血清HBV标的阴性肝炎肝组织中HBV DNA表达的研究

目的：研究HBV DNA在血清HBV标志阴性肝炎肝组织中的表达。方法：对45例HBV血清标志阴性肝炎患者，进行肝组织HBV DNA的原位杂交检测。结果：原位杂交表明，HBV DNA阳性7例（阳性率15．56％），阳性信号主要存在于肝细胞的胞核中，少数位于胞浆内；结论：血清HBV标志阴性肝炎肝组织中可检出HBV DNA，有利于提高对HBV感染的诊断。     

HBV DNA及HBV抗原在血清HBV标志物阴性肝炎肝组织中表达的研究

目的 研究HBV DNA及HBV抗原在血清HBV标志阴性的肝炎肝组织中的表达。方法 对45例HBV血清标志阴性阴性肝炎患者，进行肝组织HBV DNA的原位杂交及免疫组织化学染色检测。结果 原位杂交表明，HBV DNA阳性者7例，（阳性率15．56％），阳性信号主要存在于肝细胞的胞核中，少数位于胞浆内；免疫组化染色表明，HBsAg及HBcAg均呈阴性。结论 血清HBV标志阴性的肝炎肝组织中可检出HBV DNA，有利于提高对HBV感染的诊断。     

非甲-非戊型慢性病毒性肝炎患者隐匿性HBV感染的研究

目的 观察非甲-非戊型慢性病毒性肝炎患者隐匿性HBV感染的状况,探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术对隐匿性HBV感染的诊断价值.方法 应用FQ-PCR技术对57例非甲-非戊型慢性病毒性肝炎患者进行了血清、肝组织HBV-DNA定量检测,并将肝组织HBV DNA定量水平与肝脏炎症活动度的关系进行了分析.结果 血清、肝组织HBV DrqA定量阳性分别为13例(22.81%)、22例(38.60%).13例血清HBV DNA定量阳性患者其肝组织定量亦均阳性,但9例肝组织HBV DrqA定量阳性患者其血清定量为阴性,差异有统计学意义(P<0.01);同时13例血清与肝组织定量均阳性患者比较.显示肝组织HBV DNA定量水平显著高于血清定量水平[(6.62±1.21)拷贝,gvs.(4.03±1.06)拷贝/ml,(P<0.01)].肝组织HBV DNA水平与肝脏炎症活动度并无相关性,10例G2,7例G3,5例G4患者HB'q DNA定量分别为(6.13±1.65)拷贝/g、(5.92±1.81)拷贝,g、(5.83±1.89)拷贝/g,(P0.05),但HBV DNA定量阳性患者均为活动性肝脏病变.结论 HBV隐匿性感染是部分非甲-非戊型慢性病毒性肝炎患者的病因.单纯检测血清免疫学标志物对HBV感染诊断存在漏诊,对非甲-非戊型慢性病毒性肝炎患者应用FQ-PCR技术开展血清定量尤其是肝组织中HBV DNA定量检测可提高HBV感染的诊断.对隐匿性HBV感染的慢性病毒性肝炎亦应给予有效的抗病毒治疗.     

抗病毒治疗对慢性乙型肝炎肝组织HBV DNA及病理的影响

目的 探讨抗病毒治疗对慢乙肝肝组织HBV DNA及病理的影响.方法 75例HBeAg阳性的慢乙肝患者分别接受拉米夫定-干扰素序贯治疗24例、拉米夫定35例或干扰素α2b16例,抗病毒治疗,检测治疗前48周患者肝组织HBV DNA及炎症指数(HAI).结果 抗病毒治疗48周,三组患者血、肝组织HBV DNA及HAI均值明显下降(P＜0.05),序贯治疗组HBeAg血清转换率(38.1%)稍高于其他两组(P=0.1352).HBeAg血清转化患者(17例)和HBV DNA阴转患者(21例)肝组织HBVDNA基线值明显低于其他患者(P＜0.05).结论 抗病毒治疗可以抑制肝组织HBV的复制,改善肝细胞的炎症坏死;肝组织HBV DNA水平低者抗病毒疗效好.序贯治疗可能获得较高的HBeAg血清转化率.     

HBV携带者血清病毒标志物和HBV DNA与肝组织中HBVcccDNA相关性的研究

目的探讨HBV携带者血清病毒标志物和HBV DNA与肝组织中HBVcccDNA之间的关系。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测30例经肝组织活检病理检查确定为HBV携带者的肝组织中HBVcccDNA、HBVtDNA和血清HBV DNA,同时用化学发光免疫分析法检测HBsAg、HBeAg定量,分析感染者肝组织内HBVcccDNA与肝组织内HBVtDNA、血清HBVDNA、HBsAg及HBeAg定量水平之间的关系。结果HBV携带者肝组织中均可检出HBVcccDNA,范围在3．15×10^3拷贝／mg～1．06×10^7拷贝／mg（对数值：5．66±O．93）;肝组织cccDNA定量与肝组织总HBVDNA定量呈正相关（r=0．375,P〈0．05）,与血清HBVDNA无相关性（r=0．174,P〉0．05）。肝组织中HBVcccDNA水平与血清HBsAg定量呈高度正相关（r=0．562,P〈0．001）;而与血清HBeAg定量无相关性（r=0．152,P〉0．05）。结论HBV携带者肝组织内HBVcccDNA成稳定的中等水平复制;血清HBVDNA载量不能直接代表其肝组织中的HBVcccDNA水平;血清HBsAg定量可作为反映肝幺日织中HBVcccDNA水平的指标。     

HBV体外感染卵巢颗粒细胞

目的建立HBV体外感染颗粒细胞模型,研究HBV在颗粒细胞中的复制情况,为深入研究HBV经卵细胞母婴垂直传播提供研究平台。方法原代颗粒细胞体外培养后用HBV阳性血清感染。收集培养上清,在不同时点检测HBsAg、HBeAg定量,实时定量PCR检测HBVDNA。免疫组化检测培养细胞中的HBsAg和HBcAg。巢式PCR检测细胞中的HBVDNA及HBV-mRNA。原位杂交检测细胞内的HBVDNA。结果成功建立了HBV体外感染颗粒细胞模型,在培养上清中可以持续96h检测到HBsAg和HBV DNA,在细胞内检测到HBsAg和HBcAg的阳性信号,PCR扩增显示细胞内有HBVD-NA及HBV-mRNA的存在,原位杂交证实细胞内HBVDNA阳性。结论 HBV能够在体外感染颗粒细胞,并在其内复制,该结果为深入研究HBV经卵细胞传播机制提供了很好的研究平台。     

血清HBV标志物阴性肾炎肾组织中HBV-DNA的原位杂交检测

目的 对血清HBV标志物阴性肾炎患者肾组织进行HBV—DNA的检测，为临床诊疗提供理论依据。方法 应用原位杂交（ISH）技术检测37份血清HBVAg阴性和18份血清HBVAg阳性的肾炎患者肾活检石蜡包埋组织切片中的HBV—DNA。结果 在血清HBVAg阳性的18例标本中HBV-DNA的检出率为88．9％（16／18），血清HBVAg阴性37例中检测出HBV—DNA5例（13．5％）。原位杂交显示两组检出的HBV-DNA均以肾小管上皮细胞质分布为主，与组织中HBVAg阳性颗粒的分布基本一致。结论 血清HBVAg阴性的HBV相关性肾炎临床上并非少见，应给予足够的关注。HBV—DNA在肾组织中的检出，表明HBV在HBV相关性肾炎的发病机理中有着重要作用。     

孕妇注射乙肝免疫球蛋白阻断HBV宫内传播的研究

目的 :研究乙型肝炎免疫球蛋白 (HBIG)对HBsAg阳性孕妇的乙肝病毒 (HBV)宫内阻断作用及孕妇血清中HBVDNA水平与宫内感染的关系。方法 :HBIG组 5 6例 ,孕 2 8周起肌注HBIG ,每 4周一次至分娩 ;对照组 5 2例 ,未予用药。两组孕妇均于孕 2 8周、分娩前 ,其新生儿于生后 2 4小时内免疫接种前抽静脉血检测HBsAg ,HBeAg及HBVDNA定量。结果 :HBIG组孕妇HBVDNA水平显著下降 (P <0 .0 5 ) ,其新生儿宫内感染率明显低于对照组 (分别为 16 .1%和 32 .7% ) ,P <0 .0 5。胎儿宫内感染率随着孕妇血清中HBVDNA含量增加而呈现增高趋势 (P <0 .0 5 )。两组孕妇及其新生儿未发现有不良反应。结论 :携带HBV孕妇产前多次注射HBIG可有效减少HBV宫内感染发生率 ;孕妇血清HBVDNA水平增高是胎儿发生HBV宫内感染的重要因素之一     

慢性乙型肝炎血清及肝组织病毒学标志与病理损伤的关系

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清及肝组织病毒学标志与肝组织病理损伤的关系。方法对647例CHB患者血清病毒学标志HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HBVDNA及其中418例肝细胞病毒学标志HBsAg、HBcAg的表达与肝组织病理损伤进行对比分析。结果CHB患者血清及肝组织病毒学标志与肝组织病理损伤密切相关。结论血清HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性,HBVDNA阴性的患者肝组织炎症及纤维化程度较轻;HBVDNA与肝组织炎症分级及纤维化分期无明显相关;肝细胞HBsAg、HBcAg均阴性表达的肝组织炎症及纤维化程度较重。     

慢性乙型肝炎肝内HBV DNA和HBsAg的双标记定位研究

应用原位杂交和免疫组化PAP法双标记技术,结合病人乙型肝炎(乙肝)病毒血清学标志物检测结果,研究了31例慢性乙肝病人肝穿刺组织中乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)和HBsAg的分布及意义。结果显示,肝组织内检出HBV DNA 23例,HBsAg 26例,二者同时检出者21例。从同组病人肝组织内HBV DNA和HBsAg双标检测结果与其乙肝病毒血清学标志物检测结果的比较来看,肝组织内HBV DNA和HBsAg同时阳性很可能表明HBV正处于复制及表达的活动状态。     

慢性乙型肝炎患者血清和肝组织中HBV DNA含量与庚型肝炎病毒感染的关系

目的：观察慢性乙型肝炎（CH－B）患者血清、肝组织中HBV DNA含量与庚型肝炎病毒（HGV）感染的关系，探讨HGV感染对CH－B患者乙型肝炎病毒（HBV）复制的影响。方法：应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）、免疫组织化学法、荧光定量PCR（FQ－PCR）技术方法对56份CH－B患者血清HGV RNA、肝组织HGV Ag、血清及肝组织中HBV DNA含量分别进行了检测，并将血清HGV RNA与肝组织HGV Ag的表达、HGV RNA、HGV Ag阳性与阴性患者HBV DNA含量分别进行了对比研究。结果：血清HGV RNA、肝组织HGV Ag阳性分别为10份（17．9％）、8份（14．3％）。血清HGV RNA阳性与肝组织HGV Ag表达显著相关（P＜0．01），但部分肝组织HGV Ag阴性患者亦有血清HGV RNA表达。血清HGV RNA、肝组织HGV Ag阳性与阴性患者血清及肝组织中HBV DNA含量差异无显著性（P＞0．05）。结论：HGV感染对CH－B患者HBV复制无影响。HGV可在肝脏中复制，但致病性可能较微弱。     

194例慢性乙型肝炎病理及其与血清HBV DNA、HBeAg、ALT关系的研究

目的探讨慢性乙型肝炎病理及其与血清HBV DNA、HBeAg、ALT关系。方法对194例慢乙肝患者进行肝组织病理、HBV免疫组化检查,并检测肝功能、血清HBVM和HBV DNA。结果血清HBeAg阳性组的肝组织G2、G3~4、S2、S3~4发生率与阴性组比较差异有统计学意义,肝组织S0组与S1~4组比较差异有统计学意义,肝组织G0~1组与G2~4组、HBcAg阳性组与阴性组的HBV DNA含量比较差异亦有统计学意义,肝组织HBsAg表达为" "者与" ~ "者血清HBV DNA含量比较差异无统计学意义,肝组织达S1或(和)G2以上者血清ALT水平分别为:<40U/L组占28.57%,40~80U/L组占53.33%,81~400U/L占80.15%,>400U/L组占77.88%。结论血清HBV DNA与肝组织HBcAg表达有一致性,与肝内HBsAg无关,HBV DNA含量低可能是肝组织炎症活动度和纤维化程度高,ASC和轻度肝损害者应争取肝活检,以及时判断肝组织病理程度和治疗时机。     

CAS基因在原发性肝癌组织中的表达及其与HBV感染的关系

目的 探讨细胞凋亡易感基因(CAS)可否作为肝癌的病理诊断标志物,以及肝细胞癌中CAS蛋白的表达与HBV感染之间的关系.方法 应用免疫组化法检测肝癌、癌旁组织及未发生肿瘤的肝硬化、肝炎组织中CAS蛋白的表达情况,同时应用免疫组化法、核酸原位杂交法检测HBV感染的肝细胞癌组织、癌旁组织中HBsAg、HBcAg以及HBV DNA的表达情况,分析肝细胞癌中CAS蛋白的表达与HBV感染之间的关系.结果 CAS蛋白在肝癌组织中的表达较癌旁组织明显升高(P＜0.01),而癌旁组织中CAS蛋白表达较未发生肿瘤的肝硬化、肝炎组织显著增强(P＜0.01).低分化型肿瘤细胞的CAS蛋白表达明显高于中分化型和高分化型(P＜0.01).CAS蛋白在HBV感染的肝细胞癌组织中的表达明显高于非HBV感染的癌组织(P＜0.01),其中HBV DNA阳性的肝细胞癌组织中CAS蛋白表达水平显著高于HBV DNA阴性的肝细胞癌组织(P＜0.05).结论 CAS蛋白在肝细胞癌组织中呈高表达,肝细胞癌分化愈低其表达愈强,表明CAS蛋白可作为肝细胞癌的病理诊断与分化程度的评价标志物.并推测HBV DNA可能通过上调CAS的表达,在HBV感染相关性肝癌的发生发展过程中发挥重要的作用.     

HCV genotype and "silent" HBV coinfection: two main risk factors for a more severe liver disease.

To evaluate whether HCV genotype and a "silent" HBV infection may be related to a more severe clinical presentation of liver disease, 205 anti-HCV/HCV-RNA positive, HBsAg/anti-HBs negative patients with chronic hepatitis (113 males and 92 females; median age 55 years, range 18-77), were studied on presentation at the Liver Unit from January 1993 to December 1997. Presence of serum anti-HBc, in the absence of HBsAg and anti-HBs, was considered a marker of "silent" HBV infection. Of the 205 patients, 134 had undergone percutaneous liver biopsy. Two main diagnosis groups were established: the mild liver disease group (76 patients), and the severe liver disease group (109 patients); 20 patients who had refused to undergo liver biopsy were not included in the clinical and virological evaluation because the diagnosis was uncertain. The prevalence of severe liver disease was similar in the genotype 1 and non-1 groups (61.3% of 98 patients with genotype 1 and 52.9% of 70 patients with a non-1 genotype). Instead, the 88 patients with "silent" HBV infection showed a higher percentage of severe liver disease than the 97 anti-HBc negative patients (72.7% vs. 46.4%, respectively: P < 0.0005). Of the 88 anti-HBc positive patients, the prevalence of those with severe liver disease was similar in the 32 cases with serum HBV-DNA as detected by PCR and in the 56 HBV-DNA negative (81.2% vs. 67.8%, P = 0.4). The relation between "silent" HBV infection and severe liver disease was observed both in genotype 1 and non-1 infected patients. Nevertheless, the anti-HBc negative patients infected by genotype 1 showed a severe liver disease more frequently than those infected by a non-1 genotype, with a difference that is significant to the statistical analysis (P < 0.05). The findings suggest that "silent" HBV infection in anti-HCV positive chronic hepatitis enhances the severity of the liver disease. Evidence was also found that in patients without "silent" HBV infection there is a correlation between the presence of HCV genotype 1 and the severity of liver disease.     

Hepatitis B virus concentrations in serum determined by sensitive quantitative assays in patients with established chronic hepatitis delta virus infection.

To clarify the correlation between hepatitis B virus (HBV) DNA levels and serum alanine aminotransferase (ALT) levels in patients with established chronic hepatitis delta virus (HDV) infection, sensitive HBV quantitative assays were used for the study. Thirty-four consecutive patients with chronic liver disease who were positive for both hepatitis B surface antigen (HBsAg) and antibody to HDV (anti-HDV), including 19 patients with chronic hepatitis, 8 patients with liver cirrhosis and 7 patients with hepatocellular carcinoma. All were negative for hepatitis Be antigen (HBeAg) and positive for antibody to HBeAg. HBV DNA was detected in 25 (73.5%) of the 34 patients using real-time detection PCR, and the HBV DNA levels of these patients were significantly lower compared with HBeAg status and ALT level-matched patients with chronic liver disease positive for HBsAg but negative for anti-HDV. There was no correlation between serum HBV DNA and ALT levels among the 34 patients with chronic liver disease positive for anti-HDV. Whereas serum ALT levels in anti-HDV-positive HBsAg carriers with HDV RNA were significantly higher than those without HDV RNA. Liver damage in patients with established chronic HDV infection may be caused mainly by ongoing HDV infection not by HBV replication.     

前S1蛋白（PreS1）在乙型肝炎诊断中的作用

目的探讨HBV感染者血清中PreS1与HBV-DNA、HBeAg三者间的关系,进而评估PreS1在HBV感染、复制、诊断中的作用。方法收集1750例乙型肝炎患者血清,按不同HBV-M进行分组：HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、HBcAb（＋）为A组,HBsAg（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）为B组,HBsAg（＋）、HBcAb（＋）为C组,HBsAg（＋）为D组,采用酶联免疫法（ELISA）检测乙肝病毒PreS1与HBV血清标志物,荧光定量PCR法检测HBV-DNA。结果以HBV-DNA＆gt;5×102拷贝/mL为阳性诊断标准,不同HBV-M模式中,PreS1与HBV-DNA的检出率无显著差异（P＆gt;0.01）,PreS1与HBV-DNA的总符合率高于HBeAg与HBV-DNA的符合率,在HBeAg（-）患者中仍可不同程度地检出PreS1与HBV-DNA。结论PreS1可作为HBV感染、复制的一项新指标,在乙型肝炎诊断中具有很大的应用价值。     

慢性HBV感染肝脏病理变化和生化ALT及病毒学关系

目的 探讨慢性HBV感染ALT、HBV DNA与肝脏病理的关系.方法 对81例慢性HBV感染患者检测血清ALT、HBV DNA.并进行肝活检病理检查.结果 肝脏炎症分级和纤维化分期与ALT明显相关(r值分别为0.683和0.419),与HBV DNA无相关性.随着肝脏炎症活动度和纤维化程度的加重,ALT有升高趋势(χ2趋势值分别为25.81和12.012),HBV DNA无升高趋势,而随着HBVDNA的升高,肝脏炎症活动度和纤维化程度并无加重趋势.肝组织HBsAg、HBcAg阳性组与阴性组的ALT、HBV DNA差异无统计学意义.结论 ALT与肝脏炎症活动度有明显相关性,仍是观察炎症变化的敏感指标,HBV DNA与肝组织炎症分级及纤维化分期无相关性.     

Detection of hepatitis B viral DNA by polymerase chain reaction in patients with hepatitis B surface antigen

Hepatitis B virus (HBV) DNA was assayed using the polymerase chain reaction in serum samples of 116 hepatitis B surface antigen (HBsAg) carriers, including 30 positive for hepatitis B e antigen (HBeAg) and 86 negative for HBeAg. In the HBeAg-positive group, all were positive for HBV DNA. In the HBeAg-negative group, 80.2% were positive for HBV DNA (80.0% in the healthy carrier group, 90.0% in the chronic active liver disease group, and 69.2% in patients with cirrhosis). This study indicated that every HBeAg-positive carrier as well as the majority of HBeAg-negative carriers were infectious and, in the latter group, that viral replication is most active in patients with chronic active liver disease.