Notch家族蛋白、LCHAD在早发型重度子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨Notch家族蛋白、长链三羟基酰基辅酶A脱氢酶(LCHAD)的表达与早发型重度子痫前期发病的关系,揭示早发型重度子痫前期发病机理。方法选择早发型重度子痫前期患者45例、晚发型重度子痫前期患者42例为研究组,40例正常分娩者为对照组,免疫组化法检测Notch家族蛋白、LCHAD在胎盘绒毛组织中的分布和表达水平。结果各组胎盘组织的合体滋养细胞、血管内皮细胞、蜕膜细胞中均可以检测到Notch家族蛋白、LCHAD的表达。早发型重度子痫前期组Notch家族蛋白、LCHAD表达均显著低于晚发型重度子痫前期组及对照组。各组胎盘组织中Notch家族蛋白表达与LCHAD表达水平呈正相关。结论早发型重度子痫前期组胎盘中Notch家族蛋白、LCHAD低表达与疾病的发病发展密切相关。二者通过影响滋养细胞浸润,胎盘浅着床在早发型重度子痫前期发生发展中起重要作用。     

神经黏附分子L1在重度子痫前期胎盘组织中的研究

目的探讨神经黏附分子L1(L1CAM)在重度子痫前期胎盘组织中的表达。方法采用免疫组织化学方法检测62例重度子痫前期、22例正常晚孕胎盘中L1CAM的表达。结果与对照组相比,重度子痫前期胎盘中L1CAM表达显著上升(P0.05);L1CAM在早发型子痫前期胎盘中的表达比晚发型子痫前期胎盘显著上升(P0.05)。结论滋养细胞L1CAM高表达可能是早发型重度子痫前期发病的原因之一。     

REDD1蛋白在子痫前期患者胎盘的表达及意义

目的探讨子痫前期患者胎盘中REDD1蛋白的表达情况。方法选择2011年12月至2012年4月四川大学华西第二医院收治的确诊为子痫前期,年龄为(31.4±1.4)岁的单胎妊娠孕妇29例为研究对象。按照妊娠中子痫前期发生的时间,将其分为早发型子痫前期组(n=15)和晚发型子痫前期组(n=14)。同时按入院顺序号随机选择孕期在本院产前检查,年龄为(32.0±2.8)岁的单胎妊娠健康孕妇20例纳入对照组(本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象知情同意,并与之签署临床研究知情同意书)。采用SP免疫组织化学染色技术,Western bloting杂交及实时荧光定量PCR检测受试者REDD1蛋白及其mRNA在胎盘组织中的表达,并采用相关统计学方法分析早发型子痫前期组、晚发型子痫前期组及对照组胎盘组织中REDD1蛋白表达差异。早发型子痫前期组及晚发型子痫前期组患者的一般临床资料(年龄、孕周及产次)分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结果 REDD1蛋白表达于胎盘滋养细胞的细胞质。早发型子痫前期组及晚发型子痫前期组胎盘组织中REDD1蛋白水平均较对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。早发型子痫前期组REDD1mRNA表达水平较对照组明显增高,差异亦有统计学意义(P<0.05);但晚发型子痫前期组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 REDD1蛋白可能在子痫前期发病机制中起重要作用。     

胎盘TLR2受体的表达与子痫前期发病机制的相关性研究

目的探讨胎盘TLR2受体的表达与子痫前期发病机制的相关性。方法通过免疫组化法及Western印迹法比较早发型子痫前期组、早发型对照组、晚发型子痫前期组及晚发型对照组的胎盘TLR2的表达,探讨TLR2的表达与子痫前期的发病机制相关性。结果早发型子痫前期组胎盘TLR2受体的表达量比早发型对照组显著增高,也比晚发型子痫前期组显著增高,差异均有统计学意义(P0.05),晚发型子痫前期组与晚发型对照组之间TLR2的表达量差异无统计学意义(P0.05)。结论早发型子痫前期与晚发型子痫前期的发病机制可能不同,炎症免疫过度激活可能是早发型子痫前期的主要发病机制,TLR2是重要的免疫调节因子。     

胎盘11β-HSD2表达与皮质醇代谢水平的关系及其对子痫前期的相关性研究

目的:探讨胎盘11β-HSD2和母体皮质醇水平在不同的子痫前期病理状态下的表达及其可能机制。方法:收集15例早发型重度子痫前期患者(EOSPE组)、13例晚发型重度子痫前期患者(LOSPE组)和20例正常妊娠孕妇(NP组)的血清及胎盘组织,用酶化学发光分析仪检测血清中游离皮质醇的浓度,采用免疫组化超敏即用型二步法观察胎盘11β-HSD2在合体滋养层细胞的表达,采用实时荧光定量PCR法检测胎盘组织11β-HSD2的mRNA表达。结果:正常妊娠、早发型、晚发型重度子痫前期组的血清游离皮质醇水平分别为(728.05±155.91)nmol/L、(619.80±180.57)nmol/L、(750.53±153.80)nmol/L,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化胎盘11β-HSD2测量平均光密度值正常妊娠、早发型、晚发型重度子痫前期组分别为0.12±0.06、0.07±0.02、0.08±0.04,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量PCR测量胎盘11β-HSD2的mRNA表达水平在早发型、晚发型重度子痫前期组和正常妊娠组分别为:3.16±1.21、4.86±1.43、5.23±2.20,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胎盘11β-HSD2可能灭活皮质醇从而保护胎儿,11β-HSD2表达减少与SPE发病有关。     

Notch4和DLL4在早发型重度子痫前期中的表达及临床意义

目的探讨Notch4、DLL4在早发型重度子痫前期发生中的作用机制。方法选取2015年6月-2016年6月该院收治的30例早发型重度子痫前期患者为研究组,正常足月孕妇30例为对照组,以免疫组化法检测胎盘组织中Notch4、DLL4的表达部位,以实时荧光定量PCR和Western blot检测胎盘中Notch4、DLL4 mRNA和蛋白的表达水平。结果 Notch4、DLL4主要表达于胎盘血管内皮细胞胞核。与对照组相比,研究组Notch4、DLL4 mRNA和蛋白的表达下调(P0.0 5)。结论在早发型重度子痫前期患者中,胎盘组织中的Notch4、DLL4蛋白表达均下调,推测Notch信号通路尤其是Notch4、DLL4可能与该病的发生发展有关。     

DUSP9、P38MAPK在早发型重度子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)及双特异性磷酸酶9(DUSP9)与早发型重度子痫前期发生发展的关系,揭示其与细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)1/2信号通路相互作用机制,为早发型重度子痫前期的发病机理提供理论依据。方法收集122例重度子痫前期患者为研究组(其中早发型62例,晚发型60例),随机抽取同期65例正常妊娠者为对照组。采用免疫组化方法检测胎盘组织中P38MAPK、DUSP9的表达水平。结果各组胎盘组织的合体滋养细胞、蜕膜细胞、血管内皮细胞中均可检测到P38MAPK、DUSP9的表达。早发型重度子痫前期组P38MAPK表达显著高于晚发型重度子痫前期组及对照组(0.112±0.025,0.072±0.002,0.048±0.008,P<0.01);早发型重度子痫前期组DUSP9表达水平显著低于晚发型重度前期组及对照组(0.041±0.004,0.078±0.002,0.126±0.008,P<0.01);各组胎盘组织中P38MAPK与DUSP9的表达水平呈负相关(r=-0.53,P<0.05)。结论早发型重度子痫前期组胎盘中P38MAPK高表达及DUSP9低表达与其疾病的发生发展密切相关。提示P38MAPK、DUSP9/ERK1/2信号通路可能相互作用,并共同在早发型重度子痫前期发生发展中起重要作用。     

早发型子痫前期孕妇血清及胎盘组织中sEng及NO的表达与意义

目的检测早发型子痫前期患者与正常晚期孕妇血清及胎盘组织中可溶性内皮因子(sEng)及一氧化氮(NO)的表达,并探讨两者在早发型子痫前期发病中的作用及关系。方法随机选取2012年8月~2013年12月在该院妇产科建卡并分娩的孕妇90例,平均分为3组,分别为正常晚期妊娠组、轻度早发型子痫前期组和重度早发型子痫前期组。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测3组孕妇血清中sEng及NO浓度的变化。用免疫组化SP法检测3组孕妇胎盘组织中sEng及NO浓度的变化。结果早发型子痫前期组孕妇血清及胎盘组织中sEng水平均明显高于对照组(P0.01);而NO水平均明显低于对照组(P0.01)。早发型子痫前期组患者血清与胎盘组织中sEng水平分别与相应部位的NO水平呈负相关(r=-0.237,P0.05;r=-0.189,P0.05)。结论孕妇血清及胎盘组织中sEng及NO水平变化与早发型子痫前期发病及病情发展密切相关。     

P38MAPK、Nox1及ROSmRNA在早发型重度子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨Nox1、P38MAPK及ROS mRNA表达与早发型重度子痫前期发病的关系,揭示早发型重度子痫前期发病基础,为临床治疗提供理论依据。方法选择早发型重度子痫前期患者32例、晚发型重度子痫前期患者30例为研究组,35例正常分娩者为对照组。胎盘娩出后立即于脐带附着处母体面,避开钙化出血梗塞区(肉眼观)剪取大小为1 cm×1 cm×1 cm的组织两块,一份用无菌生理盐水(含0.1%DEPC水)漂洗,去除血液,置于经DEPC水处理并消毒的冻存管中,于-80℃冰箱保存待行RT-PCR检测;另一份取材后即以4%多聚甲醛固定,常规脱水,浸蜡,包埋,4um切片(每例5张),载玻片经清洁处理,APES包被,进行HE染色及脂肪特染观察胎盘组织的脂肪浸润情况和形态学改变;采用RT-PCR及免疫组化方法检测胎盘组织中Nox1、P38MAPK、ROSmPNA表达水平。结果各组胎盘组织的合体滋养细胞、血管内皮细胞、蜕膜细胞中均可以检测到Nox1、P38MAPKmRNA及ROS表达。早发型重度子痫前期组Nox1mRNA表达显著高于晚发型重度子痫前期组及对照组(0.712±0.012,0.215±0.013,0.113±0.01,p<0.01);早发型重度子痫前期组ROSmRNA水平显著高于晚发型重度前期组及对照组(142.43±11.81,96.12±8.93,102.21±9.75,p<0.01);早发型重度子痫前期组P38MAPKmRNA表达水平显著高于晚发型重度前期组及对照组(0.109±0.057,0.074±0.074,0.042±0.013,p<0.01)。各组胎盘组织中Nox1表达与ROS水平呈正相关(r=0.81,p<0.05);各组胎盘组织中Nox1表达与P38MAPKmRNA呈正关(r=0.63,p<0.01)。结论早发型重度子痫前期组胎盘中Nox1mRNA高表达与其发病及发展密切相关。P38MAPK介导的P38MAPK-Nox1-ROS脂质代谢途径可能在早发型重度子痫前期发生发展中起重要作用。     

重度子痫前期患者胎盘组织TGF-β_1及MMP-9的表达及意义

目的研究转化生长因子-β_1(transforming growth factor beta 1,TGF-β_1)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在重度子痫前期患者胎盘组织的表达及其临床意义。方法 Western blot方法对50例正常妊娠组和60例子痫前期组(25例轻度和35例重度)胎盘组织中TGF-β_1、MMP-9的表达进行分析。其中早发型轻度子痫前期组15例,晚发型轻度子痫前期组10例;早发型重度子痫前期组18例,晚发型重度子痫前期组17例。结果在重度子痫前期组中TGF-β_1的表达明显升高,MMP-9的表达明显降低,与轻度子痫前期组及正常妊娠组相比,差异有统计学意义(P0.05)。轻度子痫组与正常妊娠组之间比较差异无统计学意义(P0.05);胎盘组织中TGF-β_1的表达水平和MMP-9的表达水平呈负相关(P0.05);TGF-β_1、MMP-9在子痫前期患者早发型和晚发型组间的表达两两比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论重度子痫前期患者胎盘组织中TGF-β_1和MMP-9表达异常,提示两者可能共同参与重度子痫前期的发生。     

血清及胎盘组织中IGF-I及NO的表达与早发型子痫前期相关性分析

目的探讨血清及胎盘组织中胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-I)及一氧化氮(NO)的表达与早发型子痫前期的相关性。方法选择2015年1月-2016年1月于该院接受治疗的30例早发型子痫前期产妇作为观察组以及30例正常产妇作为对照组,通过检测血清及胎盘中IGF-I及NO的表达水平,统计并总结IGF-I及NO表达部位、表达水平与子痫前期之间的相关性。结果同对照组产妇相比较,观察产妇血清及胎盘组织中IGF-I及NO表达水平均明显降低(P0.05),其下降程度与子痫前期病情呈正相关。结论血清及胎盘组织中IGF-I及NO的表达与早发型子痫前期发病密切相关,其表达程度与病情发展呈正相关,临床可以通过血清及胎盘组织中IGF-I及NO的表达水平作为早发型子痫前期产妇诊断及病情监测、评估的相关参考指标。     

骨转移蛋白-7及其受体Ⅱ在重度子痫前期胎盘组织中的表达

目的检测早发型、晚发型重度子痫前期胎盘组织中骨转移蛋白-7(BMP-7)及其受体Ⅱ(BMPRⅡ)的表达情况,探讨其与重度子痫前期发病的关系。方法选取2014年9月-2016年1月在该院产科住院,临床确诊为早发型、晚发型重度子痫前期患者的胎盘组织作为研究对象,每组各30例;选取同期行择期剖宫产的正常相应孕周产妇的胎盘组织30例为对照组,分别采用qRt-PCR和Western Blot方法检测3组胎盘中BMP-7和BMPRⅡ中mRNA及蛋白的表达情况,免疫组化方法检测两者在胎盘中的表达定位。结果 BMP-7、BMPRⅡ的mRNA和蛋白表达水平在重度子痫前期胎盘组织中升高,且在晚发型重度子痫前期中升高更加明显,差异均有统计学意义(均P<0.05);BMP-7主要表达于胎盘绒毛合体滋养细胞层和绒毛外滋养细胞的细胞质,BMPRⅡ主要表达于胎盘绒毛滋养细胞和绒毛外滋养细胞的细胞膜。结论胎盘组织中BMP-7和BMPRⅡ的表达量增高有可能参与了重度子痫前期的发病过程。     

胎盘生长因子及一氧化氮的表达与早发型子痫前期相关性的研究

目的:检测早发型子痫前期患者与正常晚期妊娠妇女血清及胎盘组织中胎盘生长因子(PLGF)及一氧化氮(NO)的表达情况,并探讨两者在早发型子痫前期中的作用及相互关系。方法:将60例妊娠孕妇随机分为3组,A组20例,为正常晚期妊娠孕妇;B组20例,为轻度早发型子痫前期孕妇;C组20例,为重度早发型子痫前期孕妇。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测3组孕妇血清中PLGF、NO浓度的变化。用免疫组化法检测3组孕妇胎盘组织中PLGF、NO浓度的变化。结果:B组、C组血清及胎盘组织中PLGF、NO水平均明显低于A组(P<0.05),且随早发型子痫前期病情的加重,PLGF、NO的水平也随之降低,各组两两比较有显著性差异(P<0.05)。B组、C组患者血清与胎盘组织中PLGF水平分别与相应部位的NO水平正相关(r=0.424,0.389,P均<0.05)。结论:孕妇血清及胎盘组中PLGF、NO水平变化可能与早发型子痫前期孕妇发病及病情发展密切相关,且可作为监测患者病情变化的参考指标。     

重度子痫前期患者血清sCD40L、hs-CRP水平与新生儿出生体重的相关性

目的:研究重度子痫前期患者血清可溶性CD40L(sCD40L)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平与新生儿出生体重的关系.方法:选择重度子痫前期孕妇60例,分为早发型重度子痫前期组(发病时孕周＜34周)和晚发型重度子痫前期组(发病时孕周≥34周)各30例;分别选择同期妊娠孕妇作为早发型对照组(对照1组)和晚发型对照组(对照2组)各30例.采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清sCD40L水平,采用散射比浊法测定hs-CRP.结果:①早发型和晚发型重度子痫前期组孕妇血清sCD40L和hs-CRP的水平分别高于对照1组和对照2组,且早发型重度子痫前期组血清sCD40L水平高于晚发型,差异有统计学意义(P＜0.05);但对照1组与对照2组比较差异无统计学意义(P＞0.05).②早发型和晚发型重度子痫前期组新生儿出生体重均明显低于对照2组,且早发型重度子痫前期组低于晚发型,差异均有统计学意义(P＜0.05).③早发型与晚发型重度子痫前期组血清sCD40L、hs-CRP水平与新生儿出生体重均呈负相关(P＜0.05),对照组与新生儿出生体重无明显相关性(P＞0.05).结论:血清sCD40L、hs-CRP在重度子痫前期患者呈高表达提示其可能参与子痫前期的病理生理过程,重度子痫前期患者血清sCD40L、hs-CRP水平升高可引起新生儿体重下降,可能与胎儿宫内生长发育有关.     

白血病抑制因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的:测定白血病抑制因子(LIF)在子痫前期患者胎盘组织中的表达变化,探讨其在子痫前期发病过程中的作用。方法:选取子痫前期(子痫前期轻度组和重度组)和正常妊娠孕妇作为研究组和对照组,采用免疫组化法测定其胎盘组织中LIF的表达,并通过BI2000医学图像分析系统对染色结果进行定量检测并作比较。结果:LIF在3组中均有表达,且主要表达于滋养细胞胞质中;子痫前期轻度组及重度组与正常妊娠组相比,胎盘组织中LIF的表达明显减弱,差异有统计学意义(P<0.01);子痫前期轻度组与重度组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LIF对正常妊娠的维持起到了一定的保护作用;LIF在胎盘组织中的低表达影响了滋养细胞的浸润能力,可能是子痫前期发病的病因之一。     

子痫前期胎盘组织中差异蛋白质表达的研究

目的筛查子痫前期胎盘组织中差异表达的蛋白,寻找与子痫前期发生发展相关的蛋白。方法通过蛋白质芯片技术(PPA),针对64个磷酸化或非磷酸化抗体,检测2011年7月-2012年6月就诊的101例子痫前期患者(子痫前期组)及65例健康孕妇(对照组)的胎盘蛋白质表达水平。结果子痫前期组和对照组中有36个蛋白差异表达,19个表达上调,17个表达下调。多因素回归分析发现,Endoglin、PAI-1和Flt-1与子痫前期的不良结局发生相关;Endoglin与早发型子痫前期密切相关;PAI-1与子痫前期胎儿生长受限相关。结论本研究发现胎盘中与早发型子痫前期、不良结局、胎儿生长受限的相关蛋白,这些蛋白可能参与子痫前期的发生发展,是子痫前期预测及病情严重程度分级的潜在指标。     

凋亡相关基因Bcl-2、Caspase-3与妊娠高血压疾病

目的 探讨妊娠高血压疾病(HDCP)产妇胎盘组织凋亡相关基因Bcl-2和Castmse-3的表达及其相关性.方法 应用免疫组织化学S-P法检测5 1例轻度子痫前期(轻度组)、50例重度子痫前期(重度组)及62例正常晚期妊娠(对照组)产妇胎盘组织Bcl-2和Caspase-3的表达情况.结果 Bcl-2阳性率三组比较差异无统计学意义.Caspase-3阳性率在轻度组(53%)、重度组(64%)显著高于对照组(23%).Bcl-2与Caspase-3在HDCP产妇胎盘组织中的表达呈负相关(r=-0.199,P<0.05).结论 在HDCP产妇胎盘组织中Caspase-3表达上调、Bcl-2表达无明显变化.HDCP的发病机制可能与Caspase-3表达变化有关.     

重度子痫前期胎盘组织中Bcl-2和Caspase-3的表达及意义

目的:探讨重度子痫前期患者胎盘组织中Bcl-2和Caspase-3的表达及其与重度子痫前期发生、发展的关系。方法:采用免疫组织化学染色方法检测20例正常晚期妊娠孕妇(对照组)、40例重度子痫前期患者(重度子痫前期组,其中早发型20例,晚发型20例)的胎盘组织进行Bcl-2和Caspase-3的定位,并用计算机图像分析系统进行定量分析。结果:与对照组比较,重度子痫前期组Bcl-2的表达显著降低和Caspase-3的表达显著升高,且两者呈负相关(r=-0.334,P=0.009),早发型重度子痫前期与晚发型重度子痫前期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在胎盘组织中Bcl-2低表达和Caspase-3的高表达,可能与重度子痫前期的发生有关。     

子痫前期孕妇血清、胎盘组织MMP-9及NGAL表达变化及其意义

目的:探讨子痫前期孕妇血清、胎盘组织MMP-9及NGAL表达的变化情况。方法:回顾性分析100例子痫前期孕妇的临床资料,依据临床分型不同分为早发型组40例,晚发型组60例。另选同期正常妊娠妇女50例作为对照组。结果:早发型组和晚发型组的血清中MMP-9、NGAL的表达均明显高于对照组(t=18.00,t=19.55,P<0.05),且早发型组高于晚发型组(t=10.33,P<0.05)。早发型组和晚发型组的胎盘组织中MMP-9 mRNA、NGAL mRNA均低于对照组(t=17.45、t=16.88,P<0.05),早发型组亦低于晚发型组(t=20.22,P<0.05)。结论:子痫前期孕妇血清MMP-9、NGAL水平的上升和胎盘组织MMP-9、NGAL mRNA的表达下降可能通过不同途径共同参与子痫前期的病理生理过程。     

重度子痫前期患者胎盘组织中IGF-Ⅱ、IMP3的表达及相关性分析

目的探讨重度子痫前期患者胎盘组织中胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)以及IGFⅡmRNA结合蛋白3(IMP3)的表达情况,并分析其相关性。方法选取2014年6月-2016年12月华中科技大学同济医学院附属协和医院收治的76例重度子痫前期患者为病例组,其中40例孕28~34周早发型重度子痫前期患者为早发组,36例孕34~42周晚发型重度子痫前期患者为晚发组;另选取同一时期该院健康妊娠妇女100例为对照组,其中43例孕28~34周孕妇为早期对照组,57例孕34~42周孕妇为晚期对照组。各组胎盘组织中IGF-Ⅱ、IMP3的表达采用免疫组织化学法进行检测,对比各组胎盘组织中IGF-Ⅱ、IMP3的表达情况,并采用Spearman分析二者的相关性。结果早发组患者胎盘组织中IGF-Ⅱ、IMP3表达低于晚发组和早期对照组,晚发组患者胎盘组织中IGF-Ⅱ、IMP3表达低于晚期对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。Spearman秩相关结果显示,病例组胎盘组织中IGF-Ⅱ与IMP3的表达呈正相关关系(r=0.763,P0.05)。结论不同发病期的重度子痫前期患者胎盘组织中的IGF-Ⅱ及IMP3呈不同程度的低表达,且二者呈正相关,可能参与了重度子痫前期的发病过程,联合检测有助于指导临床治疗。