探究不同类型饮水对小鼠生长和粪便菌群的影响

目的 探讨不同类型饮水对小鼠的生长和粪便菌群的影响。方法 选取SPF级NIH小鼠,分成5组,每组32只,雌雄各半,分别饲喂纯净水(对照组)、酸化水、碱化水、弱酸水和固体水,连续监测20 d饮食和体重,实验结束后取动物粪便样本,用细菌16S rDNA通用引物扩增V3-V4区域,采用Illumina Miseq高通量测序平台进行测序,使用生物信息学方法进行微生物群落分析、α多样性分析和β多样性分析。结果 在体重方面,不同pH的饮水,雌性小鼠中弱酸水组高于对照组,其他组均低于对照组(P>0.05);雄性小鼠中仅酸化水组的体重高于对照组,其他组均低于对照组,但组间无统计学差异(P>0.05);固体形态水的雌性和雄性小鼠的体重均低于对照组的体重(P<0.05)。在采食和饮水量方面,碱化水组的雌性小鼠饮水和采食量低于其他组,固体水组的饮水量,雌性和雄性小鼠均低于其他组。经OTU聚类分析,稀释性曲线说明本次测序的数据量合理。NIH小鼠粪便菌群共分成五个门,其中拟杆菌门和厚壁菌门占主要地位,属水平上主要是Unclassified Porphyromonadaceae、乳酸杆菌属和另枝...     

高通量测序法研究不同pH的饮用水对SPF小鼠肠道微生物的影响

目的研究不同pH饮用水对SPF小鼠肠道微生物多样性的影响。方法 21日龄SPF小鼠90只随机分成3组,每组30只,分别给予三类水,即酸化水(pH 3.0),中性水(pH 7.0)和碱性水(pH 9.0),并进行为期三个月的饲养。每组分别在饲养4周、8周、12周末各处死10只动物,取血清按SPF国标项目检测了细菌、病毒、寄生虫,取回盲部内容物,根据细菌16S rRNA的保守性设计引物,构建文库,进行高通量(Illumina)测序,获得10 G的数据,并对数据进行统计,聚类分析。结果以pH 3.0处理的小鼠肠道微生物丰富度适中,稳定性高。结论在规模化饲养条件下,选取pH 3.0饮用水小鼠能较长时间维持肠道微生物多样性,稳定性达到一个平台。本研究为长期稳定维持动物质量的生产实践提供了理论与技术支持,也是胃肠道宏基因组学技术在动物质量控制领域的一个具体应用。     

基于16S rRNA测序2型糖尿病大鼠肠内容物及粪便菌群研究

目的 基于16S rRNA测序技术,研究2型糖尿病模型大鼠肠内容物和粪便菌群,进而从肠道微生态的角度去探索糖尿病的奥秘。方法 采用高脂饲料喂养结合腹腔注射链脲佐菌素（45 mg/kg）复制2型糖尿病大鼠模型,观察脾、胃和肠组织的病理形态。采用16S rRNA测序技术分别研究各组大鼠肠内容物、粪便样本的菌群,并对菌群进行物种注释与评估、组成分析、差异分析和功能预测等。结果 与空白组比较,模型组大鼠血糖水平显著升高。组织切片结果发现,模型组大鼠脾组织中有多量的白髓内可见少量的凋亡小体;肠组织中可见大量的肠绒毛顶端上皮细胞脱落;胃组织中可见黏膜层多量的上皮细胞脱落。肠道菌群研究发现,大鼠肠内容物和粪便中菌群间存在差异。但分别与正常大鼠肠内容物和粪便相比,糖尿病大鼠肠内容物和粪便中菌群的多样性、丰度（门水平）等均发生相似变化。这些结果提示糖尿病模型大鼠脾胃受损,运化失司,肠道微生物的动态平衡被破坏。结论 2型糖尿病的发生、发展与肠道（肠内容物、粪便）菌群平衡的改变有关,研究为揭示糖尿病的发病机制及临床防治糖尿病提供研究思路。     

口源性口臭患者口腔不同生态位菌群及代谢分析

目的 研究口源性口臭患者与健康受试者口腔不同生态位菌群组成和代谢差异,探讨口源性口臭与口腔菌群的关系。方法 随机选择7例以口臭为主诉就诊的口源性口臭患者(halitosis组)以及3例健康受试者(normal组)。分别记录两组口气值,收集两组唾液、舌苔、颊黏膜和颚黏膜菌群样本。采用16S rRNA方法对样本进行物种组成和多样性分析,并采用PICRUSt方法对样本进行代谢预测分析,组间差异显著性检验采用Adonis分析。结果 两组4个生态位菌群丰度和多样性均无明显差异(均P>0.05)。Adonis分析表明,两组间唾液菌群差异显著(P=0.011),两组间舌苔(P=0.25)、颊黏膜(P=0.128)和颚黏膜(P=0.178)菌群结构相似。门水平上,halitosis组唾液中螺旋体门、颊黏膜中螺旋体门和拟杆菌门、颚黏膜中放线菌门比例均明显升高(均P<0.05)。属水平上,halitosis组弯曲杆菌属和巨球型菌属在唾液、舌苔和颊黏膜中均表现出高比例,密螺旋体属在唾液和颊黏膜中比例明显升高,纤毛菌属在舌苔和颊黏膜中比例升高(均P<0.05)。此外,halitosis组唾液...     

免疫性肝损伤大鼠肠道菌群的变化及肠黏膜屏障损伤研究*

目的: 探讨免疫性肝损伤大鼠肠道菌群及肠黏膜屏障变化。方法: 利用卡介苗(BCG)诱导建立免疫性肝损伤模型,观察大鼠肝组织的病理学改变,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、二胺氧化酶(DAO)和D-乳酸(D-LA)水平,并留取粪便进行肠道菌群16S rDNA测序分析。结果: 模型组大鼠肠道菌群多样性较对照组显著升高(P＜0.05)。门水平上,两组的优势菌门均为厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes),正常对照组分别占59.50 %和37.90 %,造模组中依次占47.92 %、46.84 %,门水平肠道菌群构成差异分析,模型组厚壁菌门丰度明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)与对照组相比丰度增加,差异有统计学意义(P＜0.05)。属水平肠道菌群构成差异分析,丰度较高的前20个菌属中,模型组乳酸杆菌属(Lactobacillus)、毛螺旋菌属(Lachnospiraceae)丰度均低于对照组,差异具有显著性(P＜0.05)。模型组瘤胃球菌属(Ruminococcaceae)、拟普雷沃菌属(Alloprevotella)、布劳特氏菌(Blautia)、帕拉普氏菌属(Paraprevotella)丰度均高于对照组(P＜0.05)。结论: 卡介苗所致急性肝损伤大鼠存在肠道细菌过度生长,厚壁菌门及乳酸杆菌属丰度明显下降,变形菌门、放线菌门丰度升高,存在肠道菌群结构失衡,肠道屏障受损。     

miR-625-3p基因沉默对结直肠癌小鼠的抑瘤作用及对肠道菌群的影响

目的 基于16s rRNA测序分析微小RNA-625-3p(miR-625-3p)基因沉默对结直肠癌小鼠的肿瘤抑制作用及对肠道菌群的影响。方法 制备、获取miR-625-3p基因沉默(Si)和沉默阴性对照(SiNe)外泌体。BALB/C小鼠腹腔注射SW620细胞(5×10⁶),随机分为模型(A)组,奥沙利铂(Oxaliplatin, B)组,Oxaliplatin+exo-miR-625-3p-Si(C)组和Oxaliplatin+exo-miR-625-3p-SiNe(D)组,每组3只。观察miR-625-3p基因沉默对结直肠癌小鼠肿瘤体积、肿瘤细胞凋亡、肠道内容物菌群丰度及多样性的影响。结果 成功分离出miR-625-3p-Si和miR-625-3p-SiNe外泌体并鉴定。外泌体干预后,与D组比较,C组miR-625-3p表达降低(t=-4.057,P<0.05),肿瘤体积减小(t=-2.331,P=0.08),凋亡增加(t=2.945,P<0.05);OTUs数量降低;门水平上,Bacteroidetes丰度升高(t=3.590,P<0.0...     

不同月龄SPF级SD大鼠血液学及生化指标的变化

目的探讨不同生长期SPF级SD大鼠的血液学指标及生化指标的差异。方法采用血液分析仪分别测定SPF级SD大鼠2月龄、3月龄、4月龄、7月龄、8月龄时血液白细胞(WBC),红细胞(RBC),血红蛋白(HGB),红细胞压积(HCT),平均红细胞体积(MCV),平均红细胞血红蛋白量(MCH),平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC),血小板(PLT)等指标;运用全自动生化测定仪测定其谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、尿素氮(BUN)、肌酐(CREA)、甘油三酯(TG)等指标。结果结果表明大鼠RBC数量随年龄增长逐渐增大,雄性大鼠PLT数量逐渐增大,MCV减小,雌性HGB、HCT逐渐增大,且WBC、RBC、HGB、HCT数量随年龄增长呈现雌雄差异,雌性值偏小;大鼠各血液学指标均有较大的波动,其中以WBC和PLT的波动范围最大;随年龄的增长,雄性大鼠TP值逐渐减小;雌性大鼠TG逐渐升高;TP、ALB、BUN呈现雌雄差异,且雌性偏高;大鼠各生化指标均有较大的波动,以AST的波动范围最大。结论研究结果表明:大鼠的部分血液学及生化学指标存在性别及年龄的差异。     

磁共振DWI及灌注加权成像对不同时期脑梗死临床诊断的应用价值研究

目的分析磁共振DWI及灌注加权成像对不同时期脑梗死临床诊断的应用价值。方法回顾分析本院2017年1月至2019年5月收治的112例脑梗死患者的临床资料;对患者所得图像进行分析,对比不同时期梗死区与健侧对照区ADC值,PWI各灌注参数(rCBV、rCBF、MTT、TTP)表现,以及DWI、PWI在不同分期脑梗死中表现关系。结果不同时期梗死区与健侧对照区ADC值比较差异有统计学意义(P<0.05);在超急性期25例患者中,rCBV、rCBF降低,MTT、TTP升高;急性期44例患者中以rCBV、rCBF降低, MTT、 TTP升高为主;亚急性期33例患者中以rCBV、rCBF正常,MTT、TTP升高为主;慢性期10例患者中均为rCBV、rCBF降低,1例患者MTT、TTP表现为升高,其余为降低。超急性期患者68.00%(17/25)为DWIPEI;亚急性期78.78%(26/33)为DWI=PWI;慢性期患者均表现为DWI=PWI。结论 PWI、DWI序列联合诊断可识别早期梗死病灶,并对患者血流灌注情况进行评价,可鉴别半暗带缺血区,并为不同时期临床诊断和梗死分期提供可靠影像学参考依据。