高迁移率族蛋白1在喉鳞状细胞癌组织及血清中的表达及意义

目的 研究高迁移率族蛋白1( high mobility group box-1,HMGB1) mRNA及蛋白在喉鳞状细胞癌(简称喉鳞癌)组织及患者血清中的表达及其临床意义.方法 反转录聚合酶链反应( RTPCR)及Western blot分别检测HMGB1 mRNA及蛋白在30例喉鳞癌患者肿瘤组织及癌旁黏膜组织中的表达;酶联免疫吸附试验( ELISA)检测HMGB1蛋白在喉鳞癌患者及正常志愿者血清中的表达.结果RT-PCR结果示HMGB1 mRNA(HMGB1/GAPDH)在喉鳞癌组织、癌旁黏膜组织中的相对表达量((x)±s)分别为1.25±0.12、0.32±0.04,差异有统计学意义(t=40.27,P＜0.05);Western blot结果示HMGB1蛋白(HMGB1/β-actin)在喉鳞癌和癌旁黏膜组织中的相对表达量分别为1.29 ±0.10、0.34±0.03,两组间差异有统计学意义(t=49.84,P＜0.05).结果显示HMGB1 mRNA和蛋白的表达水平与患者的T分级、临床分期、有无淋巴转移及是否吸烟有关(P值均＜0.05);而与年龄、性别、是否饮酒及肿瘤病理分级无关(P＞0.05).ELISA结果显示,喉鳞癌患者及正常志愿者血清中HMGB1质量浓度分别为(24.80±14.08) ng/ml、(23.58±14.69)ng/ml,差异无统计学意义(t=0.37,P＞0.05).结论 HMGB1 mRNA及蛋白在喉鳞癌组织中的表达显著高于癌旁黏膜组织,且表达水平与T分级、临床分期及有无淋巴转移有关.     

葡萄糖转运蛋白1在人喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:观察葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)在人喉鳞状细胞癌中的表达及其与临床病理学的关系.方法:应用免疫组织化学的方法以及RT-PCR法检测57例喉鳞状细胞癌患者的肿瘤组织、癌旁喉组织以及远离肿瘤的正常喉组织中GLUT1的蛋白和mRNA的表达,并结合喉癌患者的临床病理特征进行分析.结果:①免疫组织化学:GLUT1在喉癌组织中的表达高于癌旁喉组织和正常喉组织(P<0.01);在低分化喉癌中的表达高于高分化喉癌(P<0.05);Ⅲ期+Ⅳ期喉癌较Ⅰ期+Ⅱ期喉癌有高表达GLUT1的趋势(P<0.01);有淋巴转移的喉癌的表达高于无淋巴转移者(P<0.05);在直径≥3 cm的肿瘤中的表达高于直径＜3cm者(P<0.05).②RT-PCR结果:GLUT1在喉癌组织中的表达高于癌旁喉组织和正常喉组织(P<0.01);在低分化喉癌中的表达高于中分化和高分化喉癌(P<0.05);Ⅲ期+Ⅳ期喉癌较Ⅰ期+Ⅱ期喉癌有高表达GLUT1的趋势(P<0.05);有淋巴转移的喉癌的表达高于无淋巴转移者(P<0.05);在直径≥3 cm的肿瘤中的表达高于直径＜3 cm者(P<0.05).结论:GLUT1与喉癌发生、发展、分化、淋巴转移和转归等密切相关,可以作为喉癌的诊断、治疗和预后指标之一.     

喉鳞状细胞癌中Survivin基因的表达

目的探讨Survivin基因在喉癌和癌旁组织中的表达。方法应用RT-PCR和免疫组织化学方法检测40例喉鳞癌病人(Ⅱ期4例,Ⅲ期10例,Ⅳ期26例)的喉癌组织、癌旁组织(离切缘0.3~0.5 cm)和远离切缘(>2 cm)的相对正常喉组织中Survivin的表达情况。结果Survivin在喉癌组织中强表达率62.5%,在近癌切缘的癌旁组织弱表达率为34.6%,在远离癌切缘的相对正常喉组织Survivin弱表达率为10.0%,三者之间有明显差异。结论Survivin基因在喉鳞癌组织中强表达,但在癌旁黏膜中阳性表达可随着离癌灶越远,表达越低。     

Survivin基因在喉癌中的表达及意义

目的 研究凋亡抑制蛋白Survivin基因在喉癌组织及喉癌细胞株中的表达,探讨其在喉癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组织化学技术,研究42例喉癌标本、20例癌旁组织、20例喉角化症、10例正常喉黏膜中Survivin 蛋白的表达情况;并用RT-PCR技术检测喉癌细胞株Hep-2中Survivin mRNA的表达。结果 正常喉黏膜中无Survivin表达, 喉癌组织中Survivin 蛋白的表达 (66.6 %) 明显高于癌旁组织 (40.0 %)和喉角化症(35.0 %)(P<0.001),喉癌组织中Survivin表达与临床分期、病理分级及有无颈淋巴结转移无明显相关性(P > 0.05)。喉癌细胞株Hep - 2中有较强Survivin mRNA的表达。结论 Survivin基因在喉癌组织及喉癌细胞株中的高表达可能与喉癌的发生关系密切,具体机制有待于进一步研究。     

基质金属蛋白酶11在喉癌中的表达

目的:检测喉癌中基质金属蛋白酶11(MMP11)的表达,探讨MMP11的表达与喉癌浸润和转移的关系.方法:采用免疫组织化学法检测63例喉癌组织和相应的癌旁正常组织MMP11蛋白的表达,运用RT-PCR技术检测22例喉癌和相应的癌旁正常组织冻存标本中MMP11 mRNA水平的表达.结果:采用免疫组织化学法检测喉癌和癌旁正常组织MMP11的表达,癌组织MMP11的表达阳性率明显高于癌旁正常组织(P＜0.01).运用RT-PCR方法检测喉癌和癌旁正常组织MMP11 mRNA的表达,癌组织MMP11 mRNA的表达阳性率明显高于癌旁正常组织(P＜0.01).MMP11蛋白表达在T3 T4组高于T1 T2组(P＜0.01),淋巴结转移组高于非淋巴结转移组(P＜0.05).MMP11 mRNA表达在T3 T4组高于T1 T2组(P＜0.05),淋巴结转移组高于非淋巴结转移组(P＜0.05).MMP11蛋白及MMP11 mRNA的表达与肿瘤原发部位和分化程度无明显相关性(P＞0.05).结论:MMP11的表达与喉癌浸润和转移密切相关,可作为预测喉癌浸润和转移潜能的参考指标之一.     

Tiam1和MTA1在喉鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨Tiam1和MTA1在喉鳞癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化方法检测46例喉鳞癌组织及10例癌旁正常组织中Tiam1和MTA1的表达.结果 Tiam1和MTA1在喉鳞癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织(P＜0.01).在喉癌组织中Tiam1的表达与肿瘤的临床分期及有无淋巴结转移有关,而与患者的年龄、性别及肿瘤的病理分级无关.MTA1的表达与肿瘤的临床分期、病理分级及有无淋巴结转移有关,而与患者的年龄、性别无关.喉癌组织中Tiam1蛋白与MTA1蛋白的表达呈正相关.结论 Tiam1和MTA1可能与喉鳞癌的侵袭、转移相关,对喉癌的诊断、治疗和预后具有重要参考意义.     

喉癌肿瘤组织HIF-1α与COX-2蛋白和mRNA的表达及意义

目的:探讨喉鳞状细胞癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、环氧合酶-2(COX-2)蛋白质和mRNA的表达,以期有助于喉鳞状细胞癌发生、发展和转移机制的进一步阐明。方法:用免疫组织化学和RT-PCR方法检测76例喉鳞状细胞癌组织和9例癌旁正常组织中HIF-1α、COX-2蛋白和mRNA的表达,并按T分期、病理分级分别探讨HIF-1α、COX-2蛋白和mRNA的表达与各临床病理参数的关系。结果:①HIF-1α、COX-2蛋白表达在喉癌标本的表达量明显高于癌旁正常组织(P<0.05),随T分期的增加而增高;中、低分化的喉癌组织中HIF-1α表达显著高于高分化喉癌;COX-2蛋白表达与病理分级无关。②HIF-1α与COX-2mRNA在喉癌组织中的阳性表达率分别是67.11%和75.00%,明显高于癌旁正常组织(P<0.05),癌旁正常组织未检测到COX-2mRNA表达。HIF-1α与COX-2mRNA在喉癌组织中的阳性表达率与T分期有关(P<0.05),标本的表达量随T分期的增加而增高,但是与病理分级无关(P>0.05)。③HIF-1α蛋白表达阳性病例中,COX-2的阳性率为78.72%。结论:HIF-1α与COX-2在喉鳞状细胞癌组织的表达增高并密切相关,可能是喉癌发生发展的原因之一。     

抑癌基因CX26在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:观察抑癌基因CX26的mRNA和蛋白质在喉鳞状细胞癌中的表达情况,探讨CX26基因与喉鳞状细胞癌生物学行为的关系,及其与喉鳞状细胞癌发生和发展的分子机制。方法:38例喉鳞状细胞癌患者,每例患者均同时在喉癌切除手术时从喉癌肿瘤组织中心部位取癌组织(喉癌组),在肿瘤边缘外1.0cm部位取喉癌旁组织(对照组),分别采用半定量RT-PCR检测CX26mRNA的表达水平,冷冻切片免疫组织化学方法检测CX26蛋白的表达情况。结果:RT-PCR结果显示,CX26mRNA在喉癌组和对照组中均呈阳性表达;经半定量分析,CX26mRNA在喉癌组中的表达较对照组明显降低(P<0.05);免疫组织化学发现,CX26蛋白在18例(47.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在34例(89.5%)患者的喉癌旁组织呈强阳性表达,CX26蛋白在两者中的阳性表达差异有统计学意义(P<0.05),并且伴有细胞内定位的改变;同时发现,CX26蛋白阳性表达率和CX26基因mRNA的表达水平在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显低于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0.05),有颈淋巴结转移者明显低于无转移者(P<0.05),并且其表达水平随病理分化程度的降低而降低(P<0.05)。结论:CX26与喉癌的发生和发展关系密切,并可能与喉癌的预后有关。     

幽门螺杆菌感染和喉鳞状细胞癌致病因素的研究

目的 探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)在喉鳞状细胞癌患者中的感染情况,分析HP感染是否为喉鳞癌的致病因素.方法 采用巢式聚合酶链反应(nested PCR,nPCR)技术和Hp培养、鉴定对30例喉癌患者和15例喉良性疾病(声带息肉和会厌囊肿)患者的喉黏膜进行Hp检测.结果 采用nPCR法检测Hp,喉癌患者肿瘤组织Hp阳性22例(73.3%)高于对照组3例(20.0%),两者差异有统计学意义(x2=11.520,P=0.010).在22例Hp(+)的喉癌患者的44份肿瘤和癌旁组织中,有19份癌旁正常组织检出Hp(86.4%),而10份肿瘤组织检出Hp(45.4%),两者差异有统计学意义(x2=4.697,P=0.030).所有标本Hp培养均为阴性.结论 Hp在喉癌患者中的感染率明显高于实验人群,可能是喉癌的致病因素之一.     

乳腺癌转移抑制基因1 mRNA在声门上型喉癌中的表达及临床意义

目的:探讨乳腺癌转移抑制基因1(BRMSl)mRNA在声门上型喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义.方法:以β-actin基因为参照,应用RT-PCR方法,检测66例声门上型喉癌组织(肿瘤组)及其相邻的癌旁正常喉黏膜组织(对照组)中BRMSl mRNA表达.结果:肿瘤组中BRMSl mRNA与β-actin平均密度(ADV)比值为0.69±0.56,明显低于对照组(P＜0.05).且肿瘤组织中BRMSl mRNA在病理高分化组中表达明显高于中、低分化组(P＜0.05);在临床Ⅱ期标本表达明显高于Ⅲ～Ⅳ期标本;颈部淋巴结N.组明显高于N 组(P＜0.05);BRMSl mRNA表达与患者性别、年龄无关(均P＞0.05).结论:BRMSl mRNA在声门上型喉癌组织中低表达,且其低表达可能与声门上型喉癌的临床分期、病理分化以及颈部淋巴结转移有关.     

VEGF和iNOS在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 :研究血管内皮生长因子 (VEGF)和诱生型一氧化氮合成酶 (iNOS)在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系 ,并分析两者表达的相关性。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,检测 4 0例新鲜喉鳞状细胞癌标本和远离肿瘤的正常喉组织中的VEGF和iNOS的mRNA表达。结果 :VEGF和iNOS在肿瘤组织中的阳性表达率明显高于正常组织 (P <0 .0 1) ;在肿瘤组织中 ,两者的表达与患者的性别、年龄、病变部位、T分期无关 (P>0 .0 5 ) ,而与病理分化程度和颈淋巴结转移相关 (P<0 .0 5及 P<0 .0 1) ,在肿瘤组织中两者的表达存在相关性 (P <0 .0 5 )。结论 :VEGF和iNOS在喉鳞状细胞癌的生长、发展和转移中起重要作用 ,两者可能通过相互上调表达而密切相关 ,共同参与喉鳞状细胞癌的生长、发展和转移。     

环氧化酶-2在喉鳞状细胞癌中的表达及其与微血管密度的关系

目的：检测喉鳞状细胞癌（LSCC）中环氧化酶-2（COX-2）、兔抗人Ⅷ因子（FⅧ）的表达,探讨LSCC中COX-2的表达情况与微血管密度（MVD）的关系。方法：利用免疫组织化学SABC法检测42例LSCC及其癌旁正常组织中COX-2、FⅧ的表达,分析其与LSCC的临床病理、淋巴结转移、MVD等的关系。结果：LSCC组织中COX-2阳性率为71．4％,癌旁正常组织中COX-2的阳性率为19．1％,肿瘤组织中COX-2的表达明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义（P〈0．05）;COX-2在LSCC中的表达与患者的性别、年龄、病变原发部位、分化程度和T分期无关（均P〉0．05）：与病理分期、颈淋巴结转移和MVD密切相关。结论：COX-2在LSCC中的高表达对肿瘤的发生、发展及淋巴结转移起促进作用,COX-2可能是促进肿瘤血管形成的主要因子。     

蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的研究蛋白磷酸酶2A癌性抑制因子（cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A）在喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）中的表达及其与喉鳞癌临床病理特征的关系。方法应用实时荧光定量PCR及免疫组化方法检测40例喉鳞癌组织与25例癌旁组织中CIP2A的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果与癌旁组织相比,CIP2A mRNA在喉鳞癌组织的表达量增加（Z=-3.182,P〈0.05）。CIP2A蛋白阳性表达定位于细胞膜与细胞质,癌组织与癌旁组织的阳性表达率分别为70.0%（28/40）和40.0%（10/25）,差异具有统计学意义（χ^2=5.70,P〈0.05）;CIP2A mRNA的表达水平和蛋白阳性表达率在III期和IV期喉癌组明显高于I期和II期病例组（Z=-2.610,χ2=5.560,P〈0.05）,有淋巴结转移组明显高于无转移组（Z=-3.346,χ^2=3.815,P〈0.05）。结论 CIP2A与喉鳞癌的发生及浸润转移密切相关,有望成为喉鳞癌治疗的靶点。     

STAT3在喉癌中的表达特征及其与Survivin表达的关系

目的探讨信号传导与转录激活因子3（STAT3）在喉癌中的表达特征及其与Survivin表达的关系。方法采用免疫组织化学方法检测40例喉鳞状细胞癌组织和12例喉正常黏膜组织中STAT3、磷酸化STAT3（p-STAT3）蛋白和Survivin蛋白的表达;运用逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）检测上述组织中STAT3 mRNA和Survivin mRNA的表达。结合病例资料进行统计学处理,采用χ2、t检验。结果喉癌组织中STAT3、p-STAT3和Survivin蛋白及STAT3 mRNA和Survivin mRNA的阳性表达率均明显高于正常喉黏膜（P＜0.01）; STAT3、p-STAT3蛋白和STAT3 mRNA在喉癌中的表达均与喉癌的临床分期相关（分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01）;Survivin蛋白和 Survivin mRNA在喉癌中的表达与临床分期及淋巴结转移相关（P＜0.01,P＜0.01）STAT3和Survivin的表达呈正相关。结论STAT3的过量表达可能在喉癌的发生、发展中起重要作用,它的异常激活也可能通过上调Survivin基因的表达,延长喉癌细胞生存时间。     

程序性细胞死亡因子5在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨程序性细胞死亡因子5（PDCD5）在喉鳞状细胞癌组织中的表达及与临床病理指标的相关性。方法 采用逆转录多聚酶链式反应（RT PCR）技术和Western blot免疫印记技术检测41例喉鳞状细胞癌及29例癌旁正常黏膜组织中PDCD5mRNA和蛋白的表达情况,进一步应用免疫组化方法验证其在喉鳞状细胞癌组织中的定位表达。结果 PDCD5 mRNA喉鳞状细胞癌组织中较癌旁正常组织的表达明显降低,表达差异有统计学意义（P=0.006）;Western blot结果显示PDCD5 蛋白在喉鳞状细胞癌组织中较癌旁正常组织的表达明显降低,表达差异有统计学意义（P=0.012）。肿瘤组织中PDCD5 mRNA表达缺失与PDCD5蛋白表达缺失之间存在明显的相关性（Pearson r= 0.695, P<0.01）。免疫组化进一步证实PDCD5在肿瘤组织中的高频率缺失。χ2检验分析发现PDCD5蛋白表达缺失与喉鳞状细胞癌患者的年龄、性别、肿瘤原发部位和有无淋巴结转移无相关性,但是与肿瘤TNM分期以及组织学分级之间相关(mRNA P=0.032, P=0.021;蛋白 P=0.027, P=0.016)。结论 PDCD5在喉癌中多呈低表达,在喉鳞状细胞癌的发生、发展过程中可能起重要作用。     

stathmin基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的：探讨stathmin基因在人喉鳞状细胞细胞癌（LSCC）的表达及其与LSCC发生、发展之间的关系。方法：原位杂交方法检测stathminmRNA在35例人LSCC组织及18例癌旁正常喉黏膜组织（NLT）中的表达情况。结果：在35例LSCC组织中有24例stathminmRNA呈阳性表达（阳性率69％）,阳性颗粒可见于细胞质及细胞核,18例NI。T中6例呈弱阳性表达,差异有统计学意义（P％0．05）。结论：stathmin基因在LSCC组织中高表达,stathmin基因高表达与LSCC组织的发生、发展有重要的相关性。     

KAI1基因在喉癌及转移淋巴结中的表达

目的 通过研究KAI1基因在人类喉鳞状细胞癌及转移淋巴结中的蛋白表达情况,试图阐明KAI1基因蛋白的表达与喉癌转移之间的关系。方法 取喉鳞状细胞癌组织标本蜡块40例及转移的淋巴结13例,以癌旁正常组织标本蜡块30例作为对照,采用免疫组织化学SP法,检测KAI1单克隆抗体在喉鳞状细胞癌、转移淋巴结及癌旁正常组织标本中蛋白的表达,并结合患者临床病理资料进行统计学分析。结果 KAI1基因在癌旁正常组织、喉鳞状细胞癌及转移淋巴结中的表达率分别为93.33%（28/30）、62.50%（25/40）、30.77%（4/13）,且各组之间差异均有统计学意义（P＜0.05）。KAI1基因的蛋白表达与喉鳞状细胞癌的临床分期差异有统计学意义（P＜0.05）,与性别、年龄、原发部位、病理学分级及有无淋巴结转移无关(P＞0.05)。 结论 KAI1基因在喉鳞状细胞癌转移淋巴结中的表达较在喉鳞状细胞癌中的表达呈显著性下降,该基因可能在喉癌转移过程中起一定作用。