重症休克时细动脉平滑肌细胞膜ATP敏感钾通道的变化

目的探讨重症休克血管反应性降低时细动脉平滑肌ＡＴＰ敏感钾通道（ＫＡＴＰ通道）特性的改变。方法酶性分离正常及休克大鼠肠系膜细动脉平滑肌细胞，用膜片钳技术（细胞贴附式和内面向外式）记录ＫＡＴＰ通道特性。结果重症休克使通道电导由正常的（１１１±６．５）ｐｓ增大到（１２９±９．５）ｐｓ；通道动力学也发生了改变，其中通道平均开放时间延长，通道开放时间常数τ０１，τ０２达１．８８ｍｓ、１３．１２ｍｓ，通道开放概率明显增大，并诱导通道多级开放。结论重症休克时细动脉平滑肌细胞膜ＫＡＴＰ通道开放，带来细胞膜超极化，参与低血管反应性的发生     

腺苷A3对失血性休克血管反应性的调节作用

目的探讨腺苷A3受体（adenosine A3 receptor,A3AR）对失血性休克大鼠肠系膜上动脉对α受体激动剂（去甲肾上腺素）收缩反应性的调控作用,并初步探讨钾通道在其中的可能作用。方法建立失血性休克（40mmHg）诱导大鼠肠系膜上动脉对去甲肾上腺素（norepinephrine,NE）低反应性模型。大鼠肠系膜上动脉血管对NE诱导的收缩反应性采用离体小血管张力测定仪检测。结果结果显示,在大鼠失血性休克后0～4h,其肠系膜上动脉1级分支血管对由NE诱导的收缩反应性呈现＂双向性＂变化;A3AR激动剂（IB-MECA）可明显改善失血性休克大鼠肠系膜上动脉1级分支由NE诱导的收缩反应性,且该作用可被A3AR阻断剂（MRS1523）所拮抗;此外,大电导钙激活钾通道（BKCa）开放剂NS1619可部分拮抗IB-MECA休克血管反应性的恢复作用;但ATP依赖钾通道（KATP）开放剂吡哪地尔对IB-MECA对休克血管反应性的恢复作用无显著影响。结论A3AR参与失血性休克血管低反应性的形成,其机制可能部分与BK通道有关。     

过氧化亚硝酸根参与重症休克血管反应性低下的发生

目的　从血管平滑肌膜电位和细胞内钙离子变化 ,探讨一氧化氮 (NO)引起重症休克血管反应性下降的机制。　方法　复制大鼠失血性休克模型 ,测定脊斜肌微动脉对去甲肾上腺素(NE)的反应性。休克至血管反应性下降时分离肠系膜细动脉平滑肌细胞 (ASMC) ,用荧光探针和激光共聚焦显微镜测定NO供体S -亚硝基 -N -乙酰青霉胺 (SNAP)对ASMC膜电位和游离钙离子浓度的影响 ,用超氧阴离子清除剂Tiron、鸟苷酸环化酶抑制剂ODQ、钙激活钾通道 (Kca)抑制剂蝎毒 (ChTX)、ATP敏感钾通道 (KATP)抑制剂优降糖 (GLY)预处理细胞后观察上述影响的变化。　结果　SNAP使ASMC超极化 ,预加Tiron完全阻断该效应 ;分别加ODQ、ChTX、GLY和三者合用预处理细胞 ,可部分阻断SNAP的作用。SNAP还可使ASMC内游离钙浓度下降 ,Tiron能阻断该作用。　结论　大量NO与超氧阴离子 (O　 )形成的过氧化亚硝酸根 (OONO )引起血管平滑肌细胞超极化 ,带来平滑肌细胞内钙离子浓度下降 ,它是休克后期血管反应性下降的重要原因。OONO 可通过KATP、Kca、cGMP等途径引起血管平滑肌超极化     

平滑肌大电导钙激活钾通道在重症失血性休克细胞膜超极化中的作用

目的 探讨失血性休克后大鼠肠系膜细动脉血管平滑肌细胞膜电位和大电导钙激活钾通道(BKCa)的变化。方法 (1)将Wistar大鼠分为假手术组和休克组。复制失血性休克模型，假手术组只做手术，不放血；(2)急性分离大鼠肠系膜A2、A3动脉，链霉蛋白酶法急性分离血管平滑肌细胞；(3)用膜片钳的细胞贴附式和内面向外式记录法记录假手术组和休克组细胞膜电位和通道的变化。结果 (1)失血性休克2h后血管平滑肌细胞膜电位由正常的-41mV变化为-65mV；(2)休克后BKCa开放概率增加，反转电位明显改变，而单通道电导没有变化。结论 失血性休克后血管平滑肌细胞膜超极化，BKCa活动增加可能是导致膜超极化的主要原因。     

Rho-激酶在失血性休克大鼠血管低反应发生中的作用

目的 观察Rho-激酶在失血性休克大鼠血管低反应发生中的作用。方法取失血性休克大鼠肠系膜上动脉（SMA），采用离体血管环张力测定技术，观察在失血性休克后不同时相点大鼠肠系膜上动脉血管环对梯度浓度去甲肾上腺素（NE）的收缩力，在去极化状态下（120mmol／LK^＋）血管环对梯度浓度Ca^2＋的收缩力，以及肠系膜上动脉Rho-激酶活性，分析不同时相点SMA对NE的反应性及Ca^2＋收缩反应性与Rho-激酶活性变化之间的关系；同时观察Rho-激酶激动剂血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）、Rho-激酶特异性抑制剂Y-27632对休克2小时大鼠SMA血管反应性和钙敏感性的影响。结果 休克早期SMA对NE和Ca^2＋的反应性明显升高，最大收缩力（Emax）明显升高（P〈0.05）；但休克2小时，血管环对NE反应性和钙反应性明显降低，Emax明显降低（P〈0．01）。与正常组相比，Rho-激酶活性在休克即刻升高（P〈0．05），休克1小时和2小时时，Rho-激酶活性明显降低（P〈0．05）。SMA对NE的反应性与Rho-激酶活性变化之间呈直线正相关，相关系数r=0．9861（P〈0．05）；SMA对Ca^2＋反应性与Rho-激酶活性变化之间呈直线正相关，相关系数r=0．9704（P〈0．05）。Rho-激酶激动剂Ang-Ⅱ（10^-9mol／L）可明显升高休克2小时血管环对NE和Ca^2＋的反应性（P〈0．05或P〈0．01），而休克2小时后，Rho-激酶特异性抑制剂Y-27632可进一步降低血管环对NE和Ca^2＋的反应性。结论 失血性休克时血管平滑肌细胞Rho-激酶活性明显降低，Rho-激酶通过调节钙敏感性调节血管反应性，并在失血性休克血管低反应性的发生中起重要作用。     

Akt 在 Ang-1、Ang-2调节失血性休克大鼠血管反应性双相变化中的作用

目的观察蛋白激酶B(PKB/Akt)在血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)调节失血性休克大鼠血管反应性双相变化中的作用。方法观察失血性休克后,以及Ang-1、Ang-2调节缺氧早期和晚期血管反应性过程中肠系膜上动脉(SMA)中Akt蛋白表达和磷酸化变化,并观察Akt抑制剂对Ang-1和Ang-2调节缺氧早期和晚期血管反应性作用的影响。结果 (1)失血性休克后SMA中Akt蛋白表达无明显改变,但磷酸化水平逐渐增高(P<0.01);(2)Akt抑制剂(1×10-5mol/L)可显著抑制缺氧10min的血管高反应性,也可显著抑制Ang-1对缺氧10min血管高反应性的维持作用(P<0.01);但对缺氧4h的血管低反应性和Ang-2降低缺氧4h血管反应性的作用无显著影响;(3)缺氧10min时,降低血管高反应性的Ang-2可降低Akt磷酸化;缺氧4h时,恢复血管低反应性的Ang-1和Tie-2抑制剂可抑制Akt磷酸化(P<0.01)。结论 Akt参与了休克早期Ang-1和Tie-2受体对血管高反应性的调节。     

钙失敏在家兔内毒素休克血管低反应性中的作用

目的观察血管平滑肌钙失敏在内毒素休克血管低反应性中的作用。方法取正常和内毒素休克家兔肠系膜上动脉（SMA）,采用离体血管环张力测定技术。以SMA血管环对梯度浓度去甲肾上腺素（NE）的收缩力反映血管反应性,用去极化状态下（120mmol／L K^＋）血管环对梯度浓度钙的收缩力反映血管的钙敏感性。观察内毒素休克低反应性血管钙敏感性变化及钙敏感性调节剂精氨酸血管加压素（arginine vasopression,AVP）和胰岛素（insulin）对血管反应性的调节作用。结果家兔脂多糖（LPS）（1mg／kg）静注后,早期（即LPS后30分钟和1小时）SMA血管环对NE和钙的反应性升高,量一效曲线左移,最大收缩力（Emax）升高（LPS1小时后P〈0．05或P〈0．01）;随着时间的延长,SMA血管环对NE和钙的反应性逐渐下降,到LPS后6小时明显降低,其量一效曲线明显右移,Emax明显降低（P〈0．01）。具有钙敏感性增强作用的AVP（1×10^-9mmol／L）可明显升高LPS后6小时SMA血管环对NE和钙的反应性（P〈0．05或P〈0．01）;而具有钙敏感性抑制作用的胰岛素则可降低LPS后1小时血管环对NE和钙的反应性（P〈0．05或P〈0．01）。结论内毒素休克血管平滑肌细胞存在钙敏感性降低,血管平滑肌细胞钙敏感性降低在内毒素休克血管低反应性的发生中起重要作用。     

血管平滑肌细胞内酸中毒在重症休克血管反应性降低中的作用

目的　查明重症失血性休克血管平滑肌细胞内pH改变 ,阐明细胞内酸中毒与血管反应性降低间的关系。方法　分离细动脉平滑肌细胞 ;用激光共聚焦显微镜测定荧光探针标记的休克平滑肌细胞内pH值 (pHi) ;以碱性液体及ATP敏感钾通道 (KATP)阻滞剂优降糖对休克及单纯酸中毒大鼠进行局部和全身治疗 ,观察对血管反应性的影响。结果　重症失血性休克时血管反应性明显降低 ,平滑肌细胞内发生酸中毒 ;碱治疗能改善细胞内酸中毒 ,但仅部分恢复血管反应性 ;优降糖能提高休克及单纯酸中毒引起的低血管反应性。结论　重症失血性休克时平滑肌细胞内发生酸中毒 ,是血管反应性低下的重要原因之一。细胞内酸中毒激活KATP 通道 ,参与介导低血管反应性的发生。     

缺血预适应诱导PKCα、PKCε活化和失血性休克大鼠血管反应性和钙敏感性保护的机制

目的观察缺血预适应是否通过腺苷受体,诱导蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)、蛋白激酶Cε(protein kinase Cε,PKCε)活化和失血性休克大鼠血管反应性和钙敏感性保护。方法采用高效液相色谱法测定缺血预适应过程中腺苷浓度变化;采用western blot技术,观察A1、A2A、A2B、A3腺苷受体(A1、A2A、A2B、A3adenosine receptor,A1R、A2AR、A2BR、A3R)抑制剂对缺血预适应诱导PKCα和PKCε表达和转位的影响;采用离体微血管环张力测定技术,观察腺苷受体抑制剂对缺血预适应诱导失血性休克血管反应性和钙敏感性保护作用的影响。结果 (1)休克2小时后血浆腺苷浓度较正常对照组显著增高,5%失血量预适应可进一步增高休克后的血浆腺苷浓度,以在休克前30分钟缺血预适应组的腺苷浓度最高(P0.01);(2)5%失血量休克前30分钟预适应可促进PKCα和PKCε由胞浆向胞膜的转位(P0.01),A1R拮抗剂可显著抑制缺血预适应导致的PKCα和PKCε的转位,使PKCα的胞膜/胞浆部分比值分别由1.071回降至0.583,使PKCε的胞膜/胞浆部分比值由1.280回降至0.606(P0.01),A2AR、A2BR和A3R拮抗剂没有明显作用;(3)5%失血量休克前30分钟预适应可诱导血管反应性和钙敏感性的保护作用(P0.01),A1R拮抗剂可以显著抑制其保护作用,使去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)和Ca2+的最大收缩力(Emax)分别降低59.3%和53.4%(P0.01),A2AR、A2BR、A3R拮抗剂均无显著抑制作用。结论缺血预适应通过A1R,诱导PKCα和PKCε活化和失血性休克大鼠血管反应性和钙敏感性的保护。     

低温海水浸泡失血性休克大鼠血液动力学变化

目的　研究低温海水浸泡对失血性休克动物血液动力学的变化。方法　 41只雄性大鼠分为六组 :陆地轻度失血性休克组 ;陆地中度失血性休克组 ;陆地重度失血性休克组 ;海水浸泡轻度失血性休克组 ;海水浸泡中度失血性休克组 ;海水浸泡重度失血性休克组。运用四道生理记录仪观察伤前、伤后即刻、10、30、6 0、90分钟动物血液动力学的变化。结果　海水浸泡失血性休克动物心率显著减慢 ,LVSP、±dp/dtmax均比对照组非常显著下降 ,海水浸泡早期血压升高 ,但很快下降 ,且低于对照组。结论　低温海水浸泡使失血性休克动物血液动力学状态明显恶化 ,死亡率大大增加     

三组高晶—高胶复合液复苏兔失血性休克的观察

雄性家兔１８只，随机分为高渗盐／右旋糖酐治疗组（ＨＳＤ组），高渗盐／甘露醇治疗组（ＨＳＭ组），高渗醋酸盐／甘露醇治疗组（ＨＡＭ组）。经股动脉放血，结果表明，三组小剂量液体（４ｍｌ／ｋｇ体重）均可在短时间内明显升高急性失血兔的血压，但３组间比较，ＨＳＭ升压，稳定的时间更长，动物的存活时间长。试验结果提示：ＨＳＭ较好地升压，稳压，延长失血性休克兔存活时间，值得进一步研究并临床应用，ＨＡＭ在稳定酸碱平衡方面，有较好的效果。     

失血性休克时重要器官组织内某些细胞因子表达,释放及其作用探讨

目的：探讨休克后重要器官内几种主要细胞因子的变化规律、产生机制及其作用．方法：采用ＲＴ－ＰＣＲ、ＥＬＩＳＡ等方法观察失血性休克时肝、肺、肾、肠组织内ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达，ＴＮＦα释放，器官功能损害及内毒素组织移位等变化．结果：（１）失血性休克及复苏后，组织内ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６ｍＲＮＡ可相继表达增加，以ＴＮＦα表达最早，ＩＬ－６虽表达较晚，但持续时间较长；（２）休克及复苏后，肝、肺、肾组织及循环内ＴＮＦα水平均有不同程度升高，其中组织内ＴＮＦα水平在数量和持续时间上大于循环内ＴＮＦα水平；（３）失血性休克时肝、肺、肾功能均有不同程度受损；（４）休克后肝、肺、肾组织内毒素水平先后明显升高，且与休克后组织内细胞因子基因表达、ＴＮＦα释放有一定内在联系．结论：休克后组织内细胞因子表达、释放在局部器官损害中起一定作用，其产生与休克后内毒素的组织移位有关．     

内毒素、失血性休克大鼠线粒体质子跨膜转运和H~ -ATP酶的改变

目的研究内毒素、失血性休克大鼠肝线粒体质子跨膜转运和Ｈ＋－ＡＴＰ酶的变化。方法大肠杆菌内毒素休克模型和失血性休克模型。采用荧光探针ＡＣＭＡ测定质子跨膜转运。结果（１）内毒素休克５小时亚线粒体在以ＡＴＰ、ＮＡＤＨ和ｓｕｃｃｉｎａｔｅ为底物时引起的ＡＣＭＡ最大荧光淬灭值显著减少（Ｐ＜０．０５）；最大荧光淬灭时间和半数荧光淬灭时间非常显著延长（Ｐ＜０．０１）。（２）内毒素休克早期，线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶活性显著升高（Ｐ＜０．０５），晚期非常显著下降。（３）内毒素休克大鼠肝线粒体膜结合ＰＬＡ２、血浆和线粒体ＭＤＡ升高（Ｐ＜０．０５）。（４）失血性休克时Ｈ＋－ＡＴＰ酶和质子转运无显著改变。结论内毒素休克时线粒体跨膜质子转运和Ｈ＋－ＡＴＰ酶活性显著下降，失血性休克时变化不大     

失血性休克时输注ATP-MgCl2对细胞膜电位的逆转效应

本实验应用“半浮置”式玻璃超微电极技术在体内测定SMCMP的实验方法，考察休克后2小时平衡盐液和平衡盐液＋ATP—MgCl2两种复苏方法对SMCMP的逆转效应。两种复苏效果的比较说明，平衡盐液＋ATP—MgCl2复苏时，SMCMP的恢复早于单纯平衡盐液复苏，提示休克复苏时在补充血容量的同时给予ATP—MgCl2，有利于细胞膜和细胞功能稳定性的早期恢复。     

参麦注射液对创伤性失血性休克复苏效果的临床观察

目的　探讨参麦注射液复苏创伤失血性休克的效果。方法　对 62例创伤失血性休克病人分别用乳酸钠林格注射液 (对照组 )及参麦注射液 (观察组 )复苏。结果　观察组 (3 2例 )血压 3～ 5min即开始上升 ,与对照组 (3 0例 )比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。随着血压上升 ,尿量、心率、肢温与意识明显好转。两组治愈率分别为 93 .75 %和 76 7% ,具有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　参麦注射液用于创伤失血性休克复苏具有作用早、速度快、维持血压平稳、用量小、安全性好等优点。     

三通管输血在抢救失血性休克中的应用

目的：探讨三通管输血在失血性休克急救中的应用。方法：中重度失血性休克患者120例随机分为常规输血组、三通管输血组,对比观察两组复苏后2 h内中心静脉压（CVP）,平均动脉压（MAP）、尿量达到早期复苏目标的例数,统计分析达标情况。结果：三通管输血组的达标例数均显著高于对照组（P〈0.05）。结论：三通管输血大大提高了失血性休克患者的早期复苏成功率。