Th22细胞在炎症免疫性疾病中作用的研究进展

Th22细胞是最近发现的CD4+T细胞功能亚群,表达CCR6、CCR4和CCR10,且分泌IL-22和TNF-α,不分泌IFN-γ、IL-4、IL-17,是独立于Th1、Th2和Th17的细胞亚群。Th22细胞主要参与皮肤的自稳调节和病理状态,可以调控皮肤的固有免疫反应、防御功能及表皮损伤后的修复功能,在炎症性皮肤病的病理生理机制中发挥重要作用。此外,Th22细胞也参与了炎症性肠病、类风湿关节炎、肝炎、试验性自身免疫性心肌炎等炎症免疫性疾病的病理过程。本文对Th22细胞其细胞因子IL-22在炎症免疫性疾病中作用的研究进展做一综述。     

肠道内Th17细胞的特征及其在炎症性肠病中的作用

Th17细胞是近几年发现的一类能够分泌白介素17(interleukin 17,IL-17)的CD4+T细胞,与自身免疫性疾病以及慢性炎症关系密切。Th17细胞在肠道内的增殖、分化、成熟具有一定的特征性,是肠道免疫屏障的重要组成部分,同时Th17细胞又能根据肠道内的变化分泌细胞因子来维持肠道免疫稳态,如IL-17、IL-22等。另一方面,肠道免疫机制异常在炎症性肠病的发病机制中占重要地位,Th17细胞及其相关细胞因子参与炎症性肠病的免疫反应,调节Th17细胞在肠道内的动态平衡对于治疗肠道疾病意义重大。本文就Th17细胞在肠道内的增殖分化、生物学功能、与炎症性肠病的关系以及关于Th17细胞动态平衡的调节做一综述。     

Th17与自身免疫性疾病

Th17细胞是新近发现的一类新型的能够分泌白细胞介素17(interleukin 17,IL-17)的CD4+T细胞。在IL-6和TGF-β作用下,初始CD4+T细胞分化为Th17细胞。分化成熟的Th17细胞可以分泌IL-17,IL-17F和IL-22等多种细胞因子,其中IL-17和IL-17F是其主要效应分子。临床前和临床数据均表明:Th17细胞与一些自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、多发性硬化、银屑病、炎症性肠病、自身免疫性甲状腺疾病)有关。     

Th17及Th17型细胞因子与炎症性肠病

Th17细胞已被划分为一个不同于Th1、Th2和Treg的新的T细胞亚群,以分泌IL-17为主要特征。Th17在防御胞外细菌感染、介导慢性炎症和自身免疫性疾病的发病机制中发挥重要作用。炎症性肠病属于自身免疫性疾病的一种,免疫调节紊乱是其发病的关键因素。免疫学和基因学的发现表明Th17及Th17效应因子在炎症性肠病发病机理中起重要作用。对Th17的进一步深入研究可以加深我们对相关疾病发病机制的认识并指导临床治疗。     

IL-12单克隆抗体通过调节肠黏膜免疫缓解克罗恩病模型小鼠肠道炎症

目的观察白细胞介素12单克隆抗体(IL-12 mAb)对IL-10敲除(IL-10 KO)的克罗恩病(CD)小鼠模型肠道炎症的治疗作用并分析可能的机制。方法选取15周龄雄性IL-10 KO小鼠16只,随机分为对照组及IL-12 mAb处理组。IL-12 mAb处理组小鼠给予腹腔注射IL-12 mAb(25 mg/kg,每周1次),对照组给予0. 2 m L生理盐水腹腔注射。处理4周后,采用炎症性肠病疾病活动度指数(DAI)及HE染色结合Spencer结肠炎组织学评分评估两组小鼠肠道炎症程度及组织学改变;采用活体肠黏膜异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-dextran)通透性实验评估两组小鼠肠黏膜屏障功能,并采用Western blot法检测肠黏膜密封蛋白1(claudin-1)的蛋白水平;采用流式细胞术检测肠黏膜CD3、CD4、γ干扰素(IFN-γ)和IL-4,评估Th1细胞/Th2细胞平衡。采用ELISA检测两组小鼠肠黏膜IL-13及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western blot法检测肠黏膜磷酸化的信号转导子与转录激活子6(p-STAT6)的蛋白水平。结果 IL-12 mAb治疗后第3周及第4周,IL-12 mAb处理组小鼠DAI及肠道炎症评分均显著低于对照组。同时,IL-12 mAb处理组小鼠肠黏膜通透性显著低于对照组,且肠黏膜claudin-1表达显著高于对照组。同时,IL-12 mAb治疗抑制肠黏膜Th1细胞比例,上调Th2细胞比例。信号通路分析中发现,IL-12 mAb治疗提高肠黏膜p-STAT6及IL-13水平,而抑制TNF-α水平。结论 IL-12 mAb可有效缓解CD小鼠模型的肠道炎症并保护肠黏膜屏障,可能与抑制肠黏膜Th1细胞免疫反应及上调STAT6信号有关。     

重肌灵片在重症肌无力小鼠模型T细胞活化中的作用

AchR免疫C57BL/6小鼠建立EAMG小鼠模型,观察重肌灵片在自身免疫性重症肌无力小鼠T细胞活化过程中的作用。结果显示重肌灵片抑制AChR诱导的EAMG小鼠淋巴细胞增殖、DTH反应并降低血清中抗AChR抗体;抑制CD28和CTLA-4的表达、增强CD80和CD86的表达,但对CD40和CD40L的表达无显著影响;并降低Th细胞中表达IFN-γ的阳性细胞数、升高表达IL-4的阳性细胞数。提示重肌灵片显著抑制EAMG小鼠T细胞的活化,其抑制作用可能是通过调节细胞表面协同刺激分子的表达,及抑制Th细胞向Th1极化、促进其向Th2极化实现的。     

IL-21在Th17细胞炎症反应中的作用

Th17细胞是新近发现的T淋巴细胞亚群.作为不同于Th1、Th2的细胞亚群,已经被证实在自身免疫病、感染、炎症等疾病中发挥重要作用.IL-21作为Th17细胞的自分泌调节因子,在Th17细胞功能的维持、抑制Th1、调节性T细胞(Treg)分化等方面发挥关键作用.Th17细胞能够自分泌产生IL-21,从而促进自身分化过程...     

IL-23/IL-17炎症轴与炎症性肠病的关系研究进展

肠黏膜慢性炎症损伤是炎症性肠病(IBD)的重要病变特点,研究表明白细胞介素23(IL-23)/IL-17炎症轴参与肠黏膜炎性损伤并参与IBD的发生、发展、治疗与转归.IL-23为IL-17重要上游分子,可促进Th17细胞活化、增殖和炎性细胞因子的分泌,并参与IBD病变局部中性粒细胞、单核巨噬细胞、调节性T细胞(Treg...     

015 IL-4、IL-12、IL-6/STAT/SOCS途径对Th细胞分化调节机制的研究进展

Th细胞分化为Th1和Th2细胞是受多种细胞因子调控的.已有研究资料表明IL4、IL-12和IL-6通过STAT/SOCS信号途径经对Th细胞的分化进行调节.IL-12/STAT4/SOCS3使CD4+和Th2向Th1分化和极化,IL-4/STAT6/SOCS1使Th0B向Th2分化.IL-6则通过STAT3可以上调CD4+T细胞SOCS-1的表达,这是由于IL-6干扰IFN-γ受体的信号转导,阻断了IFN-γ对IFN-γ基因的自我调节,因此实现了IL-6对Th1细胞的负性调控.据此认为IL-6启动CD4+T细胞分化与抑制CD4+T分化为Th1细胞是两种独立的分子机制,它在平衡Th1/Th2的免疫反应中起着重要的调节作用.     

转录因子IRF8抑制Th17细胞分化并减轻T细胞免疫介导的小鼠结肠炎

 目的：转录因子干扰素调节因子（interferon regulatory factor, IRF）家族与Th17的发育密切相关,近年来发现Th17细胞在炎症性肠病的发病中发挥重要作用,本研究探讨IRF8对Th17发育及T细胞转染免疫介导的小鼠实验性肠炎的影响。方法：(1)采用流式细胞术分选野生型（WT）或IRF8全基因敲除(IRF8 -/-)小鼠脾脏和淋巴结的naive CD4 +T细胞(CD4 + CD62L +CD44 low),在Th1、Th2或Th17极化的条件下培养,采用流式细胞术检测Th1、Th2和Th17的比例。(2)建立实验性肠炎模型：采用免疫磁珠法分选WT或IRF8 -/-小鼠中的脾脏和淋巴结中CD4 +CD25 +Treg,WT小鼠的CD4 + CD45RB hi T细胞单独或者分别联合WT或IRF8 -/-小鼠的CD4 +CD25 +Treg腹腔注射给RAG1 -/-小鼠;WT或IRF8 -/-小鼠的naive CD4 + CD45RB hi T细胞腹腔注射给RAG1 -/-小鼠;观察上述小鼠每周体重的变化,第5周时处死小鼠,进行结肠炎病理评分和肠系膜淋巴结T淋巴细胞亚群检测。结果：(1)IRF8 -/-较WT的naive CD4 +T细胞在极化条件下向Th17细胞分化更明显(P<001),而对Th1和Th2细胞的分化无影响(P>0.05)。(2)CD4 + CD45RB hi T细胞转染给RAG1 -/-小鼠,IRF8 -/-较WT供体鼠引起的RAG1 -/-小鼠体重显著降低(P<0.05),结肠炎评分显著增高（P<0.05）,且肠系膜淋巴结中IL-17 +CD4 +细胞比例明显增高(P<0.01),而 IFN-γ +CD4 + 和 Foxp3 +CD4 +细胞比例无影响(P>0.05);IRF8 -/-小鼠的CD4 +CD25 +Treg对WT小鼠CD4 + CD45RB hi T细胞转染给RAG1 -/-小鼠诱发的免疫介导的结肠炎显示出正常的免疫抑制作用。结论：转录因子IRF8基因敲除促进CD4 +T细胞向Th17细胞分化,促进转染naive CD4 +T细胞诱导的实验性结肠炎的发生,IRF8基因敲除小鼠Treg细胞免疫抑制功能正常。     

Th17与自身免疫性疾病

当初始CD4+T细胞接受抗原刺激时,在不同的细胞因子环境中分化为不同的淋巴细胞亚群.Th17作为一种新的T细胞亚群是在TGF-β与IL-6存在时经由孤独核受体(ROB)-γt途径分化而来,而当环境中仅有TGF-β时却分化为CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Tr).与Th1一样,Th17被认为在自身免疫性疾病和炎症反应的发生和进展中都发挥重要的病理作用,相反,Tr则起着抗炎和免疫负性调节的作用.因此Th1及Th17倾向的免疫应答可能导致炎症反应与自身免疫性疾病的发生和进展,故在体内阻断其相关的细胞因子IL-17、IL-6等则可使Th1、Th17及Tr重新保持平衡而对自身免疫性疾病产生治疗作用.     

Galectin-9对活化的CD4+T细胞免疫调节作用的机制研究

目的 研究Galectin-9对活化的CD4+T细胞的免疫调节作用,并进一步探讨其作用机制.方法 获取野生型C57BL/6小鼠淋巴细胞,利用MACS分选CD4+ na(i)ve T细胞,给予anti-CD3 (2.5 μg/ml)抗体、anti-CD28(5μg/ml)抗体和IL-2(100 ng/ml)刺激,培养3d.将活化的CD4+T细胞分为3组:正常对照组、Galectin-9组和Galectin-9+α-乳糖组.利用CFSE检测T细胞增殖情况,并动态观察细胞形态变化;检测CD4+ CD69+T细胞、Th1、Th2和Th17细胞的比例;并利用ELISA检测淋巴细胞分泌IFN-γ 、IL-4、IL-10、IL-12、IL-17A和TGF-β1等细胞因子的水平;利用Western blot检测T-bet、GATA-3和ROR-yt等T细胞分化调控蛋白的变化.结果 与正常对照组和Galectin-9+α-乳糖组相比,Galectin-9组于2h时开始出现细胞形态改变,同时CD4+ CD69+T细胞、Th1和Th17细胞表达减少(P＜0.05),但Th2细胞无明显变化;培养上清液中IFN-γ、IL-12、IL-17A和TGF-β1的表达水平降低(P＜0.05),而IL-4和IL-10等Th2型细胞因子水平无明显变化;同时T-bet和ROR-γt的表达水平减少(P＜0.05).结论 Galectin-9抑制活化CD4+T细胞的Th1和Th17型免疫应答,而对Th2型免疫应答无影响,免疫调节的机制可能与其在转录水平影响Th1和Th17特定转录因子的表达有关.     

结核分枝杆菌耐热抗原激活的人γδT细胞Th2极性分化特征以及T-bet/GATA-3对分化的调控作用

目的研究结核杆菌耐热抗原(MTB-HAg)激活的人外周血γδT细胞Th2极性分化特点和表达于T细胞中的T盒(T-bet)和GATA结合蛋白3(GATA-3)转录因子的调控作用。方法用MTB-HAg刺激人外周血单个核细胞(PBMC)获得MTB-HAg激活的T细胞(MTBAT),分别在中性条件和Th2极化条件培养后,再经10 ng/m L佛波醇酯(PMA)、500 ng/m L离子霉素(ionomycin)和2.5μmol/L莫能菌素(monensin)刺激6 h,四色荧光抗体染色流式细胞术检测γδT细胞和αβT细胞内细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的表达。流式细胞术分选28 d MTBAT中的γδT细胞和CD4+T细胞,反转录PCR(RT-PCR)检测T-bet和GATA-3 mRNA的表达。结果在中性条件和Th2极化条件下培养的MTBAT中,γδT细胞一直优势表达IFN-γ,而Th2极化条件下,随培养时间增加IFN-γ+αβT细胞百分率显著下降。与中性条件培养比较,Th2极化条件下MTBAT培养28 d,Th0型(IFN-γ+IL-4+)γδT细胞显著增加;而Th2型(IFN-γ-IL-4+)αβT细胞显著增加。RT-PCR结果显示,Th2极化的γδT细胞仍高表达T-bet mRNA,而在CD4+T细胞T-bet mRNA表达被显著下调;同时,GATA-3 mRNA在γδT细胞和CD4+T细胞的表达均显著上调。结论 Th2极化条件下,大部分γδT细胞仍为Th1型,仅部分极性分化为Th0型细胞;Th2极性分化的γδT细胞转录因子T-bet和GATA-3未表现出交互调节功能。     

Th17细胞及其与感染性疾病关系的研究进展

Th17细胞是一种新近发现的不同于Th1、Th2细胞的CD4+效应性T细胞亚群,其分化受到局部微环境中不同细胞因子的调节,如TGF-β、IL-6促进初始CD4+T细胞分化为Th17细胞,而IL-27等则是抑制Th17分化的重要因子.Th17细胞以分泌IL-17、IL-21、IL-22等致炎细胞因子为主要特征,在对抗机体...     

IL-4、IL-10和抗IL-12受体β1 mAb抑制IL-23诱导正常人记忆T细胞 IFN-γ产生

目的 探讨重组人白介素23（IL-23）是否能够诱导正常人T细胞IFN-γ的产生,作用的靶细胞亚群和调节因素。方法 正常人PBMC在抗CD3（anti-CD3）单克隆抗体或anti-CD3和抗CD28（anti-CD28）单克隆抗体刺激的条件下与IL-23进行培养,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养液中IFN-γ的水平;同时采用流式细胞仪,在单个细胞水平上分析IL-23诱导PBMC IFN-γ表达的T细胞亚群。结果 在未经任何刺激的情况下,PBMC产生很低或不产生IFN-γ。IL-23呈剂量依赖方式促进由anti-CD3活化的PBMC IFN-γ产生。细胞亚群分析的结果表明,IL-23诱导记忆CD4^＋和CD8^＋T细胞表达IFN-γ,对活化的CD4^＋T细胞作用较为明显。Th2细胞因子（IL-4、IL-10）和抗IL-12受体β1 mAb（IL-12Rβ1）抑制IL-23诱导T细胞IFN-γ产生。结论 IL-23促进活化的记忆CD4^＋和CD8^＋T细胞IFN-γ的产生。Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1 mAb抑制由IL-23诱导IFN-γ产生,提示这些细胞因子和抗体对IL-23引起的自身免疫病具有拮抗作用。     

八肽胆囊收缩素对经钥孔戚血蓝蛋白免疫小鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的：探讨八肽胆囊收缩素（CCK-8）对经钥孔戚血蓝蛋白（KLH）免疫小鼠T淋巴细胞亚群的影响。方法：雌性BALB/c小鼠KLH免疫同时分别给予不同剂量CCK-8。流式细胞法检测小鼠外周血及脾细胞中CD4+、CD8+T细胞阳性百分率；RT-PCR法检测脾细胞中Th1型细胞因子IFN-γ、Th2型细胞因子IL-4 mRNA表达；ELISA法检测其培养上清中IFN-γ、IL-4水平；HE染色观察小鼠肺组织病理变化。结果：CCK-8下调KLH免疫小鼠外周血及脾细胞中上升的CD4+、CD8+T细胞阳性百分率，降低CD4+/CD8+比值；进一步提高其IFN-γ mRNA表达和培养上清中IFN-γ分泌量，同时下调上升的IL-4 mRNA表达和培养上清中IL-4分泌量；减轻KLH免疫所致小鼠肺部炎症。结论：CCK-8可调节适应性免疫应答，抑制T细胞尤其是CD4+T细胞活性；抑制Th2功能，提高Th1功能，因此可能在变态反应性疾病的发病和防治中具有一定作用。     

自身免疫性溶血性贫血患者外周血Th1／Th2、Th3／Tr1细胞的检测及意义

目的探讨自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血Th1／Th2、Th3／Tr1细胞状态,分析它们在AIHA发病机制中的作用。方法收集AIHA患者及健康者外周抗凝静脉血,分离纯化淋巴细胞。运用FITC-CD3单抗,Cy5-CD4单抗,PE—CRTH2单抗,以CD3／CD4设门作三色流式细胞术检测Th1／Th2细胞,ELISA法检测血清中Th3细胞相关的细胞因子TGF-β1的含量和Tr1细胞的相关因子IL-10的含量。结果与正常对照相比．AIHA患者外周血CD3^＋CD4^＋CRTH2-T细胞（Th1）百分率、CD3^＋CD4^＋CRTH2^＋T细胞（Th2）百分率均下降（P〈0．05）,而CD4^＋CRTH2^-T／CD4^＋CRTH2^＋T比例（Th1／Th2）均明显升高（P〈0．01）,Th3／Tr1细胞分泌的相关细胞因子TGF-β1和IL-10的含量均降低（P〈0．05）。结论AIHA患者外周血存在细胞免疫功能失调,T细胞亚群极化状态发生改变,呈Th1型细胞优势,Th3／Tr1细胞因子含量下降,可能与AIHA的免疫学发病机制有关。     

Th17细胞免疫学基础以及临床研究进展

Th17作为近几年CD4^＋T辅助细胞亚群的新成员,在炎症反应中扮演了极其重要的角色。Th17主要存在于CD4^＋记忆细胞亚群中,其分泌的细胞因子IL-17具有强烈的促炎症作用,通过作用于上皮细胞、基质细胞等分泌大量的IL-8,介导中性粒细胞向炎症部位迁移,从而诱导炎症反应。虽然Th17的发现主要源于对动物及人类自身免疫系统疾病的研究,但越来越多的研究表明,Th17在感染免疫、移植免疫,以及肿瘤免疫过程中起到了举足轻重的作用。进一步的研究应该主要集中于对Th17细胞功能的研究以及通过Th17／IL-23等通路对各种疾病治疗的可行性探讨。     

日本血吸虫感染小鼠肠系膜淋巴结T细胞亚群的变化

目的:观察C57BL/6小鼠感染日本血吸虫(Schistosome japonicum,Sj)4～6周肠系膜淋巴结T细胞亚群的改变。方法:用Sj尾蚴腹贴法建立Sj感染的小鼠模型。4～6周后取肠系膜淋巴结做淋巴细胞计数,使用细胞内细胞因子染色的方法,利用流式细胞仪检测肠系膜淋巴结淋巴细胞中分泌不同细胞因子的T细胞亚群含量的变化。结果:Sj感染C57BL/6小鼠4～6周后,肠系膜淋巴结细胞数量明显增多;流式细胞仪检测发现肠系膜淋巴结中CD4+T细胞中分泌IFN-γ的Th1细胞增多1倍,分泌IL-4和IL-5的Th2细胞增多近20倍,Th1/Th2轴发生偏移;分泌IL-17的Th17细胞也增多近5倍;分泌IFN-γ的CD8+T细胞也增多1倍。结论:日本血吸虫感染C57BL/6小鼠4～6周肠系膜淋巴结细胞增多,并向Th2和Th17型细胞极化。     

PD-1/PD-L的作用机制及其在炎症性肠病中的关系进展

PD-1已被证实在肠黏膜细胞中高表达,与其配体结合后可通过激活初始T淋巴细胞、抑制活化的效应T淋巴细胞及调节细胞因子的分泌等参与肠黏膜炎症的发生过程,当阻断PD-1/PD-L通路时,肠黏膜炎症减轻。炎症性肠病是一种病因尚不清楚的慢性肠道非特异性炎症性疾病。研究发现肠道黏膜免疫平衡失调在其发病过程中占有重要地位,尤其是肠黏膜T淋巴细胞的免疫调节失衡可导致促炎介质的释放、促炎细胞的聚集和组织的破坏。由此,推断PD-1/PD-L通路可作为治疗炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的新靶点。