胡椒碱抑制LPS活化的人结肠腺癌细胞SW480表达IL-8的作用机制研究

目的研究胡椒碱(piperine,PIP)对脂多糖(LPS)活化的人结肠腺癌细胞SW480表达炎症因子的调节效应及可能的作用机制。方法采用WST-1法检测PIP对SW480细胞增殖的作用,利用流式微球捕获蛋白定量技术(cytometric beads array,CBA)检测炎症因子的蛋白表达水平,以实时定量PCR(qRT-PCR)检测炎症因子mRNA的表达水平,免疫印迹法检测p38MAPK信号通路和JNK信号通路的活化水平。结果 PIP处理可剂量依赖性地抑制SW480细胞的增殖,但PIP对细胞的毒性较小;CBA检测结果显示PIP以剂量依赖性方式抑制LPS诱导的SW480细胞中IL-8的分泌;实时定量RT-PCR检测显示,LPS+PIP处理组与LPS刺激组相比,IL-8的mRNA表达水平明显下降;免疫印迹分析表明,PIP可抑制LPS诱导的p38和JNK MAPK信号通路的活化水平。结论 PIP能够抑制LPS激活的人结肠腺癌细胞SW480中IL-8的分泌从而发挥抗炎作用,其机制可能与抑制p38和JNK MAPK信号通路有关。     

乙型肝炎病毒X蛋白通过激活ERKs和NF-κB上调大鼠系膜细胞表达TNF-α

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)X基因转染大鼠系膜细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)高表达的细胞外蛋白调节激酶(ERKs)、核因子κB(NF-κB)、P38 MAPK信号传导机制.方法 将含有HBV X基因的质粒pCI-neo-X导入体外培养的大鼠系膜细胞,分别采用特异性抑制剂U0126阻断ERK1/2通路,Lactacystin阻断NF-κB通路和SB203580阻断P38 MAPK通路,观察培养细胞TNF-α及其mRNA表达,以不加抑制剂作为对照.RT-PCR检测TNF-α mRNA表达,ELISA检测培养上清液中TNF-α表达.Western blot检测乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)表达.结果 转染pCI-neo-X后,系膜细胞TNF-α mRNA及上清液TNF-α表达均增高,通过阻断ERK1/2或NF-κB通路,细胞TNF-α mRNA及上清液TNF-α表达均下降.而阻断P38 MAPK通路对系膜细胞TNF-α mRNA及上清液TNF-α表达无明显影响.结论 HBx蛋白通过激活ERKs和NF-κB信号通路使系膜细胞高表达TNF-α,而与P38 MAPK通路无关.     

过表达Oct4B1 诱导结直肠癌SW480 细胞发生上皮间质转化

目的:探讨Oct4B1 基因过表达是否诱导人结直肠癌SW480 细胞发生上皮间质转化(EMT)及其可能的机制。方法:用带G418 抗性的Oct4B1 基因过表达质粒及阴性对照质粒转染人结直肠癌SW480 细胞株,分别称为实验组(SW480-Oct4B1)及对照组(SW480-NC),转染成功后用G418 筛选建立稳定转染的细胞株,对两种稳定转染细胞进行如下检测: RT-qPCR 检测Oct4B1 的mRNA 水平;于划痕实验和Transwell 小室实验检测迁移和侵袭能力;盂Western blot 检测EMT 相关标记物E-cadherin、N-cadherin 及Vimentin 蛋白表达; RT-qPCR 和Western blot 检测EMT 转录因子Twist 的mRNA 及蛋白表达。结果:稳定转染细胞株建立后,实验组与对照组比较:Oct4B1 基因表达水平明显升高(P<0.01);细胞迁移明显增强(P<0.01);细胞侵袭能力明显提高(P<0.01);上皮标记物E-cadherin 蛋白表达量明显下降(P<0.01);而间质标记物N-cadherin 及Vimentin蛋白表达量明显上调(P<0.01);Twist 的mRNA 及蛋白表达量均明显升高(P<0.01)。结论:过表达Oct4B1 基因可诱导人结直肠癌SW480 细胞发生EMT,增强细胞迁移及侵袭能力,其分子机制可能与提高Twist 表达有关。     

层黏素受体靶向RNA干扰在削弱直肠癌免疫逃逸中的作用探讨

为探讨层黏素受体(laminin receptor,LNR)靶向RNA干扰在直肠癌免疫逃逸中的作用,将pGenesil-3-shLNR重组质粒转染SW480细胞,对比干扰组、对照组和空载组细胞中LNR mRNA和蛋白表达情况。建立SW480细胞与人Jurkat细胞Transwell小室旁分泌共培养模型,检测共培养48 h后SW480细胞和Jurkat细胞的凋亡率,并检测2种细胞Fas、FasL、Caspase-8 mRNA和蛋白表达情况。结果显示,重组质粒转染效率为(65.30±6.03)%。与对照组、空载组比较,干扰组LNR mRNA和蛋白相对表达量均较低(P0.05);SW480细胞凋亡率较高(P0.05),Jurkat细胞凋亡率较低(P0.05);SW480细胞Fas、Caspase-8 mRNA和蛋白相对表达量均较高,FasL mRNA和蛋白相对表达量较低,Jurkat细胞Fas、Caspase-8 mRNA和蛋白相对表达量均较低,FasL mRNA和蛋白相对表达量较高(P0.05)。对照组与空载组LNR mRNA及蛋白相对表达量,SW480细胞和Jurkat细胞凋亡率,SW480细胞和Jurkat细胞Fas、FasL、Caspase-8 mRNA及蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义(P 0.05)。以上结果提示LNR靶向RNA干扰可抑制直肠癌细胞中LNR表达,可能通过调节SW480细胞和Jurkat细胞中Fas/FasL信号通路使SW480细胞诱导Jurkat细胞凋亡率降低,同时增强Jurkat细胞杀伤SW480细胞能力,削弱直肠癌细胞的免疫逃逸能力。     

IL-4诱导THP-1细胞表达DC-SIGN的信号通路调节研究

目的 研究IL-4诱导THP-1细胞表达DC-SIGN的信号调节通路,探索DC -SIGN表达的信号调控网络.方法 以佛波脂(PMA)刺激THP-1细胞24h后加入IL-4作用48 h诱导DC-SIGN的表达,并设ERK阻断剂、NF-κB阻断剂、JAK-STAT阻断剂和MAPK阻断剂处理组.用RT-PCR检测DC-SIGN的mRNA表达,Western blot检测胞质内DC-SIGN蛋白的表达,流式细胞术检测细胞表面DC-SIGN的表达.另外,提取IL-4诱导0、10、20、30、60和120 min的THP-1细胞胞质和胞核蛋白,Western blot检测不同信号通路的信号蛋白及其磷酸化蛋白的变化.结果 IL-4可以大幅提高DC-SIGN在THP-1细胞上的表达,包括mRNA和胞膜蛋白水平.在mRNA、胞质和细胞表面蛋白表达3个水平上,ERK通路阻断剂阻断效果最好,几乎完全阻断了IL-4的诱导效果,JAK-STAT和NF-κB通路阻断剂具有部分阻断效果,而p38通路阻断剂无阻断效果.信号蛋白检测结果显示,IL-4诱导0～120 min内,胞质磷酸化ERK1/2、磷酸化STAT6以及NF-κBp65、NF-κBp50、磷酸化IKB和磷酸化AKT随时间推移浓度逐渐升高,而p38MAPK及其磷酸化蛋白浓度无明显改变.胞核内胞质磷酸化ERK1/2、磷酸化STAT6以及NF-κBp65和NF-κBp50随时间推移浓度逐渐升高.结论 ERK、JAK-STAT和NF-κB通路参与了DC-SIGN启动子的活化,其中以ERK通路为主.     

肝激酶B1通过下调细胞周期素D1抑制大肠癌细胞的体外增殖

目的:研究肝激酶B1(LKB1)基因对大肠癌细胞增殖的影响。方法:用脂质体转染法将LKB1基因表达质粒(pReceiver-LKB1)瞬时转染SW1116及SW480细胞,半定量RT-PCR及Western blot方法检测LKB1 mRNA和蛋白水平的表达;CCK8法检测SW1116及转染重组质粒的细胞体外增殖变化;半定量RT-PCR和Western blot方法检测胞内LKB1对细胞周期蛋白cyclin D1的影响。结果:转染LKB1基因后,质粒转染组LKB1表达较空质粒组及空白对照组明显升高;质粒转染组在转染后48、72、96 h时,细胞活性较空质粒组及空白对照组明显降低(P<0.01);与对照组相比,质粒转染组的细胞内cyclin D1 mRNA和蛋白的表达明显降低。结论:LKB1可抑制大肠癌细胞的体外增殖能力,并且这一抑制效应可能通过下调cyclin D1产生。     

人乳腺癌中p-P38信号分子与nPA表达增强

目的 研究磷酸化p38（p-p38）信号分子和uPA在乳腺癌组织及细胞中表达及意义。方法 免疫组化检测60例乳腺癌组织及其邻近正常乳腺组织中p-p38和uPA蛋白,Western blot检测人乳腺癌细胞中p-p38及uPA蛋白表达及用p38MAPK特异性抑制剂SB203580阻断p38MAPK信号通路后uPA蛋白水平的变化。结果 免疫组化显示,p-p38,uPA蛋白在乳腺癌组织中表达阳性率分别为56.7%和60.0%。,显著高于正常乳腺组织中的表达（P<0.05）,并与乳腺癌的TNM分期及淋巴结转移相关（P<0.05）,而与患者年龄、肿瘤大小无明显相关性,且两者表达存在正相关（r=0.316, P<0.05）。乳腺癌高转移性的MDA-MB-231细胞株p-p38及uPA蛋白表达水平高于低转移的MCF-7细胞株。 用SB203580阻断p38MAPK通路可降低uPA蛋白表达。结论 p-p38和uPA表达在乳腺癌恶性进展中起重要作用,可为乳腺癌转移机制研究提供有效线索。     

过表达海兔属Ras同源物I(ARHI)增加人SW480结肠癌细胞凋亡

目的观察海兔属Ras同源物I(ARHI)对SW480人结肠癌细胞凋亡的影响。方法采用pc DNA3.1-FLAG-ARHI质粒转染和G418筛选法建立稳定表达ARHI的SW480细胞,采用反转录PCR验证ARHI mRNA和蛋白的表达。流式细胞术检测过表达ARHI对结肠癌细胞凋亡的影响;Western blot法检测蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、p53和Bcl-2的蛋白水平。结果成功建立过表达ARHI的SW480细胞,过表达ARHI的SW480细胞凋亡率明显增加,Bcl-2和p-Akt蛋白水平明显降低、P53蛋白表达水平增加,而Akt蛋白水平无明显变化。结论过表达ARHI通过抑制Akt水平增加SW480人结肠癌细胞凋亡。     

RNA干扰沉默增殖诱导配体基因对结肠癌细胞周期的影响

目的 探讨沉默增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)基因对人结肠癌SW480细胞增殖及细胞周期的影响.方法 将APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(siRNA-APRIL)转染结肠癌SW480细胞株,以非特异性序列载体转染组(nontargeting control)及未转染组(nontransfected control)作为对照.Real-time PCR和Western blot评价APRIL沉默效率;CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞周期变化;RT-PCR检测细胞周期调控基因p21及p27的表达.结果 与非特异性序列载体转染组及未转染组相比,siRNA-APRIL显著抑制APRIL mRNA及蛋白的表达(P＜0.05);siRNA-APRIL转染SW480细胞48 h、72 h和96 h后细胞增殖能力明显下降(P＜0.05);转染48 h,siRNA-APRIL组G0/G1期细胞比例增高,S期及G2/M期细胞比例减少,细胞凋亡的数量增加,同时p21及p27 mRNA的表达上调(P＜0.05);而上述指标两对照组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 siRNA-APRIL能特异性抑制结肠癌SW480细胞APRIL的表达,并抑制细胞增殖,使细胞周期出现G0/G1期阻滞,其机制可能与上调p21和p27的表达有关.     

骨桥蛋白基因真核表达载体构建及对结肠癌细胞的作用

目的：构建骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）基因真核表达载体,转染人结肠癌细胞SW480,分析其对SW480细胞株增殖及生存能力的作用。方法：构建重组表达载体pEGFP-N1/OPN,经测序鉴定无误后,转染人结肠癌SW480细胞。RT-PCR检测SW480细胞转染后OPN mRNA表达;Western blot检测SW480细胞转染后OPN蛋白表达量;Cell Counting Kit-8（CCK-8）测定细胞增殖;软琼脂克隆形成实验观察细胞的锚定非依赖性生长能力。结果：pEGFP-N1/OPN转染SW480后,OPN基因获得很好转录,OPN蛋白表达增高,转染OPN后SW480细胞增殖率（光吸收值）显著高于转染阴性组（P〈0.05）,软琼脂克隆形成速度增快,数量明显多于对照组和空载体组（P〈0.05）。结论：OPN基因真核表达载体pEGFP-N1/OPN构建成功,OPN具有促进SW480细胞增殖、存活的作用,为进一步研究OPN作用机制奠定了重要基础。     

TPX2通过p38 MAPK信号通路诱导直肠癌HR-8348细胞凋亡

目的:研究下调非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)对直肠癌细胞凋亡的影响及机制。方法:用TPX2小干扰RNA(si RNA)转染直肠癌HR-8348细胞,记为TPX2 si RNA组;以不做转染的细胞作为正常对照(control)组;以转染si RNA阴性对照(si RNA-NC)的细胞作为si RNA-NC组;用p38 MAPK抑制剂处理敲减TPX2表达后的直肠癌HR-8348细胞记为TPX2 si RNA+SB203580组。RT-qPCR和Western blot测定TPX2的表达水平,MTT法测定细胞存活率,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot测定细胞中p38 MAPK、p-p38 MAPK、cleaved caspase-3和Bcl-2的蛋白水平。结果:TPX2 si RNA转染后HR-8348细胞中TPX2的m RNA和蛋白表达水平显著下降(P 0. 05),而转染si RNA-NC对HR-8348细胞中TPX2的m RNA和蛋白水平没有影响。敲减TPX2表达后的直肠癌HR-8348细胞存活率降低,凋亡率升高,细胞中的cleaved caspase-3、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白水平明显升高,Bcl-2水平水平降低,与control组比较,差异有统计学意义(P 0. 05)。与TPX2 si RNA组相比,TPX2 si RNA+SB203580组的HR-8348细胞凋亡率、cleaved caspase-3水平和p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白水平明显降低,存活率明显升高(P 0. 05)。结论:TPX2表达下调可以通过激活p38 MAPK促进直肠癌HR-8348细胞凋亡。     

p38MAPK参与高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ

目的：探讨p38MAPK信号通路在高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ中的作用。 方法： 采用体外培养和Western blotting等方法，以不同浓度D-葡萄糖、p38MAPK信号通路特异性阻断剂SB203580以及用不同时间刺激正常大鼠肾小管上皮细胞NRK52E，分别检NRK52E细胞p38MAPK磷酸化水平和细胞外基质胶原Ⅲ的表达。 结果： 随D-葡萄糖浓度增加，p38MAPK磷酸化水平、胶原Ⅲ的产生也增加，SB203580可有效阻断高糖引起p38MAPK磷酸化水平的升高和细胞外基质胶原Ⅲ的表达的增高。 结论： 高糖引起p38MAPK磷酸化水平的升高可能在糖尿病肾病的肾间质纤维化中发挥重要作用。SB203580有潜在的糖尿病肾病防治的临床应用价值。     

Inhibition of p38 Mitogen-Activated Protein Kinase Down-regulates the Inflammatory Osteolysis Response to Titanium Particles in a Murine Osteolysis Model

The p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK) pathway is involved in the osteoclast differentiation. The aim of the study was to investigate whether SB203580, a p38 MAPK inhibitor, inhibits wear-debris-induced inflammatory osteolysis in mice. Forty-five mice were implanted with calvaria bone from syngeneic littermates; then, titanium (Ti) particles were injected into established air pouches to provoke inflammatory osteolysis. At 14?days after bone/Ti implantation, pouch membranes with intact bone implants underwent histological and molecular analysis. SB203580 had less effect on MMP-9 and TNF-?? expression under wear-debris-induced conditions. SB203580, by inhibiting the expression of p38 MAPK and phospho-p38 MAPK, inhibited Ti particle wear-debris-induced inflammatory osteolysis. It also remarkably decreased the number of tartrate-resistant acid phosphatase positive cells in Ti-particle-induced pouch tissues. Results suggest that p38 MAPK may be critical in a murine osteolysis model. SB203580 may notably inhibit wear-debris-induced inflammatory osteolysis by down-regulating expression of MMP-9 and TNF-?? via the p38 MAPK pathway.     

辛伐他汀通过抑制p38 MAPK活化降低肝硬化门静脉高压大鼠门静脉压力

 目的:探讨p38 MAPK信号通路在辛伐他汀降低肝硬化门静脉高压症大鼠门静脉压力（PP）中的作用。方法:采用四氯化碳复合因素法构建大鼠肝硬化门静脉高压症模型,成模后将存活大鼠随机分为模型组（n=10）、辛伐他汀治疗组（n=11）和p38 MAPK信号通路抑制剂SB203580处理组（n=10）,后2组分别给予辛伐他汀及SB203580干预处理;另设正常对照组（n=8）。处理结束后检测大鼠PP、肝脏总p38 MAPK蛋白、磷酸化p38 MAPK蛋白、总eNOS蛋白、磷酸化eNOS蛋白表达水平以及肝脏一氧化氮（NO）含量的变化。结果:（1）模型组大鼠PP明显高于正常对照组;辛伐他汀治疗组及SB203580处理组PP均明显低于模型组（P＜0.01）,辛伐他汀治疗组PP明显低于SB203580处理组（P＜0.01）。（2）与正常大鼠相比,模型组大鼠肝脏总p38 MAPK蛋白及总eNOS蛋白表达水平无明显变化（P＞0.05）,而磷酸化p38 MAPK蛋白及磷酸化eNOS蛋白表达水平分别增高与降低（P＜0.01）;辛伐他汀治疗组大鼠肝脏磷酸化p38 MAPK蛋白及磷酸化eNOS蛋白表达水平分别降低与增高（P＜0.01）;SB203580处理组大鼠肝脏磷酸化p38 MAPK蛋白及磷酸化eNOS蛋白表达水平分别降低与增高（P＜0.01）,但磷酸化eNOS蛋白表达水平增高的程度低于辛伐他汀治疗组（P＜0.01）。(3)辛伐他汀治疗组肝脏NO含量［（15.73±1.59） μmol/(g protein)］及SB203580处理组肝脏NO含量［（13.98±1.27) μmol/(g protein)］明显高于模型组［（9.81±1.12） μmol/（g protein）］（P＜0.01）,辛伐他汀治疗组NO含量明显高于SB203580处理组（P＜0.01）。结论: 辛伐他汀降低肝硬化门静脉高压症大鼠门静脉压力可能与其抑制p38 MAPK信号通路的活化有关。     

An inhibitor of stress-activated MAP-kinases reduces invasion and MMP-2 expression of malignant melanoma cells

A lot of parallels have been described between invasion of malignant tumor cells and leukocyte movement during inflammatory responses. Concerning these similarities, we investigated the function of cytokine-suppressive anti-inflammatory drugs (CSAIDs), which act via inhibition of stress-activated MAP-kinases, in regulation of expression of proteolytic enzymes and in vitro invasion of malignant melanoma cells. The p38MAPK inhibitor SB203580 reduced matrigel invasion of MeWo cells by 60%, while the MEK-1 inhibitor PD98059 did not have any effect on invasion. Active p38MAPK was detected in MeWo cells by immunoblotting and confocal microscopy. Cells showed a constitutive expression of matrix-metalloproteinase (MMP)-2 as well as tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMP)-1 and TIMP-2 mRNAs. Expression of MMP-1 or urokinase-type plasminogen activator (uPA) was not detected by Northern blot. Inhibition of p38MAPK by the specific inhibitor SB203580 resulted in downregulation of MMP-2 mRNA and protein levels as well as gelatinolytic activity, while expression levels of TIMP-1 and TIMP-2 mRNAs were not changed. The specific MEK-1 inhibitor PD98059 did not change expression of MMP-2 or TIMPs. Neither SB203580 nor PD98059 changed proliferation of cells. The results suggest that stress-activated protein kinases like p38MAPK are involved in regulation of expression of MMP-2 as well as in vitro invasion of malignant melanoma cells. Inhibitors of p38MAPK may be promising substances to interfere with a signaling cascade associated with invasion of malignant tumor cells.     

TGF-β1激活的p38MAPK在TGF-β1上调人卵巢癌细胞PAI-1表达中的作用

目的:纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)在凝血、创伤修复、炎症和肿瘤转移中起重要作用。已有报道转化生长因子β1(TGF-β1)能通过Smad通路诱导PAI-1表达,但TGF-β1能否通过激活非Smad通路诱导PAI-1表达尚不清楚,因此本研究探讨了在卵巢癌细胞中TGF-β1激活的非Smad通路p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和细胞外信号调节激酶(ERK)与TGF-β1上调PAI-1表达的关系。方法:用10μg/L TGF-β1处理卵巢癌SKOV3细胞和HO-8910细胞后,采用real-time PCR和Western blotting的方法检测PAI-1的表达,用磷酸化p38MAPK的抗体和磷酸化ERK的抗体检测p38 MAPK和ERK的激活情况,用p38 MAPK和ERK的特异性抑制剂SB203580和PD98059分别抑制其活性后,检测PAI-1的表达。结果:TGF-β1在卵巢癌细胞中可明显上调PAI-1mRNA和蛋白的表达,并可快速激活p38 MAPK和ERK。用p38 MAPK的抑制剂可以明显抑制TGF-β1上调PAI-1表达,但是抑制ERK活性对TGF-β1上调PAI-1表达没有明显影响。结论:TGF-β1激活的p38 MAPK通路参与了TGF-β1上调PAI-1的表达。     

ZNF580在1-磷酸鞘氨醇诱导内皮细胞迁移和增殖中的作用

 目的：研究人锌指蛋白ZNF580在1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate, S1P)诱导内皮细胞迁移和增殖中的作用,为探讨ZNF580功能提供科学依据。方法：RT-PCR检测S1P受体在EA.hy926细胞的表达情况;不同浓度(0~10 μmol/L) S1P刺激EA.hy926细胞不同时间(0~12 h)后,RT-PCR和Western blotting检测S1P对ZNF580表达的影响;利用p38 MAPK信号通路特异性抑制剂SB203580研究S1P是否通过此信号通路影响ZNF580的表达;脂质体转染法获得瞬时过表达和瞬时低表达ZNF580的EA.hy926细胞;Transwell实验及MTT比色法分析ZNF580对内皮细胞迁移和增殖活性的影响。结果：EA.hy926细胞表达S1P1、S1P3和S1P5三种受体,其cDNA的特异性扩增产物分别为352 bp、701 bp和236 bp;S1P刺激EA.hy926细胞后,ZNF580的表达呈现剂量和时间依赖性增高;SB203580能够抑制S1P诱导的ZNF580的上调作用;ZNF580过表达（低表达）后内皮细胞迁移和增殖活性明显增强（减弱）。结论：S1P通过p38 MAPK信号通路影响ZNF580的表达;ZNF580在内皮细胞迁移和增殖过程中起着重要的调控作用。     

p38MAPK信号通路在雨蛙素诱导的胰腺AR42J细胞炎症反应中的作用

目的: 探讨p38 MAPK信号通路在急性胰腺炎体外模型中的作用。方法: AR42J细胞随机分为3组:正常对照组、雨蛙素组(10^-8mol/L雨蛙素)和SB203580组(10 μmol/L SB203580+10^-8mol/L雨蛙素)。于3 h收集细胞,检测淀粉酶分泌率;免疫荧光染色观察p-p38 MAPK核移位;Western blotting印迹检测p-p38 MAPK和TNF-α蛋白表达;EMSA检测NF-κB活性。结果: 与正常对照组比较,雨蛙素组淀粉酶分泌率和TNF-α蛋白水平增高(P<0.01),p-p38 MAPK表达及NF-κB活性表达增加(P<0.01);免疫荧光示雨蛙素组p-p38 MAPK发生了核移位。而与雨蛙素组相比,SB203580组明显降低淀粉酶分泌率和TNF-α蛋白表达(P<0.01),p-p38 MAPK和NF-κB的活性表达也下降(P<0.05);SB203580还抑制了p-p38 MAPK核移位。结论: p38 MAPK通路参与了胰腺细胞内的炎症反应,其机制可能涉及NF-κB通路的活化。