶质细胞培养体系则无明显损伤。依达拉奉通过清除ROS可以阻止细胞死亡。结论 放射损伤后原代神经元培养体系ROS含量明显增高,导致神经元凋亡失调。依达拉奉通过清除ROS逆转这一病理过程而产生神经元保护作用,值得临床推广。     

藁本内酯对小鼠海马区损伤的保护作用及其作用机制

目的 研究藁本内酯(Lig)对小鼠海马区损伤的保护作用及其作用机制.方法 将24只小鼠随机均分为假手术组、模型组和Lig组,采用双侧颈总动脉结扎法(2VO)建立全脑缺血再灌注模型;Nissl染色观察小鼠海马CA1、CA2区的神经元计数;免疫组化检测海马区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、肿瘤坏死因子(TNFα)的表达.结果 与模型组比较,Lig能减轻缺血再灌带来的损伤,减少海马CA1、CA2区神经元的丢失,降低GFAP、TNFα的表达.结论 Lig能明显减轻全脑缺血再灌注所致的小鼠海马区损伤,其机制与抑制星形胶质细胞激活、减轻炎症反应有关.     

甲状腺激素缺乏对脑发育期胶质细胞影响的研究

目的探讨甲状腺激素缺乏对仔一代Wistar大鼠脑发育期星形胶质细胞和少突胶质细胞的影响。方法用5mg/L（5ppm）和15mg/L（15ppm）甲巯咪唑饮水喂养孕鼠自妊娠至仔鼠出生后第28天,检测仔鼠体内甲状腺激素（TH）水平,采用免疫组化法测定海马胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）、髓磷脂碱性蛋白（MBP）含量,分析GFAP阳性细胞的体积密度（Vv）,面数密度（NA）和细胞质平均光密度（AOD）及MBP阳性细胞AOD,正常喂养仔鼠为对照组。结果 5ppm组和15ppm组大鼠血清TH水平均低于正常对照组,5ppm组海马CA3区GFAP阳性星形胶质细胞的NA为15.11±2.41,VV为5.27±1.41,细胞质AOD为0.202±0.009,与对照组比较均明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;15ppm组海马CA3区GFAP阳性星形胶质细胞的NA、VV、细胞质AOD分别为15.03±2.23、5.11±1.53、0.089±0.010,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。MBP阳性少突胶质细胞的细胞质AOD在5ppm组为0.234±0.005,15ppm组为0.191±0.006,均较对照组减低,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论甲状腺激素缺乏影响仔鼠海马胶质细胞发育,减少其体积密度和面数密度。