HGV/GBV-C与HCV混合感染者肝组织中相关病毒抗原表达

庚型肝炎病毒(HGV/GBV-C)的致病性是目前研究焦点之一,多数研究表明大多数HGV/GBV-C感染者体内常有两种或两种以上的肝炎病毒混合感染,并认为HGV/GBV-C感染对原有乙型肝炎病毒(HBV)或丙型肝炎病毒(HCV)感染的基础病变似无明显影响[1-3].但仅从血清学、临床表现及常规病理角度试图说明HGV/GBV-C对机体有无损害的研究工作是很困难,我们应用免疫组织化学技术对HGV/GBV-C与HCV混合感染者肝组织中HGV/GBV-C.HCV相关抗原表达进行研究,试图从免疫病理学角度探讨HGV/GBV-C对机体肝脏的致病性.     

HGV/GBV-C与HCV混合感染者肝组织中相关病毒表达的免疫组化研究

目的 了解HGV/GBV-C与HCV混合感染者肝组织HGV/GBV-C相关抗原的分布状况,探讨HGV/GBV-C对肝脏的损害机制。方法 以抗HGV/GBV-C NS5单克隆抗体或抗HCV NS3单克隆抗体为试剂,采用免疫组织化学方法检测肝炎病人肝组织中HGV/GBV-C、HCV相关抗原表达。结果 56例肝炎病肝组织中HGV/GBV-C相关抗原表达阳性率为26.79％(15/56);HCV NS3抗原表达阳性率为39.29％(22/56)。HGV/GBV-C NS5抗原表达阳性信号主要位于肝细胞胞浆中,染色阳性细胞周围可见淋巴细胞浸润。结论 肝细胞中存在HGV/GBV-C相关抗原表达,其编码产物可能作为一种靶抗原,诱发免疫病理反应,免疫损伤可能是其发病机制之一。     

GBV-C/HGV在血清学非甲～戊型急性肝炎发生中的作用

探讨GBV-C/HGV在血清学非甲～戊型急性肝炎发生中的作用及临床意义.采用免疫组化方法对56例血清学非甲～戊型急性肝炎患者肝组织标本进行GBV-C/HGV NS5抗原的检测,结合临床资料进行分析.血清学非甲～戊型急性肝炎肝组织中GBV-C/HGV NS5抗原检出率为53.6%,主要是以和HBV/HCV重叠感染的形式存在,重叠感染组的ALT升高和HBV/HCV感染组差异无显著意义.单纯GBV-C/HGV感染占16.1%,所引起的血清ALT升高明显低于HBV/HCV感染,而与病原不明病例差异无显著意义.GBV-C/HGV可能没有致病性或者有弱致病性,不是血清学非甲～戊型急性肝炎的主要致病因子.     

临床肝病患者中庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)的感染

本文应用抗-HGV酶联免疫法(EIA)和逆转录套式聚合酶链反应法(RT-PCR)检测150份乙型、120份丙型、15份戊型和49份非甲-戊型肝炎患者血清。结果显示:乙肝、丙肝、戊肝和非甲-戊型肝炎患者中抗-HGV抗体的阳性率分别为22.0％(33/150)、25.0％(30/120)、33.3％(5/15)和40.1％(20/49)。其中乙型、丙型、戊型和非甲-戊型肝炎的抗-HGV抗体阳性者中,HGV RNA的阳性率分别为58.3％(7/12)、60.0％(6/10)、40.0％(2/5)和45.5％(9/12)。说明GBV-C/HGV可与HBV、HCV或HEV合并感染,该病毒可能引起临床型肝炎。     

HDV感染后在肝细胞损伤中的作用探讨

通过对ＨＤＶ感染肝组织中ＨＤＡｇ表达和细胞免疫状态的观察发现ＨＤＡｇ表达可在一定程度上直接引起细胞破坏，同时其表达数目与肝组织中炎症有关，特别是与汇管区中ＣＤ＾３＋细胞浸润（ｒ＝０．５２１）和坏死区中ＣＤ８＋细胞浸润（ｒ＝０．４９５）有较好相关性，提示ＨＤＶ的直接细胞毒作用并非是引起肝细胞损伤的唯一因素，细胞免疫特别是ＣＤ８细胞所介导的细胞毒作用在肝细胞损伤也发挥着重要作用。     

庚型肝炎病毒（HGV）感染在原发性肝细胞癌（HCC）发生中作用的探讨

探讨庚型肝炎病毒 (HGV)感染在原发性肝细胞癌 (HCC)发生中的作用。采用RT -PCR法及ELISA法对实验组 (77例HCC患者 ) ,对照 1组 (5 6例健康体检者 )及对照 2组 (38例慢肝肝硬化病人 )分别进行HGVRNA、抗 -HGV和抗 -HCV测定。对随机抽取的实验组 5 8例 ,对照 1组 38例和对照 2组 30例的HGVRNA检测 ,分别查到阳性 3例、2例和 2例。三组间P值均 >0 0 5 ,无显著性差异。三组抗 -HGV检出率分别为 2 5 9%(2 0 / 77) ,7 2 % (4/ 5 6 )和 8 3 % (3/ 36 ) ,实验组与对照 1组P <0 0 1,实验组与对照 2组间P <0 0 5。三组间抗 -HCV检出率分别为 18 1% (14/ 77) ,1 7% (1/ 5 6 )和 2 8% (1/ 36 ) ,2 7例抗 -HGV阳性者中抗 -HCV阳性 12例 ,重叠率 44 4% ,16例抗 -HCV阳性中 11例抗 -HGV阳性 ,重叠率 6 8 7%。结论HGVRNA感染对HCC的发生未见明显作用。抗 -HGV检测难以完全排除抗 -HCV的干扰 ,临床上不应单以抗 -HGV阳性确定HGV感染     

地高辛素标记探针原位杂交法检测肝组织中庚型肝炎病毒RNA

目的自从建立起甲、乙、丙、丁、戊5种肝炎病毒的病原学诊断之后,仍有少部分肝炎患者的病因得不到明确,因此不少学者试图探索是否还有新型肝炎病毒的存在,并进行了大量的流行病学和实验诊断的研究,认为的确存在可经肠道外传播并引起人类肝炎的致病因子.目前关于庚型肝炎病毒(HGV/GBV-C)的致病性和组织嗜性尚无结论性资料.本文目的是研究HGV/GBV-C RNA在肝组织中表达并进一步探讨HGV/GBV-C引起肝脏损害的可能机制.方法应用地高辛素标记HGV/GBV-C cDNA探针原位杂交法检测肝组织中庚型肝炎病毒RNA.结果检测196例肝炎患者肝组织切片中的HGV/GBV-CRNA阳性率为37.24%;在血清中HGV/GBV-CRNA呈阳性患者肝组织中该病毒RNA检出率为48.94%;单一HGV/GBV-C感染者肝组织中检出率为58.33%;阳性信号仅为胞质型.原位杂交信号阳性细胞与肝细胞变性、瘀胆、炎性细胞浸润及细胞坏死程度等并不相关.本文原位杂交与免疫组化两种检测方法对比研究结果表明,两项技术有较高的符合率(86.74%),说明这两项技术具有相辅相成的作用.结论提示HGV/GBV-CRNA并不直接损害肝细胞.原位杂交和免疫组化两项技术成功地应用于石蜡包埋切片,为回顾性研究HGV/GBV-C的致病性及致病机制提供了有价值的实验手段.     

HDV/HBV感染树鼩肝组织中Bcl2/Bax表达和肝细胞凋亡

目的探讨HDV感染树鼩肝组织中Bcl2/Bax表达与HDV感染之间的关系,以及Bcl2/Bax在丁型肝炎肝细胞凋亡中的作用.方法采用免疫组化技术对45份HDV感染树鼩肝组织中HDAg,Bcl2/Bax的表达进行了检测;应用原位末端标记技术对肝细胞凋亡进行检测;并应用免疫组化双重染色对HDAg,Bcl2/Bax的表达以及肝细胞凋亡进行了检测.结果45份肝组织中有33份可检出Bax(阳性率73%),有7份可检出Bcl2(阳性率16%),有41份可检出凋亡细胞(阳性率91%).HDAg表达与Bcl2/Bax表达之间有显著相关性(X12=27.6,X22=35.9,P<0.05),HDAg表达越强,Bax表达越强;相反,Bcl2表达则越弱.凋亡在HDAg阳性和阴性细胞中均可发生,以在HDAg阳性细胞内发生为主.Bcl2/Bax表达与肝细胞凋亡之间有显著相关性(X12=40.1,X22=38.2,P<0.05),Bax表达越强,凋亡阳性细胞越多;相反,Bcl2表达越强,凋亡阳性细胞越少.结论丁型肝炎病毒感染和未感染的肝细胞均可发生凋亡,但凋亡只在少数细胞内发生;HDV可诱导Bax表达,但对Bcl2表达无明显诱导作用,Bcl2/Bax在肝细胞凋亡中起重要作用.     

HCV RNA及其编码蛋白在肝癌和癌旁肝组织中的表达

本文采用光敏生物素标记的ＨＣＶｃＤＮＡ探针和免疫金银显色法对４２例肝癌和癌旁肝组织中的ＨＣＶＲＮＡ和ＨＣＡｇ进行了检测，发现ＨＣＶＲＮＡ可以感染肝癌细胞，其分布状态及其抗原表达亦与肝组织一致。这些阳性细胞在组织中的感染状态多呈区域性，在此区域又可呈片状、簇状或散在分布。     

抗-HGV在各型病毒性肝炎患者中的检出情况及意义

目的了解抗庚型肝炎病毒抗体（抗－ＨＧＶ）在各型病毒性肝炎患者中的检出情况及临床意义。方法对１９０例不同病原的病毒性肝炎患者进行抗－ＨＧＶ（ＥＬＩＳＡ）检测,对其中抗－ＨＧＶ阳性者进行ＨＧＶ－ＲＮＡ（ＲＴＰＣＲ）检测。结果①在各型病毒性肝炎患者中总的抗－ＨＧＶ阳性率为１２１％（２３／１９０）。②ＨＣＶ感染者中抗－ＨＧＶ的阳性率（２６９％）最高,其后依次为ＨＥＶ（１８２％）,ＨＢＶ（１１２％）,ＨＤＶ（８３％）。③２３例抗－ＨＧＶ阳性的患者中仅有５例（２１７％）ＨＧＶ－ＲＮＡ同时检测阳性。④抗－ＨＧＶ阳性组与抗－ＨＧＶ阴性组比较,两组肝功能指标无统计学差异（Ｐ＞００５）。结论①抗－ＨＧＶ阳性并不一定代表ＨＧＶ病毒复制或现症感染。②ＨＧＶ致病性可能较弱。③ＨＧＶ可能通过多途径传播。     

HGV: the identification,biology and prevalence of an orphan virus

ABSTRACT— Hepatitis G virus (HGV) and GB virus C (GBV-C) (both hereinafter referred to as HGV) were independently identified in patients with hepatitis of unknown aetiology. HGV is a positive-sense RNA virus of the family Flaviviridae. The virus can establish both acute and chronic infection and appears to be sensitive to interferon. Horizontal transmission is mainly parenteral, although other routes such as vertical have been well documented. High risk groups include intravenous drug users (IVDUs), the multiply transfused, haemodialysis patients and haemophiliacs. Up to 90% of IVDUs are positive for either HGV-RNA or antibodies to HGV envelope-2 protein (anti-E2). HGV is frequently detected in patients with HBV and HCV infection. Its link to hepatitis has now become less certain. Only around 3–6% of non-A–E hepatitis cases are HGV viraemic, clearly showing that HGV is not the major cause of idiopathic hepatitis as originally hoped. Around 1–5% of volunteer blood donors in developed countries are HGV viraemic, but the prevalence is 10–20% in the general population in some developing countries. At present, it is not known whether HGV is associated with other diseases in humans, is a passenger virus, or only becomes virulent under certain conditions.     

GBV-C/HGV is not the major cause of autoimmune hepatitis

Recently, GBV-C and HGV - two isolates of the same new flavivirus - were identified in serum samples of patients with indeteriminate hepatitis and posttransfusion hepatitis, respectively. The pathogenic relevance of these viruses is still uncertain. As viral infections are presumed to trigger autoimmune processes, we investigated GBV-C in autoimmune hepatitis as well as in cryptogenic hepatitis, and compared the prevalences to patients with chronic viral hepatitis and those of blood donors. We found only a slightly higher prevalence of the virus in cryptogenic (12%) and autoimmune hepatitis type I–III (6.7%, 10%, and 12.5%) compared to blood donors (4.7%). In contrast, patients with viral hepatitis B, C, and D were more frequently infected with GBV-C (16%, 20%, 36%). These results suggest that GBV-C is not a major cause for inducing autoimmunity and leading to autoimmune hepatitis. We analyzed the nucleic acid sequences of a representative number of GBV-C positive patients () and found a broad range of nucleotide similarity in the NS3 helicase region (74–100%) among the isolates and the prototype sequences. However, we could not identify a specific sequence, which would point to a certain strain or subtype of the Virus associated with autoimmune or cryptogenic liver disease.     

肝炎病人血清、外周血单个核细胞和肝脏中GBV-C/HGV复制中间体的研究

目的:关于GBV-C/HGV组织亲和性的研究尚无结论性资料。我们研究27例肝炎病人血清、外周血单个核细胞(PBMCs)及肝脏中GBV-C/HGV正链及负链RNA(复制中间体)的存在状况。方法:应用逆转录-巢式多聚酶链反应技术检测GBV-C/HGV正、负链RNA。结果:27例病人血清中21例病人血清、7例PBMCs、10例肝组织中检测到GBV-C/HGV正链RNA,其中2例单一GBV-C/HGV感染者肝组织中检测到负链RNA,在27例病人血清及PBMCs中均未检测到负链RNA。结论:提示GBV-C/HGV是一种嗜肝病毒,肝脏可能是其复制的主要场所之一,但GBV-C/HGV与HCV混合感染时,在PBMCs及肝脏中尚未发现该病毒复制的证据。