聚合酶链反应在肺结核诊断中的应用价值

１９９７年３月－１９９７年１２月，１７６例患者，肺结核者３６例，结核性胸膜炎者４２例，非结核性痰标本９８例，同时行ＰＣＲ法和涂片镜检法（痰／胸水）比较。结果表明ＰＣＲ有很高检出率（７７．８％和７６．１９％）。该项技术为结核病早期诊断开辟了新的前景。     

聚合酶链反应对活动性肺结核病的诊断价值探讨

目的：探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）对结核病的临床诊断价值。方法：本文对１２６例活动性肺结核病人的痰标本进行了检测。结果：发现ＰＣＲ检出率为６０．３％,高于痰培养的４９．２％和痰涂片的３８．１％。但涂阳病人中有２２．９％ＰＣＲ阴性,８２例非结核疾患有２８．１％ＰＣＲ阳性。结论：提示ＰＣＲ阳性结果并非活动性结核病所特有     

PCR技术在儿科支原体肺炎诊断中的应用

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和间接血凝法（ＩＨＡ）对６５３例肺炎患儿及２００例健康婴幼儿进行下呼吸道分泌物ＭＰ ＤＮＡ及血清抗ＭＰ－ＩｇＭ检测。结果表明：ＭＰ ＤＮＡ阳性１０７例，阳性率１６．４％；抗ＭＰ－ＩｇＭ阳性１２３例，阳性率１８．８％两者同时阳性２３例，占阳性病例的１０％。ＭＰ阳性病例数共２０７例，占肺炎病例数的３１．７％。本实验结果提示应用ＰＣＲ技术对小儿ＭＰ肺炎的早期诊断具有特异、快速、     

结核-聚合酶链反应在诊断结核性胸腔积液中的价值

目的：阐明结核－聚合酶链反应（ＴＢ－ＰＣＲ）在诊断结核性胸腔积液中的作用。方法：以胸膜活检病理结果为标准，总结了１１８例胸腔积液ＴＢ－ＰＣＲ的检测结果，并与结核菌涂片，培养两种方法进行对比，结果：ＴＢ－ＰＣＲ，涂片，培养三种方法的阳性率分别为３３％，０和５％，前者高于后两者（Ｐ〈０．００１），但ＴＢ－ＰＣＲ的假阴性率较高（６７％），结论：用ＴＢ－ＰＣＲ法诊断结核性胸腔积液的价值有限，最好做胸膜活检     

结核杆菌（TB）PCR荧光诊断试剂盒的临床应用

目的：探讨半定量ＴＢ－ＰＣＲ荧光探针诊断试剂盒的临床应用价值。方法 以双盲法对１１５例结核病和５９例非结核病人的痰标本进行厚涂片抗酸染色检查、结核菌培养、荧光探针ＴＢ－ＰＣＲ检查对比。结果：三种方法检测的敏感性分别为３２．２％，５９．１％，７１．３％，荧光探针ＴＢ－ＰＣＲ法的敏感性显著高于培养法和涂片法（Ｐ〈０．０１和Ｐ〈０．０５）。特异性分别为９３．２％、９１．５％、９４．９％，差异无显著性。结     

荧光定量PCR与RT-PCR技术检测HCV-RNA的比较观察

目的 比较荧光定量ＰＣＲ与ＲＴ－ＰＣＲ（定性）检测不同检材中的ＨＣＶ－ＲＮＡ,评价荧光定量ＰＣＲ技术测定ＨＣＶ－ＲＮＡ水平的价值。方法 采用荧光定量ＰＣＲ及ＲＴ－ＰＣＲ（定性）技术同时检测了７１例血液透析患者的血清,血浆,淋巴细胞、尿液标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果 血清、淋巴细胞,尿液标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ的荧光定量ＰＣＲ检出率（４６．３８％,８０．００％）,分别高于相应标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ的ＲＴ－Ｐ     

双带PCR提高检测血清HBV-DNA质量的意义

应用双带ＰＣＲ方法（ＤＢ－ＰＣＲ）检测了２４０份血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，该方法能直接观察和判断假阴性和假阳性结果，提高了检测的准确性。与国内其它ＰＣＲ试剂比较，符合率分别为９４．０５％（ＤＢ－ＰＣＲ／华美产品），和９５．２８％（ＤＢ－ＰＣＲ／长城产品）。ＨＢｅＡｇ阳性的血清，经ＤＢ－ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者达９３．５５％（２９／３１）。ＰＣＲ产物Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ后能与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针杂交，证明了该方法的特异性。     

用RT－PCR测血清中柯萨奇B组病毒基因初探

本文用ＲＴ－ＰＣＲ对１００例临床不同病人血清中柯萨奇Ｂ组病毒基因作了检测，其阳性结果分别为：心血管疾病患者１９．６％（１０／５１），内科原因不明发热忍者７．１％（２／２８），儿科患者４．７％（１／２１），总阳性率为１３％（１３／１００）。并将阳性结果与心电图检查进行比较分析，以探讨ＰＣＲ技术对心肌炎疾病的诊断应用。     

聚合酶链反应检测克隆性免疫球蛋白重链基因重排

目的 建立较简便、敏感的Ｂ细胞恶性肿瘤微小残留病（ＭＲＤ）检测方法。 方法 根据免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因的保守序列设计引物，应用半巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）基因扩增技术检测克隆性ＩｇＨ基因重排。结果 该方法敏感性达１０＾－３。６２例Ｂ细胞恶性肿瘤患者，５１例检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，阳性率为８２％，假阴性率为１８％（１１／６２）。同时检测３５例非Ｂ细胞恶性肿瘤患者和２０例正常人均阴性，无假阳     

PCR法检测细针穿刺标本中的结核杆菌

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对６８例肺外肿块细针穿刺标本，进行结核病病原学诊断，结果２０例结核杆菌ＰＣＲ呈阳性，其中７例经手术活检，１３例经细胞学诊断，均证实为肺外结核病。４８例结核杆菌ＰＣＲ阴性者，均经细胞学诊断为非结核病。提示：用ＣＰＲ法检测肺外肿块细针穿刺标本中的结核杆菌，在鉴别诊断肺外结核病方面具有重要的意义。     

脑瘫患儿CT改变与巨细胞病毒感染关系的初步研究

用多聚酶链反应法（ＰＣＲ）检测７４例脑瘫患儿尿中巨细胞病毒ＤＮＡ（ＣＷＶ－ＤＮＡ），ＣＭＶ－ＰＣＲ阳性率为５４．１％，同时行ＣＴ检查，其中４７例（６３．５％）异常，在ＣＴ异常组中ＣＭＶ－ＰＣＲ阳性率为６３．８％，而ＣＴ正常组阳性率为３６．５％，两者比较差异有显著性。（Ｐ＜０．０５）。示ＣＭＶ感染可能与婴儿脑损伤有关，且在一部分患儿可引起解剖性损伤。     

PCR检测技术在结核病诊断中的价值

用ＰＣＲ技术对１７５例临床可疑结核病，但常规培养或抗酸染色阴性的病理标本中结核菌ＤＮＡ进行了检测。结果发现有２２．３％（３９／１７５）的样本结核菌ＤＮＡ阳性。结果提示，ＰＣＲ技术在检测结核菌ＤＮＡ中具有简便、快速和灵敏的特点，其阳性结果说明被测样品中有结核菌的存在，对结核病的确诊有重要辅助意义。     

四种淋病实验室检测方法的比较和评价

本文对３０例来自妇科门诊的非性病患者和７０例来自皮肤科，妇科和泌尿科门诊的疑淋病患者分别作涂片、培养、ＰＣＲ检测ＮＧ和酶标法检测ＮＧ抗体四项检测，以培养为对照评价各方法的临床应用价值。结果表明，在３０例非性病患者中，培养和涂片均为阴性，但ＰＣＲ和ＮＧ抗体检测各有一例假阳性，假阳性率为３．３％。在７０例疑淋病患者中，有１５例培养阳性，其中ＰＣＲ阳性为１３例，故ＰＣＲ的假阴性率为１３．３％。因此，ＮＧ     

用PCR技术检测痰液中结核菌的研究

对１８８例肺结核人的痰标本进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＴＢ－ＤＮＡ，并同时行痰直接涂片糖结核菌，其中７２例痰标本做了结核菌培养，结果提示：ＰＣＲ阳性率为５２．６６％（９９／１８８），直接涂片阳性率为２３．４％（４４／１８８），培养阳性率为１２．５％（９／７２）。表明ＰＣＲ特异性高，重复性好，敏感性强，与临床符合率高。我们的试验结果证实，ＰＣＲ可作为肺结核早期，快速的诊断方法，尤其适用于菌阴肺结核     

聚合酶链反应在结核性胸膜炎和结核性腹膜炎中的应用

应用聚合酶链反应技术对６６例胸水和腹水进行结核ＤＮＡ检测。１７例结核性胸腹水ＰＣＲ检测阳性率为５２．９４％，４９例非结核性胸腹水未出现假阳性结果。结果表明ＰＣＲ直接检测胸腹水中结核菌显示出快速、敏感和高效等优点。同时对影响ＰＣＲ检测结核菌的某些因素作了分析。     

套式聚合酶链反应单管法检测单纯疱疹病毒

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法、套式ＰＣＲ双管法及套式ＰＣＲ单管法分别检测１３０份散发性脑炎患者脑脊液（ＣＳＦ）中单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）的ＤＮＡ，阳性率依次为１８．５％（２４／１３０）、２９．２％（３８／１３０）、２９．２％（３８／１３０）；６０份非中枢神经系统感染者ＣＳＦ标本的检测阳性率分别为０、３．３％（２／６０）、０。结果显示：套式ＰＣＲ虽然提高了检测的敏感性，但假阳性也大大增加。改良的套式ＰＣＲ单管法则大大减少了污染机会，使操作更方便、省时，适于临床推广应用。     

聚合酶链反应检测霍乱弧菌

为快速、准确地检测霍乱弧菌，控制霍乱流行，研究建立了一种聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测方法。根据霍乱弧菌肠毒素ＣＴ基因序列，自行设计一对特异引物，扩增片断为２９６ｂｐ，同时采用一种高效率、快速、简便的方法提取并纯化ＤＮＡ，该法能成功地检测各种样品中的产ＣＴ肠毒素Ｏ１群霍乱弧菌。应用ＰＣＲ技术和常规分离培养方法对９０９份腹泻患者粪便标本和１８份环境水样标本进行平行检测。结果表明，两种方法的检测结果一致，粪便标本阳性率为４．２％（３８／９０９）；水样标本为２２．２％（４／１８），其中１份粪便标本和１份水样标本，是经过第２次增菌培养后，检出用性，而ＰＣＲ方法未见假阳性及假阴性结果。表明ＰＣＲ方法准确、快速、灵敏，并可在２、３小时内检测出含３个菌细胞的标本。因此，该方法可广泛应用于检测各种临床、环境标本中的产ＣＴ肠毒素Ｏ１群霍乱弧菌。     

急性淋巴细胞白血病化疗缓解后TCRγ基因检测的意义

目的：定量检测急性淋巴细胞白血病化疗效应差异及其临床意义。方法：应用竞争性ＰＣＲ技术，定量检测急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）细胞中Ｔ细胞受体γ（ＴＣＲγ）基因重排。结果：检测ＡＬＬ患者５４例１５８份骨髓标本，随访时间中位数为３３．５个月。临床缓解时３６例患者的白血病细胞＜１×１０－５，１８例为（３５４±３２７）×１０－５。诱导缓解期的杀伤效应与缓解早期的残留白血病细胞数量显著相关，并与临床复发相关。部分患者缓解后残留白血病细胞数量持续小于１×１０－５且临床无复发。结论：白血病化疗效应差异显著，化疗效应的定量评价有助于制定个体化的治疗方案     

聚合酶链反应检测克隆性免疫球蛋白重链基因重排

目的建立较简便、敏感的Ｂ细胞恶性肿瘤微小残留病（ＭＲＤ）检测方法。方法根据免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因的保守序列设计引物，应用半巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）基因扩增技术检测克隆性ＩｇＨ基因重排。结果该方法敏感性达１０－３。６２例Ｂ细胞恶性肿瘤患者，５１例检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，阳性率为８２％，假阴性率为１８％（１１／６２）。同时检测３５例非Ｂ细胞恶性肿瘤患者和２０例正常人均阴性，无假阳性。检测１４例Ｂ细胞非何杰金淋巴瘤患者形态学检查正常的骨髓标本，ＭＲＤ检出率为７１％（１０／１４）。随访５例处于完全缓解期的Ｂ细胞型急性淋巴细胞白血病患者，６个月内ＭＲＤ均阳性，１２个月后３例转阴性，２例持续阳性，１８个月后持续阳性的２例患者均复发，而转阴性的３例仍处于完全缓解状态。结论半巢式ＰＣＲ检测克隆性ＩｇＨ基因重排，方法简便，敏感性和特异性高，可用于Ｂ细胞恶性肿瘤ＭＲＤ检测     

痰标本检测p53基因突变及其在肺癌早期临床争端中的意义

用ＰＣＲ单链多肽性ＳＳＣＰ银染法检测５４例原发性肺癌患者（男３６例，女１８例，年龄３４岁至７８岁，平均６２岁）和１１４例良性肺疾病患者（男７８例，女３６例，年龄３４岁至７４岁，平均６１岁）痰标本中ｐ５３基因第５～８外显子的点突变，同时进行痰涂片细胞学检查。结果ｐ５３突变在肺癌组检出率为５６％（３０／５４），非肺癌组检出率为１．８％２／１１４，＜０．００１。痰标本检测ｐ５３基因突变作为肺癌临床诊断监测指标的灵敏性为５６％，特异性为９８％，阳性似然比为３１．７５。肺癌组ｐ５３阳性检出率（…