丹参酮ⅡA对低氧培养下人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡及HIF-1α表达的影响

目的:观察丹参酮ⅡA(Tan ⅡA)对低氧培养下人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡及HIF-1α表达的影响.方法:用氯化钴(CoCl2)创建低氧模型,设常氧对照组、低氧对照组和低氧加不同浓度Tan ⅡA组.分别取0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 mg/L的Tan ⅡA干预低氧胃癌SGC7901细胞24、48、72 h后,MTT法检测细胞活力:用上述同样浓度的Tan ⅡA干预低氧胃癌细胞48 h和72h后.HOECHST染色法检测细胞凋亡.Tan ⅡA(0.5、2.0、10.0 mg/L)干预低氧胃癌细胞48h后,免疫细胞化学二步法检测HIF-1α蛋白表达的变化.结果:MTT法证实,低氧条件下,Tan ⅡA呈时间、剂量依赖性地抑制胃癌SGC-7901细胞增殖(P＜0.01),10.0 mg/L Tan ⅡA作用细胞72 h后,其抑制率达71.2%.HOECHST染色法发现,低氧条件下,分别用0.5-1 0.0 mg/L浓度的Tan ⅡA作用胃癌细胞24、48 h,Tan ⅡA可呈时间、剂量依赖性地诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡(F=60354.00,187922.10,均P＜0.05),10.0mg/L Tan ⅡA作用细胞72 h后,凋亡率达40.70%±1.55%.免疫细胞化学法显示,Tan Ⅱ A呈剂量依赖性地抑制低氧诱导的HIF-1α蛋白表达(F=712.326,P＜0.01).结论:低氧条件下,Tan ⅡA抑制胃癌细胞增殖并诱导其凋亡,这种作用可能与其抑制HIF-1α蛋白表达有关.     

低氧下丹参酮ⅡA对人胃癌SGC-7901细胞HIF-1α与c-Myc表达的影响

目的观察低氧下丹参酮ⅡA（Tan ⅡA）对人胃癌SGC-7901细胞低氧诱导因子let（HIF-1α）与c—Myc表达的影响和二者的相关性。方法用氯化钴创建低氧模型,设常氧对照组、低氧对照组和低氧加不同浓度Tan Ⅱ A组。分别取0．5、2．0、10．0mg／L Tan ⅡA干预低氧胃癌细胞48h后,免疫细胞化学二步法检测HIF-1α和c—Myc蛋白表达的变化。结果Tan ⅡA呈剂量依赖性地抑制HIF—1α和c—Myc蛋白表达,且二者呈高度正相关（r=0．901,P〈0．05）。结论低氧条件下,Tan ⅡA可同时抑制人胃癌SGC-7901细胞HIF-1α和c—Myc蛋白的表达,提示Tan ⅡA可能对抑制肿瘤的无氧糖酵解和VEGF表达具有重要作用。     

5-Fu对低氧下胃癌SGC7901细胞系中SP细胞比例及HIF-2、ABCG2表达的影响

目的:探讨低氧下5-Fu化疗抵抗的机制.方法:MTT检测常氧和低氧下的细胞活力,并计算5-Fu的半数抑制浓度(IC50).以IC50的5-Fu分别作用细胞常氧和低氧组细胞24、48和72h后,收集标本,Hoechst33342染色法检测侧群(side population,SP)细胞的比例,免疫细胞化学法检测低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor-2α,HIF-2α),荧光免疫细胞化学法检测ABCG2(ATP-binding cassettesuperfamily Gmember 2)的表达.结果:常氧和低氧下,5-Fu均呈时间、剂量依赖性地抑制SGC7901细胞增殖,其IC50分别为100、200mg/L.常氧下SP细胞的比例为1.87%,低氧诱导后其比例逐渐增加.常氧下5-Fu-IC50作用于细胞不用时间后,SP细胞的比例无明显变化,低氧下其比例却逐渐增加.常氧下,HIF-2和ABCG2蛋白呈低水平表达,且5-Fu-IC50作用于不同时间后也无明显变化,低氧下5-Fu-IC50作用于不同时间后二者的表达逐渐增加.结论:低氧下5-Fu对胃癌SGC7901细胞存在化疗抵抗可能与低氧通过诱导HIF-2α-ABCG2通路的表达、促进肿瘤细胞的干细胞化有关,这可能是肿瘤化疗抵抗和复发的根源.     

常氧与低氧下CagA~+幽门螺杆菌对人胃癌SGC7901细胞系HIF-2α、ABCG2表达的影响

目的:观察常氧与低氧下CagA+幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)对人胃癌SGC7901细胞系低氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2alpha,HIF-2α)、ABCG2表达的影响,初步探讨H.pylori在胃癌发生发展中的干细胞机制,及其与肿瘤微环境低氧的协同作用.方法:内镜下采集胃黏膜标本,行H.pylori培养并鉴定,PCR方法检测H.pyloriCagA+基因.CagA+H.pylori与胃癌SGC7901细胞于常氧和低氧环境下共培养48h(分常氧对照组、低氧对照组、常氧CagA+H.pylori组、低氧CagA+H.pylori组).免疫细胞化学法检测HIF-2α和ABCG2蛋白的表达,RT-PCR法检测ABCG2 mRNA的表达.结果:免疫细胞化学结果显示:常氧下胃癌SGC7901细胞HIF-2α、ABCG2蛋白呈低水平表达,低氧和CagA+H.pylori均能显著诱导HIF-2α、ABCG2蛋白表达(与常氧对照组相比,均P0.01),与低氧对照组和常氧CagA+H.pylori组相比,低氧CagA+H.pylori组表达进一步升高(均P0.01).相关分析显示HIF-2α与ABCG2表达呈正相关(r=0.976,P0.05).RT-PCR检测ABCG2 mRNA表达结果与免疫细胞化学一致.结论:CagA+H.pylori可刺激胃癌细胞HIF-2α、ABCG2表达,低氧环境下其表达进一步增加,表明CagA+H.pylori和低氧对HIF-2α、ABCG2的表达有协同作用.提示CagA+H.pylori和低氧可能是诱导胃癌细胞干细胞化及化疗抵抗的重要原因.     

低氧对无糖逆境中星形胶质细胞增殖和凋亡的作用

目的探讨星形胶质细胞对低氧的耐受程度;葡萄糖对其凋亡和增殖的影响及无糖逆境中低氧微环境对胶质细胞的是否具有保护作用及可能分子机制。方法通过三气培养箱构建低氧微环境,将星形胶质细胞(HAC)设为常氧常糖组(21%O2-G+)和常氧无糖组(21%O2-G-),低氧常糖组(0.1%O2-G+)和低氧无糖组(0.1%O2-G-)。分别在不同培养条件下培养24、48、72 h后通过MTT法及Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞增殖及凋亡情况,利用Western印迹法检测各组低氧诱导因子(HIF)-1α表达情况。结果在低氧常糖组星形胶质细胞各时间段无明显凋亡(P0.05),但可缓慢增殖。常氧无糖组及低氧无糖组48 h细胞开始发生明显凋亡,增殖被显著抑制(P0.05),48 h低氧无糖组细胞凋亡明显低于常氧无糖组(P0.05),至72 h凋亡率高于常氧无糖组(P0.05)。低氧可诱导HIF-1α表达水平增高,其中低氧常糖组HIF-1α表达水平最高,其次为低氧无糖组,常氧常糖及常氧无糖组表达量均较低。结论星形胶质细胞可耐受极度低氧;葡萄糖缺乏可诱导细胞发生明显的凋亡并抑制其增殖;低氧可在一定时限内部分对抗葡萄糖缺乏所诱导细胞凋亡。低氧可诱导HIF-1α的高表达,并且可能与低氧抗无糖逆境作用有关。     

丹皮酚联合5-FU对食管癌EC9706细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨丹皮酚(paeonol,Pae)单独及联合5-Fu对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用.方法:采用6种浓度的Pae(7.81、15.63、31.25、62.50、125.00、250.00 mg/L)、3种浓度的5-FU(12.50、25.00、50.00 mg/L)及Pae(31.25 mg/L)和5-FU(12.50 mg/L)联合分别处理EC9706细胞24、48、72 h.同时设对照组(细胞不做处理),采用MTT法检测各个时间段细胞的增殖情况:采用流式细胞术检测4种浓度的Pae(31-25、62.50、125.00、250.00 mg/L)处理EC9706细胞72 h后细胞周期的变化:倒置显微镜下观察各Pae组细胞各时间段形态学变化,HE染色光镜下观察凋亡细胞:采用免疫细胞化学法检测经Pae(31.25 mg/L)、5-FU(12.50mg/L)单独和联合作用48 h后细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达.结果:Pae、5-FU可明显抑制EC9706细胞增殖,并随着浓度的增加和作用时间的延长而增强(P<0.05),Pae与5-FU联合用药比单用Pae或5.FU抑制效果更明显(P<0.05);Pae作用后EC9706细胞中G0/G1期和G2/M期细胞比例下降、S期细胞比例上升(Pae 125.00 mg/L组:G0/G1期21.18%±2.28% vs 62.17%±5.23%、G2/M期0.76%±0.54% vs 9.92%±3.10%、S期78.06%±2.82% vs 27.91%±2.13%,均P<0.05):HE染色光镜下可见典型的肿瘤细胞凋亡改变:Pae、5-FU可下调EC9706细胞中Bcl-2蛋白表达,同时增强EC9706细胞中Bax蛋白的表达,联合用药组较单药组作用更为明显(2.21±0.14 vs 5.67±0.30,4.22±0.34;8.55±0.33 vs 3.90±0.27,6.28±0.26,均P<0.05).结论:Pae可明显抑制人食管癌EC9706细胞的增殖.促进其凋亡,Pae联合5-FU作用更为明显.     

丹参酮Ⅱ A对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖及诱导凋亡的作用

目的体外观察丹参酮(Tan)ⅡA对人皮肤鳞状细胞癌细胞株A431细胞的增殖、凋亡情况的影响及其抑癌机制。方法选取0.5、1、2.5、5、10μg/ml浓度的TanⅡA作用于体外培养的A431细胞,同时设空白对照组,分别于作用24、48、72 h时间点,应用MTT法、流式细胞术检测A431细胞增殖和凋亡情况。结果不同浓度的TanⅡA作用于A431细胞后,细胞生长受到不同程度的抑制,各浓度组与空白对照组比较,均有统计学意义(P<0.05)。随着药物浓度的增加和作用时间的延长,TanⅡA对A431细胞增殖抑制率有明显差异(P<0.05);流式细胞术检测结果表明,TanⅡA可以诱导A431细胞凋亡。各浓度组的细胞凋亡率明显均高于空白对照组(P<0.05)。细胞凋亡率随TanⅡA浓度的增加而上升(P<0.05)。结论TanⅡA通过抑制人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖和诱导其凋亡途径,抑制人皮肤鳞状细胞癌的发生发展,且具有浓度和时间依赖性。     

HIF-1α在小鼠ACTH垂体腺瘤细胞AtT-20的抗凋亡作用

目的 观察缺氧诱导因子(HIF)-1α在小鼠垂体促肾上腺皮质激素腺瘤细胞AtT-20生长增殖中的作用,验证HIF-1α能否保护AtT-20细胞免于低氧诱导的细胞凋亡.方法 不同浓度的CoCl2诱导AtT-20细胞发生低氧,MTT方法观察CoCl2促进细胞生长增殖的作用,实时定量PCR和Western印迹检测常氧和低氧环境下HIF-1α mRNA和蛋白水平的改变;细胞转染HIF-1α-siRNA后,CoCl2低氧诱导,实时定量PCR和Western印迹验证siRNA下调HIF-1α的效率,凋亡检测系统Annexin V-FITC和TUNEL法检验细胞凋亡情况.结果 在一定浓度(≤100 μmoL/L)和时间(≤48 h)范围内,CoCl2可以促进AtT-20细胞的生长增殖,并呈浓度和时间正相关性;HIF-1α-siRNA转染后,CoCl2低氧诱导处理的细胞发生凋亡的比率大幅度上升(P＜0.05).结论 HIF-1α在AtT-20细胞生长增殖中发挥抗凋亡的作用.     

Celecoxib对胃癌细胞凋亡的影响

目的:研究选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂Celecoxib对人胃癌细胞株SGC7901凋亡的影响.方法:采用MTT法测定人胃癌细胞株SGC7901分别在1×10-5,1×10-6,1×10-7,1×10-8,1×10-9mol/L的Celecoxib作用48h后生长抑制情况;流式细胞术(FCM)观察Celecoxib对SGC7901细胞凋亡的影响;采用免疫细胞化学染色观察Survivin的表达.结果:Celecoxib浓度为1×10-5-1×10-9mol/L时,对SGC7901细胞的生长均有抑制作用,以1×10-5mol/L浓度的抑制作用最为显著,其抑制率为30.03%;1×10-5mol/LCelecoxib作用12,24,48h后,细胞凋亡比例较对照组均明显增加,48h凋亡率达17.83%;1×10-5mol/LCelecoxib作用后,Survivin的表达自用药3h起下降,24h最明显.结论:Celecoxib可诱导SGC7901细胞的凋亡,其可能的作用机制为抑制细胞Survivin基因的表达.     

内源性途径调控芬太尼与5-氟尿嘧啶联合诱导的MCF-7乳腺癌细胞凋亡

目的探讨芬太尼与5-氟尿嘧啶(FU)联合应用对MCF-7乳腺癌细胞凋亡的影响及内源性途径的调控机制。方法作用48 h后通过流式细胞技术检测亚二倍体峰细胞凋亡情况,通过Western印迹检测Bcl-2、Bax表达情况。结果 1μmol/L及10μmol/L浓度的芬太尼单独应用均引起凋亡率增加(P0.01),Bcl-2表达减弱(P0.01),Bax表达增强(P0.05,P0.01);5-FU单独应用后凋亡率亦明显增加(P0.01),Bcl-2表达减弱(P0.01),Bax表达增强(P0.01);三种浓度芬太尼与5-FU联合应用均具有协同作用(P0.05,P0.01)。结论一定浓度的芬太尼、5-FU及联合应用48h对MCF-7乳腺癌细胞有促进凋亡作用,并显著下调Bcl-2表达、上调Bax表达,两药联合应用启动内源性凋亡途径具有协同作用。     

曲古抑菌素A对胃癌细胞生长的抑制作用

目的: 研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂-曲古抑菌素A(trichostatin A, TSA)对胃癌细胞系SGC-7901的生长抑制作用, 证实该作用是通过促使细胞凋亡而实现的.方法: 用不同浓度(0.2、0.4和0.8 mg/L)和不同作用时间(24、48和72 h)的TSA作用于SGC-7901细胞, 采用MTT法观察TSA对SGC-7901细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率的变化;通过透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果: TSA可抑制胃癌SGC-7901细胞的生长,且这种作用呈时间和剂量依赖关系. 当TSA作用浓度分别为0.2、0.4和0.8 mg/L时, 与SGC-7901细胞均作用72 h, TSA对SGC-7901细胞生长的抑制率分别为25%±1.2%, 45%±1.4%和73%±1.7%, 各组均与TSA 0.2 mg/L组比较, 差异显著( P<0.05). 当0.8 mg/L TSA分别与SGC-7901细胞作用24、48和72 h, TSA对SGC-7901细胞生长的抑制率分别为21%±1.1%, 37%±2.0%和73%±1.7%, 各组均与TSA作用24 h组比较, 差异显著( P<0.05). TSA可延缓细胞周期, 具有明显的诱导细胞凋亡作用. 电镜下见细胞染色质凝聚成段片状, 细胞核固缩断裂, 核膜破裂, 细胞器及胞膜自溶, 凋亡小体形成.结论: TSA通过诱导细胞周期阻止和凋亡来抑制胃癌细胞系SGC-7901的生长, 且这种作用呈时间和剂量依赖性, 为TSA用于胃癌的治疗提供理论依据.     

环氧合酶-2抑制剂celecoxib抑制胃癌生长的实验研究

目的研究celecoxib在体内外对胃癌增殖及凋亡的影响.方法不同浓度celecoxib处理体外培养的SGC7901细胞后,采用噻唑蓝(MTT)法检测处理后24、48、72、96小时SGC7901细胞的增殖活性,流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡.利用SGC7901胃癌细胞株建立裸鼠胃癌种植瘤模型,实验组予以celecoxib 10 mg/Kg/day灌胃,共给药6周.结果 25,50,100,200μmol/Lcelecoxib处理SGC7901细胞24、48、72、96小时后,细胞增殖明显受到抑制,呈时间和剂量依赖性特点.50 μmol/L celecoxib处理SGC7901细胞24 h后,流式细胞仪细胞周期分析表明G0/G1期细胞百分率上升,S期和G2/M期细胞百分率下降.流式细胞仪检测实验组的凋亡率明显高于对照组(20.4±2.8%vs 7.6±0.6%,P＜0.05).celecoxib治疗组裸鼠胃癌种植瘤重量为(0.43±0.21)g,明显低于对照组(1.33±0.45)g(P＜0.05).结论体内及体外实验表明,celecoxib能有效抑制胃癌生长,其机制可能与其阻滞细胞周期及诱导凋亡有关.     

Fas途径调控芬太尼与5-氟尿嘧啶联合诱导MCF-7乳腺癌细胞凋亡

目的探讨芬太尼与5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人乳头癌细胞株(MCF-7)乳腺癌细胞凋亡的影响及Fas途径的调控机制。方法作用48 h后通过流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡检测试剂盒/碘化丙啶(Annexin V-EGFP/PI)染色的细胞凋亡情况,通过Western印迹检测Fas、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-8表达情况。结果 1μmol/L及10μmol/L浓度的芬太尼单独应用均引起凋亡率增加,Fas、Caspase-8表达增强(P0.05,P0.01);5-FU单独应用后凋亡率亦明显增加,Fas、Caspase-8表达增强(P0.01);三种浓度芬太尼与5-FU联合应用均具有协同作用(P0.01)。Caspase-8与Fas表达变化呈显著正相关(r=0.877,P0.01)。结论一定浓度的芬太尼、5-FU及联合应用48 h对MCF-7乳腺癌细胞有促进凋亡作用,并显著上调Fas表达和Caspase-8活性,两药联合应用启动外源性凋亡途径具有协同作用。     

低氧对前列腺间质细胞活性氧、低氧诱导因子-1α、雄激素受体表达的影响及依达拉奉的干预作用

目的探讨低氧环境下活性氧(ROS)在前列腺增生中的作用及依达拉奉对其的干预作用。方法流式细胞仪检测前列腺增生组织及原代培养细胞中ROS的表达,低氧条件下观察前列腺间质细胞ROS及生长变化,荧光定量PCR法检测低氧诱导因子(HIF)-1α、雄激素受体(AR)的变化。低氧条件下用依达拉奉干预后,检测细胞生长及ROS、HIF-1α、AR的变化。结果前列腺增生组织及3%O_2条件下细胞ROS均明显升高(P<0.01),3%O_2条件下细胞增殖升高(P<0.01);HIF-1α、AR表达上调(均P<0.05);在3%O_2条件下依达拉奉干预后,ROS明显降低(P<0.01),HIF-1α明显下调(P<0.05);细胞增殖明显下降(P<0.01)。结论低氧及低氧环境刺激产生的ROS在前列腺增生中可能起关键作用。     

姜黄素抑制胃腺癌SGC7901细胞增殖和表皮生长因子受体表达的研究

背景：姜黄素是一种有价值的植物抗癌物。有研究报道其能抑制多种肿瘤细胞生长，诱导肿瘤细胞凋亡。目的：探讨姜黄素对胃癌细胞增殖的影响及其可能机制。方法：①胃腺癌SGC7901细胞经常规培养，给予不同浓度的姜黄素处理，观察细胞生长情况，采用甲基噻唑基四唑（MTT）比色法检测细胞增殖，计算抑制率。②以不同浓度的姜黄素处理胃腺癌SGC7901细胞，采用免疫荧光染色和流式细胞术（FCM）检测表皮生长因子受体（EGFR）表达的变化。③以低浓度姜黄素或转化生长因子（TGF）-α处理胃腺癌SGC7901细胞，或以低浓度姜黄素和TGF-α同时处理细胞，采用MTT比色法检测细胞增殖，计算抑制率。结果：①姜黄素可显著抑制胃腺癌SGC7901细胞增殖，并随其浓度的增加而作用增强（P均〈0．001）。当给予10、20、30μmol／L姜黄素作用72h时，抑制率分别为22．4％、46．9％和67．2％。②姜黄素使胃癌细胞EGFR表达显著下降。当给予10、20、30μmol／L姜黄素作用48h时，EGFR表达分别下降了10．5％、17．1％和30．0％。③当给予5I．μmol／L低浓度姜黄素处理细胞72h时，细胞增殖速度无明显变化；给予30μg/L TGF-α处理，细胞增殖速度加快；同时给予5μmol/L低浓度姜黄素和30μg/L TGF-α处理时，则TGF—α刺激的胃癌细胞增殖明显受抑制，抑制率为21．5％。结论：姜黄素能抑制胃腺癌SGC7901细胞增殖，并能抑制其EGFR的表达，进而抑制TGF—α的促细胞增殖作用。     

熊果酸纳米脂质体微粒对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及机制探讨

目的观察熊果酸纳米脂质体微粒(UA-PL-NP)对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响,并探讨其机制。方法将对数生长期的SGC-7901细胞分为两组,观察组分别加入0.01、0.1、1.0、10.0 mg/L的UA-PL-NP,对照组不加UA-PL-NP;分别于培养24、48、72 h,MTT法测算细胞增殖抑制率。另取对数生长期的SGC-7901细胞分为两组,观察组加入为3.73 mg/L的UA-PL-NP,对照组不加UA-PL-NP;作用72 h后倒置显微镜观察细胞形态,细胞免疫化学染色法检测细胞中的Caspase-3。结果不同浓度的UA-PL-NP均能抑制SGC-7901细胞增殖,并呈剂量、时间依赖性(P均<0.05);UA-PL-NP作用72 h后,SGC-7901细胞出现典型的凋亡形态学改变;对照组和观察组Caspase-3蛋白表达的HSCORE得分分别为(2.133±0.149)、(3.307±0.069)分,两组比较P<0.05。结论 UA-PL-NP对SGC-7901细胞具有增殖抑制作用,其机制可能与活化Caspase-3诱导细胞凋亡有关。     

阿霉素联合5-氟尿嘧啶通过Akt/mTOR通路治疗肺腺癌的研究

目的 探讨阿霉素与5-氟尿嘧啶治疗肺腺癌的作用机制.方法 用MTT比色法与流式细胞术法检测32例肺腺癌患者肿瘤组织提取的细胞给药阿霉素和/或5-氟尿嘧啶后细胞凋亡情况.用Western blot法检测CoCl2诱导低氧情况下血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)与磷酸化哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达水平.用Transwell法检测药物对细胞迁移与侵袭能力的影响.结果 给药72 h后,5-氟尿嘧啶组与阿霉素组细胞显著凋亡(P值均<0.05);联合组与对照组相比差异有显著统计学意义(P<0.01).药物处理细胞48 h后,各给药组VEGF、HIF-1α、p-Akt与p-mTOR蛋白的表达水平显著降低,其中联合组蛋白下降水平最为显著.给药48 h后,5-氟尿嘧啶与阿霉素可显著抑制细胞迁移与侵袭(P值均<0.05);联合组细胞迁移率与对照组相比差异有显著统计学意义(P<0.01).结论 阿霉素联合5-氟尿嘧啶可能是通过抑制Akt/mTOR信号通路对肺腺癌起到治疗的作用.     

丹参酮ⅡA对肝癌SMMC-7721细胞COX-2表达的影响

目的:观察丹参酮ⅡA对肝癌SMMC-7721细胞生长和凋亡的影响及其作用机制．方法:体外培养肝癌SMMC-7721细胞株,经丹参酮ⅡA(终浓度0．5 mg／L)作用后,采用四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖,透射电镜观察细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫细胞化学SABC法检测COX-2蛋白表达,放射免疫法检测前列腺素E2(PGE2)含量．结果:丹参酮ⅡA对肝癌细胞的生长有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性．以0．5 mg／L作用终浓度抑制作用最明显,其48 h的抑制率为 69．3％,与对照组相比差异有显著性(P<0．01)．电镜下观察,丹参酮ⅡA作用后肝癌细胞表现为细胞皱缩、核染色质浓缩、核碎裂以及凋亡小体形成等凋亡特征性的形态改变．5 mg/ L丹参酮ⅡA作用后,随时间的延长,凋亡率逐渐升高,48 h达到高峰,随后逐渐下降(24,48, 72 h凋亡率分别为7．45％±0．33％、6．59％± 0．45％、4．78％±1．05％),与对照组比较,各处理组都有显著性差异(均P<0．01),丹参酮作用组肝癌细胞COX-2表达明显减少,其培养液中 PGE2的产生量下降,与对照组相比差异均有显著性(P<0．01)．结论:丹参酮ⅡA可能是通过下调COX-2 mRNA的表达水平发挥其对肝癌细胞生长抑制及促进凋亡作用．     

全反式维甲酸联合奥沙利铂对人SMMC-7721肝癌细胞株的作用

目的:观察全反式维甲酸(ATRA)联合奥沙利铂(L-OHP)对人SMMC-7721肝癌细胞增殖及凋亡的影响.方法:选用ATRA(10-5mol/L)及不同浓度的L-OHP(10mg/L、20mg/L、40mg/L),并选用10-5mol/L的ATRA分别联合L-OHP(10mg/L、20mg/L、40mg/L)作用于SMMC-7721肝癌细胞24h、48h、72h;采用MTT比色法观察其对SMMC-7721肝癌细胞的生长抑制作用,倒置显微镜下观察细胞形态变化;采用流式细胞术分析药物作用48h时SMMC-7721细胞的周期分布和凋亡的情况.结果:ATRA及不同浓度L-OHP单药及联合均可显著抑制SMMC-7721肝癌细胞的生长,细胞形态改变,凋亡比例增加,并呈剂量-时间依赖性;两药联合较单药相比作用明显增强(P<0.01);ATRA联合20mg/LL-OHP与ATRA联合40mg/LL-OHP相比,作用细胞48h及72h时,对细胞生长抑制作用无统计学差异;两药联合较单药相比,细胞凋亡率明显增加,细胞阻滞S期增强(P<0.01).结论:ATRA可抑制肝癌SMMC-7721细胞的生长并诱导细胞凋亡,与L-OHP联用后作用增强并可减少奥沙利铂用量,具有协同作用.     

白藜芦醇对胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响

目的:探讨白藜芦醇(Res)对胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响.方法:MTT法检测不同浓度(0,10,20,50,100,200 μmol/L)Res处理24,48,72 h对SGC7901细胞的抑制率.流式细胞仪采用AnnexinV和PI双染检测细胞的早期凋亡率.电镜扫描观察SGC7901细胞形态学改变,分光光度法检测caspase-3活性.结果:Res在20-300 μmol/L浓度范围内,以浓度和剂量依赖的方式抑制胃癌细胞的增殖(P＜0.01).经0,10,20,50,100,200 μmol/L Res处理24 h后,细胞凋亡率分别为1.17%,3.73%,8.75%,23.35%,63.97%和70.10%,晚期凋亡和坏死的细胞比例分别为5.66%,7.22%,9.86%,6.91%,12.51%及11.98%,各组之间差异不大.电镜下见到典型的细胞凋亡的形态学改变.100 μmol/L Res处理后6 h caspase-3活性增加,18 h达高峰,24 h后下降,48 h仍高于正常(0.135±0.036 vs 0.069±0.008,P＜0.05).经20,50,100 μmol/L Res处理18 h后的细胞的caspase-3活性分别为0.169±0.017,0.247±0.028,0.353±0.044(P＜0.01),较对照组(0.063±0.006)分别增加2.68倍、3.92倍和5.61倍.结论:Res通过诱导caspase-3活性增加以时间依赖和浓度依赖的方式抑制SGC7901细胞增殖,诱导细胞凋亡.