Rxa对L02细胞增殖的细胞周期分析和对Ki-67、CyclinD1、PCNA蛋白表达的影响

目的　探讨丹参提取物Ｒｘａ 对正常肝细胞（Ｌ０２ 细胞） 增殖速率的影响。方法　应用流式细胞术（ＦＣＭ）分别测定Ｌ０２ 细胞Ｒｘａ 处理组（Ｌａ 组） 和未处理组（Ｌ组）０、２、４、８、１２ 小时Ｇ０Ｇ１ 、Ｓ、Ｇ２Ｍ 期细胞指数,同步进行Ｋｉ６７、Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１ 、ＰＣＮＡ 蛋白表达的免疫组化分析。结果　Ｌａ 组细胞增殖速率较快,Ｋｉ６７ 抗原表达相对较强,ＣｙｃｌｉｎＤ１、ＰＣＮＡ 表达相对提前。结论　Ｒｘａ 可能促进Ｌ０２ 细胞增殖。     

消炎痛对人肝癌MHCC97L细胞增殖和细胞周期的影响

目的 观察消炎痛(Indomethacin)对有转移潜能的人肝癌MHCC97L细胞增殖和细胞周期的影响.方法 采用0.1、0.2、0.5 mmol/L消炎痛分别作用于MHCC97L细胞,观察细胞增殖、克隆形成率、形态学、生长曲线、流式细胞术分析(FCM).结果 消炎痛明显抑制MHCC97L细胞增殖和克隆形成,呈良好的剂量.效应关系.0.1、0.2、0.5 mmol/L消炎痛处理组细胞增殖抑制率依次升高,克隆形成率依次降低(P均<0.01),镜下可见明显的形态学改变.其中,0.5 mmol/L消炎痛组24、48、72 h细胞增殖抑制率分别为50.6%、47.1%、43.4%;集落形成率为(0.00±0.00)%.0.1、0.2、0.5 mmol/L消炎痛处理组细胞倍增时间分别为110.1、199.3、-614.2 h,与对照组(58.6 h)比较,0.1、0.2 mmol/L消炎痛处理组细胞倍增时间分别延长了2.17倍和3.40倍,而0.5mmol/L消炎痛处理组第6天的细胞均数[(3.4±0.4)×104个]少于初始细胞数(4×104个)结果细胞倍增时间为负值而无法计算.FCM显示,G1期细胞比例随消炎痛浓度增加而增加,S+G2期细胞比例随消炎痛浓度增加而降低(P均<0.01).结论 在一定条件下,消炎痛可抑制人肝癌MHCC97L细胞增殖和克隆形成,其作用部分是通过使细胞周期阻滞在G1期实现.     

SFPQ在肝细胞癌的表达及其对细胞增殖与细胞周期的影响

目的:探讨脯氨酸、谷氨酰胺剪接因子(SFPQ)在肝细胞癌(HCC)中的表达及作用。方法:采用实时定量PCR及Western blot检测HCC患者的癌组织和对应癌旁组织SFPQ mRNA及蛋白表达。采用TCGA和GEO数据库分析正常肝组织及HCC组织中SFPQ的表达丰度差异;采用TCGA数据库分析SFPQ表达与HCC患者临床分期、病理分级以及患者生存期的关系以及与增殖基因PCNA、Ki-67和周期蛋白CCNE1、CDK2的相关性。观察敲低HCC细胞株HepG2及Hep3B中SFPQ的表达后增殖能力与细胞周期的变化。结果:组织标本分析结果显示,SFPQ mRNA及蛋白表达水平在HCC组织中明显高于癌旁组织(均P0.05)。数据库分析结果显示,HCC组织中SFPQ mRNA表达丰度明显高于正常肝组织,且患者临床分期及病理学分级越高,SFPQ mRNA水平越高,高表达SFPQ的患者的总生存率明显降低,SFPQ mRNA表达与PCNA、Ki-67、CCNE1、CDK2的表达均呈明显正相关(均P0.05)。敲低SFPQ表达后,HepG2及Hep3B细胞的增殖能力明显减弱,并出现明显G1期阻滞(均P0.05)。结论:SFPQ在HCC中表达升高,升高的SFPQ可通过调节HCC细胞周期,促进HCC细胞的增殖,加速肿瘤进展。     

Losartan对血管平滑肌细胞增殖和血小板衍化生长因子及c—my …

目的 探讨血管紧张素受体拮抗剂－Ｌｏｓａｒｔａｎ治疗高血压,动脉粥样硬化等心血管疾病的细胞作用机制。方法 运用免疫荧光组织化学技术和激光共聚焦显微镜定量观察Ｌｏｓａｒｔａｎ作用下的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）中细胞核增殖抗原（ＰＣＮＡ）,ＰＤＧＦ和ｃ－ｍｙｃ癌基因表达变化的影响。结果 Ｌｏｓａｒｔａｎ作用下,ＶＳＭＣ中的ＰＣＮＡ,和ｃ－ｍｙｃ癌基因的平均荧光值增低于对照组,而ＰＤＧＦ的平均荧光值与对     

丙谷胺联合NS-398对人大肠癌LoVo细胞增殖和细胞周期的影响

目的：研究胃泌素受体拮抗剂（丙谷胺）联合环氧合酶．2抑制剂（NS-398）对人大肠癌LoVo细胞增殖和细胞周期的影响。方法：人大肠癌LoVo细胞株培养于RPMI1640培养液中,加入丙谷胺6个稀释度1．O、3．0、5．0、6．0、8．0、10．0mmol／L及NS-3986个稀释度0．01、0．1、1．0、10．0、100．0、1000．0μmol／L连续培养24h后用噻唑蓝（MTT）比色实验检测肿瘤细胞增殖抑制率;单用丙谷胺稀释度为6mmol／L,单用NS-398稀释度为100．0μmol／L及两者的混和液作用24、48、72h后检测肿瘤细胞抑制率;单用丙谷胺稀释度为6mmol／L,单用NS-398稀释度为100．0μmol／L以及2者的混和液作用24h后,用流式细胞仪测定细胞周期的变化。结果：丙谷胺与NS．398均能抑制LoVo细胞株增殖,丙谷胺与NS-398能协同作用,抑制大肠癌LoVo细胞增殖,且协同作用随药物作用时间的延长而增强。流式细胞仪检测表明两者均能抑制大肠癌LoVo细胞从G1期到S期的转化,两者联合用药抑制效果更为显著。结论：丙谷胺与NS-398均能抑制大肠癌LoVo细胞从G1期到S期的转化从而抑制LoVo细胞株的增殖,两者合用具有协同抗癌作用。     

原发性肝细胞癌中细胞周期G1期相关基因CyclinD1的表达及其临床？…

目的 研究原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）中ＣｙｃｌｉｎＤ１基因的表达及其与ｐ５３基因、肝癌细胞增殖活性的关系，探讨其在ＨＣＣ的发生，发展中可能的作用。方法 应用免疫组织化学及定量ＤＮＡ图像分析的方法，检测ＣｙｃｌｉｎＤ１，Ｐ５３基因在３２例ＨＣＣ和６例正常肝组织中的表达，并分析ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白的表达与肝癌细胞增殖活性的关系。结果 肝癌组织中ｃｙｃｌｉｎＤ１蛋白的过表达率明显高于癌旁肝组织（７１．８％     

保肾片对人系膜细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响

目的 :探讨对慢性肾衰竭治疗有效的中药复方保肾片对人系膜细胞生物学行为的影响。方法 :以健康志愿者服用保肾片 ,取不同浓度含药人血清加入系膜细胞培养体系中。应用MTT法和流式细胞仪检测系膜细胞增殖、凋亡和细胞周期。结果 :含中药保肾片的血清组 ,与正常人血清对照组相比 ,显著抑制人系膜细胞增殖 (P <0 .0 5 ) ,并且使大量系膜细胞阻滞在G0 /G1期 ,能诱导人系膜细胞发生凋亡。结论 :保肾片延缓慢性肾衰竭进展的作用机理之一是抑制系膜细胞增殖和促其凋亡。     

白细胞介素-13对肾小球系膜细胞增殖及细胞周期的影响

目的：探讨白细胞介素—13(IL—13)对肾小球系膜细胞(MC)增殖及其细胞周期的影响。方法：用甲基偶氮唑法(MTT)测定MC增殖，流式细胞术分析细胞周期。结果：IL—13在1ng／ml、5ng／ml、10ng／ml、100ng／ml浓度范围呈剂量依赖性抑制5％FCS培养的和脂多糖(LPS)诱导的MC增殖，抑制率分别为19．8％和29．23％、24．35％和37．05％、30．03％和46．6％、46．93％和55．23％。IL—13作用MC48h，使MC较多滞留于G1期，而S期细胞减少。结论：IL—13通过参与细胞周期的调控而抑制MC增殖。     

积雪草苷对烧伤创面愈合中细胞周期蛋白、增殖细胞核抗原表达的影响

目的　探讨积雪草苷 (asiaticoside)在烧伤创面愈合过程中对细胞周期蛋白B1(CyclinB1)、细胞周期蛋白C(CyclinC)及增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的影响。方法　建立Waster大鼠深Ⅱ°自身对照烫伤模型 ,分为积雪草苷治疗组和对照组。采用免疫组织化学方法 ,检测创面愈合过程中CyclinB1、CyclinC及PCNA表达水平。 结果　积雪草苷组在伤后第 3天开始有CyclinB1表达于基底细胞层。第 5天表达明显高于对照组 (P <0 .0 1)。PCNA免疫组织化学结果与CyclinB1表达一致 ,积雪草苷组在伤后第 5天表达明显高于对照组 (P <0 .0 1)。而CyclinC在积雪草苷治疗组和对照组于伤后第 4天胞核表达明显增多 ,但两组差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论　积雪草苷能有效促进CyclinB1和PCNA的表达 ,使细胞周期的S +G2 期明显提前 ,从而加快细胞增殖 ,促进创面愈合。     

人骨形成蛋白-2对人脑胶质瘤细胞增殖细胞周期的影响及其抑瘤作用

本研究旨在观察人骨形成蛋白(ＢＭＰ) 2对人脑胶质瘤细胞增殖、细胞周期的影响及其抑瘤作用 ,现将结果报道如下。一、材料和方法1.材料 :人脑胶质瘤细胞系ＳＨＧ 44由本所保存。 18只ＢＡＬＢ/Ｃ胸腺缺陷裸小鼠 ,4～ 6周龄 ,体重 (18± 2 )ｇ ,购自本校动物实验中心。重组人骨形成蛋白 2 (ｒｈＢＭＰ 2 )由本校生物化学教研室蒲勤博士提供 ,16 40培养基及胰蛋白酶购自Ｇｉｂｃｏ公司。四甲基唑蓝 (ＭＴＴ)及二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ)购自华美生物公司。2 .细胞培养 :参照司徒镇强[1] 方法。3.ＭＴＴ实验 :以 5× 10 3 个对数生长期细胞接种于…     

地氟醚,七氟醚和异氟醚对原代培养肝细胞增殖及分泌白蛋白？…

目的：本研究采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入方法，观察地氟醚、七氟醚和异氟醚对肝细胞增殖和分泌白蛋白功能的影响，旨在从细胞生物学水平探讨卤族吸入全麻药肝毒性的作用机制。方法：肝细胞分离培养，经地氟醚、七氟醚或异氟醚作用后，固相膜片法测定肝细胞增殖功能。ＥＬＩＳＡ法测定培养液中Ａｌｂ分泌量。结果：地氟醚组在临床剂量和超临床剂量对肝细胞增殖功能和Ａｌｂ分泌均无明显影响，七氟醚和异氟醚组在临床剂量对增殖和Ａｌｂ分     

正常和异常肝组织增生中细胞增殖与凋亡的关系

目的 探讨正常和异常肝细胞增生过程中,细胞周期调控下细胞增殖与凋亡关系的异同。方法 分别以大鼠肝切除后肝再生和二乙基亚硝胺（DEN）诱导的大鼠肝癌为正常（40只）及异常（60只）组织增生模型;以Ki-67抗原检测和Sub-G1法分别作为细胞增殖和细胞凋亡定量分析方法：凋亡细胞比例（Ap）与Ki－67阳性细胞比例（Ki）之比值（Ap/Ki）为描述两者关系的指标。结果 肝再生和诱癌发生肝硬化以前的Ap和Ki基本呈正比关系,Ap/Ki峰值出现。结论 细胞增殖和细胞凋亡相伴相随,始终贯穿于正常或异常肝组织增生的全过程;对正常组织增生,细胞凋亡可限制其增生速度和规模。对异常组织增生,还监测和清除异常细胞;应以Ap/Ki作为衡量细胞凋亡在组织增生各时期所具有作用之重要指标。     

灵芝对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖及细胞周期的影响

目的：探讨灵芝对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞（MCs）增殖及细胞周期的影响。方法：用不同浓度的灵芝作用于高糖培养的MCs,采用MTT法观察其增殖情况,并通过流式细胞仪检测其细胞周期变化,MODIFIT LT软件分析。结果：（1）高糖组与正常组比较有统计学差异（P〈0.05）;其余各组与正常组比较无统计学差异（P〉0.05）,与高糖组比较有统计学差异（P〈0.05）,48h与24h比较有统计学差异（P〈0.05）,72h与48h、24h比较有统计学差异（P〈0.05）。苯那普利组与灵芝组比较无统计学差异（P〉0.05）。（2）培养48h时,高糖组相对于正常对照组G0-G1期细胞比例降低,S期细胞比例增高,细胞凋亡受到抑制（P〈0.05）;而不同浓度的灵芝、苯那普利均减低了高糖对系膜细胞的这种作用,使G0-G1期细胞比例增高,S期细胞数减少,促进过度增殖的系膜细胞凋亡（P〈0.05）。结论：灵芝通过抑制高糖诱导的MCs增殖并促使其凋亡,发挥对糖尿病肾病的保护作用。     

白藜芦醇对大鼠系膜细胞增殖和细胞周期的影响

目的：探讨白藜芦醇（resveratrol,Res）体外对大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞周期分布的影响。方法：采用四甲基氨唑蓝法（MTT）检测Res处理后系膜细胞的增殖情况,用流式细胞仪分析经25,75,150,300μmol/LRes分别作用48h后大鼠系膜细胞周期分布的改变。结果：Res体外能显著抑制大鼠肾小球系膜细胞的生长增殖,且在一定范围内呈浓度-时间依赖性。Res作用后细胞G0/G1期比例下降,S期比例上调,G2/M期未见规律性改变。结论：Res在体外能显著抑制大鼠肾小球系膜细胞的增殖,引起细胞周期重新分布可能是Res抑制大鼠系膜细胞增殖的机制之一。     

3-甲基腺嘌呤对大鼠内皮祖细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的 观察3-甲基腺嘌呤(3-methlyadenine,3-MA)对大鼠骨髓源性内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法 密度梯度法取大鼠骨髓EPCs,体外诱导分化并鉴定.实验分对照及不同浓度(1.25、2.5、5、10 mmol/L)3-MA组.四氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测细胞增殖,流式细胞仪测凋亡率及细胞周期.结果 (1)5 mmol/L组促EPCs增殖;10 mmol/L组抑制EPCs增殖,差异有统计学意义(P＜0.05).其余两组对EPCs增殖无明显影响,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)10 mmol/L组促EPCs凋亡,差异有统计学意义(P＜0.05).其余各组对EPCs凋亡率无明显影响,与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).(3)5、10 mmol/L组影响细胞周期,5 mmoL/L组G0/G1期细胞减少、S和G2/M期增加;10 mmol/L组发生S期阻滞,G2/M细胞减少;差异有统计学意义(P＜0.05).结论 3-MA对EPCs增殖及凋亡的影响与其浓度有关,当浓度为10 mmol/L时抑制增殖并促进凋亡.

Abstract：

Objective To investigate the effect of proliferation,apoptosis and cell cycle of 3-MA on rat endothelial progenitor cells. Methods Bone marrow-derived mononuclear cells were isolated from rat bone marrow by ficoll. There were five groups. The control group and four 3-MA concentration groups: 1. 25 mmol/L,2. 5 mmol/L,5 mmol/L, 10 mmol/L. MTT was used to measure the proliferation of endothelial progenitor cells. Flow cytometry ( FCM) was used to detect cell apoptosis and cell cycle. Results (1)5 mmol/L 3-MA promotes proliferation of endothelial progenitor cells, while 10 mmol/L 3-MA inhibits the proliferation of endothelial progenitor cells (P ＜ 0. 05). (2) 10 mmol/L 3-MA promotes apoptosis of endothelial progenitor cells, compared with the control, the difference was significant ( P ＜ 0. 05 ). (3) 3-MA at the concentration of 5 mmol/L reduces cells at G0/G1 phase and increases S and G2/M phase cells; 10 mmol/L 3-MA induces endothelial progenitor cells blockade at S phase, G2/M phase cells decreased, compared with the control, the difference was significant (P ＜ 0. 05). Conclusions 5 mmol/L 3-MA promotes the proliferation of endothelial progenitor cells. 10 mmol/L 3-MA inhibits the proliferation and promotes apoptosis of endothelial progenitor cells.     

9-硝基喜树碱及其脂质体对HepG2、L02细胞周期和凋亡作用的研究

目的 研究9-硝基喜树碱及其脂质体对人肝癌细胞株HepG2和人正常肝细胞L02细胞周期、凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 HepG2、L02细胞用含不同浓度9-硝基喜树碱及其脂质体的培养液孵育后,利用MTT法测定细胞活性,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,WesternBlot验证周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达变化.结果 9-硝基喜树碱及其脂质体对两种细胞生长呈时间和剂量依赖性抑制.药物处理后S期和G2/M期细胞明显增多,浓度大于0.1 μmol/L时24 h后HepG2细胞完全阻滞于S期;0.1 μmol/L孵育72 h后,超过95%HepG2细胞阻滞于G2/M期.药物对细胞凋亡的诱导作用也呈明显的剂量和时间依赖关系.Western Blot显示:Bax、Caspase3表达增高,Cyclin A、Cdk2、Cyclin E、Bcl-2表达减低.与L02相比,HepG2细胞对药物更加敏感.结论 9-硝基喜树碱及其脂质体可以通过调控细胞周期和诱导凋亡有效抑制细胞生长,其对肿瘤细胞的抑制作用强于正常肝细胞.9-硝基喜树碱脂质体体外抗肿瘤效果略强于9-硝基喜树碱单体.

Abstract：

Objective To investigate the modulating effects and explore their mechanism of 9-nitrocamptothecin and its liposomes to induce apoptosis and inhibit cell cycle in HepG2 and L02 cell lines. Methods Cells were incubated with 9-nitrocamptothecin(9NC) or with 9-nitrocamptothecin liposomes for 24 h, 48 h and 72 h, then, the cell viability was measured via MTT assay; cell cycle and apoptosis was evaluated by flow cytometry after stained by PI and Annexin V-PE/7AAD. Additional, Western Blot was used to evaluate the expression of cell cycle and apoptosis related protein. Results Both cells viability were apparently inhibited by the 9-nitrocamptothecin and 9-nitrocamptothecin liposomes, the inhibitory effect showed a time-dependent and dose-dependent manner. Both S and G2/M phases arrest were observed after incubated with drugs. HepG2 cell was completely arrested in S phase when 9NC concentration over than 0. 1 μmol/L after incubation for 24 h, while more than 95% cells arrested in G2/M phase when 9NC concentration is 0. 1 μmol/L after incubation for 72 h. Apoptosis induction effect also showed a time-dependent and dose-dependent manner. Western Blot results showed the expression of Bax and Caspase-3 were upregulated while Cyclin A, Cdk2, Cyclin E and Bcl-2 were downregulated. More importantly, the compounds were more cytotoxic to the cancer cell lines than to the normal liver cell. Conclusions 9-nitrocamptothecin and 9-nitrocamptothecin liposomes can potently inhibit cell growth via regulation of cell cycle and induction of apoptosis, and this effect was preferentially in cancer cell. Inhibitory of 9-nitrocamptothecin liposomes was slightly better than the 9-nitrocamptothecin.     

丹参和川芎嗪对瘢痕成纤维细胞DNA含量及细胞周期进程的影响

应用流式细胞光度分析法测定丹参和川芎嗪对体外培养的瘢痕成纤维细胞ＤＮＡ相对含量和细胞周期时相变化，发现药物在一定浓度作用下，ＤＮＡ指数无明显变化；丹参使Ｃ２Ｍ期细胞分布增多，Ｇ２Ｍ期延长；川芎嗪使Ｇ２Ｍ期细胞分布增多，Ｇ２Ｍ期、Ｓ期延长；药物使细胞群体倍增时间延长，与浓度呈明显直线正相关。认为，丹参能抑制细胞的有丝分裂，川芎嗪能抑制细胞的ＤＮＡ合成、复制和有丝分裂，细胞周期均停滞于Ｇ２Ｍ期     

咖啡酸苯乙酯对大肠癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester,CAPE)对培养的大肠癌SW480细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法不同浓度CAPE处理培养的大肠癌SW480细胞后,采用MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,TUNEL染色观察凋亡细胞。结果CAPE对SW480细胞的生长具有明显的抑制作用,其作用表现为剂量依赖性和时间依赖性。流式细胞仪检测发现2.5、5.0、10mg/L的CAPE对SW480处理24h后,G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,细胞凋亡率上升,呈剂量依赖性。TUNEL染色也发现CAPE作用后凋亡细胞数量增加。结论CAPE对大肠癌SW480细胞株具有明显的增殖抑制作用,其作用机制与阻滞细胞周期G期和诱导细胞凋亡有关。     

游离脂肪酸对大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞周期的影响

目的：探讨游离脂肪酸（FFAs）对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖和生长周期的影响。方法：用不同浓度的游离脂肪酸处理大鼠HBZY-1细胞株（即大鼠肾小球系膜细胞）24h～72h。采用噻唑蓝比色（MTT）法检测内皮细胞增殖情况,流式细胞术（FCM）分析法测定细胞周期变化。结果：游离脂肪酸可抑制HBZY-1细胞的生长增殖（与对照组比较,P〈0.01）,且这种抑制作用具有剂量和时间依赖性;游离脂肪酸作用于HBZY-1细胞24h、48h、72h,细胞周期发生明显改变,G1期细胞数增多,S期细胞数减少（与对照组比较,P〈0.01）。结论：游离脂肪酸可通过停滞细胞生长于G1期,抑制大鼠肾小球系膜细胞的生长增殖。