放射免疫分析试剂盒质量控制

196 0年Yalow -Berson创立放射免疫分析至今已 4 4年 ,现已发展成为一门综合性的边缘学科。为了规范放射免疫分析试剂盒的生产和销售 ,1995年 12月卫生部药政局颁布了《放射免疫分析药盒通则》[1] (以下简称“《通则》”)。我国政府在 1985年颁布了《中华人民共和国药品管理法》 ,而后卫生部根据该法制定了《放射性药品管理办法》 ,于 1989年 4月颁布 ,《通则》则是根据这个管理办法制定的行政法规。作者曾参与《通则》的制定、修改和润色定稿。近 10余年来 ,作者一直在从事放射免疫分析的质量控制和标准化工作 ,在贯彻执行《通则》的过程…     

放射免疫分析试剂盒生产及其质量控制

放射免疫分析技术发展到今天已经有了比较明晰的机理, 也有了系统的、理论性的质量控制方法.由于原材料、设备、人员等方面的原因, 要想生产出达到纯理论要求的产品是不可能的. 因此, 仅仅用纯理论计算得到的指标来控制放射免疫分析试剂盒的质量, 也是不现实的. 但是脱离了理论指导, 任意制定一种控制指标或采取不科学的质量控制方法也是不可取的, 所以总结出一套切实可行的放射免疫分析试剂盒生产及其质量控制方法是非常必要的. 　　要使放射免疫分析试剂盒质量达到要求, 就要控制好其各个组分的质量, 即做好前期的质量控制. 放射免疫分析试剂盒有三大主要要素: 标记物、标准品和抗体. 此外, 质控血清也很重要, 是否满足质控血清的要求是最简便、最直接的检验试剂盒可靠性的条件.当然, 还有一些辅助组分, 如分离剂、缓冲液等试剂也不能忽视.     

国外8种免疫分析试剂盒的骨钙素测定值

国外８种免疫分析试剂盒的骨钙素测定值骨钙素（ＯｓｔｅｏｃａｌｃｉｎｅＯＣ，或ＢＧＰ）为成人骨内含量最多的非胶原蛋白，约占它总量的１％～２％，由４９个氨基酸组成，分子量５８００Ｄａ。它由成骨细胞合成，掺入骨基质，小部分释放入血。血内浓度为骨形成的特异指...     

循环酶法测定同型半胱氨酸试剂盒评价

目的 选取北京九强、上海执诚、宁波瑞源生产的循环酶法同型半胱氨酸（Hcy）试剂盒,对其方法性能及临床实验室应用的要求进行评价.方法 据NCCLS颁布的的EP5-A、EP6-A和EP7-A评价方案对三个循环酶法Hcy测定试剂盒进行回收实验、干扰实验、线性及精密度评价.结果 九强、执诚、瑞源的循环酶法Hcy测定试剂盒高、低浓度的批内CV分别为3.2、2.4、1.2;3.7、3.8、1.8;总CV（％）分别为4.4、3.4、3.1;4.3、5.6、3.3.回收率97％ ～ 105％.相关系数分别为r=0.996、r=0.993、r=0.995.胆红素在500mg/L、抗坏血酸在500 mg/L、甘油三酯在8.88mmol/L内对九强和瑞源的试剂无明显干扰,相对偏差小于4％.胆红素在500 mg/L、抗坏血酸在500mg/L内对执诚的试剂无明显干扰,相对偏差小于4％;甘油三酯对该试剂有明显干扰,甘油三酯在8.88mmol/L时相对偏差为12.2％.结论 三种循环酶法Hcy测定试剂盒的抗干扰、线性范围及精密度等性能可满足临床检验的需要.     

血清孕酮放射免疫测定试剂盒的研制

制备人孕酮放射免疫试剂盒的特异性抗血清,首先要合成孕酮-11α-半琥珀酰-BSA结合物,形成完全抗原,依据动物体的免疫反应规律,制备高质量的抗孕酮抗血清。采用氯胺T法标记孕酮;TCL分离。制备去人激素血清,建立了竞争结合分析法。通过方法学和可靠性的测定,说明该方法具有较高的灵敏度、特异性、准确性,相关系数r=0.996。检测了50名正常中、青年男子,测定值为0～1.85ng/ml,正常女性范围:滤泡期为0.14～1.65ng/ml,黄体期2.07～32ng/ml,绝经期0.2～1.7ng/ml,妊娠期:随着妊娠月份的增加,孕酮浓度也增加,最高可达280ng/ml。经临床验证,该试剂盒符合稳定、可靠、灵敏、适用的要求。     

国内三种βhCG试剂盒测定结果的比较分析

国内三种βｈＣＧ试剂盒测定结果的比较分析孙海翔，杨怀恭，顾惠心，孙龙安用不同试剂盘进行妊娠及滋养叶细胞疾病诊断和监测时，ｈＣＧ测定值差别甚大，常令临床医生困惑不解。我们用国内常用的三种β－ｈＣＧ放免试剂盒同时对早孕妇女的血清进行β－ｈＣＧ浓度测定，以...     

两种酶法测定血清游离脂肪酸试剂盒的分析性能比较

目的比较两种酶法测定血清游离脂肪酸试剂盒的分析性能。方法分别应用国产与进口两种血清游离脂肪酸检测试剂盒,通过雅培c8000全自动生化分析仪测定50份体检样本血清游离脂肪酸浓度,进行精密度、准确度、抗干扰和线性试验等分析性能的评价与比较。结果①精密度分析结果：国产试剂的批内CV%为7.6%、5.8%,批间CV%为9.6%;进口试剂的批内CV%为0.7%、2.8%,批间CV%为2.2%。②平均回收率结果：国产试剂平均回收率为100.3%,进口试剂为97.76%,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。③线性范围分析结果：在3.11mmol/L内,国产试剂测定血清游离脂肪酸线性相关性良好;在3.23mmol/L内,进口试剂线性相关性良好,且两者差异无统计学意义（P〉0.05）。④干扰试验分析结果：在血红蛋白〈0.12mmol/L,胆红素〈0.34mmol/L,甘油三酯〈11.3mmol/L,维生素C〈1.2mmol/L条件下,两种试剂盒测定血清血清游离脂肪酸的结果之间无显著差异（P〉0.05）。⑤对临床血清游离脂肪酸测定结果分析表明,两种试剂相关性好（Y九强=0.9667X德赛＋0.0175,R2=0.9801,P〈0.05,n=50）,偏差无统计学差异（P〉0.05）。结论国产与进口试剂盒检测血清游离脂肪酸结果一致性较好,且CV%均小于10%。国产试剂精密度相对较低,线性可达3.11mmol/L,抗干扰能力较强。该结果表明两种试剂盒的分析性能无明显差异,具有较好可比性。     

酶法测定游离脂肪酸液体试剂盒的稳定性评价

目的评估北京九强生物技术股份有限公司(简称九强)和德国德赛诊断系统有限公司(简称德赛)的酶法游离脂肪酸(FFA)试剂盒的效期稳定性、开瓶稳定性以及热加速稳定性。方法取出两个厂家的三批试剂后同时定标,分别测定其批内不精密度、线性范围、开瓶稳定性和热加速稳定性。结果九强和德赛各批次试剂配套质控品的偏倚均小于5%,质控品及低、中、高浓度血清样本的批内不精密度CV均小于5%;九强和德赛试剂线性范围分别是0.1~2mmol/L和0.01~3mmol/L;九强和德赛试剂在开瓶监测期前后测定质控累计偏差分别为4.26%、8.88%(朗道质控水平1)和5.19%、-1.43%(朗道质控水平2)。结论九强和德赛试剂实时稳定性良好,在效期内各批次包括接近效期末批次的试剂正确度、批内不精密度、线性范围都可满足厂商制定的性能指标要求。两种试剂开瓶稳定性都较好,在机开瓶可稳定4周,但九强试剂比德赛试剂具有更长的有效期,可达18个月。     

<放射免疫分析试剂盒质量管理软件>的开发和应用

放射免疫分析(RIA)自问世以来,就以其灵敏度高、特异性好的特点,成为一项常规的微量体外诊断技术.受原卫生部药政局的委托,我所于1992-1995年对国产放射免疫分析试剂盒进行了全面质量整顿,对23个生产企业的70多个品种的255个试剂盒发放了生产批准文号.     

脂质过氧化物丙二醛（MDA）测定试剂盒

脂质过氧化物丙二醛（ＭＤＡ）测定试剂盒本试剂盒是在国外最新测试方法的基础上改进的一种微量、灵敏、快速、简便、稳定、准确、无污染、无损健康的测试方法。能测定和种组织、细胞、体液以及各类亚细胞成从和培养细胞的过氧物含量。本试剂盒所用主要的试剂均从国外进口...     

DM2患者血脂、尿酸和CRP测定的临床分析

目的:为了探讨2型糖尿病(DM2)患者血脂、尿酸(SUA)和C-反应蛋白(CRP)测定的临床意义.方法:采用生化法测定了78例DM2患者和66例正常对照组的血脂(TC、TG、HDL-C和LDL-C)水平,过氧化物酶免疫分析测定了SUA水平以及免疫比浊法测定了CRP水平,并与66例正常对照组进行了对比性分析.结果:78例...     

多发性硬化患者血清尿酸水平测定的临床意义

目的探讨多发性硬化患者血清尿酸的水平及其临床意义。方法采用放射免疫法对24例多发性硬化患者治疗前后进行了血清尿酸测定。结果多发性硬化患者血清尿酸水平均显著降低,与对照组比较有显著性差异,治疗后进入稳定期尿酸水平有所提高,与对照组比较无显著性差异。结论测定多发性硬化患者血清尿酸水平有助于了解病情,判断病情活动性,尿酸对多发性硬化有保护作用,值得进一步研究。     

采用国产放射免疫分析试剂盒之我见

1959年美国科学家Yalow和Berson在J Clin Invest发表文章,报道了用放射免疫分析法测定人体胰岛素含量,从而提示小分子肽类激素也可作为抗原参与免疫反应,导致了免疫学旧观念的改变。我国放射免疫分析起步很早,在六十年代初期已开始作放射免疫分析方法的研究,后来由于文化大革命的干扰,以致与世界先进国家相比落后了将近十年。文化大革命结束后,放射免疫分析技术在全国得到了高速度的发展,并在普及的基础上逐步提高。国家科委、国家教委批准出版全国唯一的一本双月刊《放射免疫学杂志》,在全国重点大学之一的同济大学内举办放射免疫分析大专班。国家教委还多次委托同济大学上海放射免疫分析技术研究所举办全国性放射免疫分析及其临床意义学习班。这些举措都说明了国家有关部门已经重视这个领域的发展。全国目前已有3000余家医疗和科研单位开展放射免疫分析,为临床医学、基础医学、生物学、遗传学等领域的发展起到了积极作用。     

雌三醇放射免疫分析试剂盒的研制

雌三醇(Estriol，E3)是一种弱雌激素，其活力仅为雌二醇的3%。但雌三醇在调节胎儿宫内发育、调节子官肌运动等过程中有十分重要的作用。血清雌三醇浓度的测定，对临床产科了解胎盘功能、胎儿宫内发育情况以及高危妊娠的监护有重要意义。     

RPHA测定人潜血试剂盒的制备和临床应用

<正> 目前国内多用化学方法检测潜血,但该法易受饮食、药物等影响而出现假阳性,所用试剂联苯胺又是致癌物。尿血和脑出血多用尿液分析仪和细胞计数,但对陈旧性微量出血,细胞在尿液及脑脊液内时间过长,血红蛋白(Hb)被溶解,并且尿液沉渣和脑脊液内微量红细胞用此试验反应不出。因此我们纯化人Hb免疫家兔获得高效价兔抗人Hb抗体,用以致敏绵羊红细胞,采用RPHA检测粪便、尿液及脑脊液标本,取得良好的结果,现报告如下。     

Lp- PLA2酶法测定试剂盒的临床应用评价

目的 验证北京九强金斯尔脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)酶法测定试剂盒的性能指标,评价其是否符合临床需求。方法 根据WS/T492-2016《临床检测定量测定项目精密度与正确度性能验证》、CNAS-GL037:2019《临床化学定量检验程序性能验证指南》及WST402-2012《临床实验室检验项目参考区间的制定》等文件要求,对北京九强金斯尔Lp-PLA2酶法测定试剂盒的正确度、精密度、线性范围、可报告范围和生物参考区间等性能进行验证,并与上海润鸿Lp-PLA2测定试剂盒进行方法学比对。结果 正确度验证中,金斯尔Lp-PLA2酶法测定试剂盒测定厂家工作标准品偏差均小于8%;检测配套高低两水平质控品,每个水平检测的重复性和实验室内精密度的变异系数(CV)均在±2%范围内;在线性区间评价试验中,得到线性回归方程Y=1.0054X-3.3466,R²=0.9998。验证线性区间为58.53～1 181.07U/L,最大可稀释倍数为64倍,临床可报告上限水平为75 588.48U/L。厂家提供的生物参考区间男性：230～728U/L,女性：194～640U/L(18～...     

化学发光免疫分析法HER-2测定试剂盒的初步临床评价

目的评价试验产品HER-2测定试剂盒(化学发光免疫分析法,深圳市新产业生物医学工程股份有限公司)与参比产品HER-2/neu蛋白测定试剂盒(化学发光法,西门子)的临床使用的等效性。方法使用两种试剂对临床收集的样本进行平行盲法检测。试验结束后对参比产品和试验产品的测定结果进行离群值检验、回归分析、Bland-Altman一致性分析、医学决定水平处的预期偏倚分析以及定性结果的一致性分析。结果共测定 360例临床样本,均为女性样本。对纳入定量分析的355例样本测定结果进行方法间离群值检验,无离群值。线性回归方程: Y =0.9758 X +0.1668, R 2 = 0.9910 。试验产品与参比产品差值百分比的95%一致性界限(LoA)为(-21.80%,18.87%);其中98.87%(351/355)的点在95%一致性界限内。两种方法在医学决定水平15 ng/mL处的预期偏倚百分比为-1.31%,满足评价标准。试验产品与参比产品阳性符合率为98.76%,阴性符合率为98.49%,总符合率为98.61%。其中有5例标本两种方法检测定性结果不一致,但均为非恶性组且结果在参考值附近。定性结果经Kappa一致性检验,κ值=0.9719。结论试验产品HER-2测定试剂盒与参比产品HER-2/neu蛋白测定试剂盒临床应用中具有等效性,即临床应用上的有效性和安全性。     

精神病诊断试剂盒

精神疾病的早期鉴别诊断具有一定难度,利用精神分裂症等精神病人大脑内某些蛋白质所发生的变化,就能像诊断糖尿病、冠心病等疾病那样,早期发现和诊断精神疾病。美国德克萨斯州奥斯汀市Myriad RBM医学生物研究所的Sabin Bahn博士研究报导,一旦患有精神分裂     

胃蛋白酶原Ⅰ/Ⅱ测定试剂盒行业标准的建立和验证

<正>胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)是胃蛋白酶的前体,被认为是胃黏膜损伤的重要生物标志物,主要包括两种同工酶,PGI和PGII(也称为PGA和PGC)^[1]。PGI只在胃底和胃体的腺黏膜中产生,PGII由整个胃和十二指肠产生。以往的研究表明,PGI水平和(或)PGI/PGII比值反映了胃黏膜的形态和功能状态^[2],可用于预测萎缩性胃炎^[3],此外,已有研究证实PG的表达与胃癌的发生有很好的相关性^[4-6]。与内镜检查相比,测量血清PGI和PGII水平提供了一种无创、直接的大规模筛查方法,可用于胃癌的早期筛查。