OLP组织中Smad7蛋白的表达研究

目的:检测Smad7蛋白在口腔扁平苔藓(OLP)组织中的表达及分布,探讨其在OLP发病机制中的作用。方法:采用免疫组化SABC法,用Smad7兔抗人多克隆抗体检测60例OLP病变组织及10例正常口腔黏膜组织中Smad7蛋白的表达及分布。结果:Smad7在OLP病变组织有明显的阳性表达,而在正常口腔黏膜组织中阴性表达(P<0.05)。结论:Smad7蛋白在OLP病变组织中高表达,其在OLP发病机制中有重要作用。     

口腔黏膜良性淋巴组织增生病的免疫组化研究

目的　研究口腔黏膜良性淋巴组织增生病与口腔癌的细胞增殖能力、血管密度和细胞凋亡的变化。方法　采用免疫组化SP法检测 15例黏膜良性淋巴组织增生病、9例黏膜良性淋巴组织增生病伴上皮异常增生、15例口腔癌及 10例正常黏膜组织中Ki 6 7的表达、细胞凋亡及微血管密度。结果　口腔黏膜良性淋巴组织增生病伴异常增生及鳞状细胞癌中Ki 6 7的表达明显高于不伴异常增生的口腔黏膜良性淋巴组织增生病及正常黏膜 (P <0 0 5 ) ,在所有的口腔黏膜良性淋巴组织增生病及鳞状细胞癌中微血管密度均明显高于正常组 (P <0 0 5 )。口腔黏膜良性淋巴组织增生病中细胞凋亡明显高于正常黏膜及口腔癌 (P <0 0 5 )。结论　在伴有上皮异常增生的口腔黏膜良性淋巴组织增生病中Ki 6 7表达及微血管密度均介于正常组织和口腔癌之间 ,凋亡细胞数也明显多于正常组织。研究结果提示 :口腔黏膜良性淋巴组织增生病是一种具有癌变潜能的疾患     

核仁组织区在Wistar大鼠腭黏膜癌变过程中表达的变化

目的:研究Wistar大鼠腭黏膜癌变过程中核仁组织区(NOR)的变化及与癌变趋势的关系。方法:通过化学诱导法建立大鼠口腔癌模型,采用银染核仁组织区法对7例正常黏膜和63例不同癌变发展阶段黏膜细胞的增殖状态进行检测。结果:随着异常增生程度和组织病理学分级的增加,AgNOR颗粒计数逐渐增多。单纯性增生、异常增生、原位癌、浸润性鳞癌与正常黏膜相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AgNOR的表达在口腔黏膜癌变过程中逐渐增强。     

P16在口腔白斑和鳞癌组织中的表达及其意义

目的探讨P16在口腔白斑癌变过程中的变化及其意义。方法免疫组化polymer法检测P16蛋白在口腔白斑和鳞癌组织中的表达情况。结果 P16蛋白在10例正常口腔黏膜组织、16例单纯增生性白斑、10例异常增生性白斑及30例口腔鳞癌组织中表达逐步下降,在正常口腔黏膜组织和单纯增生性白斑中表达强于异常增生性白斑组织和鳞癌组织（P〈0.05）,在异常增生性白斑中表达亦强于鳞癌组织（P〈0.05）。结论 P16蛋白表达下降可以作为口腔白斑癌变的指征之一。     

口腔癌及癌前病变中PTEN与CXCR4的蛋白表达及相关性研究

目的通过检测抑癌基因PTEN与趋化因子CXCR4在口腔癌及癌前病变中的蛋白表达情况,并分析其相关性。方法收集口腔癌及癌前病变标本共111例,其中正常口腔黏膜15例、单纯上皮增生22例、上皮异常增生16例、口腔鳞癌58例,应用免疫组化SP法检测这些标本中PTEN与CXCR4蛋白表达水平,并对结果进行统计学分析。结果 PTEN在口腔鳞癌中阴性和弱阳性表达占74%(43/58),显著低于正常黏膜、单纯上皮增生、上皮异常增生组(P<0.05);CXCR4在单纯增生、异常增生和口腔鳞癌中阳性或强阳性表达分别占40.91%、43.75%和66.13%,显著高于正常组的表达(P<0.05)。经直线相关分析和Spearman等级相关分析,PTEN与CXCR4之间存在负相关关系(r=-1.000,P<0.001)。结论口腔鳞癌的发生和发展过程中PTEN和CXCR4均起着一定的作用;口腔癌中PTEN与CXCR4的蛋白表达存在负相关的关系。     

口腔黏膜下纤维性变组织中Smad7蛋白的表达研究

目的检测Smad7蛋白在口腔黏膜下纤维性变(OSF)组织中的表达及分布,探讨其在OSF发病机制中的作用。方法采用免疫组化抗生蛋白链菌素生物素复合体法(strept Avidin-Biotin complex,SABC),用Smad7兔抗人多克隆抗体检测20例OSF病变组织及10例正常口腔黏膜组织中的Smad7蛋白的表达及分布。结果Smad7在OSF病变组织中为弱阳性表达,在正常口腔黏膜组织中为阴性表达,差别具有显著意义(P<0.05)。结论Smad7蛋白在OSF病变组织中弱阳性表达,在OSF发病机制中有重要作用。     

口腔黏膜癌前病变和口腔鳞状细胞癌中Stat3的表达及意义

目的研究口腔黏膜癌前病变和口腔鳞状细胞癌(OSCC)中细胞信号传导和转录激活因子(Stat3)的表达及意义。方法采用免疫组化方法分别检测9例正常口腔黏膜,口腔扁平苔藓(OLP)和白斑(OLK)共8例,OLP、OLK伴异常增生22例,OSCC19例中Stat3的表达。结果Stat3阳性表达分布于细胞质和细胞核内。正常口腔黏膜、单纯增生、异常增生和OSCC中Stat3阳性表达率分别为11.11%(1/9)、12.50%(1/8)、59.09%(13/22)和84.21%(16/19)。OSCC与正常口腔黏膜、单纯增生、异常增生相比,差异有显著性(P<0.05);异常增生与正常口腔黏膜、单纯增生相比,差异有显著性(P<0.05);而单纯增生和正常口腔黏膜相比差异无显著性(P>0.05)。结论Stat3与口腔黏膜癌变的发生发展有着密切关系,对Stat3表达的研究将有助于口腔黏膜癌前病变癌变的检测和OSCC的早期诊断。     

PCNA、p53和hTERT在口腔黏膜癌前病变和鳞癌中的表达及意义

目的：探讨PCNA、p53蛋白和hTERT在口腔黏膜癌前病变和鳞癌组织中的表达及临床意义。方法：采用原位杂交和免疫组化技术检测口腔黏膜单纯增生(HP)9例,轻度异常增生(LD)11例,中度异常增生(MD)10例,重度异常增生(原位癌CIS)9例,鳞癌(SCC)11例中p53蛋白、PCNA和hTERTmRNA的表达。结果：PCNA、p53和hTERT在口腔黏膜癌前病变和鳞癌中均有表达的异常。结论：hTERT、PCNA和p53与口腔黏膜癌前病变癌变的发生发展有关,它们的异常表达有助于口腔黏膜癌前病变和鳞癌的早期诊断,为研究癌前病变癌变的发生提供了一定的理论依据。     

金黄地鼠颊囊癌变过程中DPC4的表达特征

目的:研究dpc4基因在金黄地鼠颊囊癌变过程中的表达特征,探讨其与口腔鳞癌的发生、发展之间的关系及临床意义。方法:用免疫组化技术检测23例金黄地鼠颊囊正常上皮、21例单纯增生上皮、27例异常增生上皮、25例鳞癌组织中DPC-4的表达。结果:DPC-4在正常黏膜上皮组织的细胞质内呈稳定性、强阳性表达,在细胞质内出现棕褐色颗粒;在单纯增生上皮中表达与正常黏膜组织相似;在上皮异常增生组织表达降低,阳性率为74.1%;在鳞癌中的表达亦明显降低,阳性率为48%,且与正常黏膜、异常增生黏膜相比有显著性差异(P<0.01)。结论:Smad4的缺失促进了口腔黏膜鳞癌发生发展。     

骨形成蛋白信号通路中Smad4和Smad7在口腔鳞癌中的表达变化

目的：观察口腔鳞癌和癌旁正常组织中Smad4和Smad7表达量的变化,探讨Smad4和Smad7对口腔鳞癌发生和发展的影响。方法：收集临床和病理学诊断为OSCC的病例72例。取癌组织和癌旁正常组织做切片,用SP免疫组化法分别检测Smad4和Smad7在口腔鳞癌和正常组织中的表达,采用SPSS11.5软件包对数据进行统计学分析。结果：Smad4蛋白在癌旁正常组织中的阳性表达率为69.44%,在口腔鳞癌组织中的阳性表达率为45.83% (P<0.05),且随着分化程度的降低其阳性表达率降低;有淋巴结转移者阳性表达率为22.50%,无淋巴结转移者阳性表达率为65.63% (P<0.05)。Smad7蛋白在癌旁正常组织中的阳性表达率为19.44%,在口腔鳞癌组织中的阳性表达率为83.33%(P<0.05),且随着分化程度的降低其阳性表达率升高;有淋巴结转移者阳性表达率为92.50%,无淋巴结转移者阳性表达率为68.75% (P<0.05)。结论：Smad4在癌组织中表达明显减少,且分化程度越低,表达越少,Smad4在有淋巴结转移的组织中比在无淋巴结转移的组织中表达低;Smad7的作用则相反。Smad4的表达缺失可能促进了口腔鳞癌的发展和转移,Smad7的过表达促进了口腔鳞癌的发展和转移;BMP/Smads信号传导通路受到抑制,可能会导致口腔鳞癌的继续发生和发展。     

Overexpression of Smad proteins, especially Smad7, in oral epithelial dysplasias

Objective

Transforming growth factor β, via membrane-bound receptors and downstream Smad2–4, 7, can modulate tumorigenesis. Smad2 and Smad3 heterodimerize with Smad4, and the complex migrates to the nucleus to regulate the expression of target genes. Smad7 is a key negative regulator of this signaling pathway. This study aimed to examine Smad2–4, 7 expression and phosphorylated Smad2–3 (p-Smad2–3) in oral epithelial dysplasia and compared it with normal oral mucosa, hyperkeratosis/epithelial hyperplasia and squamous cell carcinoma (SCC).

Materials and methods

Immunohistochemical staining of Smad2–4, 7 and p-Smad2–3, was performed for 75 samples of human oral mucosa, including hyperkeratosis/epithelial hyperplasia (n?=?20), mild epithelial dysplasia (n?=?11), moderate to severe epithelial dysplasia (n?=?11), and SCC (n?=?43). Normal buccal mucosa samples (n?=?9) were also included.

Results

A significant increase in Smad7 expression was observed in the ascending order of samples of normal oral mucosa, hyperkeratosis/epithelial hyperplasia/mild oral epithelial dysplasia, moderate to severe oral epithelial dysplasia, and well-differentiated oral SCC/moderately to poorly differentiated oral SCC. Additionally, significant increases in Smad7 expression were noted as compared with expression of Smad2–4 and p-Smad2–3 in lesions of hyperkeratosis/epithelial hyperplasia, mild oral epithelial dysplasia, moderate to severe oral epithelial dysplasia, well-differentiated oral SCC, and moderately to poorly differentiated oral SCC.

Conclusions

Our results indicate that Smad proteins, particularly Smad7, in oral epithelial dysplasia and SCC could contribute to the attenuation of Smads anti-proliferative signaling in cancer development.

Clinical relevance

Smad7 could be a marker for risk of malignant transformation of oral epithelial dysplasia.     

Expression of TGF-beta1, Smad7 and cell apoptosis in epithelium of oral lichen planus

OBJECTIVE: To examine the expression of TGF-beta1, Smad7 and cell apoptosis in oral lichen planus (OLP) and to evaluate the possible pathogenesis of oral lichen planus. METHODS: Immunohistochemical technique was used to study the expression of TGF-beta1 and Smad7 in the epithelia cells of 17 OLP cases and 7 normal oral mucosa (NOM). TUNEL was used for detecting the cell apoptosis in 17 OLP cases and 7 NOM. RESULTS: TGF-beta1 was moderately positive in the epithelia cells of OLP. All the epithelia cells in OLP showed strong cytoplasmic staining. The expression of TGF-beta1 and Smad7 were significantly increased in OLP compared with that in NOM (P < 0.05). Cell apoptotic index (AI) was remarkably increased in epithelia cells in OLP cases, and the cell apoptosis was localized in basal and suprabasal epithelial layers. There was a positive correlation between TGF-beta1 expression and cell apoptosis in the epithelia of OLP (r = 0.69, P <0.05). CONCLUSIONS: High expression of TGF-beta1 and Smad7 in the epithelia of OLP suggests that TGF-beta1-Smad7 signal pathway was disturbed in oral lichen planus. The imbalance of TGF-beta1-Smad7 pathway may contribute to the mechanisms of cell apoptosis of epithelial cells in OLP.     

Aberrant expression of Smad4, a TGF-beta signaling molecule, in oral squamous cell carcinoma

Although carcinogenesis of oral squamous cell carcinoma (OSCC) has been studied by many investigators in the past decade, the available evidence about its molecular mechanism is inconclusive. The objective of the present study was to compare expression of Smad4, a signaling molecule of the transforming growth factor beta (TGF-beta) pathway, between OSCC and normal oral mucosa. We assayed expression of Smad4 in OSCC and normal oral mucosa by performing immunohistochemistry using paraffin-embedded tissue samples. We also compared expression of Smad4 protein between OSCC lines and normal oral keratinocytes, using Western blot analysis. Smad4 expression was observed in only 60% of OSCC tissue samples, whereas it was observed in 82% of normal oral mucosa samples. Reduced Smad4 expression was clearly observed in all OSCC lines, compared with normal oral keratinocytes. These findings suggest that aberration of the TGF-beta pathway, as indicated by a reduction or absence of Smad4 expression, promotes carcinogenesis of OSCC.     

癌前病变口腔上皮中细胞粘附分子CD44v3和CD44v6表达的改变

目的　研究细胞粘附分子CD44v3和CD44v6在口腔癌前病变中的表达特点及其与癌变的关系。方法　用SP免疫组织化学染色法检查 85例正常、单纯及异常增生的口腔上皮和口腔鳞癌中CD44v3和CD44v6的表达。结果　正常及单纯增生口腔上皮细胞膜有CD44v3和v6的强表达 ,上皮染成网状。上皮轻度异常增生变化不明显。随上皮异常增生程度加重 ,上皮深层细胞出现CD44v3和v6低表达 ,染色变浅或无染色 ,12例重度异常增生者均出现低表达。同一标本中既有上皮单纯增生又有上皮中、重度异常增生的 9例中 ,8例有CD44v3和v6的低表达。鳞状细胞癌的浸润缘有上述低表达 ,部分转移灶较原发灶染色浅。结论　上皮中、重度异常增生时 ,CD44v3和v6表达下降。这种低表达可能与异常增生时细胞粘附力下降及癌变时发生基底膜浸润有关。     

口腔白斑和癌组织中Smad4、Bel-2的表达及其相关性研究

目的：检测口腔白斑和癌组织中Smad4和Bcl-2的表达情况，探讨二者在口腔白斑的癌变过程中的变化及其相互关系。方法：免疫组织化学SABC法检测Smad4蛋白表达情况及Polymer法检测Bcl-2蛋白的表达情况。结果：Smad4蛋白在正常组织、白斑及癌组织中阳性表达率分别是100.0％、92.3％和33.3％，阳性表达差异有统计学意义（P〈0.01）；Bcl-2蛋白在正常组织中、白斑及癌组织中阳性表达率分别是30.0％、53.8％和100.0％，阳性表达差异有统计学意义（P〈0.01）；Smad4蛋白表达与Bcl-2蛋白表达呈负相关（r=-0.854，P〈0.01）。结论：Smad4和Bcl-2可能参与了口腔癌变的过程：在鳞癌的发生发展过程中，Smadd缺失表达和Bcl-2的过表达两者可能单独或协同参与。     

细胞角蛋白19和间隙连接蛋白43在4-亚基硝氧喹啉诱发大鼠舌黏膜癌变过程中表达的研究

目的 研究4-亚基硝氧喹啉（4NQO）诱发大鼠口腔黏膜癌变过程中细胞角蛋白19（CK19）和间隙连接蛋白43（Cx43）的表达,探讨口腔黏膜癌变过程中CK19与Cx43的相关性。方法 利用4NQO诱导SD大鼠的口腔黏膜癌变,运用免疫组织化学的方法检测CK19、Cx43在口腔黏膜癌变过程中各阶段的动态变化。结果 在大鼠正常舌黏膜组织中,CK19阳性染色的细胞散在分布于黏膜基底层;随着大鼠舌黏膜上皮异常增生程度的增加,CK19表达于黏膜基底上层;在口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中,CK19阳性染色细胞分布在黏膜各层。CK19在正常舌黏膜、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生、OSCC组织中阳性表达率分别为30.00%、50.00%、58.33%、80.00%、91.67%,差异有统计学意义（P<0.05）。在正常舌黏膜中Cx43蛋白主要表达于大鼠舌黏膜上皮细胞的细胞膜上,上皮的基底层、棘层和颗粒层呈阳性染色。随着大鼠舌黏膜上皮异常增生程度的增加,Cx43的表达明显下降。Cx43在正常舌黏膜、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生、OSCC组织中阳性表达率分别为100.00%、85.71%、66.67%、40.00%、33.33%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 在大鼠舌黏膜癌变过程中,CK19蛋白表达水平随病变程度加重显著升高,提示CK19与口腔上皮细胞的癌变有关;Cx43蛋白表达水平随病变程度加重显著下降,Cx43表达下降是口腔黏膜癌变的早期事件。CK19与Cx43蛋白表达呈负相关,CK19和Cx43的联合检测对OSCC的早期诊断有重要的作用,有利于提高OSCC早期诊断的灵敏度和特异性。     

大鼠舌癌变过程中生存素、Bcl-2和p53蛋白的表达

目的 探讨生存素(survivin)蛋白在大鼠舌癌变过程中的表达及其与Bcl-2、p53蛋白表达的相关性.方法 0.002%4-硝基喹啉-1-氧化物(4一nitro-quinoline 1-oxide,4NQO)饮水喂养SD大鼠9～36周建立大鼠舌癌变模型,用免疫组化二步法检测60例大鼠舌癌变过程中生存素、Bcl-2及p53蛋白的表达.结果 36例止常组织中生存素蛋白表达仅1例,而11例异常增生组织中其表达为6例,11例口腔癌组织中其表达为10例.生存素蛋白在正常舌黏膜、异常增生黏膜及舌癌中的阳性表达差异有统计学意义(P<0.001),异常增生及口腔癌组织中生存素蛋白表达显著高于正常黏膜中的表达(P<0.01).在17例生存素蛋白表达阳性的大鼠舌组织中,Bcl-2蛋白阳性表达12例,p53蛋白阳性表达8例;生存素蛋白表达与Bcl-2、053蛋白表达呈正相关(P<0.01).结论 生存素蛋白的表达增高和口腔鳞状上皮的异常增生、癌变有关,提示生存素可能参与了口腔癌的发生、发展;生存素、Bcl-2及p53蛋白的表达可能在口腔癌的发生、发展中起协调作用.