利培酮抑制结肠癌细胞株SW480生长的作用机制

目的:探讨利培酮对人结肠癌细胞株SW480生长抑制的作用机制及其相关研究.方法:表皮生长因子和利培酮单独或联合作用于SW480细胞,通过蛋白印迹实验观察蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)及细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)磷酸化程度,利用RT-PCR判断细胞因子信号转导抑制因子基因表达水平,利用显微镜及细胞计数方法判断细胞生长情况.结果:利培酮抑制人表皮生长因子诱导的结肠癌细胞株SW480细胞的生长;其机制是通过激活ERK1/2的活性并诱导SOCS3的基因的表达,从而抑制PKB的磷酸化,最终抑制SW480的生长.结论:利培酮具有抑制表皮生长因子对人结肠癌细胞株的生长作用.     

miR-193b对结肠癌细胞侵袭转移的影响及其机制

目的探讨miR-193b对结肠癌细胞侵袭转移能力的影响及其可能的作用机制。方法 RT-PCR检测高转移细胞系SW620、低转移细胞系中SW480 miR-193b的表达,同时设计miR-193b siRNA及miR-193b利用脂质体2000转染入细胞内,并通过RT-PCR检测其转染效率,利用体外划痕及Transwell实验验证转染miR-193b siRNA及miR-193b后对肿瘤细胞的侵袭转移能力的影响,利用Western印迹验证miR-193b对尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)的影响。结果 RT-PCR结果显示miR-193b在高转移细胞系SW620中表达水平显著低于转移细胞系SW480;RT-PCR检测转染效率的结果显示转染miR-193b-siRNA的SW480细胞中miR-193b的表达较对照显著降低,而在转染mimic-miR-193b的SW620细胞中其表达水平明显升高;体外划痕实验结果显示SW480-miR-193b-siRNA细胞体外迁移能力显著升高,而在转染mimic-miR-193b的SW620细胞中其迁移能力较对照组显著降低;Transwell小室结果显示体外细胞侵袭及迁移实验中过表达miR-193b均可明显抑制SW620细胞的侵袭转移能力,而抑制miR-193b的表达可显著增加SW480侵袭转移潜能;Western印迹显示过表达miR-193b可显著降低SW620细胞中uPA蛋白的表达,抑制miR-193b可明显提高SW480中uPA蛋白的表达水平。结论 miR-193b通过下调uPA可抑制结肠癌细胞的侵袭和转移。     

候选分子抑制癌细胞扩散

通过对有5万多“小分子”的库进行筛选,发现了一个潜在的候选分子,可以抑制癌细胞扩散到全身。细胞在我们的身体中经历生长,分裂和死亡的连续过程,但是,当这一过程中出现差错,会导致不受控制的细胞生长和肿瘤发展。不加制止的话,这种增长首先表现为一个局部肿瘤,但最终癌症将“发生转移”,侵犯周围组织器官。癌症转移造成的死亡超过90％。     

肠胃清口服液抑制结肠癌细胞LS-174T侵袭转移的体外研究

[目的]研究肠胃清口服液在体外抑制结肠癌细胞侵袭转移的作用。[方法]SD大鼠肠胃清连续灌胃给药3c1后断头取血．分离血清？M1v】、法检测结肠癌细胞LS174T与人工基底膜的黏附能力;划痕试验测定细胞的运动能力：浸润杯试验法研究细胞的浸润能力。[结果]肠胃清药物血清可以有效地抑制肿瘤细胞黏附能力[半数有效浓度（EC50）为90μl／／ml]；抑制LS-174T癌细胞移动（EC50为100μl／ml）：肠胃清药物血清处理过的结肠癌细胞浸润穿过Matrigel膜的细胞数要比对照的细胞数明显减少．100μl/ml肠胃清药物血清对细胞浸润的抑制率达到56％。[结论]肠胃清口服液可以通过抑制结肠癌细胞的黏附、运动、浸润能力．抑制肿瘤的侵袭转移。     

中药抑制结肠癌细胞增殖、促进凋亡的分子机制

结肠癌(colon cancer)已为常见的恶性肿瘤之一,有转移者5年生存率仅有8%。我国传统的中医在治疗结肠癌中,彰显了增效减毒的优势,具有抗肿瘤作用。近年来,中药对结肠癌细胞系体外培养生长的抑制作用、增强机体免疫功能以及对细胞周期、细胞凋亡的影响等进行了有益的探索。本文就中药抑制结肠癌细胞增殖、促进凋亡的分子机制与研究进展作一综述。     

黄连素抑制结肠癌细胞环氧合酶-2的作用

目的 探讨黄连素对结肠癌细胞系HT—29的作用及其相关机制,为阐明黄连素作为一种新的结肠癌化学治疗药物进行理论上的准备并提供相关实验结果。方法 黄连素0．1、0．3、3．0、30．0μmol／L加入到HT—29结肠癌细胞系培养液中,每天测量各有关值。同时以NS—398为环氧合酶(COX-2)活性抑制剂,对比观察黄连素对COX—2活性的影响。采用氮蓝四唑盐实验法检测细胞的生长和增殖,逆转录—PCR法检测COX—2 mRNA,免疫细胞化学法检测COX—2蛋白表达,ELISA法检测前列腺素(PG)E2的含量。结果 黄连素在浓度大于0．3μmol／L时则有明显的量效关系。黄连素在浓度大于0．3μmol／L时对COX—2 mRNA水平和蛋白的表达有明显的抑制作用。黄连素对PGE2的生成有显著抑制作用。结论 黄连素抑制COX—2在mRNA水平和蛋白质水平的表达,同时也抑制COX—2活性,进而抑制PGE2的生成,这可能为黄连素抑制HT—29细胞生长和增殖的机制之一。     

康莱特注射液对老年非小细胞肺癌放疗的增效减毒作用

非小细胞肺癌( NSCLC)患者放疗过程中出现骨髓抑制、消化道反应、放射性食管炎、放射性肺炎等不良反应影响到患者化疗效果.本文拟观察康莱特注射液在晚期NSCLC患者化疗中的增效减毒作用,为其临床应用提供依据.1 资料与方法1.1 一般资料 我院2008年12月至2010年12月NSCLC患者60例,均经病理组织学或细胞学检查证实,均为年龄较大不宜手术或者拒绝手术患者,同时排除心肝肾等器官功能障碍.肿瘤患者生存质量评分标准评分均大于60分.其中观察组30例,男18例,女12例,年龄60～ 79岁[平均(65.3±5.8)]岁;病理分型:鳞癌16例,腺癌12例,腺鳞癌1例,大细胞癌1例.TNM分期:其中Ⅲb期17例,Ⅳ期13例;初治11例,复治19例.对照组30例,男17例,女13例,年龄60 ～78[平均(64±6.3)]岁;病理分型:鳞癌14例,腺癌13例,腺鳞癌2例,大细胞癌1例.TNM分期:其中Ⅲb期17例,Ⅳ期13例;初治和复治患者各15例.两组患者在性别、年龄、病理分型、分期等方面无显著差异,具有可比性.     

槐耳清膏对结肠癌细胞生长和迁移的影响及其作用机制

目的中药槐耳清膏具有抗肿瘤效应,但其对结肠癌的作用及机制尚不清楚。本研究旨在探讨槐耳清膏对人结肠癌细胞生长和迁移的影响及作用机制。 方法体外培养人结肠癌细胞系HCT116,采用MTT法检测槐耳清膏对肿瘤细胞生长的抑制作用;采用Boyden趋化小室检测槐耳清膏对肿瘤细胞迁移能力的影响;采用荧光定量PCR法检测药物对MMP-9表达的影响;应用流式细胞技术检测药物对细胞凋亡和细胞周期的影响。 结果槐耳清膏对HCT116细胞生长有明显的抑制作用,该抑制作用具有药物剂量和时间依赖性。与细胞共培养96小时后,槐耳淸膏的抑制作用最强;与对照组相比,10 mg/mL、20 mg/mL和30 mg/mL槐耳淸膏对肿瘤细胞的抑制作用分别为25%(P＝0.025),42%(P＝0.032)和67%(P＝0.018)。槐耳清膏能明显抑制肿瘤细胞的迁移,11 mg/mL药物的抑制率为63%(P＝0.01);槐耳清膏(8mg/mL和11mg/mL)处理后的肿瘤细胞中MMP-9的表达量下降(2.73±0.32 vs 4.8±0.36,P＝0.02;1.46±0.25 vs 4.8±0.36,P＝0.004);槐耳清膏可阻滞细胞停留在S期,但对细胞凋亡无明显影响。 结论体外试验证实槐耳清膏对结肠癌细胞的生长及迁移能力具有抑制作用,其作用机制可能是阻滞细胞停留在S期和下调MMP-9的表达。     

生长抑素抑制胰岛素分泌作用的分子机制

为探讨生长抑素抑制胰岛素分泌的分子机制，我们以ＨＩＴ细胞为模型进行体外实验，系统全面地探讨了其对胰岛素分泌、钙离子跨膜电流、细胞内钙离子浓度、细胞内钾离子外流以及ＨＩＴ细胞腺苷酸环化酶和ｃＡＭＰ水平的影响。发现生长抑素能在不影响ＨＩＴ细胞腺苷酸环化作用以及细胞内外钾离子分布的情况下剂量依赖性地抑制细胞胰岛素的分泌，同时伴有钙离子跨膜流动和细胞内钙离子水平的升高。百日咳毒素可拮抗生长抑素的这种抑制作用。这些资料表明，抑制细胞外钙离子通过百日咳毒素敏感性的Ｇ－蛋白调节的电压依赖性钙离子通道进入胰岛素分泌细胞，是生长抑素抑制胰岛素分泌的重要分子机制之一。     

尼美舒利抑制结肠癌LOVO细胞增殖及转移的机制

目的 研究选择性COX2抑制剂尼美舒利(Nimesulide)对结肠癌细胞株LOVO生长的影响以及其参与抑制肿瘤血管转移的可能机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察尼美舒利对结肠癌细胞增殖的抑制,电镜下观察尼美舒利作用后细胞的超微结构变化,ELISA法检测尼美舒利对上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的影响.结果 MTT显示尼美舒利能抑制LOVO的增殖,呈剂量和浓度依赖性.0.2 mmol/L尼美舒利作用72 h后电镜观察可见典型的凋亡小体.尼美舒利作用后上清液中VEGF的含量呈剂量依赖性下调.结论 尼美舒利可抑制结肠癌细胞株LOVO的生长,促进其凋亡,还可下调细胞上清中的VEGF含量,推测其通过抑制VEGF释放,从而抑制肿瘤的生长及浸润转移.     

The inhibition effect and its molecular mechanism of human cervical cancer oncogene siRNA on hepatocarcinoma cells

OBJECTIVE: To evaluate the effect and the possible mechanism of HCCR siRNA on cell proliferation and apoptosis of hepatocarcinoma cells. METHODS: pRIV2-siHCCR plasmids, which express small interfering RNA of HCCR were constructed and transfected into HepG2 cells. The mRNA and protein expressions of HCCR were detected by real time PCR and Western blot. The proteins p15, p16, p27, p53, and PTEN were detected by Western blot. The cell proliferation and apoptosis were observed by MTT and FACS. RESULTS: The plasmid pRIV2-siHCCR was constructed successfully. Real time PCR and Western blot analysis showed that the HCCR siRNA effectively inhibited HCCR expression in HepG2 cells after pRIV2-siHCCR transfection. MTT method confirmed that HepG2 cell proliferation was suspended, while the cell apoptosis was increased much more than that in the control group. After the transfection with the plasmid of pRIV2-siHCCR into HepG2 cells, the expression of p53 protein was decreased, and P15 increased; and levels of PTEN, p16, and p27 were evidently not changed. CONCLUSION: After being transfected with HCCR siRNA expression plasmid, the cell proliferation of HepG2 was arrested, while the apoptosis of HepG2 cells increased. Our results demonstrate the potential role of p53 and p15 in HCCR signaling.     

ERK1／2抑制剂PD98059对大肠癌细胞侵袭和转移的影响

目的观察细胞外信号调节蛋白激酶（ERK1／2）抑制剂PD98059对大肠癌细胞侵袭和转移的影响,探讨其可能机制。方法PD98059不同浓度（0、10、20、40μmo1／L）干预大肠癌细胞24h。用Boyden小室检测其体外运动和侵袭能力,Western blot法检测ERK1／2磷酸化蛋白和ERK1／2蛋白表达情况。结果随着PD98059剂量增大,大肠癌细胞穿膜数逐渐减少（P〈0．05）,磷酸化ERK1／2蛋白水平逐渐降低（P〈0．05）,ERK1／2蛋白水平无明显变化（P〉0．05）。结论PD98059能抑制大肠癌细胞的运动和侵袭力;其机制与PD98059抑制磷酸化ERK1／2有关。     

青蒿琥酯对人结肠癌HCT-8细胞诱导血管新生的影响及机制探讨

目的观察青蒿琥酯对人结肠癌HCT-8细胞诱导血管新生的影响,并探讨其作用机制。方法采用大鼠主动脉环体外培养实验和鸡胚绒毛尿囊膜体内血管生长实验观察青蒿琥酯对人结肠癌HCT-8细胞诱导血管新生的影响。采用Western blot法检测青蒿琥酯作用前后人结肠癌HCT-8细胞的血管内皮生长因子(VEGF)、血管生成素-2(Ang-2)蛋白。结果青蒿琥酯可明显减少HCT-8细胞诱导的血管生成。HCT-8细胞高表达VEGF、Ang-2蛋白,青蒿琥酯呈剂量依赖方式下调HCT-8细胞VEGF、Ang-2蛋白的表达(P均<0.05)。结论青蒿琥酯具有抗人结肠癌HCT-8细胞诱导血管新生的效应,与青蒿琥酯抑制HCT-8细胞的VEGF、Ang-2蛋白表达有关。     

人宫颈癌基因小干扰RNA抑制HepG2细胞生长的作用及其机制

目的 利用RNA干扰技术探讨人宫颈癌基因(HCCR)对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能的分子机制. 方法 构建表达HCCR小干扰RNA的真核表达质粒pRIV2-siHCCR,将其转染肝癌细胞株HepG2细胞,定量PCR、Westem blot检测HCCR及其相关基因的表达,四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖状态,流式细胞术观察细胞凋亡与细胞周期变化. 结果 成功构建真核表达质粒pRIV2-siHCCR,其表达的HCCR siRNA可有效抑制HepG2细胞内HCCR的表达,细胞增殖受到抑制,细胞凋亡增加.Western blot结果显示HCCR小干扰RNA作用HepG2细胞后,细胞内P53蛋白的表达降低,P15蛋白的表达明显升高,而PTEN、P16、P27蛋白水平没有明显改变. 结论 HepG2细胞中HCCR蛋白下调后,细胞增殖受到抑制,凋亡细胞增多,其作用机制可能与蛋白质P53、P15有关.     

Possible mechanism for the regulation of glucose on proliferation, inhibition and apoptosis of colon cancer cells induced by sodium butyrate

AIM： To study the effect of glucose on sodium butyrate- induced proliferation inhibition and apoptosis in HT-29 cell line, and explored its possible mechanisms.
METHODS： HT-29 cells were grown in RPMI-1640 medium supplemented with 10% fetal calf serum, and were allowed to adhere for 24 h, and then replaced with experimental medium. Cell survival rates were detected by MTr assay. Apoptosis was detected by TUNEL assay. Glucose transport protein 1 （GLUT1） and monocarboxylate transporter 1 （MCT1） mRNA expression was detected by RT-PCR. RESULTS： Low concentration of glucose induced apoptosis and regulated proliferation in HT-29 cell line, and glucose can obviously inhibit the effect of proliferation inhibition and apoptosis induced by sodium butyrate. Glucose also down-regulated the expression of MCT1mRNA （0.28 ± 0.07 vs 0.19± 0.10, P 〈 0.05）, and decreased the expression of GLUTlmRNA slightly （0.18 ± 0.04 vs 0.13 ± 0.03, P 〈 0.05）.
CONCLUSION： Glucose can regulate the effect of proliferation inhibition and apoptosis induced by sodium butyrate and this influence may be associated with the intracellular concentration of glucose and sodium butyrate.     

葡萄糖影响丁酸钠诱导结肠癌细胞凋亡和增殖抑制作用及其可能机制

目的观察葡萄糖对丁酸钠诱导结肠癌细胞凋亡和增殖抑制作用效果的影响,并探讨这种影响的可能机制。方法细胞生存率的检测采用MTT法,流式细胞仪法检测细胞凋亡。RT-PCR方法检测单羧酸转运蛋白1（MCT1）和葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）mRNA的表达情况。结果低葡萄糖浓度培养条件下可以诱导结肠癌细胞HT-29凋亡,并影响其生长,且葡萄糖能够明显抵制丁酸钠诱导凋亡和增殖抑制作用,同时葡萄糖轻度抑制GLUT1 mRNA表达,对MCT1 mRNA也有一定抑制作用。结论葡萄糖浓度变化能够明显影响丁酸钠诱导凋亡和增殖抑制作用,这种影响可能与葡萄糖和丁酸钠在细胞内浓度变化有关。     

Advances in understanding the molecular mechanism of pancreatic cancer metastasis

BACKGROUND: Pancreatic cancer (PC) is usually diagnosed at the late-stage and therefore, has widespread metastasis and a very high mortality rate. The mechanisms underlying PC metastasis are not well understood. Recent advances in genomic sequencing have identiifed groups of gene mutations that affect PC metastasis, but studies elucidating their roles are lacking. The present review was to investigate the molecu-lar mechanisms of PC metastasis.
DATA SOURCES: Relevant articles on PC metastasis were searched in MEDLINE via PubMed prior to April 2015. The search was limited in English publications.
RESULTS: PC metastatic cascades are multi-factorial events including both intrinsic and extrinsic elements. This review highlights the most important genetic alterations and other mechanisms that account for PC invasion and metastasis, with particular regard to epithelial-mesenchymal transition, inlfammation, stress response, and circulating tumor cells.
CONCLUSIONS: Analyses of relevant gene functions and signaling pathways are needed to establish the gene regula-tory network and to deifne the pivotal modulators. Another promising area of study is the genotyping and phenotyping of circulating tumor cells, which could lead to a new era of per-sonalized therapy by identifying speciifc markers and targets.