N F- КB 在脂肪酸合酶抑制剂诱导人结肠癌LoVo 细胞凋亡中的作用

 目的　探讨 NF-κB在脂肪酸合酶抑制剂 ( FASI)诱导人结肠癌 Lo Vo细胞凋亡中的作用。方法　 FASI—浅蓝菌素处理大肠癌 Lo Vo细胞株 ,四唑盐比色试验 ( MTT法 )、片断 DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪及荧光染色 ( AO/EB)等方法检测细胞调亡 ,用凝胶电泳迁移率法 ( EM-SA)检测 NF- κB活性。结果　 Lo Vo细胞在 FASI作用下 ,细胞增殖被阻遏 ,并呈现剂量效应关系。同时诱导细胞发生凋亡。FASI对人成纤维细胞增殖无明显影响。NF- κB在不同浓度浅蓝菌素 ( 1 0 -9～ 1 0 -5)处理 Lo Vo细胞 1 2 h后 ,可抑制 NF- κB活性 ,其抑制程度呈剂量依赖性递减。结论FASI可能通过抑制 Lo Vo细胞内源性脂肪酸合成 ,诱发细胞凋亡来阻遏 Lo Vo的增殖。NF- κB可能参与 FASI诱导人结肠癌 Lo Vo细胞凋亡中的信号转导.     

5-氟尿嘧啶诱导结肠癌细胞凋亡与NF-κB活化及uPA表达的关系

目的 研究5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导人结肠癌细胞(HCT116)凋亡与核转录因子-κ B(NF-κ B)活化以及尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)表达的关系,并观察吡咯烷二硫氨基甲酸盐(PDTC)抑制NF-κ B活化对5-Fu诱导结肠癌细胞凋亡及uPA表达的影响.方法 采用流式细胞仪Annexin V-FITC法检测结肠癌细胞HCT116凋亡;采用免疫组织化学方法半定量分析HCT116细胞NF-κB及uPA表达的动态变化.结果 5-Fu在诱导HCT116细胞凋亡的同时有NF-кB活化,1μmol/L PDTC能显著增加5-Fu诱导HCT116细胞凋亡及抑制5-Fu诱导的HCT116细胞NF-κB活化作用(P＜0.05),uPA变化与NF-κB一致.结论 5-Fu在诱导HCT116细胞凋亡的同时活化了NF-κ B,uPA表达亦随之增强;PDTC在抑制5-Fu诱导的HCT16细胞NF-κB活化的同时增强了5-Fu诱导细胞凋亡的作用,uPA表达也相应下降.     

5-Fu诱导结肠癌细胞凋亡与NF-κB活化及uPA表达的关系

 [摘要] 目的 研究5-氟尿嘧啶（5-Fu）诱导结肠癌细胞HCT116凋亡与核转录因子-κB (NF-κB) 活化以及uPA表达的关系，并观察吡咯烷二硫氨基甲酸盐（PDTC）抑制NF-κB活化对5-Fu诱导结肠癌细胞凋亡及uPA表达的影响。方法 采用流式细胞仪Annexin Ⅴ-FITC法检测结肠癌细胞HCT116凋亡;采用免疫组织化学方法半定量分析HCT116细胞NF-κB及uPA表达的动态变化。结果 5-Fu在诱导HCT116细胞凋亡的同时有NF-κB活化，1umol/LPDTC能显著增加5-Fu诱导HCT116细胞凋亡及抑制5-Fu诱导的HCT116细胞NF-κB活化作用(P<0.05), uPA变化与NF-κB一致。结论5-Fu在诱导HCT116细胞凋亡的同时活化了NF-κB，uPA表达亦随之增强；PDTC在抑制5-Fu诱导的HCT116细胞NF-κB活化的同时增强了5-Fu诱导细胞凋亡的作用，uPA表达也相应下降     

雄黄对人结肠癌LoVo细胞生长及凋亡的作用

 目的 研究雄黄对结肠癌LoVo细胞生长及凋亡的调控作用及其机制。方法 用雄黄作用于体外培养的人结肠癌LoVo细胞，分别用细胞计数和MTT（四甲基偶氮唑蓝）比色法分析其对LoVo细胞生长的抑制作用，采用流式细胞仪测定细胞周期分布和凋亡率，用光镜观察细胞形态。结果 雄黄在（2.5～160.0）μg／ml质量浓度范围内呈剂量依赖方式抑制结肠癌LoVo细胞生长（P＜0.05），雄黄（12.5～50.0）μg／ml作用24 h后，光镜可见LoVo细胞呈典型的凋亡形态学改变；流式细胞仪检测出现凋亡峰，其测得的细胞凋亡率与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 雄黄对人结肠癌LoVo细胞生长具有抑制作用，其机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关，对细胞周期的影响表现为G2／M阻滞。     

NF-κB抑制剂对卡铂诱导卵巢癌细胞凋亡的影响

目的探讨NF—κB抑制剂（PDTC）对卡铂诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡的影响。方法采用免疫组织化学方法,观察了卡铂诱导下卵巢癌SKOV3细胞中NF-κB在细胞质和细胞核中的表达变化;采用凝胶迁移率变动试验（EMSA）法,检测卡铂作用下和卡铂与PDTC共同作用下NF—κB的活性;MTT和流式细胞仪分别检测2种情况下SKOV3细胞的生长情况和凋亡率。结果NF—κB在卵巢癌SKOV3细胞质中表达,卡铂诱导12h后卵巢癌SKOV3细胞质中的NF—κB转移至细胞核。EMSA实验结果表明,卡铂诱导后的卵巢癌SKOV3细胞NF—κB的活性增强,PDTC可以抑制此作用。PDTC预处理后可增强卡铂对卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用。卡铂作用24h、48h后卵巢癌SKOV3细胞的凋亡率分别为6．7％、20．1％;卡铂＋PDTC作用24h、48h后卵巢癌SKOV3细胞的凋亡率为14．0％、32．7％,两者比较差异显著（P〈0．05）。结论卡铂能诱导NF—κB的活化,NF—κB的抑制剂可以增强卡铂诱导SKOV3细胞的凋亡,提高化疗疗效。     

NF-κB p65对人非霍奇金淋巴瘤细胞凋亡调控的研究

目的:研究NF-κB p65对人非霍奇金淋巴瘤(NHL)细胞凋亡的作用及其调控机制。方法:以NF-κB p65抑制剂quinazoline(QNZ)处理人NHL细胞,采用Annexin-Ⅴ染色方法检测肿瘤凋亡水平的变化,蛋白质印迹法检测各细胞系中Survivin蛋白及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Cleaved Caspase-3的表达水平;进一步应用实时定量PCR方法检测Survivin mRNA水平。结果:NF-κB p65抑制剂QNZ能够诱导NHL细胞的凋亡(P<0.05),具有时间-剂量依赖性。10nmol/L QNZ作用72h后Namalwa、Ramos和Raji细胞凋亡率分别为(13.5±2.7)%、(16.4±2.8)%和(15.8±2.5)%。抑制NF-κB p65的表达能够显著下调淋巴瘤细胞中Survivin蛋白的表达水平,10nmol/L QNZ作用72h后Namalwa、Ramos和Raji细胞中Survivin蛋白表达为0.58±0.06、0.54±0.03和0.51±0.09。同时,凋亡相关蛋白Bcl-2表达减低而Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2与Bax蛋白比值明显降低,与对照组相比差异均有统计学意义,P<0.05。预处理QNZ后3种NHL细胞Survivin mRNA均不同程度下降,随浓度增加其作用更为明显,P<0.05。结论:抑制NF-κB p65能够诱导NHL细胞凋亡,其机制可能与下调Survivin蛋白表达水平及对凋亡相关蛋白Bcl-2家族的调节有关。     

NF-κB在TNF-α诱导的Hela细胞凋亡中的作用

目的：探讨核因子-κB(nuclear factorkappa B，NF-κB)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)诱导的宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法：培养宫颈癌Hela细胞。不同处理因素按指定时间作用后，RT一PCR检测NF-κB p65 mRNA的表达。免疫印迹和免疫组化检测NF-κB p65活性的变化，TUNEL法检测细胞凋亡。结果：静息状态下。在Hela细胞中NF-κB p65具有微弱活性水平。TNF-α诱导Hela细胞NF—κB活化与其诱导细胞凋亡明显相关，NF-κB p65单抗能显著抑制TNF-α(10ng／mL)诱导的Hela细胞NF-κB活化，抑制率为49．69％，并增强其诱导Hela细胞凋亡的作用，凋亡增加率为57．52％。结论：TNF-α在诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的同时活化NF-κB。NF-κB p65单抗可通过抑制NF-κB活化以增强TNF-α诱导Hela细胞凋亡的作用。     

NF-κB、IκB与肿瘤细胞凋亡

细胞核因子κＢ又称κ基因结合核因子(ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒκｇｅｎｅｂｉｎｄｉｎｇ,ＮＦκＢ),是1种广泛存在于细胞中的具有多向性调节作用的蛋白质分子,参与调控细胞激酶、趋化因子、生长因子、细胞粘附因子及早期反应的蛋白质分子基因的转录,其活性受到1个强抑制物ＩκＢ的抑制。近年来研究结果表明:ＮＦκＢ能介导广泛的生物学作用,参与多种疾病的发生发展过程。ＮＦκＢ在细胞凋亡中有一定的作用。1　ＮＦκＢ和ＩκＢＮＦκＢ是1种转录因子,有着广泛的生物学作用。1986年Ｓｅｎ等[1]最初发现ＮＦκＢ是1种与免疫球蛋白κ轻链…     

NF-κB信号传导途径对TNF-α诱导的SMMC-7721细胞凋亡的影响

背景与目的:已证明核因子κ B( nuclear factor- κ B,NF- κ B) 在免疫细胞激活、抗病毒、多种应激反应和细胞凋亡的调控等许多方面起着重要作用.本实验研究 NF- κ B信号传导途径对 TNF- α诱导的肝癌细胞株 SMMC- 7721细胞凋亡的影响.方法:采用 ELISA和免疫组化检测 TNF- α对 NF- κ B信号传导通路的激活作用,继而用 TPCK( n- tosyl- Phe- chloromethylketone) 阻断 NF- κ B的活化,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:① TNF- α能激活 NF- κ B信号传导通路 ; ② TPCK能抑制 TNF- α诱导的 NF- κ B活化 ; ③ TPCK抑制 NF- κ B活化后,能加强 TNF- α诱导的细胞凋亡.结论:SMMC- 7721细胞中 NF- κ B信号传导途径参与了细胞的抗凋亡过程,在 SMMC- 7721细胞对 TNF- α的细胞毒性作用耐受中起重要作用.抑制 NF- κ B信号传导途径可能在肿瘤治疗中有潜在的应用价值 .     

NF-κB在前列腺癌发生中的作用及可能机制

前列腺炎是前列腺癌的危险因素之一,核转录因子-κB（nuclear factor κB, NF-κB）在前列腺炎诱发前列腺癌的过程中起重要作用。作为炎症环境特点之一的缺氧与参与免疫应答的Toll样受体,均可激活NF-κB;同时炎症细胞亦可通过NF-κB影响肿瘤的生物学行为;此外,NF-κB与其他前炎症因子间存在交互作用。NF-κB通过多途径调控肿瘤生长,包括促凋亡、抑增殖,介导肿瘤侵袭、转移和血管生成,同时可能诱导前列腺癌向雄激素非依赖性阶段演进。抗炎及针对NF-κB的靶向治疗为前列腺癌的治疗提供新思路,有待进一步深入研究。     

POKemon和NF-κB p65在肝癌细胞中的信号调控

目的:旨在探讨原癌基因POKemon和核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB) p65在肝癌细胞中的信号调控作用.方法:采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)和蛋白质印迹法分别检测POKemon、NF-κB p65 mRNA和蛋白在肝癌细胞株HepG2和SMMC7721及人胚胎肝细胞LO2中的表达情况;随后应用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)法依次分别抑制POKemon和NF-κB p65在肝癌细胞中的表达,观察二者在肝癌细胞中的变化,并应用FCM法检测对肝癌细胞凋亡的影响.结果:POKemon和NF-κB p65在肝癌细胞HepG2和SMMC7721中的表达量明显高于人胚胎肝细胞LO2;特异性针对POKemon基因的siRNA抑制POKemon的表达后,NF-κB p65在HepG2和SMMC7721细胞中的表达量也明显下降,转染前后分别为2.12±0.14vs 1.37±0.11和2.08±0.16vs 1.35±0.13,差异有统计学意义(P＜0.05),且肝癌细胞凋亡明显增加分别为(5.07±0.46)％vs (39.65±3.75)％和(5.71±0.83)％vs (33.21±3.66)％,差异有统计学意义(P＜0.05);特异性针对NF-κB基因的siRNA抑制NF-κB p65的表达后,POKemon在HepG2和SMMC7721细胞中的表达则无明显变化,其表达量转染前后分别为1.86±0.12vs 1.90±0.13和1.91±0.11 vs 1.85±0.11,差异无统计学意义(P＞0.05),但明显提高HepG2和SMMC7721细胞的凋亡率,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:原癌基因POKemon可通过调控NF-κB p65的表达而阻遏肿瘤细胞凋亡,促进肝癌的发生、发展.     

NF-κB在UVB诱导的皮肤癌中的作用

0 引言 近年来,世界范围内皮肤癌发生率不断增高,伴随全球人口老龄化,这一趋势还会继续增强,这主要是由臭氧层遭到破坏,导致到达地表的紫外线增多而引起的[1].日光下的慢性照射是基底细胞癌(BCC)和鳞状细胞癌(SCC)发生的主要原因[2].日光的紫外光谱可以分为3个波段,UVA(320～400nm),UVB(280～320nm)和UVC(200～280nm),能够到达地表的紫外线主要是UVA和少量的UVB,而UVC全部被臭氧层滤除.     

青蒿不同溶剂萃取粗提物对结肠癌HT-29、LoVo细胞NF-κB活性的影响

目的:通过比较不同溶剂萃取青蒿的粗提物对结肠癌HT-29和LoVo细胞的核因子κB(NF-κB)活性的影响,寻找青蒿中对结肠癌细胞NF-κB活性有作用的萃取相.方法:分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇对青蒿水煎液进行萃取,并将萃取得到的粗提物分别处理结肠癌HT-29细胞和LoVo细胞,提取核蛋白后采用凝胶阻滞分析(EMSA)方法对NF-κB活性进行测定.结果:青蒿水煎液氯仿萃取相对HT-29细胞和LoVo细胞的NF-κB活性表达均有明显的抑制作用(P＜0.05),其它各萃取相对两种细胞NF-κB活性的影响与对照组比较无明显差异.结论:在不同溶剂萃取青蒿水煎液中,氯仿萃取相粗提物对结肠癌HT-29细胞和LoVo细胞的NF-κB活性具有抑制作用.     

NF-κB在肿瘤中的研究进展

核因子kappaB(NF-B)因其在人体免疫,炎症,肿瘤的发生,发展,侵袭,转移等方面的重要作用而成为近来国际研究的热点.本文就其结构、功能、作用机制、与肿瘤的关系和未来研究方向等做一介绍.     

银杏叶提取物对胶质瘤细胞NF-κB表达和NO生成的调控

目的研究银杏叶提取物(EGb761)对C6胶质瘤细胞核转录因子-κB(NF-κB)表达和可诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、一氧化氮(NO)生成的影响。方法以脂多糖(LPS)和佛波酯(PMA)诱导体外培养的C6胶质瘤细胞表达可诱导型一氧化氮合酶、产生大量NO,应用激光共聚焦成像系统和NO荧光探针监测细胞内NO浓度变化,逆转录基因扩增技术和蛋白质印迹技术检测EGb761对C6胶质瘤细胞中iNOS基因表达的影响,并探讨这一调控作用的分子机制。结果EGb761能明显降低C6胶质瘤细胞中iNOSmRNA和蛋白的表达、减少NO的生成,抑制IκB-α的降解和阻止p65/RelA进入细胞核。结论EGb761可通过NF-κB信号通路对C6胶质瘤细胞iNOS基因表达和NO的生成进行调控。     

白血病细胞核因子-κB活化与化疗药物诱导凋亡的关系

目的 研究化疗药物诱导P388白病细胞核因子-κB(NF-κB)活化与凋亡的关系,以及长春新碱(VCR)对它们的影响。方法 采用电泳迁移率变动分析(EMSA)检测细胞NF-κB活化水平;采用TdF介导的dUTF缺口末端标记技术(TUNEL)和DNA电泳方法检测细胞凋亡。结果 化疗药物诱导P388白血病细胞NF-κB活化与化疗药物诱导细胞凋亡有明显关系,0．1μmol／L VCR不仅能显著抑制100μmol／L阿糖胞苷(Ara-C)或100μmol／L鬼臼乙叉甙(Vp-16)诱导的P388细胞NF-κB活化(抑制率分别为52％和63％),而且增强它们诱导P388细胞凋亡的作用(凋亡增加率分别为89%和123%)。P388细胞在接触化疗药物前,NF-κB亦有一定程度的活化。结论 化疗药物诱导P388白血病细胞凋亡的同时,可活化NF-κB;VCR可通过抑制NF-κB活化,增强化疗药物诱导白血病细胞凋亡的作用。     

NF-κB在TNF-α诱导的Hela细胞凋亡中的作用

目的探讨核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosisfactor-α,TNF-α)诱导的宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法培养宫颈癌Hela细胞,不同处理因素按指定时间作用后,RT-PCR检测NF-κBp65mRNA的表达,免疫印迹和免疫组化检测NF-κB p65活性的变化,TUNEL法检测细胞凋亡。结果静息状态下,在Hela细胞中NF-κB p65具有微弱活性水平,TNF-α诱导Hela细胞NF-κB活化与其诱导细胞凋亡明显相关,NF-κB p65单抗能显著抑制TNF-α(10ng/mL)诱导的Hela细胞NF-κB活化,抑制率为49.69%,并增强其诱导Hela细胞凋亡的作用,凋亡增加率为57.52%。结论TNF-α在诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的同时活化NF-κB。NF-κB p65单抗可通过抑制NF-κB活化以增强TNF-α诱导Hela细胞凋亡的作用。     

脂肪酸合酶抑制剂对大肠癌细胞NF-κB活性的抑制作用

目的　探讨脂肪酸合酶抑制剂对大肠癌细胞NF κB活性的抑制作用。方法　用脂肪酸合酶抑制剂(FASI) 浅蓝菌素处理大肠癌LoVo细胞株 ,用凝胶电泳迁移率法 (EMSA)检测NF κB活性。结果　实验分别用不同浓度浅蓝菌素 (10 -9～ 10 -5M )处理LoVo细胞 12h后 ,可抑制NF κB活化 ,其抑制程度呈剂量依赖性递减 ,与对照组相比较浅蓝菌素 (10 -9～ 10 -5M )处理LoVo细胞 12h后NF κB条带扫描像素积分比分别为 0 .787,0 .45 1,0 .379,0 .338,0 .32 2。结论　浅蓝菌素处理人大肠癌LoVo细胞后 ,NF κB活化程度随浅蓝菌素的剂量递增而递减。提示浅蓝菌素对LoVo细胞NF κB活性的具有抑制作用。     

NF-κB抑制剂增敏卡铂对卵巢癌细胞毒性作用的机制研究

[目的]探讨NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）增敏卡铂对卵巢癌细胞的毒性作用及其机制。[方法]采用凝胶迁移率变动试验（EMSA）法,观察卡铂作用下和卡铂与PDTC共同作用下NF-κB的活化反应;MTT和流式细胞仪分别比较2种情况下SKOV3细胞的生长情况和凋亡率;RT-PCR方法检测2种情况下survivinmRNA的表达。[结果]EMSA实验结果表明,卡铂可以诱导NF-κB活化,PDTC可以抑制此作用。PDTC预处理后可增强卡铂对卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制作用。卡铂作用24h、48h后卵巢癌SKOV3细胞的凋亡率分别为3.4%、20.1%;卡铂＋PDTC作用24h、48h后卵巢癌SKOV3细胞的凋亡率明显增加,分别为14.0%、32.7%,与卡铂组相比有显著性差异（P〈0.01）。卡铂作用3d、5d后卵巢癌SKOV3细胞中survivinmRNA的相对表达量分别为0.48±0.04、0.57±0.03,卡铂＋PDTC组分别为0.33±0.04、0.38±0.04,对应时间点两组差异显著（P〈0.01）。[结论]卡铂能诱导NF-κB的活化,NF-κB抑制剂可以增强卡铂诱导的SKOV3细胞的凋亡。NF-κB可能通过上调SKOV3细胞内survivinmRNA的表达来抵抗卡铂诱导的SKOV3细胞的凋亡。     

Bcl-2过表达对多柔比星诱导的膀胱癌细胞凋亡和NF-κB活化影响的观察

目的:探讨凋亡相关基因Bcl-2过表达对多柔比星(ADM)诱导的膀胱癌细胞凋亡和NF-κB活化的影响.方法:采用脂质体转染法将Bcl-2基因转入膀胱癌细胞,G418筛选获得抗性亚克隆细胞株,RT-PCR检测Bcl-2基因的表达.用6.25、12.5和25 μg/mL的ADM分别作用于细胞24 h,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测NF-κB活化情况.结果:建立分别稳定过表达Bcl-2基因和新霉素抗性基因(neo)的膀胱癌亚克隆株BIU87/Bcl-2和BIU87/neo,RT-PCR结果显示,BIU87/Bcl-2细胞的Bcl-2 mRNA水平明显高于BIU87/neo和BIU87细胞,F=63.107,P<0.01.经6.25、12.5和25 μg/mL ADM作用24 h后,BIU87/Bcl-2细胞凋亡率较BIU87/neo细胞明显降低,t=11.216,P<0.01.与BIU87/neo细胞相比,ADM作用24 h后BIU87/Bcl-2细胞胞质IκB明显减少,t=-0.255,P=0.018;而胞核NF-κB p65明显增多,t=2.088,P=0.049.结论:Bcl-2基因能够抑制ADM诱导的膀胱癌BIU87细胞凋亡,其抗凋亡作用涉及NF-κB活化.