止喘胶囊对哮喘大鼠气道重建转化生长因子β1和血小板源性生长因子蛋白及其mRNA表达的影响

目的探讨止喘胶囊对哮喘大鼠肺组织TGF-β1、PDGF-B蛋白及其mRNA表达的影响。方法将48只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、止喘胶囊组、地塞米松组、止喘胶囊加地塞米松组五组,每组8只。通过腹腔注射卵蛋白、右腿肌注氢氧化铝致敏及反复雾化吸入不同浓度(1%、2%、3%)卵蛋白溶液建立哮喘气道重建动物模型。在哮喘激发4周后检测肺组织TGF-β1、PDGF-B蛋白及其mRNA表达。计量资料用ANOVA进行分析。结果哮喘模型组大鼠气道上皮TGF-β1、PDGF-B蛋白以及mRNA表达显著高于正常对照组大鼠(P<0.01);止喘胶囊组、止喘胶囊加地塞米松组和地塞米松组大鼠TGF-β1、TGF-β1mRNA表达显著低于哮喘模型组大鼠(P<0.01或P<0.05)。结论止喘胶囊通过减少气道上皮TGF-β1、PDGF-BmRNA表达从而减轻气道炎症及气道重建,降低气道高反应性,从而发挥固本防喘作用。     

哮喘大鼠TGF—β1／Smad3信号通路中黄芪与激素调控的对比研究

目的：观察黄芪、糖皮质激素对哮喘大鼠TGF-β1／Smad3信号通路及哮喘气道重塑的对比调控作用。方法SPF级雄性SD大鼠50只随机分为5组,分别为对照组（A组）、哮喘组（B组）、布地奈德组（C组）、地塞米松组（D组）、黄芪组（F组）,每组10只。用卵白蛋白（OVA）致敏与激发建立大鼠哮喘模型。应用图像分析技术测定肺内支气管壁厚度（Wat）及平滑肌厚度（Wam）等重塑指标;免疫组化法检测肺组织TGF—β1、P—Smad3蛋白的表达;酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定血清和支气管肺泡灌洗液（BALF）中TGF—β1的浓度。结果：干预组大鼠Wat、Warn较哮喘组显著性降低（均P〈0．01）,C组、D组Wat比较无显著性差异,但均低于黄芪组（均P〈0．01）;C组、D组Wam比较无显著性差异,D组Wam较F组有降低;免疫组化染色阳性结果呈棕黄色,TGF-β1蛋白表达于胞浆,P—Smad3蛋白表达于胞浆和胞核,主要表达于支气管上皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞及散在的炎性细胞。干预组TGF-β1的蛋白表达均显著低于哮喘组（P〈0．05或P〈0．01）;C组、D组、F组比较无显著性差异,P—Smad3蛋白表达：各干预组均显著低于哮喘组（均P〈0．01）,C组、F组之间无显著性差异,D组较F组降低（P〈0．01）;干预组血清、BALF中TGF—β1浓度与哮喘组比较有降低（均P〈0．01）,BALF中C组、D组、F组比较无显著性差异,血清中C组、D组无显著性差异,但均低于F组（P〈0．05或P〈0．01）。结论糖皮质激素、黄芪可通过调控TGF-β1／Smad3信号通路而拮抗气道重塑,但黄芪效果比糖皮质激素稍差。     

咳喘平冲剂对幼龄哮喘大鼠气道重塑TGF-β_1和IL-1_2的影响

目的：探讨咳喘平冲剂对幼龄哮喘大鼠气道重塑TGF-β1和IL-12的影响。方法：将SD大鼠40只随机分为模型组、空白对照组、咳喘平冲剂组,通过对大鼠采用卵蛋白致敏,并反复雾化吸入卵蛋白建立哮喘气道重塑模型。肺组织石蜡切片行免疫组化染色,计算机图像处理软件测定TGF-β1表达（以染色吸光度值表示）。ELISA法检测血清IL-12的含量。结果：模型组大鼠TGF-β1、IL-12含量与空白对照组比较差异具有极显著性（P〈0.01）;咳喘平冲剂组大鼠TGF-β1、IL-12含量与模型组大鼠比较差异具有显著性（P〈0.05）。结论：咳喘平冲剂能够降低哮喘大鼠肺组织TGF-β1含量,升高血清IL-12含量,从而减轻气道炎症,干预气道重塑。     

活血化瘀法对哮喘大鼠气道重塑模型的调控作用研究

目的观察中医活血化瘀法对哮喘大鼠气道重塑后肺组织及TGF-β1、MMP-9的影响,探讨活血化瘀法干预气道重塑的作用机制。方法将SPF级SD成年雄性大鼠30只随机分为正常组、模型组、药物干预组。用卵蛋白(OVA)-氢氧化铝混悬液致敏与激发建立大鼠哮喘气道重塑模型,激发8周后处死,观察各组大鼠肺组织病理情况,采用ELISA法检测大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9水平。结果模型组大鼠气道炎细胞浸润及支气管平滑肌增厚,肺组织TGF-β1、MMP-9水平显著高于正常组(P均0.05);药物干预组气道炎细胞浸润减少,管壁趋于正常,肺组织TGF-β1、MMP-9水平明显低于模型组(P均0.05)。结论TGF-β1、MMP-9参与哮喘气道重塑过程,活血化瘀法可通过抑制TGF-β1、MMP-9水平而干预阻断哮喘气道重塑。     

血必净注射液对急性百草枯中毒大鼠肺损伤的保护作用研究

目的通过动物实验探讨百草枯肺损伤的发病机制及血必净注射液对肺损伤的保护作用。方法将108只SPF级Wistar大鼠随机分为对照组、染毒组、干预组,每组36只。染毒组及干预组大鼠腹腔内一次性注射百草枯25 mg/kg制作中毒模型,对照组给予0.9%氯化钠等量注射。之后,干预组腹腔内注射血必净注射液4 mL/kg,对照组及染毒组腹腔内注射等量0.9%氯化钠溶液,均1次/d。分别于实验第3,7,14,21,28,35天留取各组大鼠肺标本,检测肺组织中羟脯氨酸(Hyp)含量以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生成因子-β_1(TGF-β_1)、细胞外调节蛋白激酶蛋白(ERK)的表达量。结果染毒组各时间点大鼠肺组织中Hyp含量及TNF-α、TGF-β_1、ERK表达量均明显高于对照组(P均0.05)。干预组各时间点肺组织中Hyp含量及TNF-α、TGF-β_1、ERK表达量均明显低于染毒组(P均0.05),但仍明显高于对照组(P均0.05)。结论 Hyp、TNF-α、TGF-β_1、ERK在百草枯肺损伤中起重要作用,血必净注射液可通过降低肺组织中Hyp含量及抑制TNF-α、TGF-β_1、ERK的表达而发挥对肺组织的保护作用。     

三步序贯法对哮喘模型大鼠激素撤减过程中TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的观察三步序贯法对哮喘模型大鼠激素撤减过程中TGF-β_1/Smad信号通路上转化生长因子β_1(TGF-β_1)、Smad2、Smad3、Smad6、Smad7蛋白表达的影响。方法将150大鼠随机分为正常对照组、气道重塑组、地塞米松干预组、普米克令舒组及三步序贯组,每组30只。哮喘大鼠激素撤减模型建立方法:以卵蛋白加氢氧化铝致敏,卵蛋白激发,自激发之日开始,于激发前给予地塞米松0.5 mg/kg腹腔注射,连续2周,从第3周开始,按每周0.1 mg/kg速度递减地塞米松用量,至第7周地塞米松全部撤除。三步序贯组在地塞米松干预基础上,于实验第15~28天(撤减前期)给予第一步方颗粒灌胃,第29~63天(撤减中期)给予第二步方颗粒灌胃,第64~77天(撤减后期)给予第三步方颗粒灌胃。气道重塑组仅给予致敏和激发,普米克令舒组在致敏和激发基础上,给予普米克令舒雾化吸入,各组于实验第28、63、77天末次激发2 h后取左肺组织行免疫组化检测,比较各组TGF-β_1、Smad2、Smad3、Smad6、Smad7蛋白表达变化。结果与本组撤减前期比较,地塞米松组撤减中、后期TGF-β_1、Smad2、Smad3蛋白表达升高,Smad6、Smad7蛋白表达降低(P0.05,P0.01);普米克令舒组和三步序贯组撤减中、后期TGF-β_1、Smad3、Smad2蛋白表达降低,Smad6蛋白表达升高(P0.05,P0.01)。在撤减过程中,与正常对照组同期比较,气道重塑组撤减前、中、后期TGF-β_1、Smad2及Smad3蛋白表达均升高,Smad6、Smad7蛋白表达均降低(P0.01);与气道重塑组比较,地塞米松组、普米克令舒组、三步序贯组前、中、后期TGF-β_1、Smad2、Smad3蛋白表达均降低,Smad6蛋白表达升高(P0.01),普米克令舒组、三步序贯组Smad7蛋白表达升高(P0.01),地塞米松组Smad7蛋白表达撤减前、后期升高(P0.05);与地塞米松组比较,普米克令舒组、三步序贯组前、中、后期TGF-β_1、Smad2及Smad3均降低,Smad6升高(P0.01),Smad7中、后期升高(P0.01)。Smad2与Smad3蛋白表达呈正相关(r=0.909,P0.01),Smad6与Smad7蛋白表达呈正相关(r=0.873,P0.01)。结论三步序贯法在哮喘模型大鼠激素撤减过程中能降低TGF-β_1、Smad2、Smad3,升高Smad6、Smad7其阻抑气道重塑的作用可能是通过调节TGF-β_1/Smad信号转导通路来实现的。     

姜辛夏颗粒对哮喘大鼠气道重建TGF-β1表达的影响

目的 研究姜辛夏颗粒对卵蛋白致敏哮喘SD大鼠肺组织中TGF-β1水平变化的影响.方法 雄性SD大鼠52只随机分为4组.以卵蛋白(OVA)致敏激发制备大鼠哮喘模型,并用地塞米松、姜辛夏颗粒灌胃分别治疗,与哮喘模型组、地塞米松组比较.主要测定各组大鼠肺组织中TGF-β1表达及各组支气管管腔内周长、平滑肌面积以及厚度变化.结果 地塞米松组、姜辛夏颗粒治疗组与哮喘模型组比较,肺组织中TGF-β1水平表达明显降低(P＜0.01);姜辛夏颗粒治疗组能有效降低肺组织中TGF-β1水平表达,与地塞米松组相比无明显差异(P＞0.05);与哮喘模型组比较,地塞米松组、姜辛夏颗粒组的WAt/Pbm、WAi/Pbm与WAm/Pbm显著低于哮喘模型组(P＜0.01).结论 TGF-β1在调节哮喘气道重建中起重要作用;姜辛夏颗粒可以下调TGF-β1的表达,阻止哮喘气道重建的发生发展.     

血必净注射液对急性百草枯中毒大鼠肺组织中炎性因子表达影响研究

目的观察血必净注射液对百草枯中毒大鼠肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量及白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)蛋白表达的影响,探讨血必净注射液治疗急性百草枯中毒的机制。方法采用随机数字表法将108只Wistar大鼠分成对照组、染毒组、干预组,每组36只。干预组造模后给予血必净注射液4 m L/kg腹腔注射,对照组、染毒组给予等量生理盐水腹腔注射。每组分别在干预后1,3,7,14,21,28 d各处死6只大鼠,检测肺组织中SOD活力、MDA含量及IL-6、TGF-β_1表达量。结果染毒组大鼠肺组织中SOD活力下降,MDA含量升高,IL-6和TGF-β_1蛋白表达增强,干预后各时间点与对照组比较差异均有统计学意义(P均0.05)。干预组干预后各时间点SOD活力均明显高于染毒组(P均0.05),但干预后1~14 d SOD活力均明显低于对照组(P均0.05);干预后1~21 d MDA含量和各时间点IL-6、TGF-β_1表达量均明显低于染毒组(P均0.05),但干预后1~14 d MDA含量和干预后各时间点IL-6、TGF-β_1表达量均明显高于对照组(P均0.05)。结论氧自由基和细胞因子IL-6、TGF-β_1均参与百草枯所致肺损伤,而血必净注射液能够通过调节这些指标表达而减轻染毒大鼠肺组织损伤。     

TGF-β1、MMP-9在哮喘大鼠气道重建模型中的表达及丹参的干预作用

目的:观察TGF-β1、MMP-9在哮喘大鼠气道重建模型中的动态变化,探讨丹参干预气道重建的作用机制。方法:SPF级SD成年雄性大鼠70只随机分为正常对照组、哮喘模型组(哮喘2周组、哮喘4周组、哮喘8周组)、丹参干预组(丹参2周组、丹参4周组、丹参8周组)3个大组,7个小组。用卵蛋白(OVA)-氢氧化铝混悬液致敏与激发建立大鼠哮喘气道重塑模型,激发2、4、8周后处死。观察哮喘大鼠肺组织病理变化,采用ELISA法检测大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9水平。结果:哮喘大鼠气道炎性细胞浸润及支气管平滑肌增厚,随着激发时间的延长逐渐加重;同时,哮喘大鼠肺组织TGF-β1、MMP-9水平逐渐升高,哮喘4周组、哮喘8周组较正常对照组显著升高(P0.05、P0.001);使用丹参干预后,丹参8周组较哮喘8周组显著降低(P0.001)。结论:气道重建的程度随着哮喘发作及时间推移而发生动态变化;TGF-β1、MMP-9参与哮喘气道重建过程;活血化瘀药丹参可通过抑制TGF-β1、MMP-9水平而干预阻断哮喘气道重建。     

小青龙汤对0505大鼠TGF-β1／Smad3信号通路的影响

目的：探讨小青龙汤对哮喘大鼠TGF-β1／Smad3信号通路的影响。方法：将24只SPF级sD雄性大鼠随机分为正常对照组（A组）,支气管哮喘组（B组）和小青龙汤组（c组）,每组各8只。以卵清白蛋白（OVA）致敏与激发建立哮喘大鼠气道重塑模型。小青龙汤干预支气管哮喘大鼠后,HE染色观察各组气道壁嗜酸性粒细胞浸润及气道平滑肌增生情况;应用图像分析技术测定各组肺内支气管Wat、Wam等重塑指标;免疫组织化学法检测各组肺组织TGF-β1、Smad3蛋白的表达;酶联免疫吸附（ELISA）法测定各组血清中TGF-β1的浓度。结果：B组、C组大鼠Wat、warn较A组明显增加,差异均有统计学意义（P〈0．01）,C组Wat、Warn较B组低,差异具有统计学（P〈0．01）;免疫组织化学显示B组和C组TGF-β1及Smad3蛋白的表达明显高于A组,差异具有统计学（P〈0．01）,B组高于c组,差异具有统计学（P〈0．01）;血清中TGF-β1的浓度比较,B组和c组明显高于A组,差异具有统计学（P〈0．01）,B组高于c组,差异具有统计学（P〈0．01）。结论：小青龙汤可能通过影响支气管哮喘大鼠TGF-β1／Smad3信号通路来拮抗气道重塑,从而起到治疗作用。     

针刺对哮喘大鼠气道重构及转化生长因子-β_1表达的影响

目的:探讨针刺治疗哮喘的作用机制。方法:将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺组和药物组。采用卵蛋白致敏的方法制备哮喘模型。针刺组选用邵氏"五针法",即"肺俞""大椎""风门"穴进行治疗,留针20min,每日1次,共10次。药物组以100mg/kg的剂量腹腔注射氨茶碱注射液。治疗结束后,取肺组织HE染色,采用图像分析的方法测定气道壁和气道平滑肌厚度,评价气道重构程度;免疫组化法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)在各组大鼠小气道中的表达情况。结果:模型组大鼠支气管管壁和平滑肌厚度明显高于空白组(P0.01),肺组织中TGF-β1表达明显高于空白组(P0.01);经治疗,药物、针刺两组支气管管壁和平滑肌厚度较模型组均有降低(P0.05),TGF-β1表达较模型组明显减少(P0.01);针刺组和药物组比较,支气管管壁和平滑肌厚度的差异无统计学意义(P0.05),TGF-β1表达针刺组明显低于药物组(P0.05)。结论:邵氏"五针法"能下调小气道中TGF-β1的表达,进而干预气道结构的改变,这可能是针刺防治哮喘的作用机制之一。     

止喘胶囊对哮喘大鼠气道TGF-β1信号转导的干预作用

探讨止喘胶囊对哮喘大鼠气道TGF-β1信号转导的干预作用。通过长期反复给予致敏大鼠吸入不同浓度的卵蛋白,建立大鼠慢性哮喘模型。40只大鼠随机分为5组：正常对照组、模型组、中药组、西药组和中西结合组。原位杂交技术检测Smad．2mRNA、Smad．7mRNA表达水平。结果：各治疗组均可下调Smad-2mRNA的表达,与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）,其中尤以中西医结合组疗效最佳,中药组与西药组效果相当（P〉0．05）。中药组可显著上调Smad-7mRNA表达水平,与模型组比较差异显著（P〈0．05）;而西药组与模型组比较,无显著性差异（P〉0．05）。结论：止喘胶囊能通过下调Smad-2mRNA,上调Smad-7mRNA的表达,阻断TCF-β1的信号转导,从而阻断哮喘气道重塑的发展。     

黄芪对放射性肺损伤干预作用及对TGF-β1,IL-1表达影响的研究

目的:观察黄芪对局部中晚期胸部肿瘤放射治疗的肺保护作用及对转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、白介素-1(IL-1)表达水平的影响.方法:将局部中晚期胸部肿瘤放射治疗者随机分为治疗组和对照组.治疗组在放射治疗开始起服用黄芪10 m,2次/d,连续6个月.放射治疗前后测定血浆TCF-β_1和IL-1,放射治疗开始15 d起观察临床症状、高分辨率CT和肺弥散功能.结果:治疗组放射治疗前血浆TGF-β_1为(4.45±1.94) μg·L~(-1),放射治疗后为(5.87±2.43)ng·L~(-1);对照组放射治疗前为(4.47±2.01) μg·L-1,放射治疗后为(11.67±5.62) μg·L~(-1),较治疗组明显升高(P＜0.001).治疗组放射治疗前血浆IL-1为(24.32±14.49) ng·L~(-1),放射治疗后为(29.76±19.11)ng·L~(-1);对照组放射治疗前为(25.44±17.18)ng·L~(-1),放射治疗后为(65.37±35.32)ng·L~(-1),明显升高(P＜0.001).放射治疗开始后5个月和10个月治疗组CO弥散量下降情况较对照组差异有统计学意义(P＜0.05).治疗组和对照组急性放射性肺炎和肺纤维化的发生率比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:黄芪能抑制放射治疗后血浆TGF-β_1和IL-1的过度表达,降低放射治疗后弥散功能的恶化.可以用于放射性肺损伤的预防和干预.     

小青龙汤对哮喘大鼠肺组织β2-肾上腺素能受体作用的研究

用卵蛋白（OA）致敏造成大鼠哮喘模型,观察哮喘大鼠肺组织β－肾上腺素能受体（βAR）、β2－肾上腺素能受体（β2AR)攻环磷酸酰苷（cAMP）水平的变化及中药小青龙汤对其的影响。结果：在哮喘激发间隙期和再次激发期,模型大组大鼠肺组织cAMP均明显低于正常对照组（P＜0．01）。在再次激发期,小青龙汤等各治疗组肺组织cAMP均明显高于模型组（P＜0．05或P＜0．01）。在间隙期和再次激发期,模型组大鼠肺组织βAR和β2AR水平均明显低于正常对照组（P＜0．01）,并且从间隙期到再次激发期有下降趋势。在再次激发期,小青龙汤等各治疗组肺组织βAR和β2AR均明显低于正常对照组（P＜0．01）,但除喘康速组外,小青龙汤组和必可酮组大鼠肺组织βAR和β2AR均显著高于模型组（P＜0．05或P＜0．01）。提示：小青龙汤能够显著提高哮喘大鼠肺组织βAR、β2AR数目和cAMP水平。     

苍耳子挥发油对支气管哮喘大鼠气道重塑的影响

目的:探讨苍耳子挥发油对支气管哮喘模型大鼠气道重塑的影响,并从对基质金属蛋白酶-9(MMP-9),基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1),血小板衍生生长因子(PDGF),转化生长因子-β_1(TGF-β_1),Smad2,Smad3和Smad7 mRNA的表达方面探讨了其作用机制。方法:SD大鼠雌雄各半,共48只,随机分为正常组,模型组,苍耳子挥发油7. 5,15,30 mg·kg-1组和地塞米松(0. 5 mg·kg~(-1))组,每组各8只。除正常组外,用卵蛋白致敏并雾化吸入法诱发大鼠支气管哮喘模型。苍耳子挥发油给药组从第1次哮喘激发开始(造模后第4周)至处死前每天通过喷雾给予苍耳子挥发油干预,共4周。进行苏木素-伊红(HE)染色分析支气管肺组织病理学改变;进行气道重塑情况观察,记录支气管管腔内周长(Pi),支气管平滑肌面积(S),管壁面积(W),平滑肌细胞核数(N);检测肺泡灌洗液(BALF)中内皮素-1(ET-1)和类胰岛素生长因子-1(IGF-1)水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测肺组织MMP-9,TIMP-1,PDGF,TGF-β_1,Smad2,Smad3和Smad7 mRNA的表达。结果:模型组支气管壁周围有大量炎性细胞浸润,气道平滑肌厚度明显增加,官腔变窄扁平,基底膜增厚;苍耳子挥发油各剂量组明显改善支气管肺组织病理损伤。与正常组比较,模型组S/Pi,W/Pi,N/Pi均明显升高(P 0. 01),苍耳子挥发油各剂量组和地塞米松组S/Pi,W/Pi,N/Pi均低于模型组(P 0. 01)。与正常比较,模型组BALF中ET-1和IGF-1水平明显升高(P 0. 01),苍耳子挥发油各剂量组和地塞米松组BALF中ET-1和IGF-1水平明显低于模型组(P 0. 01)。与正常比较,模型组MMP-9 mRNA表达明显升高(P 0. 01),TIMP-1 mRNA表达明显降低(P 0. 01),MMP-9/TIMP-1明显升高(P 0. 01),苍耳子挥发油各剂量组和地塞米松组MMP-9 mRNA表达和MMP-9/TIMP-1低于模型组(P 0. 01)。与正常组比较,模型组肺组织PDGF mRNA表达明显增强(P 0. 01),苍耳子挥发油各剂量组和地塞米松组PDGF mRNA表达均低于模型组(P 0. 01)。与正常组相比较,模型组TGF-β1,Smad2和Smad3 mRNA表达均增强(P 0. 01),Smad7 mRNA表达减弱(P 0. 01),与模型组比较,苍耳子挥发油各剂量组和地塞米松组TGF-β_1,Smad2和Smad3 mRNA表达减弱(P 0. 01),Smad7 mRNA表达增强(P 0. 01)。结论:苍耳子挥发油可调节MMP-9,TIMP-1水平及MMP-9/TIMP-1值,调节TGF-β1/Smad信号通路,抑制PDGF,ET-1和IGF-1因子表达,通过多种途径抑制了上皮下纤维化、细胞外基质合成、气道平滑肌细胞增殖、迁移等,起到减轻或抑制气道重塑,从而起到防治哮喘的作用。     

三七皂苷对TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞EMT的影响

目的:研究三七皂苷(PNS)对转化生长因子-β_1(TGF-β_1)诱导的大鼠肾小管细胞上皮-间充质转化(EMT)的干预作用,并从沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/TGF-β_1/Smad通路分析其可能机制。方法:在DMEM培养基中,用10%胎牛血清培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E),分为正常组,TGF-β_1组(5μg·L~(-1)),白藜芦醇组(50 mg·L~(-1)),SIRT1阻断剂EX527组(10μmol·L~(-1)),PNS组(100 mg·L~(-1)),EX527+PNS组(EX527 10μmol·L~(-1),PNS 100 mg·L~(-1)),48 h后收集细胞;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测SIRT1,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),E-钙黏附蛋白(E-cadherin),TGF-β_1,Smad3,Smad4 mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SIRT1,α-SMA,E-cadherin,TGF-β_1蛋白表达。结果:与正常组比较,TGF-β_1组α-SMA mRNA及蛋白表达明显增多(P 0. 05),E-cadherin表达显著减少(P 0. 01);与TGF-β_1组比较,PNS,白藜芦醇组,E-cadherin mRNA及蛋白表达均显著增加(P 0. 01),α-SMA表达显著减少(P 0. 01),EMT发生被抑制,同时,SIRT1表达显著增加(P 0. 01),TGF-β_1,Smad3,Smad4表达显著降低(P 0. 01)。在SIRT1阻断剂EX527的干预下,PNS则不能发挥明显抑制作用。结论:PNS可以阻止TGF-β_1诱导的肾小管上皮细胞EMT的发生,其机制可能是通过激活SIRT1进而抑制TGF-β_1/Smad通路实现的。     

哮喘大鼠TGF-β1/Smad3信号通路中黄芪与激素调控的对比研究

目的:观察黄芪、糖皮质激素对哮喘大鼠TGF-β1/Smad3信号通路及哮喘气道重塑的对比调控作用。方法SPF级雄性SD大鼠50只随机分为5组,分别为对照组(A组)、哮喘组(B组)、布地奈德组(C组)、地塞米松组(D组)、黄芪组(F组),每组10只。用卵白蛋白(OVA)致敏与激发建立大鼠哮喘模型。应用图像分析技术测定肺内支气管壁厚度(Wat)及平滑肌厚度(Wam)等重塑指标;免疫组化法检测肺组织TGF-β1、P-Smad3蛋白的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中TGF-β1的浓度。结果:干预组大鼠Wat、Wam较哮喘组显著性降低(均P<0.01),C组、D组Wat比较无显著性差异,但均低于黄芪组(均P<0.01);C组、D组Wam比较无显著性差异,D组Wam较F组有降低;免疫组化染色阳性结果呈棕黄色,TGF-β1蛋白表达于胞浆,P-Smad3蛋白表达于胞浆和胞核,主要表达于支气管上皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞及散在的炎性细胞。干预组TGF-β1的蛋白表达均显著低于哮喘组(P<0.05或P<0.01);C组、D组、F组比较无显著性差异,P-Smad3蛋白表达:各干预组均显著低于哮喘组(均P<0.01),C组、F组之间无显著性差异,D组较F组降低(P<0.01);干预组血清、BALF中TGF-β1浓度与哮喘组比较有降低(均P<0.01),BALF中C组、D组、F组比较无显著性差异,血清中C组、D组无显著性差异,但均低于F组(P<0.05或P<0.01)。结论糖皮质激素、黄芪可通过调控TGF-β1/Smad3信号通路而拮抗气道重塑,但黄芪效果比糖皮质激素稍差。     

糖肾平干预糖尿病肾病大鼠肾脏组织TGF-β1和FN表达的实验研究

目的：通过研究糖肾平对糖尿病肾病大鼠肾脏组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）和纤连蛋白（FN）表达活性的影响,探讨糖肾平治疗早期糖尿病肾病的机理。方法：将60只雄性Wistar大鼠分成四组（每组15只）,分别设定为正常组、糖尿病肾病模型组、糖尿病肾病＋贝那普利组、糖尿病肾病＋贝那普利＋糖肾平组。各给与相应处理,糖肾平组给喂服糖肾平方,治疗6周,处死大鼠,取出取左侧肾脏,免疫组化测定肾脏组织TGF-β1和FN的表达活性。比较治疗前后各组TGF-β1和FN的表达活性。结果：TGF-β1在正常对照组主要在肾小管细胞浆中表达,而肾小球系膜区表达较少;在糖尿病肾病模型组,TGF-β1表达明显增加（P〈0．01）;在糖肾平联合贝那普利组上述明显增加的表达受到显著抑制（P〈0．05）。正常对照组肾小球系膜细胞、肾小管基底膜有少量FN表达;在糖尿病肾病模型组,这些成分表达明显增加（P〈0．01）。在糖肾平联合贝那普利组上述明显增加的表达受到显著抑制（P〈0．05）。结论：糖肾平能够抑制TGF-β1、FN在糖尿病肾病大鼠。肾组织中的表达。     

复方中药糖耐康对高糖诱导大鼠系膜细胞外基质的影响，

目的观察复方中药糖耐康对高糖环境下大鼠系膜细胞外基质的纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ型胶原蛋白（IV—C）及转化生长因子TGF-β1。含量的影响。方法大鼠肾小球系膜细胞按1×10^5孔接种24孔板,实验分为6组：正常葡萄糖组、高糖对照组、中药糖耐康高、中、低浓度干预组、西药吡格列酮组。每组设平行孔4孔,培养24h后检测指标。采用双抗夹心酶联免疫吸附（ELISA）法检测FN、IV-C及TGF-β1,含量。结果与空白对照组比较,高糖模型组MCs的上清中的FN、IV-C、TGF-β1含量均显著升高,差异有统计学意义（P均〈0．05）;与高糖组比较,治疗组FN、IV-C、TGF-β1,含量均显著降低,差异有统计学意义（P〈0．01）;与吡格列酮组比较,糖耐康中、低剂量组FN、IV-C、TGF-β1。含量差异有统计学意义（P〈0．01）,而糖耐康高剂量组各指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论糖耐康对糖尿病肾病肾脏的保护作用之一,是通过抑制系膜细胞外基质中FN、IV-C、TGF-β,的分泌、产生,从而抑制了系膜细胞的增值,起到保护糖尿病患者。肾脏的作用。     

黄芪山甲方抗肾间质纤维化多靶点效应的拆方研究

目的:观察黄芪山甲方按照不同治则拆方后对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠肾间质纤维化的治疗作用。方法:42只UUO雄性大鼠,随机分为7组:假手术组、模型组、益气组、活血化瘀组、清热解毒组、益气活血组、益气清热组,各6只。术后14d观察血肾功能指标、光镜肾脏病理改变及转化生长因子-β1(TGF-β_1)、纤维黏连蛋白(FN)的表达。结果:与假手术组比较,各造模组治疗后各项观察指标差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,益气活血组治疗后血尿素氮及血肌酐指标同时下降,差异有统计学意义(P0.05);益气组治疗后肾间质纤维化评分差异无统计学意义(P0.05),其余各组差异有统计学意义(P0.05);各治疗组肾脏TGF-β_1、FN的表达差异有统计学意义(P0.05)。结论:黄芪山甲方中活血化瘀法及清热解毒法可以延缓肾脏间质纤维化病理改变进程以及下调肾组织TGF-β_1、FN的蛋白表达。单独益气组只能下调肾组织TGF-β_1、FN的蛋白表达,但与其他治则联合有较好的增效作用,益气活血组在全方中的作用最重要。