阻断交感神经及加味逍遥丸对心理应激小鼠免疫功能的影响

目的探讨交感-肾上腺髓质轴阻断对心理应激小鼠免疫器官结构和细胞免疫功能的影响及加味逍遥丸调节心理应激损伤的作用机理。方法利用电刺激心理应激箱诱发心理应激模型、六羟多巴胺阻断外周交感神经、加味逍遥丸为平行对照研究中药;检测脏器指数、胸腺细胞凋亡率、NK细胞活性、淋巴细胞转化率、胸腺病理等免疫学指标。结果单纯应激组较单纯对照组小鼠胸腺指数下降、脾指数下降[(0.41±0.13)vs(0.53±0.15);P<0.05]、胸腺细胞凋亡率升高[(33.21±5.54)%vs(17.79±5.18)%;P<0.01]、NK细胞活性下降[(22.1±14.1)%vs(35.5±10.3)%;P<0.01]、淋巴细胞转化率下降(P<0.01);六羟多巴胺阻断后应激组较单纯应激组NK细胞活性增大[(31.9±14.7)vs(22.1±14.1);P<0.05]、淋巴细胞转化率升高[(6985±580)cpm vs(4810±598)cpm,ConA(0.5ug/ml);P<0.01];灌胃加味逍遥丸后应激组较单纯应激组脏器指数升高、胸腺细胞凋亡率下降[(20.37±4.56)%vs(33.21±5.54)%;P<0.01];二者均能显著降低血糖皮质激素水平(P<0.05)。结论阻断外周交感神经明显保护心理应激小鼠的细胞免疫功能;加味逍遥丸通过减少胸腺细胞凋亡、防止胸腺和脾脏萎缩、降低血糖皮质激素等方面发挥抗应激损伤作用,其发挥作用的途径可能不是通过阻断外周交感神经实现的。     

美替拉酮阻断下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴及加味逍遥丸对慢性心理应激小鼠免疫系统的影响

目的探讨美替拉酮阻断下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(hypothalamic-pituitary-adrenalcortexaxis,HPAA)对慢性心理应激小鼠免疫器官和细胞免疫功能有无保护作用,以及加味逍遥丸调节慢性心理应激损伤的作用是否与下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴相关。方法将小鼠随机分为生理盐水对照组、加味逍遥丸对照组、美替拉酮对照组、美替拉酮合用加味逍遥丸对照组、生理盐水应激组、加味逍遥丸应激组、美替拉酮应激组、美替拉酮合用加味逍遥丸应激组。其中对照组小鼠不予以应激刺激,应激组小鼠采用电刺激条件反射箱诱导建立慢性心理应激模型。检测各组小鼠体质量、血清糖皮质激素水平、胸腺指数、胸腺细胞凋亡率、脾脏自然杀伤细胞活性及淋巴细胞转化率,并观察小鼠胸腺组织病理学改变。结果各应激组与其相对应的非应激对照组比较,其胸腺指数明显下降,自然杀伤细胞活性及淋巴细胞转化率均明显下降;同时,胸腺细胞凋亡率升高,胸腺组织病理损伤加重。美替拉酮及加味逍遥丸应激组与生理盐水应激组比较,其血清糖皮质激素含量明显下降,自然杀伤细胞活性及脂多糖刺激的淋巴细胞转化率明显升高,胸腺组织病理损伤减轻。美替拉酮合用加味逍遥丸应激组与单纯的美替拉酮或加味逍遥丸应激组各项指标比较,均无明显差异。结论阻断HPAA对慢性心理应激小鼠的免疫系统有明显的保护作用。加味逍遥丸对慢性心理应激小鼠的保护作用与美替拉酮阻断HPAA的效应基本一致,两者无叠加、协同效应。推测HPAA是加味逍遥丸抗应激损伤的作用靶点之一。     

逍遥丸对慢性心理应激小鼠免疫系统的影响

目的:探讨逍遥丸对慢性心理应激小鼠免疫器官结构和细胞免疫功能的调节作用。方法:利用应激箱诱发慢性心理应激模型,逍遥丸为抗慢性应激损伤中药,检测指标包括胸腺细胞凋亡率、胸腺病理、淋巴细胞转化率、血清糖皮质激素水平。结果:各应激组与非应激组比较,胸腺指数、淋巴细胞转化率下降(P<0.05),胸腺细胞凋亡率升高(P<0.05),胸腺病理损伤加重;逍遥丸应激组与生理盐水应激组比较,胸腺指数、淋巴细胞转化率升高(P<0.05),血清糖皮质激素水平、胸腺细胞凋亡率下降(P<0.05),胸腺病理损伤减轻;结论:逍遥丸对慢性心理应激造成的免疫系统结构和功能损伤有明显保护作用。     

慢性心理应激小鼠胸腺免疫细胞凋亡损伤的研究

目的 观察慢性束缚应激下小鼠胸腺病理改变及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的活性,探讨应激对小鼠免疫器官的损害作用及途径.方法 动物随机分为空白对照组和应激组.应激组小鼠给予慢性束缚应激,每天1次,每次8 h,持续2周.应激后处死小鼠,制作胸腺HE片、免疫组化Caspase-3片,在显微镜下进行免疫阳性细胞记数并显微拍照.结果 应激后小鼠胸腺组织形态改变重量下降[NC组(0.1000±0.0193)g vs SS组(0.0703±0.0205)g,P＜0.01],胸腺指数下降[NC组(0.0034±0.0003)vs SS组(0.0028±0.0007),P＜0.05],同时应激组胸腺Caspase-3阳性细胞率增加[NC组(15.6±3.91)%vs SS组(55.2±7.12)%,P＜0.01].结论 慢性心理应激能造成胸腺损伤,Caspase-3参与了应激状态下胸腺免疫细胞损伤.     

Exendin-4对人脐静脉内皮细胞内质网应激损伤的拮抗作用

目的 研究exendin-4(Ex-4)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)内质网应激相关凋亡的拮抗作用.方法 RPMI1640培养基培养HUVECs,待细胞长到培养瓶底部80％左右后,分4组干预细胞,每组8瓶,共32瓶.实验分组:①正常对照组(n=8):不做任何处理;②Ex-4组(n=8):(Ex-4,8μg/mL,45 min);③EPBS组(n=8):(EPBS,100μL/mL,30 min);④双药组(n =8):Ex-4预处理(8μg/mL,45 min),后加EPBS(100 μL/mL,30 min).免疫荧光法检测确认HUVECs上存在胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R);内源性过氧化氢酶抑制物(endogenous peroxidase blocking solution; EPBS)诱导HUVECs的凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡率变化;加入Ex-4预处理后,观察EPBS诱导HUVECs凋亡率的变化.Western blot检测细胞Calnexin、(C/EBP homologous protein,CHOP)和Bax表达情况,探讨内质网应激相关凋亡的机制.结果 ①HUVECs上有GLP-1受体表达;②与正常对照组相比,EPBS组HUVECs的凋亡率显著增加[(52.27±3.66)％ vs(7.25±0.62)％,P＜0.01)];与EPBS组比较,Ex-4的预处理可明显降低EPBS诱导的HUVECs凋亡[(37.77±2.86)％ vs(52.27±3.66)％,P＜0.01)].与正常对照组相比,EPBS能增加Calnexin[(1.76±0.16) vs(1.00±0.05),P＜0.01]、CHOP[(4.58±0.32)vs(1.00±0.12),P＜0.01]和Bax[(2.25±0.10)vs(1.00±0.06),P＜0.01]的表达;与EPBS组比较,Ex-4的预处理可显著降低Calnexin[(0.42±0.05)vs(1.76±0.16),P＜0.01]、CHOP [(0.64±0.10) vs(1.65±0.12),P＜0.01]和Bax[(1.48±0.08) vs(2.25±0.10),P＜0.01)]的表达.结论 Ex-4对EPBS诱导的HUVECs凋亡有明显抑制作用,其抑制作用可能与EX-4减少内质网应激相关蛋白Calnexin、CHOP和Bax相关.     

对氧磷酶2对氧化低密度脂蛋白诱导的乳鼠心肌细胞损伤的影响

目的 探讨对氧磷酶2(paraoxonase 2,PON2)在氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的乳鼠心肌细胞(neonatal rat ventricular cells,NRVCs)损伤中的作用及机制.方法 分离SD大鼠(出生1～3d,雌雄不限,共90只)心肌细胞.细胞分为:①对照组(未进行任何干预)、②0.1 μmol/Lox-LDL组(ox-LDL干预24 h)、③10 μmol/Lsalubrinal+ox-LDL组(salubrinal预处理1h后加入ox-LDL干预24 h)、④20 μg/mLPON2+ox-LDL组(PON2预处理1h后加入ox-LDL干预24 h)、⑤2.5μmol/LMn(Ⅲ)TBAP+ ox-LDL组[(Mn(Ⅲ)TBAP预处理1h后加入ox-LDL干预24 h].通过MTT法和Caspase-3/7活性检测试剂盒分别检测细胞活性和细胞凋亡变化(n=6);Western blot检测心肌细胞内质网应激和氧化应激蛋白表达情况(n=4).结果 与对照组相比,ox-LDL明显降低心肌细胞活性[(0.417 ±0.047) vs(O.883 ±0.064),P ＜0.01]显著增加心肌细胞凋亡[(11 505 ±817)vs(6417 ±439),P ＜0.01].与ox-LDL组相比,PON2、salubrinal和Mn(Ⅲ)TBAP干预后,细胞活性显著升高[(0.567 ±0.066) 、0.649 ±0.082) 、0.539 ±0.049) vs0.417 ±0.047),P ＜0.01],细胞凋亡显著下降[(7 776 ±488) 、(7 545 ±547)、(7 960±480)vs (11 505 ±817),P ＜0.01).与对照组相比,ox-LDL显著增加PON2蛋白表达[(0.86 ±0.223) vs (0.561 ±0.13),P ＜0.05]、内质网应激蛋白eIF-2αphox、caspase-12和氧化应激蛋白Nox2/gp91 phox、p47 phox表达[(1.309 ±0.274) vs (0.780 ±0.186) 、(1.294±0.273) vs (0.606 ±0.064) 、(1.342 ±0.274) vs(0.788 ±0.137) 、(1.178 ±0.194) vs (0.629 ±0.125),P＜0.01].与ox-LDL组相比,PON2干预后,PON2蛋白表达明显升高[(1.190 ±0.151) vs (0.860±0.222),P＜0.05];eIF-2αphox 、caspase-12、Nox2/gp91 phox和p47 phox蛋白表达明显降低[(0.924 ±0.170) vs(1.309 ±0.274) 、(0.895 ±0.202) vs (1.294 ±0.273) 、(0.957 ±0.190) vs (1.342 ±0.274) 、(0.799±0.232) vs(1.178 ±0.194),P ＜0.05].与PON2作用类似,salubrinal干预后,eIF-2αphox和caspase-12蛋白表达明显降低[(1.010±0.096) vs(1.309±0.274)、(0.788±0.042)vs(1.294±0.273),P＜0.01],Mn(Ⅲ)TBAP干预后,Nox2/gp91 phox和p47 phox蛋白表达明显降低[(0.898 ±0.190) vs(1.342±0.274) 、(0.769±0.158) vs(1.178 ±0.194),P ＜0.01],二者均显著升高PON2蛋白表达[(1.248±0.259) 、(1.176 ±0.248) vs(0.860 ±0.222),P ＜0.05].结论 PON2可能通过代偿性升高抑制氧化应激和内质网应激而减轻ox-LDL诱导的心肌细胞损伤.     

慢性束缚应激对移植S180肿瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的 观察慢性束缚应激下荷瘤小鼠肿瘤的生长情况及病理改变.方法 40只昆明小鼠建立慢性束缚应激模型,随机分为单纯肿瘤组(ST组)和肿瘤+应激组(T+S组).应激后处死小鼠,剥取肿瘤称重、制作肿瘤组织HE片,在显微镜下进行组织形态学观察并显微拍照.结果 T+S组瘤重[(1.69±0.33)g]明显较ST组重[(1.02±0.57)g],P ＜0.01;T+S组小鼠瘤细胞在异型性、瘤周及瘤内炎症三方面与ST组比较,差异有显著性,分别为[ST组(1.18±0.62) vs T+S组 (3.00±0.00),P ＜0.05;ST 组(2.02±0.36) vs T+S 组(0.78±0.16),P ＜0.01;ST 组(1.89±0.17) vs T+S 组(1.07±0.45), P ＜0.05].结论 慢性心理应激促进了肿瘤的发生、生长并使肿瘤的恶性程度增加.     

中药对情绪应激小鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的：探讨条件反射箱应激不同时间对小鼠胸腺细胞的破坏及凋亡的影响，通过加味逍遥丸加以干预，揭示中药对应激所致免疫功能变化的调节作用。方法：利用条件反射箱诱发的应激模型．观察应激3、5、7天以及加味逍遥丸干预后胸腺功能的变化状况。结果：应激3、5、7天组小鼠胸腺重量、胸腺指数、糖皮质激素水平、TFAR19蛋白平均荧光度、Annexin-V单阳性细胞及Annexin—V和PI双阳性细胞与对照组相比达显著性（P〈0．05）。结论：争件反射箱应激是一种急性负性情绪应激，应激的性质较平缓。应激通过神经内分泌免疫网络而影响胸腺功能，加味逍遥丸可调节应激反应而对胸腺的损伤起保护作用。     

加味逍遥丸对小鼠小站台水环境应激状态调节作用的实验研究

目的:观察加味逍遥丸对小鼠应激状态调节作用。方法:本实验采用自制小站台水环境应激小白鼠,应激后灌胃加味逍遥丸,取不同应激时间应激组和给药组小鼠,分别测定小鼠胸腺、脾的重量和指数、5-HT及血清糖皮质激素。结果:随应激时间的加长,小鼠胸腺的5-羟色胺、糖皮质激素的含量逐渐升高,胸腺、脾指数逐渐下降。结论:加味逍遥丸可以有效地改善小鼠的心理应激变化。     

Jagged1真核表达质粒构建及其对VSMCs增殖凋亡的影响

目的构建大鼠Jagged1真核表达质粒,分析Jagged1过表达对血管平滑肌细胞(vascular smooth musclecells,VSMCs)增殖和凋亡的影响。方法从带Jagged1全长基因质粒pBOS-SN3T中酶切获得目的基因,用载体pCMV-IRES-GFP构建重组质粒,转染至VSMCs。Western blot检测Jagged1蛋白表达变化,[3 H]-TdR掺入法检测细胞增殖,流式细胞仪(FACS)检测细胞凋亡。结果成功构建大鼠Jagged1真核表达载体并转染至VSMCs,经G418筛选后转染率可达90%以上,转染上调了VSMCs的Jagged1蛋白水平约6倍。转染p-rJagged1后VSMCs的增殖能力明显降低[(10 265±1 004)cpm/孔vs(17 584±1 587)cpm/孔,P<0.01],而凋亡明显增高[总凋亡率:(32.35±2.86)%vs(15.24±1.27)%;早期凋亡率:(22.47±2.54)%vs(10.22±0.98)%;P<0.01]。结论成功构建大鼠Jagged1真核表达质粒,过表达Jagged1可抑制VSMCs增殖并促进其凋亡。     

硫氧还蛋白系统与中枢神经系统疾病

有关中枢神经系统疾病发病机制的学说很多，自由基学说一直倍受关注。即如果中枢神经系统产生的自由基过多且未能及时清除，将会引起细胞结构的破坏进而功能丧失，最终导致中枢神经系统疾病的发生。广泛存在于各种组织细胞中的硫氧还蛋白(thioredox in，Trx)与疏氧还蛋白还原酶(thioredoxinreductase，TR)和NADPH一起组成     

新《医院财务制度》下的成本管理

以新《医院财务制度》的颁布实施为背景,阐述了在新形势下加强医院成本管理工作的必要性,同时解析了新制度中关于医院成本管理的相关内容和具体要求,针对具体形势和新制度的相关要求对医院如何开展成本管理提出了建议。     

刍议研究生导师资助制

导师资助制是研究生教育发展到一定阶段的必然产物,是缓解研究生教育中出现各种矛盾的有效手段,但仍存在学科差异使此制度难以公平执行;师生关系扭曲;边缘学科面临困境;部分导师面临淘汰等诸多问题亟待解决。     

股份制是公有制的主要实现形式

以公有制为主体、多种所有制经济共同发展,是社会主义初级阶段的基本经济制度,也是社会主义市场经济体制的坚实基础。要坚持和完善社会主义市场经济体制,就必须解决好公有制与市场经济有机结合的问题,而要解决好这个问题,关键在于找到一种能与市场经济有机结合的公有制的实现形     

实施导师制进一步完善医学院校学分制管理

本科生导师制是学分制管理的一个组成部分。本文结合医学院校特点 ,就实施导师制的重要意义 ,导师的主要职责、任职条件、管理措施展开论述 ,探讨如何有效发挥导师制对学分制管理的重要保证作用     

病案首页信息从旧系统转换到新系统的方法研究

本文针对病案管理上的需要,提出一种将病案首页信息从旧系统转换到新系统的方法,该方法能够高效、准确、完整的将旧系统的病案首页信息转换到新系统中,对已经实施或将要实施医院管理系统的相关单位和人员有一定的参考作用.     

电子病历系统在医院信息管理系统中的应用

作者针对该院电子病历系统的实际应用情况，详细阐述电子病历系统的软件结构、功能特点及实施方法．可为其他医院开发和应用电子病历系统提供有益的参考。