Survivin基因在肝门部胆管癌组织中的表达及其与nm23和PTEN相关性的研究

目的:探讨Survivin基因在肝门部胆管癌组织中的表达情况以及与nm23和PTEN基因表达的相关性。方法:应用免疫组织化学方法测定肝门部胆管癌及相应癌旁正常组织中Survivin、nm23和PTEN基因的表达,分析Survivin基因表达与肿瘤组织病理分级、淋巴结转移以及nm23和PTEN基因的相关性。结果:44例肝门部胆管癌组织中,Survivin基因阳性表达率63.6%,15例癌旁组织中Sur-vivin基因阳性表达率为6.67%,二者比较差异有统计学意义(P<0.05);Survivin基因表达与病理分级无关(P>0.05),与淋巴结转移无关(P>0.05);Survivin基因表达与PTEN及nm23的表达呈负相关(P<0.05)。结论:Survivin基因的高表达在肝门部胆管癌的发生、进展和转移过程中可能起重要作用;联合检测Survivin与PTEN及nm23基因表达可能有助于临床诊断及判断预后。     

Survivin蛋白在肝外胆管癌组织中的表达及其与预后的关系

目的 观察Survivin蛋白在肝外胆管癌组织中的表达,探讨Survivin蛋白表达水平与肝外胆管癌临床病理特征的相关性,研究Survivin蛋白表达与肝外胆管癌预后的关系.方法 采用免疫组化法检测59例肝外胆管癌组织和相应的20例癌旁组织中Survivin蛋白的表达,分析肝外胆管癌组织中Survivin蛋白的表达水平与患者临床病理特征、淋巴结转移的关系及其与预后的关系.结果 肝外胆管癌组织Survivin蛋白表达阳性率为67.8%(40/59),而癌旁组织为20.O%(4/20),二者有明显差别(P<0.01).Survivin蛋白表达水平与分化程度呈负相关(P<0.01),与TNM分期、淋巴管浸润、神经浸润和淋巴结转移旱正相关(P<0.05).Survivin蛋白表达阳性组血清CA19-9的水平为(290 300±55 500)U/L,阴性组为(113 300±31 400)U/L,Survivin蛋白阳性表达组高于阴性表达组(P<0.05).Survivin蛋白表达阴性组和阳性组平均生存期分别为43.5个月和21.1个月,差异有统计学意义(P<0.01).多因素生存分析结果显示,Survivin蛋白、癌残留及淋巴结转移是肝外胆管癌独立的预后因素(P<0.05,P<0.01,P<0.01).结论 Survivin蛋白表达水平与分化程度呈负相关,与淋巴浸润和血清CA19-9浓度呈正相关.Survivin蛋白表达水平为肝外胆管癌根治术后独立的预后因素.     

Survivin在胆管癌组织中的表达及其与VEGF关系的相关研究

目的: 探讨凋亡抑制蛋白Survivin在胆管癌组织中的表达及其与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的关系.方法:应用免疫组织化学方法测定51例胆管癌组织和10例正常胆管组织的Survivin和VEGF的表达水平.结果:1)胆管癌组织中,Survivin阳性表达率为74.5%,正常胆管组织中的阳性表达率为0,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01);Survivin在胆管癌中的表达与患者的性别和年龄、肿瘤的分化程度和部位、有无淋巴结转移无明显相关性(P＞0.05).2)VEGF在胆管癌组织中的阳性表达率为80.4%,在正常胆管组织中的阳性表达率为20%,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01); VEGF在胆管癌中的表达与患者的性别和年龄、肿瘤的分化程度和部位无明显相关性(P＞0.05),而与有无淋巴结转移有相关性(P＜0.05),转移组高于无转移组.3)Survivin和VEGF在胆管癌组织中阳性表达的比率均为70.6%,二者的表达密切相关(P＜0.01).结论: Survivin和VEGF在胆管癌的发生、发展、侵袭和转移过程中发挥重要作用,二者在肿瘤血管生成过程中密切相关,为胆管癌的诊断和靶向基因治疗提供新的途径.     

Survivin和C-myc在肝门部胆管癌组织中的表达及其相关性研究

目的：探讨Survivin和C-myc在肝门部胆管癌中的表达、临床意义及相互关系。方法：用免疫组织化学SP法检测45例肝门部胆管癌及20例非癌胆管组织中Survivin和C-myc的表达。结果：45例肝门部胆管癌组织中Survivin和C-myc的表达率分别为68.9%（31/45）和62.2%（28/45）,非癌胆管组织中Survivin和C-myc的表达率分别为0和15%（3/20）,差异有统计学意义（P〈0.05）。肝门部胆管癌组织中Survivin的表达与淋巴结转移有关（P〈0.05）,C-myc的表达与肿瘤分化程度和淋巴结转移有关（P〈0.05）,它们的表达与患者的性别、年龄,肿瘤大小及Bismuth分型无关（P〉0.05）。Survivin、C-myc的表达呈正相关关系（P〈0.05）。结论：Survivin、C-myc在肝门部胆管癌中的表达呈正相关关系,共同在肝门部胆管癌的发生、发展、转移中起一定作用,Survivin有望成为肝门部胆管癌治疗的新靶点。     

凋亡相关基因bcl-2和bax在胆管癌组织中表达的意义

目的　探讨细胞凋亡抑制基因ｂｃｌ－ ２ 和凋亡促进基因ｂａｘ 在胆管癌组织中的表达。方法　应用免疫组化方法对２０ 例胆管癌（ＣＨＣ）和７例先天性胆总管囊肿（ＣＣＣ）组织中ｂｃｌ－ ２和ｂａｘ 蛋白进行检测。结果　２０例ＣＨＣ中有１例ｂｃｌ－ ２ 蛋白表达阳性（５％ ）,７例ＣＣＣ中ｂｃｌ－ ２均表达阴性。２０例ＣＨＣ中有１１ 例ｂａｘ 蛋白表达阳性（５５％ ）,７例ＣＣＣ中仅１ 例表达阳性（１４．２９％ ）,两组间差异有显著意义（Ｐ＜ ０．０１）。结论　ｂｃｌ－ ２ 和ｂａｘ 蛋白的改变在胆管癌发生发展过程中不起重要作用。     

MTSS1在胆管癌组织中的表达及其与预后关系

目的 探讨MTSS1在胆管癌组织中的表达及其与预后关系.方法 收集2003年1月至2005年12月第二军医大学东方肝胆外科医院手术切除的49例肝门部胆管癌患者的胆管标本,构建肝门部胆管癌组织芯片和10例对应癌旁正常胆管上皮的组织芯片,免疫组织化学染色方法检测MTSS1的表达情况;并以脂质体法转染胆管癌细胞株RBE,Western blot法检查MTSS1蛋白表达情况,MTT法检查RBE细胞增殖能力.患者采用门诊和电话随访,随访时间截至2012年5月.计量资料采用t检验,计数资料采用x2检验,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,单因素生存分析采用Log-rank检验,多因素生存分析采用COX回归模型.结果 免疫组织化学染色结果显示:MTSS1在癌旁正常胆管上皮组织中的表达率为10/10,而在胆管癌组织中的表达率仅为59.2％(29/49).转染MTSS1的胆管癌细胞增殖比率为1.55 ±0.05,低于没有转染MTSS1的胆管癌细胞的2.32 ±0.08(=4.454,P＜0.05).性别、年龄、TNM分期、T分期、组织分化、神经侵犯、肿瘤直径等不影响MTSS1的阳性表达(r=0.211,3.471,0.507,0.507,0.368,0.882,0.660,P ＜0.05),而淋巴结转移则影响MTSS1的阳性表达(x2=10.436,P＜0.05).所有患者随访1～59个月,中位随访时间16个月.MTSS1阳性表达患者中位无瘤生存时间为17.9个月,MTSS1阴性表达患者为11.3个月,两者比较,差异无统计学意义(Log-rank值=3.707,P＞0.05).MTSS1阳性表达患者中位生存时间为34.9个月,而MTSS1阴性表达患者仅有18.7个月,两者比较,差异有统计学意义(Log-rank值=5.671,P＜0.05).多因素生存分析结果显示:MTSS1表达不是影响患者预后的独立危险因素(x2=0.406,P＞0.05).结论 MTSS1在胆管癌原发灶中表达下降,与淋巴结转移呈负相关,是判断胆管癌患者预后的重要指标.     

靶向Xklp2靶蛋白在胆管癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨在胆管癌组织中靶向Xklp2靶蛋白(TPX2)的表达及其临床意义。方法:收集60例胆管癌患者的癌组织及癌旁组织标本,用免疫组化方法检测TPX2蛋白的阳性表达率,随机抽取4对标本用Western blot方法检测TPX2蛋白的表达量;分析癌组织中TPX2蛋白的表达与患者临床病理参数及预后之间的关系。结果:胆管癌癌组织中TPX2蛋白的阳性表达率(46.7%vs.8.3%,P0.05)及表达量West blot均高于癌旁组织。TPX2蛋白的表达与患者TNM分期、淋巴结转移以及生存有关(均P0.05);TPX2蛋白阳性患者的术后生存率明显低于其阴性患者(2年生存率:27.6%vs.78.4%;3年生存率:14.3%vs.59.5%,均P0.05)。结论:TPX2高表达可能是胆管癌患者术后发生转移、复发的危险因素;TPX2可能是评价胆管癌早期诊断和预后一个潜在生物学指标和治疗的潜在靶点。     

Maspin在原发性胆管癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨Maspin蛋白在原发性胆管癌中的表达和意义及其与p53蛋白的关系。方法:用免疫组化法检测42例胆管癌连同癌旁组织及12例正常胆管组织中Maspin蛋白和p53蛋白的表达,分析两者与患者临床病理因素及预后的关系以及两者之间的关系。结果:Maspin蛋白与p53蛋白在胆管癌组织中阳性率均明显高于癌旁组织与正常胆管组织(均P0.05);Maspin蛋白表达与胆管癌淋巴结转移及远处转移有关,而p53蛋白表达与胆管癌病理分级、TNM分期、淋巴结转移以及远处转移有关(均P0.05),但胆管癌中Maspin蛋白与p53蛋白表达无相关性(r=-0.329,P=0.144)。Maspin阳性表达患者术后生存期长于阴性表达患者(χ~2=4.440,P=0.035),而p53阳性表达患者术后生存期短于阴性表达患者(χ~2=8.231,P=0.004)。单因素与多因素Cox回归模型分析结果显示,Maspin蛋白是胆管癌患者预后的独立预测指标(HR=0.094,95%CI=0.015~0.593,P=0.012)。结论:Maspin蛋白在胆管癌组织中表达增加,但其减少或缺失可能与患者不良临床病理特征及预后密切相关,且其作用机制可能与p53蛋白无关联。     

Survivin基因在胰腺癌组织中的表达及与bcl-2和p53蛋白表达的关系

目的探讨Survivin基因在胰腺癌中的表达及与bcl 2、p5 3蛋白表达的相互关系。方法用RT PCR法检测 4 9例胰腺癌、5例慢性胰腺炎和 12例正常胰腺组织中SurvivinmRNA的表达 ,免疫组织化学法检测胰腺癌中bcl 2、p5 3蛋白表达。结果SurvivinmRNA在胰腺癌中表达率为76 % ,在慢性胰腺炎及正常胰腺组织中不表达 (P <0 0 5 )。Survivin基因表达与胰腺癌的分化程度、临床分期及淋巴结转移无相关性 (P >0 0 5 )。Survivin基因表达与bcl 2蛋白表达不相关 ,与p5 3蛋白表达显著相关。结论Survivin基因在胰腺癌中过度表达 ,提示该基因对胰腺癌发生和发展起重要作用 ;抑癌基因p5 3的失活与Survivin基因的表达可能在胰腺癌的发生中起协同作用。     

Hvin和Ki-67蛋白在胆管癌组织中表达的意义

目的 探讨Livin和Ki-67蛋白在胆管癌组织中的表达及两者之间的关系和临床意义.方法 采用SP法检测2002年1月至2003年12月中国医科大学附属盛京医院手术切除的55例胆管癌组织和12例慢性胆管炎组织中Livin和Ki-67蛋白的表达,并分析这两种蛋白与胆管癌临床病理特征的关系.应用Spearman等级相关分析、χ2检验和t检验对结果进行分析.结果 Livin蛋白在胆管癌标本中的阳性表达率为71%(39/55),明显高于慢性胆管炎标本的0(0/12)(χ2=20.361,P<0.01);Livin蛋白的表达受胆管癌患者的分化程度和淋巴结转移影响(χ2=4.193,4.245,P<0.05).Ki-67蛋白在胆管癌标本中的阳性表达率为96%(53/55).临床Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者Ki-67标记指数分别为22%±16%、33%±12%、43%±15%、49%±10%,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期与Ⅰ期比较差异有统计学意义(t=2.307,2.871,3.957,P<0.05);有无局部淋巴结转移的患者Ki-67标记指数分别为43%±13%、34%±16%,两者比较差异有统计学意义(t=2.334,P<0.05).胆管癌组织中Livin蛋白的表达与Ki-67标记指数呈正相关(r=0.502,P<0.01).结论 Livin蛋白在胆管癌的发生、发展中起重要作用,并且与胆管癌增殖活性相关,两者结合可作为胆管癌恶性程度和判断预后的标准.     

Gastrin/CCK与胆管癌细胞bcl-2/bax蛋白表达的关系

目的 初步探讨Gastrin/CCK对胆管癌细胞bcl-2/bax蛋白表达的调节作用。方法 原位杂交和免疫组化分别检测Gastrin/CCK受体mRNA和bcl-2/bax蛋白在40例胆管癌组织标本中的表达、分析两者间关系,流式细胞术研究Gastrin/CCK及其受体拮抗剂对QBC939人胆管癌细胞系bcl-2/bax蛋白表达的影响。结果Gastrin/CCK受体 mRNA和bcl-2/bax蛋白在胆管癌组织和细胞系中均有表达;Gastrin/CCK-B受体阳性胆管癌标本bcl-2表达率高于其阴性者（P<0.01）;Gastrin-17或CCK-8S（10~（-8）mol·L~（-1）×48h）能刺激QBC939细胞bcl-2表达、同时加入L365,260或 L364,718（10~（-8）mol·L~（-1））可逆转,CCK-SS还能抑制bax表达、L364,718可逆转（P<0.01或P<0.05）。结论Gastrin/CCK可通过其受体后途径上调胆管癌细胞bcl-2表达,“CCK→CCK-A受体”信号还可能具有抑制bax表达的作用。     

结肠癌中hTERT的表达及其与Survivin和bcl-2表达的关系

目的：研究端粒酶逆转录酶（hTERT）在结肠癌中的表达及其与Survivin和bcl-2表达的关系。方法：应用免疫组织化学SABC法检测52例结肠癌及其相应癌旁正常组织中hTERT、Survivin和bcl-2的表达。结果：52例结肠癌组织中hTERT表达阳性率为80.8%,而相应癌旁正常结肠组织中无一例阳性表达。hTERT表达的上调与患者性别、年龄、肿瘤浸润深度无明显相关（P〉0.05）,而与肿瘤分化程度、淋巴结转移、Dukes分期明显相关（P〈0.05）。在52例结肠癌组织中hTERT与Survivin以及hTERT与bcl-2的表达之间呈正相关（r=0.589,P〈0.05;r=0.559,P〈0.05）。结论：hTERT表达的上调与结肠癌的发生、发展、恶性程度有着密切的关系;结肠癌中hTERT的表达与Survivin和bcl-2的表达密切相关。     

低温保存不同时间大鼠带瓣管道活性与bax、bcl-2基因表达的关系

目的 观察低温保存不同时间大鼠带瓣血管活性及bax和bcl-2基因的表达,探讨基因检测是否能成为带瓣血管活性指标.方法 Wistar大鼠80只,体质量250～350 g,分为新鲜组A组,-196 ℃液氮冻存3、6、9个月为B、C、D 3组.检测细胞结构、糖代谢及bax、bcl-2基因的变化.结果 大鼠带瓣血管的各组葡萄糖代谢率测定,A组(4.365±0.784)与B(4.383±0.548)、C组(4.446±0.608)、D组(4.090±0.657)差异无统计学意义(P＞0.05);bax基因的表达分别为20%、45%、60%和85%,差异有统计学意义(P＜0.05);bcl-2基因表达分别25%、30%、20%和35%,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 经冻存后的大鼠带瓣血管活性良好,提示bax基因可作为检测带瓣血管活性的指标,bcl-2的表达或高表达可能是细胞能耐受冻存打击的原因之一.

Abstract：

Objective To study the expression of bax and bcl-2 genes and activity of valved conduit in rats by cryopreservation for different lengths, and to probe whether genetic detection will become one of the indexes of valved conduit activity. Methods Eighty Wistar rats were divided into four groups: 20cases of fresh blood vessels ( group A ), 20 cases of frozen vessels for 3 months ( group B ), 20 for 6months ( group C), and 20 for 9 months ( group D). The changes in cellular structure, gluoce metabolism and the expression of bax and bcl-2 proteins were observed. Results The glucose metabolism rate of the rate valved conduit in groups A, B, C and D was 4. 365 ± 0. 784, 4. 383 ± 0. 548, 4. 446 ± 0. 608, and 4. 090 ± 0. 657 respectively, with the difference being not significant ( P ＞ 0. 05 ). The positive expression rate of bax protein in groups A, B, C and D was 20%, 45%, 60% and 85% respectively (P＜0. 05).The positive expression rate of bcl-2 in groups A, B, C and D was 25%, 30%, 20% and 35% respectively ( P ＞ 0. 05 ). Conclusion The frozen rat valved vascular showed good activity. bax gene can be regarded as one of the indicators for detecting valved vessel activity. The expression or over-expression of bcl-2gene may be one of the reasons why the cells can tolerate the frozen preservation.     

Survivin在胆管癌中的表达

目的　探讨Survivin基因表达与胆管癌发生发展的关系。方法　应用免疫组织化学技术 (SP法 )检测Survivin基因在 3 3例胆管癌标本、2 8例癌旁胆管组织和 5例胆管良性病变标本中的表达。结果　 3 3例胆管癌组织中Survivin阳性表达率为 72 .7% ( 2 4/3 3 ) ;在癌旁胆管组织和胆管良性病变组织中未检测到Survivin的表达 ,胆管癌组织、癌旁胆管组织、胆管良性病变组织之间的Survivin基因的表达差异有非常显著性 (P <0 .0 1)。Survivin基因的表达与患者的性别、年龄、肿瘤的大小、分化及是否转移无关。结论　Survivin在胆管癌中高度表达可能与胆管癌的发生发展有关 ,与预后的关系有待进一步的探讨。     

bcl-2/bax mRNA在三氧化二砷体外诱导人胆管癌细胞株凋亡中的表达

目的 观察bcl-2、bax mRNA在三氧化二砷(As2O3)诱导人类胆管癌株QBC939、RBE细胞凋亡中的表达.方法 Rhodamine123染色检测线粒体膜通透性变化;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcl-2、bax mRNA的表达.结果 As2O3干预,实验组Rhodamine123荧光染色强度较对照组明显减弱;凝胶成像检测bcl-2/β-actin mRNA A比值,QBC939、RBE细胞对照组分别为0.41±0.03、0.84±0.03;24 h实验组为0.01±0.01、0.43±0.02.bax/GAPDHmRNAA比值QBC939、RBE细胞对照组分别为0.21±0.01、0.42±0.04;24 h实验组为1.44±0.16、1.15±0.21,对照组与实验组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 As2O3可能增加胆管癌细胞株线粒体膜的通透性,下调bcl-2mRNA表达,上调bax mRNA的表达,可能启动了线粒体凋亡信号传导途径.     

凋亡相关基因 bcl-2、bax、bad与乳腺癌

目的探讨乳腺癌发生、发展过程中bcl-2、bax及bad基因表达水平变化及与乳腺癌其他生物因素的相关性。方法复习国内、外相关文献并进行综述。结果在从正常乳腺组织到乳腺癌逐渐演化的过程中凋亡抑制基因bcl-2的表达水平变化尚有待进一步研究,而凋亡促进基因bax、bad的表达水平呈递减趋势。bcl-2基因表达水平与乳腺癌中一些公认的正性因子如雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)呈正相关,与其他一些负性因子如p53、表皮生长因子受体、c-erbB-2、腋窝淋巴结转移情况等呈负相关。bax基因的表达水平与乳腺癌ER、PR水平以及p53表达水平等无关。对于bad基因与乳腺癌其他生物因素的相关性尚未见报道。结论乳腺癌中bcl-2基因表达水平的变化对乳腺癌预后以及治疗的作用尚存在争议,bad基因与乳腺癌预后的关系亦不清楚,而bax基因表达水平与乳腺癌的预后呈正相关。对于它们的研究将为我们评价乳腺癌的预后提供新的指标,为乳腺癌的治疗开辟新的思路。     

髓鞘相关蛋白抗体对大鼠脊髓损伤早期bcl-2与bax表达的影响

目的 探讨髓鞘相关蛋白(Nogo-A)抗体应用于脊髓损伤动物模型中对bcl-2与bax表达的影响.方法 建立大鼠急性脊髓损伤实验动物模型.180只大鼠随机分成对照组、损伤组和损伤后Nogo-A抗体治疗组,每组各60只.不同时间点损伤节段脊髓取材,分别行苏木素-伊红(HE)染色、免疫组织化学法检测bcl-2、bax表达并进行定量分析.结果 HE染色后光镜下观察:损伤后治疗组出血、小胶质细胞增生和炎细胞浸润均较损伤组轻.bcl-2、bax在损伤组和治疗组表达呈现动态变化,损伤后24 h bcl-2表达达高峰(3组分别为0.1004±0.0091、0.1890±0.0100、0.2456±0.0179,F=197.541,P＜0.01);损伤后8 h bax表达达高峰(3组分别为0.1084±0.0041、0.3440±0.0070、0.2472±0.0071,F=1856.199,P＜0.01);3组各时间点的图像分析结果 经单因素方差分析,差异有统计学意义(P＜0.05),治疗组和损伤组比较,bcl-2表达增强而bax表达减弱.结论 Nogo-A抗体治疗脊髓损伤能抑制bax表达,促进bcl-2表达,减轻脊髓继发性损伤.     

半乳糖化磁性阿霉素白蛋白纳米粒对大鼠移植性肝癌模型bcl-2/bax蛋白表达的研究

目的　半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒 (Gal MADM NP)治疗大鼠移植性肝癌对肿瘤细胞凋亡bcl 2及bax蛋白表达的影响。方法　采用SABC法进行免疫组织化学染色观察bcl 2及bax蛋白的表达。结果　注射Gal MADM NP(肿瘤区加磁场 )组免疫组织化学显示bcl 2蛋白表达阳性率 2 3 .5 3 % ,低于ADM组 5 4.5 5 %及NS组 71.43 % (P <0 .0 1) ,bax蛋白表达阳性率88.2 4% ,高于ADM组 45 .45 %及NS组 2 8.5 7%。结论　Gal MADM NP组在适当外加磁场的作用下 ,能够降低bcl 2蛋白表达 ,增加bax蛋白表达 ,促进移植肝癌肿瘤细胞凋亡。