不同蚯蚓纤溶酶组分纤溶活性的相互作用

采用纤维蛋白平板法对从赤子爱胜蚓中纯化的4种纤溶酶(EFE-1，EFE-2，EFE-3，EFE-4)组分的单独作用及相互作用的活性进行了研究，结果表明，4种组分单独作用时以EFE-4的活性最强，其次是EFE-3，最弱的是EFE-1和EFE-2，4种组分之间存在着相互作用，其纤溶活性的大小因组合不同而不同，不同组分联合使用时，以EFE-2—4的活性最强，除EFE-1-3、EFE-3—4两组合的活性与其单独作用的活性差异不显著外，其它各组合的纤溶活性都显著地高于单独作用的活性     

药用蚯蚓纤溶酶的制备及其性质的研究

从爱胜蚓中制备药用纤溶酶，经工厂中试，收率为２．５２－２．７４％，纤溶活性为２４３３３－２６５６０ｍｍ＾２／ｍｇ；水解酪蛋白活性为５９８－６４０ｍＵ／ｍｇ。制备工艺重复性好，操作简易可行另报道了该酶的一些生化特性和稳定性的研究结果。     

蚯蚓纤溶酶的抗肿瘤作用

目的　观察蚯蚓纤溶酶 (EFE)对体外人癌细胞株及体内人癌裸鼠移植性肿瘤生长的影响 ,对该药进行临床前抗肿瘤药效学评价。方法　采用MTT法观察蚯蚓纤溶酶对体外人癌细胞的生长抑制作用 ;用人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤模型对蚯蚓纤溶酶进行体内抗肿瘤药效学观察。结果　蚯蚓纤溶酶在体外对人癌细胞的生长无抑制作用 ;灌胃给予蚯蚓纤溶酶 2 0 0～ 10 0 0mg·kg-1,可明显抑制人胃癌BGC82 3和人乳腺癌B37裸鼠移植性肿瘤的生长。结论　蚯蚓纤溶酶具有抗肿瘤作用。     

蚯蚓纤溶酶同工酶的分析

对4种蚯蚓(赤子爱胜蚓、栉盲环毛蚓、通俗环毛蚓、威廉环毛蚓)进行粗提，将所得样品作活性印迹试验，观察同工酶谱以及经还原后谱带的变化情况，并对这4种蚯蚓活力大小进行比较，发现威廉环毛蚓总活力最高，其经过PAGE电泳后同工酶FE2活力最高。     

蚯蚓纤溶酶的药用淀粉化学修饰

用活化的药用淀粉对蚯蚓纤溶酶进行化学修饰 ,并筛选优化了化学修饰条件。其中以 1mg/ml的淀粉二醛对相同体积的酶液 (酶的比活力为 390U/mg蛋白质 ;底物为酪蛋白 )进行修饰 ,于4℃反应 2h ,制备的修饰酶效果最佳。实验结果表明 ,修饰酶的Kmapp(底物为碱性氨基酸的酯 )为 8.6 9× 10 5mg/ml,较原酶降低了近 2倍 ,修饰酶的反应最适 pH值为 8.6 ,原酶为 7.2 ;原酶和修饰酶的反应最适温度均为5 5℃。     

赤子爱胜蚯蚓纤溶酶的研究：Ⅷ纤溶酶活性组分的确证

本文报告了应用电泳分离纤溶酶组分,电泳洗脱收集每个组分,然后测其活性的方法。证明赤子爱胜蚯蚓溶酶具有七个有活性组分,同时测定出在变性与变性纤维蛋白平板上溶纤行为的差异。     

赤子爱胜蚯蚓纤溶酶的研究Ⅷ纤溶酶活性组分的确证

本文报告了应用电泳分离纤溶酶组分,电泳洗脱收集每个组分,然后测其活性的方法,证明赤子爱胜蚯蚓纤溶晦具有七个有活性组分,同时测定出在变性与不变性纤维蛋白平板上溶纤行为的差异。     

蚯蚓纤溶酶的亲和层析纯化及部分性质

用牛血纤溶酶原Ｓｅｐａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析方法从蚯蚓粗提物丙酮粉中分离纯化一种纤维蛋白溶解酶。该酶为糖蛋白，含糖量约为１．４３％，Ｍｒ为３００００。实验结果表明此酶具有直接溶解纤维蛋白和激活纤溶酶原的间接溶解纤维蛋白的双重作用，并对人血凝块有明显的溶解作用。１％ＰＭＳＦ对酶有显著的抑制作用，说明此蚯蚓纤溶酶为典型的丝氨酸蛋白酶类酶。     

用亲和色谱柱纯化蚯蚓纤溶酶

蚯蚓纤溶成分具有良好的抗栓、溶栓作用，也未见毒副反应。利用亲和柱色谱分离可获得纯度极高的产品，本研究用国产对氨基苯砜乙基交联琼脂代替进口Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ，可降低生产成本，是一种较为实际的纯化方法。     

蚯蚓纤溶酶化学修饰的研究

以三聚氰氯为活化剂，采用活化聚乙二醇(PEG)对环毛蚯蚓纤溶酶进行化学修饰，优化了修饰条件，得到了PEG-EFE的加合物(修饰酶)，并研究了PEG-EFE的部分酶学性质。修饰酶的活力为天然酶的85％，结果表明酶的活性中心基本保持不变。对修饰酶的残留氨基测定表明，70％的可滴定氨基参加了反应，且EFE的活性改变较小，可以推测PEG是连接在蛋白质表面上的。     

紫外分光光度法测定利凡诺注射液中利凡诺的含量

目的 采用分光光度法测定利凡诺注射液中利凡诺的含量。方法：以水为溶剂,加入盐酸和亚硝酸钠,采用分光光度法,在518nm测定利凡诺注射液含量。结果 线性范围16～20ug／ml,(r=0．9996),平均回收率在99％以上,变异系数小于0．8％。结论 本法简便、准确、快速、稳定,可以作为利凡诺注射液中利凡诺的含量测定方法。     

紫外分光光度法测定复方碘滴鼻液的含量

目的应用紫外分光光度法测定复方碘滴鼻液中碘的含量。方法用液状石蜡作溶剂,在521nm波长处测定吸收度。结果碘在0．04～0。24mg／ml范围内线性关系良好,r=O.9998,平均回收率为99．7％,RSD为0．42％。结论本法操作简单、快速、结果准确,适用于制剂分析。     

紫外分光光度法测定普卢利沙星片中主药的含量

目的:建立以紫外分光光度法测定普卢利沙星片中主药含量的方法。方法:以0.1mol.L-1盐酸溶液为溶剂,测定波长为274nm。结果:普卢利沙星检测浓度在1~10μg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为100.0%(RSD=0.31%,n=9)。结论:本方法操作简便,检测结果准确。     

离子电极法与酶法测量钾、钠的比较

目的 对离子电极法和酶法两种测量钾钠的方法作一个评价。方法 通过线性测定、重复 性试验、回收试验、相关性试验、干扰试验对其进行评价。结果 两种方法所检测的项目其线性 范围、回收率均符合要求,重复性良好,批内批间CV%均在允许范围内,相关系数r>0.95,t检 验无显著性差异(p>0.05),酶法的干扰因素大于离子电极法。结论 两种方法可以交替使用,更 加方便了临床应用。     

紫外分光光度法测定七叶莲中总皂苷的含量

目的:建立以紫外分光光度法测定七叶莲药材中总皂苷含量的方法。方法:以齐墩果酸为对照品,香草醛-冰醋酸-硫酸溶液为显色剂,测定波长为532nm。结果:齐墩果酸检测浓度在0~240μg·mL-1范围内与吸光度呈良好的线性关系(r=0·9995);平均加样回收率为99·59%,RSD=0·82%(n=9)。结论:本方法操作简便、精密度高、重现性好,可用于七叶莲的质量控制。     

复方制剂紫外光谱分析测定系统的开发

目的：开发复方制剂紫外光谱分析测定系统。方法：采用Microsoft Visual Studio 2008作为开发平台,以ADO方式连接数据源。结果：本系统可实现复方制剂含量测定所需的各项功能,运算结果准确。结论：该系统运行稳定可靠,界面友好,值得推广。     

紫外分光光度法测定氧氟沙星滴眼液的含量

紫外分光光度法测定氧氟沙星滴眼液中氧氟沙星的含量,以0.1mol/L 醋酸为溶剂,测定波长293nm,吸收系数(E1cm1%)为876,测得平均回收率为99.9%,CV=0.36%(n=5)。滴眼液附加剂对测定无干扰。     

紫外分光光度法测定夜咳灵口服液中盐酸异丙嗪含量

目的:建立夜咳灵口服液中盐酸异丙嗪的含量测定方法。方法:采用紫外分光光度法在波长299nm处,测定盐酸异丙嗪的含量。结果:盐酸异丙嗪平均回收率为100.42%,RSD为0.82%(n=9)。结论:该方法简便、快速、精确,可用于医院药房夜咳灵口服液中盐酸异丙嗪的快速含量测定。     

紫外分光光度法测定戊二醛含量

目的 :建立紫外分光光度法测定戊二醛溶液中戊二醛的含量。方法 :于戊二醛特征吸收峰的233nm波长处测定戊二醛含量。结果 :戊二醛浓度在100～1600μg/ml之间线性关系良好 ,r=0.9998(n=5) ,测定结果的相对标准偏差≤2 13 % (n=6)。结论 :本方法简便、快速、准确     

莲子心中总黄酮含量测定方法的研究

目的：研究莲子心中总黄酮含量的测定方法。方法以芦丁为对照品,可见分光光度法用氯化铝作显色剂,在510nm波长测定总黄铜含量;紫外分光光度法在358nm 波长下测定总黄酮含量。结果可见分光法的回收率为98．47％,RSD 为0．24％;紫外分光法的回收率为97．10％,RSD为0．35％,比较两种方法的测定结果无显著性差异。结论可见分光光度法显色不稳定,紫外分光光度法显色稳定,且快速和简便,可用于莲子心中总黄酮的含量测定。