中药"腰痛定"对体外培养小鼠星形胶质细胞的影响

目的:观察"腰痛定"对体外培养星形胶质细胞(脊髓)增殖能力的影响.方法:取经过传代培养的小鼠(脊髓)星形胶质细胞,随机分为实验组和对照组.MTT比色法观察星形胶质细胞在体外培养24 h、48 h和72 h后的增殖情况.结果:腰痛定低浓度(6 mg/ml)组对星形胶质细胞增殖有明显促进作用,尤其是72 h后MTT测试结果与对照组相比差异有显著性意义(P＜0.05).结论:"腰痛定"在适当浓度范围内可以促进星形胶质细胞增殖.     

补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓星形胶质细胞增殖的影响

目的 探究补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓星形胶质细胞增殖的影响。方法 采用改良Allen重物打击法制作脊髓损伤模型,将大鼠分为3组,即假手术组、脊髓损伤模型组、补阳还五汤组,各10只。造模干预1、3、5周后,巴索-比蒂-布雷斯纳汉(Basso-Beattie-Bresnahan, BBB)评分和斜板试验,评价大鼠后肢运动功能;皮层体感诱发电位波潜伏期,检测大鼠脊髓神经传导功能。于术后5周,HE染色,观察脊髓组织形态学变化的情况;免疫荧光染色,检测脊髓损伤区域中脊髓星形胶质细胞数量;蛋白质印迹法,检测脊髓组织中GFAP蛋白表达。结果 在造模干预1、3、5周后,模型组BBB评分及斜板试验倾斜角度显著低于假手术组(P<0.05),皮层体感诱发电位波潜伏期显著高于假手术组(P<0.05);补阳还五汤组BBB评分及斜板试验倾斜角度明显高于模型组(P<0.05),皮层体感诱发电位波潜伏期明显低于模型组(P<0.05)。在造模干预5周后,HE染色见补阳还五汤组脊髓组织结构较清晰,白质及灰质中坏死区减小,胶质疤痕减少,细胞及组织结构接近假手术组。在造模干预5周后,模型组大鼠脊髓组...     

少突胶质细胞相关因子与脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤是脊柱骨折的严重并发症,患者失去基本的生活自理能力,对个人家庭和社会都造成了严重的影响。脊髓损伤后轴突脱髓鞘变化是影响神经功能恢复的主要因素。近年来随着人们对脊髓损伤后少突胶质细胞死亡及轴突脱髓鞘改变认识的加深,少突胶质细胞对轴突再髓鞘化的作用也逐渐被人们所重视。通过检索近10年相关文献,将少突胶质细胞相关因子与脊髓损伤方面的研究做一综述。     

针刺双向良性调控星形胶质细胞治疗脊髓损伤的研究进展＊

随着近年来交通和工业的快速发展，脊髓损伤患者也不断增加，现已成为严重的社会负担，但却一直没有理想的治疗方案。继发性损伤是脊髓损伤后分子和细胞发生的一系列复杂的级联反应。它是SCI的重要组成部分，阐明继发性损伤的机制，针对不同的机制采取不同的干预措施是主要的治疗策略。而星形胶质细胞作为中枢神经系统中数量最多的细胞，在脊髓损伤后发挥了重要作用，受到研究人员的广泛关注，许多研究证明针刺可通过调节星形胶质细胞而发挥治疗作用，故本文综述了星形胶质细胞在脊髓损伤后的作用，以及针刺对其的干预影响，并提出日后研究的展望。     

电针对脊髓损伤后星形胶质细胞增生的影响

目的:探讨电针治疗脊髓损伤的机理.方法:选用成年Wistar大鼠,Allen氏法制备脊髓损伤模型,分别应用督脉电针治疗3 d、1 w、2 w或4 w,以正常组和损伤组作对照.应用电镜、免疫组化、原位杂交显色观察星形胶质细胞的形态、数量的变化;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测损伤脊髓星形胶质细胞特异性标志蛋白胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)mRNA表达变化.结果:电镜观察,术后3 d,损伤组星形胶质细胞肿胀明显;1 w时见反应性增生,体积增大,数量增加;4 w时,形态基本正常.电针组胶质反应轻,线粒体、核糖体增多,常见吞噬现象.免疫组化见,同一动物星形胶质细胞数灰质多于白质,尾侧多于头侧;组间比较阳性细胞数损伤组明显多于电针组,且损伤范围大,胶质界膜明显.原位杂交结果与免疫组化结果类似.电泳结果表明损伤早期电针组GFAP mRNA表达明显低于损伤组.结论:电针治疗可抑制脊髓损伤后星形胶质细胞反应性增生,防止胶质瘢痕形成,创造有利于神经再生的微环境.     

脊髓康对脊髓损伤小鼠小胶质细胞活化及组蛋白乙酰化水平的影响

目的 从小胶质细胞活化及组蛋白乙酰化的角度观察脊髓康对脊髓损伤小鼠的影响,并探究其促进脊髓损伤修复的部分机制.方法 采用改良A11en's法制备C57BL/6小鼠脊髓损伤模型,将实验分为假手术+生理盐水组、假手术+脊髓康组、脊髓损伤+生理盐水组、脊髓损伤+脊髓康组.小鼠后肢运动功能的恢复情况采用BMS评分法和斜板试验评...     

独活寄生汤对骨癌痛小鼠痛行为及脊髓星形胶质细胞GFAP表达的影响

目的:探讨独活寄生汤对骨癌痛小鼠痛行为及脊髓星形胶质细胞神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法:随机将雄性小鼠分为模型组、假手术组、正常组、中药A、B、C组和溶媒组。中药组和溶媒组分别灌胃含0.1、0.3、0.9 g独活寄生汤生药/0.4 m L的制剂和0.4 m L生理盐水,于造模14 d开始连续灌胃7 d,每天1次。热辐射刺激仪检测各组小鼠行为学指标(PWTL),21 d后取小鼠脊髓腰膨大处,检测GFAP m RNA和蛋白的表达情况。结果:对比正常组和假手术组的PWTL值,模型组小鼠的PWTL值随时间的推移显著下降(P0.05),而在14 d时间点,模型组、中药A、B、C组和溶媒组之间PWTL值的差异并没有统计学意义(P0.05),在21 d的时间点,对比模型组和溶媒组的数据,中药B、C组的PWTL值显著性升高(P0.05)。对比溶媒组和模型组小鼠,中药B、C组的脊髓组织GFAP m RNA及GFAP蛋白表达水平显著降低(P0.05)。但是溶媒组、模型组以及中药A组小鼠之间GFAP m RNA及GFAP蛋白表达水平比较,差异并没有统计学意义(P0.05)。结论:独活寄生汤对骨癌痛具有显著的镇痛作用,并能够使脊髓星形胶质细胞的活化受到抑制。     

益肾养髓方对脊髓型颈椎病大鼠脊髓中星形胶质细胞过度增殖的影响

目的观察益肾养髓方对脊髓慢性压迫大鼠脊髓（C5~C7）中胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）mRNA 表达量及GFAP 蛋白表达和分布的影响,以探讨益肾养髓方对脊髓型颈椎病（Cervical Spondylotic Myelopathy,CSM）大鼠脊髓中星形胶质细胞过度增殖和胶质瘢痕形成的作用。方法将56 只健康 雌性SD 大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、阳性对照组及益肾养髓方低、中、高剂量组,每组8 只。 模型组、益肾养髓方各剂量组及阳性对照组大鼠采用吸水膨胀材料压迫脊髓建立脊髓型颈椎病大鼠模型,假手 术组仅手术暴露脊髓。手术后2 周,益肾养髓方不同剂量组采用中药水煎剂灌胃,阳性对照组采用单唾液酸四 己糖神经节甘脂钠肌注,其余组采用生理盐水灌胃,每日1 次,连续4 周。于给药后第1、3、7、14、21、 28 天进行大鼠运动功能评价（BBB 评分）。术后6 周时HE 染色观察脊髓组织结构,RT-qPCR 法检测大鼠脊髓 GFAP 的mRNA 表达,免疫荧光观察GFAP 蛋白表达。结果灌胃后益肾养髓方各组及阳性对照组大鼠BBB 评分明显高于模型组,差异具有统计学意义（P＜0.05）,说明益肾养髓方对改善脊髓型颈椎病大鼠脊髓功能有 一定疗效。HE 染色益肾养髓方各组及阳性对照组可见脊髓组织中瘢痕、空洞变少,胞浆逐渐增多,神经细胞 形态接近假手术组。RT-qPCR 及免疫荧光结果提示模型组GFAP mRNA 及蛋白表达升高（P＜0.05）,益肾养髓 方各组及阳性对照组可降低其表达,与模型组比差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论益肾养髓方可降低脊 髓慢性压迫性损伤大鼠脊髓中GFAP 的表达,从而减少胶质瘢痕的形成,促进大鼠后肢运动功能恢复。     

电针在脊髓损伤修复中的应用基础研究概况

本文就电针对脊髓损伤修复作用的应用基础研究进展作一概述,共综合32篇文献的内容,从电针治疗脊髓损伤的方法、取穴部位、应用基础研究现状、电针治疗的作用机制等方面做了归纳总结,为临床应用电针治疗脊髓损伤提供实验依据。     

丹参与神经生长因子对脊髓损伤保护作用的实验研究

目的:探讨静脉注射丹参结合局部应用神经生长因子对兔脊髓损伤(SCI)的保护作用.方法: 58只成年日本大耳白兔,随机分成四组,A组10只,作为正常组;B、C、D组各16只,分别作对照组、地塞米松(Dex)治疗组和丹参结合神经生长因子(NGF)治疗组.结果:地塞米松对脊髓伤区血流量(SCBF),、丙二醛(MDA)含量及超过氧化物歧化酶(SOD)活性改善不明显,而使用丹参结合神经生长因子治疗后,脊髓伤区SCBF增高、MDA含量下降,SOD活性增高.结论: 丹参结合神经生长因子对脊髓损伤具有保护作用,且疗效较地塞米松明显,为临床治疗提供依据.     

火针对脊髓损伤模型大鼠凋亡细胞的影响

目的:观察火针改善脊髓损伤大鼠凋亡细胞的表达情况,为临床治疗脊髓损伤提供实验依据。方法:本研究以随机对照法进行动物分组,采用改良的Allen s法制备脊髓损伤模型,以火针、毫针分别进行干预,采用TUNEL法观察大鼠凋亡细胞的变化。结果:治疗手段干预后,与模型组比较,火针组、毫针组72 h、1 w的细胞凋亡表达存在显著性差异(P<0.05)。结论:火针能较好的减少脊髓损伤大鼠凋亡细胞的表达数量。     

电针对急性脊髓损伤大鼠氧化应激反应的影响

目的:观察电针对脊髓损伤后大鼠氧化应激反应的影响.方法:采用Allen's法制备急性脊髓损伤模型.动物分为假手术组、模型组、电针组.电针组造模成功后电针治疗14天,选用双心腧、双脾腧作为治疗穴位,测定脊髓中的SOD、MDA和GSH-Px含量变化.结果:电针组SOD、GSH-Px含量均有不同程度的上升,与模型组相比有显著...     

骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对脊髓损伤与修复的作用与机制及细胞移植的方法与途径。方法:实验组为将体外培养SD大鼠的MSCs经绿色荧光蛋白(GFP)转染标记后显微注射于脊髓横断模型的脊髓损伤处,并以无血清培养基注射动物为对照组。12周后观察移植细胞的分化情况,并通过行为学、组织学及免疫组化的方法评价脊髓功能变化。结果:实验组MSCs移植12周后,脊髓功能明显恢复。结论:骨髓间充质干细胞移植对脊髓的损伤修复具有明显作用。     

大鼠骨髓基质细胞移植治疗急性脊髓损伤的实验研究

目的:本实验在大鼠脊髓损伤后经原位移植骨髓基质细胞(bone marrow stroma cell-s,BMSCs),证明植入的BMSCs在损伤的脊髓内能分化为神经元样细胞,并通过对远期运动能力测试,探讨移植后神经功能障碍恢复的情况。方法:①采用Alien重物坠落法制作改良型大鼠Alien’s脊髓损伤模型(重量10g,高度30mm),苏木精-伊红(Haematoxyli-n/eosin,HE)染色鉴定脊髓损伤情况。②采用体外骨髓贴壁法培养大鼠BMSCs,进行细胞染色观察细胞形态,检测CD44从而对骨髓基质细胞进行鉴定。细胞进行三次培养传代后用携带绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)基因的慢病毒转染。③传代细胞移植及移植后细胞存活:将GFP标记的BMSCs原位(损伤区)植入损伤模型,分别对2w、4w、6w后处死大鼠行脊髓组织切片,免疫荧光显微镜下观察表达GFP的细胞。④随机入组的各组大鼠行改良Rivlin斜板实验和脊髓运动功能BBB评分法,比较单纯损伤组、移植后2w组、移植后4w组及移植后6w组大鼠的运动能力的改变。结果:①采用Alien’s重物坠落法造模,制造改良型大鼠Alien’s脊髓损伤模型,效果可靠、稳定。②BMSCs经过3次传代后增殖能力已趋于稳定,细胞在体外培养、扩增后,细胞形态改变为胞体呈锥形,突起交织成网,故可作为脊髓损伤后细胞移植的来源;染色观察细胞形态,检测CD44呈阳性。③由携带GFP基因的慢病毒转染BMSCs移植入脊髓损伤模型后,在6w内可见到细胞表达GFP。④通过改良Rivlin斜板实验和脊髓运动功能BBB评分法对单纯损伤组大鼠测试结果均明显差于移植对照组,差异具有统计学意义(P0.05);移植后2w、4w及6w组均能改善远期运动功能,以6w后神经功能障碍恢复最好,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:BMSCs移植能促进SCI后神经功能障碍的恢复,其机制可能与BMSCs分化为神经元和神经胶质细胞及移植诱导后的BMSCs可与周围的神经细胞相互作用,产生某些细胞因子有关。     

火针对脊髓损伤模型大鼠凋亡相关蛋白表达的影响

目的:观察火针改善脊髓损伤大鼠凋亡相关蛋白的表达情况,为临床治疗脊髓损伤提供实验依据;方法:本研究以随机对照盲法进行动物分组,采用改良的Allen’s法制备脊髓损伤模型,以火针、毫针分别进行干预,采用westen-blot法观察大鼠IL-1β、Caspase3、p38蛋白的变化;结果:造模后组织中IL-1β蛋白表达于6h达高峰,磷酸化的p38MAPK表达于24h达高峰,Caspase-3表达于24h达高峰;火针组、毫针组与模型组比较,72h、1w的Caspase-3表达量存在显著性差异(P0.05);火针组、毫针组与模型组比较,72 h、1w的IL-1β表达量存在显著性差异(P0.05);结论:火针能较好的改善脊髓损伤大鼠凋亡相关蛋白的表达,值得在临床治疗脊髓损伤推广。     

补阳还五汤抑制脊髓损伤区内胶质原纤维酸性蛋白基因表达的实验研究

 目的 研究补阳还五汤对大鼠脊髓损伤区胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）表达的抑制作用。方法 利用脊髓半横断损伤大鼠模型,将SD大鼠随机分为正常组、空白对照组和补阳还五汤治疗组、阳性对照组（激素组）,每组8只均在7,15,30 d等3个时间点,通过免疫组织化学染色方法检测各组脊髓损伤区GFAP表达的差异。结果 补阳还五汤组与空白对照组相比,脊髓损伤区内GFAP表达受到明显抑制,差异有极显著性差异（P<0.01）,激素组与空白对照组相比差异无显著性(P>0.05)。结论 补阳还五汤可以抑制脊髓损伤区GFAP的表达,可能是其促进脊髓损伤后后神经功能恢复的机制之一。     

补阳还五汤对脊髓损伤大鼠脊髓组织超微结构的影响

目的探讨补阳还五汤(BYHWD)对脊髓损伤(SCI)大鼠脊髓组织超微结构的影响,从微观角度探讨脊髓损伤的病理机制。方法应用SPF级Wistar大鼠,采用Allens’打击法制作中度SCI模型,参照改良Tarlov评分标准,分为模型组、BYHWD组、金纳多组,正常组不造模;用药2周结束实验后,取SCI大鼠脊髓组织制片行透射电子显微镜超微结构观察。结果正常组大鼠胞内与灰质内均未观察到空泡;模型组大鼠脊髓损伤严重,大部分的线粒体嵴丢失,形成空泡,内质网重度扩张,与其他组别比较有明显差异,差异有统计学意义(P<0.01);BYHWD组与模型组和金纳多组比较有明显好转,差异有统计学意义(P<0.01)。大鼠后肢运动功能Tarlov评分结果:在0 d～3周内,正常组大鼠后肢运动功能Tarlov评分无明显变化;BYHWD组与金纳多组评分随时间变化差异无统计学意义(P>0.05),与模型组及正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BYHWD能有效保护损伤脊髓组织的组织结构继发性损伤,营养神经元细胞,促进神经纤维的修复。     

三七总皂甙对大鼠脊髓损伤后HSP70阳性神经元表达的影响

目的探讨脊髓继发性损伤的病理生理机制及三七总皂甙(Panaxnotoginsengsaponins,PNS)防治该病的作用机理。方法以Wistar大鼠65只为研究对象,分为空白组、假手术组、溶媒对照组、三七总皂甙(PNS)组,各实验组按2、6、12、24小时相点观察,Allen's脊髓损伤模型100g*cm致伤脊髓。各组在相应时相点取脊髓组织,采取免疫细胞化学方法观察脊髓组织热休克蛋白70(HeatShockProtein70,HSP70)阳性神经元的表达变化。结果脊髓HSP70阳性神经元表达PNS组>溶媒对照组>假手术组>空白组。结论HSP70参与了脊髓继发损伤的病理生理机制,PNS可能通过诱导脊髓组织HSP70神经元的表达而起保护作用。