环状RNA hsa＿circ＿0001479在胃癌中的表达及功能研究

目的：探讨hsa＿circ＿0001479在胃癌（gastric cancer,GC）组织中的表达情况及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法：建立实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测hsa＿circ＿0001479表达量的方法并进行方法学性能评价;通过RT-qPCR检测76对胃癌组织和配对癌旁组织中hsa＿circ＿0001479的表达水平并分析其表达量与临床病理参数的关系;构建针对hsa＿circ＿0001479的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)和过表达载体,转染至胃癌细胞株,通过CCK-8实验、克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期分布,划痕实验检测细胞横向迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果：RT-qPCR检测hsa＿circ＿0001479表达量的方法具有良好的精密度、正确度和线性;hsa＿circ＿0001479在胃癌组织中表达增高且表达水平与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和CA19-9水平有关;细胞功能实验显示,在胃癌细胞株中干扰hsa＿circ＿0001479的表达可抑制胃癌细胞的增...     

环状RNA hsa＿circ＿0009043在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 探讨hsa＿circ＿0009043在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及其临床意义。方法 采用实时定量PCR测定hsa＿circ＿0009043在OSCC细胞系及组织中的表达水平,并分析其与临床病理特征的相关性。用受试者操作特征（ROC）曲线评估hsa＿circ＿0009043在OSCC诊断中的价值。基于生物信息学分析预测hsa＿circ＿0009043的潜在功能。结果 hsa＿circ＿0009043在OSCC细胞系及OSCC组织中的表达水平低于癌旁组织及正常口腔角质细胞（均P <0.05）,其表达水平与肿瘤大小及淋巴结转移有显著相关性（P=0.01,P=0.037）。ROC曲线下面积为0.676 9。基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析及hsa＿circ＿0009043/miRNA/mRNA调控网络显示,hsa＿circ＿0009043与OSCC进展存在一定相关性。结论 hsa＿circ＿0009043可能成为一种OSCC的生物标志物,并参与OSCC的发生、发展。     

环状RNA hsa＿circ＿0006834可作为肝细胞癌患者预后的潜在生物标志物

目的 基于RNA测序技术筛选肝细胞癌（HCC）中差异表达的环状RNAs(circRNAs),检测其在HCC组织中的表达变化,并探讨其与临床特征及预后的关系,为HCC提供潜在的分子标志物和治疗靶点。方法 选取56对HCC组织及其癌旁组织进行RNA测序,筛选出具有差异表达的circRNAs;采用RT-qPCR法在另外选取的15对HCC组织和配对的癌旁组织中对circRNA进行差异表达的验证;分别运用卡方、Cox比例风险模型及Kaplan-Meier法分析circRNA与HCC患者临床特征及预后的相关性;采用ROC曲线评估circRNA对HCC患者无复发生存期和总体生存期的预测价值。结果 基于56对HCC组织及其癌旁组织的RNA测序数据分析显示：在HCC组织中显著上调的circRNAs有17个,显著下调的circRNAs有45个（P<0.05）;其中circRNA hsa＿circ＿0006834在HCC中异常低表达,并在另外15对HCC组织及其癌旁组织中进一步验证其在癌组织中显著低表达（P<0.05）。结合临床数据分析显示hsa＿circ＿0006834的表达与HCC患者的血管...     

hsa＿circ＿0044556通过miR145/PD-L1介导NK细胞对肝癌细胞的杀伤作用

目的:探究hsa＿circ＿0044556在肝癌细胞免疫逃逸中的作用及其相关机制。方法:收集肝癌患者肿瘤组织及其癌旁组织,通过qRT-PCR检测hsa＿circ＿0044556和PD-L1表达水平并进行相关性分析。采用qRT-PCR检测正常肝上皮HL-02细胞和肝癌SMMC-7721、HCCLM3细胞hsa＿circ＿0044556及PD-L1表达水平。通过信息学预测和荧光素酶报告实验检测hsa＿circ＿0044556和miR145以及miR145和PD-L1的靶向关系。通过脂质体转染法将si-hsa＿circ＿0044556、si-miR145、si-NC转染至HCCLM3细胞,分组为:si-NC组、si-hsa＿circ＿0044556组、si-miR145组和si-hsa＿circ＿0044556+simiR145组。比较各组细胞PD-L1表达水平、细胞增殖能力;通过NK细胞毒性试验检测对NK细胞杀伤的敏感性。结果:与癌旁组织相比,肿瘤组织hsa＿circ＿0044556和PD-L1表达水平升高(P <0.05),hsa＿circ＿0044556与PD-L1表达成正相关(...     

hsa＿circ＿0000073对骨肉瘤脂质代谢的影响

目的 探讨hsa＿circ＿0000073在骨肉瘤组织中的表达及其对骨肉瘤细胞脂质代谢的影响。方法 收集2020年1月至2022年1月贵州省人民医院就诊且经病理证实的10例骨肉瘤患者的肿瘤组织及癌旁组织,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa＿circ＿0000073的表达水平。骨肉瘤细胞转染sh-NC和sh-hsa＿circ＿0000073,通过G418构建稳转细胞株,荧光显微镜和qRT-PCR验证干扰效率。使用GeneChip基因芯片筛选出差异表达基因并进行GO分析,R语言(3.6.3版本)的“clusterProfiler”包用于数据分析,“ggplot2”包用于数据可视化。骨肉瘤细胞和裸鼠异种移植双重模型上进行油红实验、尼罗红实验评估hsa＿circ＿0000073对骨肉瘤细胞脂质代谢的影响。结果 与癌旁组织比较,骨肉瘤组织hsa＿circ＿0000073表达水平升高(P<0.05)。转染sh-RNAs后,circ＿0000073干扰组hsa＿circ＿0000073表达水平低于对照组(P<0.05)。干扰hsa＿circ＿0000073后,GeneCh...     

环状RNA hsa＿circ＿0008591对乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨环状RNA(circRNA)hsa＿circ＿0008591在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法 运用高通量芯片数据分析筛选在乳腺癌组织中差异表达的circRNAs,确定hsa＿circ＿0008591为研究对象,并通过Sanger测序、核糖核酸酶R(RNaseR)处理等对其进行表征。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa＿circ＿0008591在乳腺癌组织和细胞中的表达;进一步将质粒或小干扰RNA(siRNA)转染至乳腺癌细胞,采用实时无标记细胞分析技术(RTCA)、CCK-8增殖实验、EdU增殖实验和平板克隆形成实验检测hsa＿circ＿0008591对细胞增殖能力的影响。运用TargetScan等数据库预测互相作用的微小RNA(miRNA)和蛋白,同时进行功能富集分析;并运用Cytoscape软件绘制竞争性内源RNA(ceRNA)调控网络。结果 与癌旁组织比较,hsa＿circ＿0008591在乳腺癌组织中呈低表达(P=0.007 6);与人正常乳腺上皮细胞比较,hsa＿circ＿0008591在6种乳腺癌细胞株中的表达水平明显下调(P&...     

甲状腺微小乳头状癌hsa＿circRNA＿001059表达及其临床价值研究

目的 分析hsa＿circRNA＿001059在甲状腺微小乳头状癌（PTMC）中的表达情况,探讨其与PTMC患者颈部淋巴结转移的关系,并分析其对PTMC的诊断价值。方法 收集2018年1月至2021年5月儋州市人民医院收治的102例PTMC患者（PTMC组）及同期在本院体检正常者50名（对照组）血液标本,以及PTMC组患者的PTMC组织与配对的癌旁正常组织,采用RT-PCR法检测血浆及组织hsa＿circRNA＿001059表达水平;比较PTMC颈部淋巴结转移患者与无颈部淋巴结转移患者癌组织、血浆hsa＿circRNA＿001059表达水平;分析hsa＿circRNA＿001059表达水平对PTMC的诊断价值及对PTMC患者颈部淋巴结转移的诊断价值。结果 PTMC组血浆hsa＿circRNA＿001059表达水平高于对照组[（2.40±1.02）比（0.74±0.16）,P<0.05]。PTMC组织hsa＿circRNA＿001059表达水平高于癌旁正常组织[（2.87±1.15）比（0.81±0.20）,P<0.05]。PTMC颈部淋巴结转移患者血浆、组织hsa＿circ...     

hsa＿circ＿0001859靶向miR-16抑制类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和转移的机制研究

目的 探讨hsa＿circ＿0001859靶向miR-16抑制类风湿关节炎（RA）滑膜成纤维细胞（RASFs）增殖和转移的机制研究。方法 选取2019年6月-2020年7月于成都八一骨科医院进行治疗的RA患者40例为RA组,同时选取本院体检中心健康志愿者40例为对照组。培养RASFs细胞,将si-NC、si-hsa＿circ＿0001859、pcDNA-NC、pcDNAhsa＿circ＿0001859、miR-NC、miR-16 mimics、si-hsa＿circ＿0001859+anti-miR-NC、si-hsa＿circ＿0001859+anti-miR-16分别转染至RASFs,记为si-NC组、si-hsa＿circ＿0001859组、pcDNA-NC组、pcDNA-hsa＿circ＿0001859组、miR-NC组、miR-16组、si-hsa＿circ＿0001859+anti-miR-NC组、si-hsa＿circ＿0001859+anti-miR-16组。RT-qPCR检测hsa＿circ＿0001859、miR-16表达水平;四甲基偶氮唑蓝（MTT）检测细胞活性;...     

环状RNA hsa＿circ＿0009735对胃癌细胞上皮间质转化、细胞周期和自噬的影响

目的：探讨环状RNA hsa＿circ＿0009735在胃癌组织和细胞中的表达,阐明其对胃癌细胞上皮间质转化(EMT)、迁移、细胞周期和自噬的影响。方法：取正常胃黏膜GES-1细胞、胃癌MGC-803细胞、 MKN-45细胞和HGC-27细胞。将hsa＿circ＿0009735小干扰RNA和阴性对照转染MGC-803细胞,将胃癌MGC-803细胞分为si-hsa＿circ＿0009735组和阴性对照组;将对照质粒和hsa＿circ＿0009735过表达质粒转染入HGC-27细胞,将胃癌HGC-27细胞分为OE-hsa＿circ＿0009735组和对照质粒组;MGC-803细胞转染细胞自噬质粒pcDNA-eGFP-LC3后分为空白组和不同浓度(0.25、0.50、1.00和2.00 mg·L^-1)雷帕霉素组。实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测胃癌组织和细胞中hsa＿circ＿0009735表达水平,激光共聚焦显微镜观察各组MGC-803细胞形态表现和细胞中自噬小体数,Transwell小室实验检测各组迁移细胞数,流式细胞术检测不同细胞周期各组细胞百分率,W...     

环状RNA hsacirc0032664抑制肝癌细胞的增殖、侵袭与迁移

目的 大多数环状RNA(circular RNA,circRNA)在肝癌中的潜在机制和特定功能仍不清楚。本研究通过生物信息学分析和临床肝癌组织与细胞系研究hsa＿circ＿0032664在肝癌中的差异表达,并探讨hsa＿circ＿0032664在肝癌中的生物学功能。方法 从基因表达数据库(GEO)中下载与肝癌相关的circRNA数据集(GSE164803和GSE97332),然后利用Rstudio软件进行差异表达分析。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa＿circ＿0032664在肝癌组织和肝癌细胞系的表达水平,设计干扰片段siRNA干扰hsa＿circ＿0032664在肝癌细胞系(HepG2、MHCC97H)的表达,通过CCK8实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验验证hsa＿circ＿0032664在肝癌中的生物学功能。结果 生物信息学分析发现hsa＿circ＿0032664在肝癌中低表达,qRT-PCR结果显示hsa＿circ＿0032664在肝癌组织和肝癌细胞系中低表达。干扰hsa＿circ＿0032664在HepG2、MHCC97H细胞中的表达后可促进肝癌细...     

急性缺血性脑卒中患者的外周血细胞凋亡相关基因mRNA表达水平

目的：探讨急性缺血性脑卒中（ AIS）患者的外周血细胞凋亡相关基因mRNA表达水平。方法选择AIS患者21例（病例组）和健康正常人32例（对照组）。检测并比较两组外周血7个细胞凋亡相关基因[ B细胞受体相关蛋白29（BCAP29）基因、死亡诱导清理因子1（DIDO1）基因、Bcl2／腺病毒E1B相互作用蛋白3（BNIP3L）基因、肿瘤坏死因子受体作用因子3（TRAF3）基因、丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK1）基因、磷脂酰肌醇激酶3调节亚基α（PIK3R1）基因、信号转导和转录激活因子3（STAT3）]mRNA的表达水平。结果病例组外周血BCAP29、BNIP3L、TRAF3、STAT3基因的mRNA表达水平均高于对照组（P＜0．05）,但是两组DIDO1,MAPK1,PIK3R1基因mRNA表达水平比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。结论急性缺血性脑卒患者外周血细胞凋亡相关基因 BCAP29、BNIP3L、TRAF3、STAT3 mRNA的表达水平升高,其可能与急性缺血性脑卒的发生相关。     

急性缺血性脑卒中患者外周血LINC00342相对表达水平及其与临床特征的关系

目的 探讨急性缺血性脑卒中患者外周血LINC00342相对表达水平及其与临床特征的关系。方法 纳入90例急性缺血性脑卒中患者（病例组）和90例健康对照者（对照组）,采用实时荧光定量PCR技术检测两组研究对象的外周血LINC00342相对表达水平。检测病例组的血糖、血脂和血压水平,并比较LINC00342高表达(外周血LINC00342相对表达水平≥7.03×10^-3)和低表达(外周血LINC00342相对表达水平<7.03×10^-3)患者上述指标的差异。结果 病例组的外周血LINC00342相对表达水平低于对照组（P<0.05）。LINC00342低表达的急性缺血性脑卒中患者的餐后2 h血糖水平高于LINC00342高表达者（P<0.05）。结论 急性缺血性脑卒中患者的外周血LINC00342相对表达水平下调,外周血LINC00342的相对表达水平可能影响急性缺血性脑卒中的发生和患者机体的血糖代谢。     

肺腺癌患者组织中circ＿0000620的表达和患者化疗耐药的相关性

目的 检测circ＿0000620在肺腺癌患者组织中的表达并且分析其与患者化疗耐药的相关性。方法 选取2018年1月至2020年1月在郑州大学第一附属医院确诊的120例肺腺癌患者的癌组织及癌旁组织,其中男73例,女47例,年龄≥55岁者71例,<55岁者49例,化疗耐药者28例,化疗敏感者92例。采用环状RNA(circRNA)高通量测序技术筛选出差异性表达的circRNA;使用divergent primer和测序技术证明circ＿0000620在肺腺癌组织中是否存在且为环状;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测人肺腺癌组织、癌旁组织、肺腺癌细胞株(A549、PC-9、SPC-A-1、NCI-H1299、NCI-H1395)和正常人支气管上皮细胞(NHBE)中circ＿0000620的表达情况。结果 circ＿0000620在肺腺癌组织中存在且为环状;肺腺癌组织中circ＿0000620的表达水平高于其配对癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);与化疗敏感组相比,化疗耐药组circ＿0000620的表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05...     

血糖水平与急性缺血性脑卒中关系

急性脑卒中是人类三大死亡原因之一。急性缺血性脑卒中时 ,血糖应急性增高造成能量供给和利用障碍 ,使临床症状加重 ,影响预后 ;而糖尿病合并缺血性脑卒中 ,不仅临床表现重 ,而且预后也差 ,其死亡率明显高于非糖尿病合并缺血性脑卒中者。为探讨血糖水平与急性缺血性脑卒中关系 ,现将我院1 999～ 2 0 0 0年共收住院的 2 1 8例急性缺血性脑卒中患者血糖水平分组研究报告如下。1　对象与方法1 .1　对象　 2 1 8例急性缺血性脑卒中患者均符合1 995年第 4次全国脑血管病会议制定的诊断标准 ,并经头颅 CT证实排除出血性脑卒中 ,根据既往是否有糖…     

院内急性缺血性脑卒中的诊治进展

院内急性缺血性脑卒中(IHAIS)是全部AIS的重要组成部分。IHAIS与院外AIS(OHAIS)在发病机制、病情严重程度以及预后方面皆有明显差异。IHAIS患者较OHAIS患者神经功能缺损更严重,这导致IHAIS患者住院时间更长,住院期间病死率更高,住院期间发生的脑梗死并发症更多,出院时神经功能预后更差以及出院后继续进行康复治疗的患者比例更高。脑卒中合并症、代谢性疾病和血液病、脑卒中严重程度是IHAIS不良预后的主要影响因素,但诊断延迟、转诊延迟、专科评估以及溶栓治疗延误也是IHAIS不良预后的影响因素。     

无症状脑梗死干预治疗与急性缺血性脑卒中发生的相关性研究

目的研究无症状脑梗死患者干预性治疗与缺血性脑卒中发生的相关性。方法采用随机、对照的原则,将符合无症状脑梗死诊断标准的89例患者分为2组,对照组45例,只进行控制血糖、血压、血脂等危险因素的治疗;干预组44例,在控制危险因素的基础上进行干预治疗,包括阿司匹林抗血小板治疗、尼莫通保护脑细胞及中药治疗。治疗6个月后测定2组血液流变学指标。结果治疗后干预组各项指标均显著改善(P<0.05或P<0.01),对照组仅低切全血黏度降低(P<0.05)。干预组各项指标均明显低于对照组(P<0.05)。在3年随访期间,对照组发生症状性缺血性脑卒中21例(52.5%)高于干预组12例(29.3%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论对无症状脑梗死患者进行干预性治疗,可望降低急性缺血性脑卒中的发生率。     

环状RNA circ＿0020123靶向调控微小RNA-145影响胰腺癌细胞SW-1990增殖、侵袭与转移实验研究

目的:探讨环状RNA circ＿0020123靶向调控微小RNA(miR)-145对胰腺癌细胞SW-1990增殖、侵袭与转移的影响。方法:选择胰腺癌细胞株SW-1990,分为si-NC组、si-circ＿0020123组、si-circ＿0020123+anti-miR-145组,进行细胞转染。采用MTT法检测细胞增殖能力。采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭与迁移能力。采用反转录定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ＿0020123和miR-145相对表达量。采用Western blot检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)。采用双荧光素酶报告实验分析circ＿0020123与miR-145的靶向作用。结果:与si-NC组比较,si-circ＿0020123组和si-circ＿0020123+anti-miR-145组细胞增殖、侵袭及迁移能力明显降低(均P<0.05)。与si-circ＿0020123组比较,si-circ＿0020123+anti-miR-145组细胞增殖、侵袭及迁移能力明显...