Toll样受体4介导的自噬减轻糖基化高密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞凋亡

目的:探讨自噬对糖基化高密度脂蛋白(glycosylated high-density lipoprotein,gly-HDL)所致的血管内皮细胞凋亡的影响及其分子机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),分别与100 mg/L HDL和不同浓度(25、50和100 mg/L)gly-HDL共同孵育24 h;另再培养HUVECs给予1μmol/L自噬诱导剂雷帕霉素或2 mmol/L自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)预处理1 h,或5 mg/L抗Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)单克隆中和抗体预处理30 min,再与gly-HDL(100 mg/L)共同孵育24 h。采用MTT法检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,试剂盒测定培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,采用Western blot技术检测自噬标志分子beclin-1和微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)、内质网应激凋亡途径关键分子caspase-12及TLR4的表达变化,采用激光共聚焦显微镜观测细胞内LC3的变化。结果:经gly-HDL处理的HUVECs活力下降,LDH漏出和细胞凋亡显著增加(P<0.01),且caspase-12被激活(P<0.05);雷帕霉素预处理HUVECs后,gly-HDL对细胞的损伤作用和对caspase-12的活化作用减弱(P<0.05);而3-MA预处理HUVECs后,gly-HDL对细胞的损伤作用和对caspase-12的活化作用则进一步加强(P<0.05)。gly-HDL显著上调TLR4的表达,并触发自噬反应,表现为beclin-1和LC3-Ⅱ表达上调及LC3显著颗粒化,且呈浓度依赖性(P<0.05);而抗TLR4单克隆中和抗体预处理可显著抑制gly-HDL所诱导的beclin-1上调和LC3颗粒化(P<0.01)。结论:TLR4介导gly-HDL对HUVECs自噬的诱导作用,而一定程度的自噬可通过抑制caspase-12活化减轻gly-HDL所诱导的HUVECs凋亡。     

人endostatin体外诱导血管内皮细胞凋亡的实验研究

目的 探讨人endostatin抑制血管内皮细胞增殖的作用机制。方法 在含重组人endostatin蛋白和10%小牛血清的DMEM培养基中，培养人脐静脉内皮细胞ECV304。72h后，采用透射电镜，流式细胞术细胞周期分析和细胞核DNA的1.5%琼脂糖凝胶电泳，检测重组人endostatin蛋白作用后，血管内皮细胞的凋亡。结果 透射电镜下可见实验组ECV304细胞核染色质浓缩，边集，核碎裂及胞浆浓缩等，呈典型的凋亡细胞的形态学表现，流式细胞术细胞周期分析显示，在G1期峰前存在1个凋亡峰（20.6%)，1.5%琼脂糖凝胶电泳显示，细胞核DNA呈梯状，对照组ECV304细胞表达正常。结论 重组人endostatin蛋白可诱导血管内皮细胞凋亡，是其抑制血管内皮细胞增殖的原因之一。     

Toll样受体4对高糖诱导胰岛微血管内皮细胞株凋亡蛋白表达的影响

目的:观察小鼠胰岛微血管内皮细胞(MS1)Toll样受体4(TLR4)的表达及其对高糖诱导凋亡蛋白表达的影响。方法:离体小鼠MS1分为低浓度葡萄糖(5.6mM)对照组(C组)、高浓度葡萄糖(25.0mM和35.0mM)诱导组(HG组)、TLR4抑制剂干预组(35.0mM葡萄糖+1μM CLI-095,HG+CLI组)及TLR4抑制剂对照组(5.6mM葡萄糖+1μM CLI-095,CLI组)。平行培养24h或48h后,先用CCK-8法检测C组和HG组MS1细胞活力,选定高糖干预浓度(35.0mM)及时间(48h);再分别应用免疫组化和Western Blotting检测各组MS1细胞TLR4表达水平;应用Western Blotting检测各组MS1细胞凋亡蛋白Caspase-9、Caspase-3表达水平;应用明胶酶谱分析法检测基质金属蛋白酶2(MMP2)活性变化。结果:与C组比较,HG组MS1的TLR4蛋白表达显著增加(P0.01);凋亡蛋白Caspase-9和Caspase-3表达均显著升高(P0.01,P0.05);MMP2活性明显增强(P0.05);与HG组比较,HG+CLI组Caspase-9水平均明显降低(P0.01),Caspase-3水平仅有降低趋势,差异无统计学意义(P0.05);TLR4的表达和MMP2活性虽有下降,但差异亦无统计学意义(P0.05)。结论:MS1高表达TLR4可能参与高糖诱导的MS1细胞凋亡。     

血管内皮生长因子对OX-LDL诱导的内皮细胞凋亡的影响及其机理

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）对氧化型低密度脂蛋白（OX—LDL）诱导的血管内皮细胞凋亡的拮抗作用及其机理，以探讨VEGF预防血管成形术后再狭窄的机制。方法将对数生长期的人脐静脉内皮细胞分成对照组、OX—LDL处理组和OX—LDL＋VEGF处理组，12h后采用原位末端标记法和流式细胞术观察各组细胞的凋亡发生情况，并通过逆转录聚合酶链反应研究各组细胞中凋亡相关基因Bcl-2与Fas mRNA的表达情况。结果OX—LDL处理组凋亡细胞和Fas mRNA表达明显多于对照组和OX-LDL＋VEGF处理组，而Bcl-2 mRNA表达情况相反。结论VEGF能部分拮抗OX—LDL诱导的血管内皮细胞凋亡，可能与其上调Bcl-2 mRNA表达及下调Fas mRNA表达有关，为VEGF预防血管成形术后再狭窄进一步提供了理论依据。     

党参多糖联合沉默调节蛋白4对体外人脐静脉糖尿病血管内皮细胞凋亡的影响

目的:研究党参多糖联合SIRT4对体外人脐静脉糖尿病血管内皮细胞凋亡的影响。方法:血管内皮细胞分成空白对照组(常规细胞培养液培养)、高糖模型组(30mmol/L葡萄糖处理)、转染阴性对照组(转染阴性对照载体并经30mmol/L葡萄糖处理)、转染SIRT4组(转染SIRT4过表达载体并经30mmol/L葡萄糖处理)、转染阴性+党参多糖组(转染阴性对照载体并经30mmol/L葡萄糖处理和100μg/ml党参多糖处理)、转染SIRT4+党参多糖组(转染SIRT4过表达载体并经30mmol/L葡萄糖处理和100μg/ml党参多糖处理)。MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA检测ROS、MDA、SOD、CAT水平,JC-1染色法检测线粒体膜电位,Western blot检测C-Caspase-3蛋白和cyt-c蛋白表达。结果:与空白对照组比较,高糖模型组细胞增殖能力降低,细胞凋亡和C-Caspase-3蛋白表达增多,细胞中ROS和MDA水平升高,SOD、CAT水平下降,胞浆cyt-c蛋白增多,线粒体cyt-c蛋白减少,线粒体膜电位降低。与转染阴性对照组比较,转染SIRT4组和转染阴性+党参多糖组细胞增殖能力升高,细胞凋亡和C-Caspase-3蛋白表达减少,细胞中ROS和MDA水平降低,SOD、CAT水平升高,线粒体膜电位升高,胞浆cyt-c蛋白减少,线粒体cyt-c蛋白增多。与转染SIRT4组和转染阴性+党参多糖组比较,转染SIRT4+党参多糖组细胞增殖能力升高,细胞凋亡和C-Caspase-3蛋白表达减少,细胞中ROS和MDA水平降低,SOD、CAT水平升高,线粒体膜电位升高,胞浆cyt-c蛋白减少,线粒体cyt-c蛋白增多。结论:党参多糖联合SIRT4可抑制体外糖尿病血管内皮细胞凋亡,作用机制可能与其抑制线粒体凋亡途径有关。     

金黄色葡萄球菌及其L型诱导血管内皮细胞凋亡的研究

金黄色葡萄球菌 (简称金葡菌 )是临床上常见的主要致病菌之一 ,金葡菌感染可以诱发宿主细胞凋亡。我们用原位末端标记法 (TUNEL)、流式细胞术检测金葡菌及其L型诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)凋亡情况。将处于指数生长期的HUVECs中陈旧培养液弃去 ,加入 1.8ml营养液和 0 .2ml 10 8CFU ml作为诱导因素的金葡菌(标准菌株 :CMCC2 60 75株 )及其L型进行实验 ,同时设立生理盐水对照 ,各组于诱导因素加入后 2、4、6、8及 10h分别收集 1次细胞进行检测。TUNEL染色法示金葡菌及其L型均能诱导HUVECs发生凋亡 ;流式细胞仪 (F…     

血管内皮细胞生长因子对内皮细胞凋亡拮抗作用的研究

目的 :初步探讨缺氧对培养人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及血管内皮生长因子的干预性影响。方法 :( 1)人脐静脉内皮细胞的培养及鉴定。 ( 2 )建立人脐静脉内皮细胞缺氧模型 ,TUNEL法观测不同缺氧时间 ( 0、12、2 4、48h)对内皮细胞凋亡的影响及不同剂量血管内皮生长因子的拮抗作用。结果 :随缺氧时间延长 ,HUVECs凋亡率显著升高 ,呈时间相关性 ;血管内皮生长因子显著抑制缺氧导致的内皮细胞凋亡 ,呈剂量相关性。结论 :缺氧作为一种致病因素 ,对内皮细胞凋亡的促发作用是随缺氧时间的延长而加重的。内皮细胞的过度凋亡是引起内皮功能障碍的一个重要因素 ,血管内皮生长因子通过抑制内皮细胞凋亡 ,而具有内皮细胞保护作用。     

川芎嗪和剪切率对悬浮血管内皮细胞凋亡的影响

目的 探讨川芎嗪和剪切率对悬浮血管内皮细胞凋亡的影响。方法 体外培养大鼠脑微血管内皮细胞(rCMEC)，以川芎嗪和锥一板旋转剪切方式共同作用于悬浮rCMEC，采用Annexinv-FITC／PI双染法，流式细胞仪检测川芎嗪和剪应力对rCMEC凋亡的影响。结果 方差分析表明，川芎嗪和剪切率对rCMEC凋亡率有显著影响，川芎嗪降低凋亡率；剪切率增加凋亡率，二者作用相反但无交互作用。组间t检验表明：单独使用川芎嗪时，在本实验剂量范围内(3l.5～126μg／m1)，川芎嗪对静态悬浮rCMEC凋亡率无显著影响。高剪切率(6000，8000s-1)可诱导rCMEC凋亡，川芎嗪对此具有显著抑制作用。结论 适当剂量的川芎嗪可用于抑制高剪切率诱导的血管内皮细胞凋亡。     

汉滩病毒感染血管内皮细胞引起TLR4表达上调

目的 探讨汉滩病毒感染血管内皮细胞后,Toll样受体(TRY)分子的表达变化,为抗感染免疫和致病机制研究提供重要资料.方法 分别用LPS,CL097,Poly I:C以及汉滩病毒76-118刺激血管内皮细胞,6 h后提取总RNA,进行反转录获得cDNA,再分别用各自的引物进行PCR反应,产物用1%琼脂糖凝胶电泳分析,并用间接免疫荧光测定汉滩病毒感染血管内皮细胞后TLR4的表达.结果 汉滩病毒刺激感染后,血管内皮细胞TLR2、TLR4转录水平增高,TLR3转录水平降低,细胞膜表面的TLR4表达上调.结论汉滩病毒76-118感染血管内皮细胞后,可以引起TLRs分子转录水平发生改变,其中TLR4表达上调,固有免疫参与了汉滩病毒致病过程.     

miR-181b在动脉粥样硬化血管中的表达及对H2O2诱导的血管内皮细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨miR-181b在动脉粥样硬化血管中的表达及miR-181b对H2O2诱导的血管内皮细胞增殖与凋亡的影响.方法 qPCR法检测动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞中miR-181b的表达情况;酶联免疫法检测miR-181b对鼠血清中TNF-α、IL-6和IL-10含量的影响;克隆形成实验检测miR-181b对H2O2诱导的血管内皮细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测miR-181b对H2O2诱导的血管内皮细胞凋亡能力的影响;qPCR和Western blot法检测miR-181b对主动脉和H2o2诱导的血管内皮细胞中Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响.结果 miR-181b在动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞表达水平显著下调,血清中TNF-α、IL-6含量均增加,IL-10含量减少;过表达miR-181b使小鼠血清中TNF-α、IL-6含量均减少(P＜0.05),IL-10含量增加(P＜0.05).与对照组比较,H2O2诱导的血管内皮细胞的增殖能力显著下降,凋亡能力显著提高,miR-181b过表达使血管内皮细胞增殖能力提高,凋亡能力下降;与对照组比较,动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞中Caspase-3、Bax的mRNA和蛋白表达水平均上调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平下调,miR-181b过表达使动脉粥样硬化模型组小鼠主动脉和H2O2诱导的血管内皮细胞中Caspase-3、Bax的mRNA和蛋白表达水平均下调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达上调(P＜0.05).结论 miR-181b在动脉粥样硬化血管和H2O2诱导的血管内皮细胞中低表达,过表达miR-181b抑制细胞凋亡及促进细胞的增殖,可能在动脉粥样硬化的治疗中起到积极作用.     

2型登革病毒通过线粒体途径诱导EA.hy926细胞凋亡

目的：探讨登革病毒诱导EA.hy926细胞(人脐静脉内皮细胞融合细胞株)相对活力的变化与线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,Δψm)改变及线粒体凋亡途径的关系。方法：用2型登革病毒(denguevirustype2,DENV-2)感染EA.hy926细胞,MTT法检测感染前后EA.hy926细胞的相对活力,荧光显微镜和流式细胞术分别观察感染前后JC-1在EA.hy926细胞线粒体内的聚集情况以检测Δψm的改变,通过比色法检测caspase-9的活性变化。结果：DENV-2感染EA.hy926细胞24h、36h及48h后,细胞活性受到显著抑制,550nm处的A值均低于未感染组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);JC-1染色显示,感染后各时点,代表正常线粒体的红色荧光均较未感染组减弱,而代表Δψm下降的绿色荧光较未感染组逐渐增强。流式细胞术检测Δψm平均荧光密度比未感染组减低,差异有统计学意义。DENV-2感染后早期即可出现caspase-9活性的上升,与未感染组相比,各时点的活性差异均有统计学意义(P<0.01)。结论：DENV-2感染EA.hy926细胞后可诱发Δψm下降,增强caspase-9活性,进而启动线粒体的凋亡途径。     

2型登革病毒诱导RAW264.7细胞凋亡的机制及凋亡对病毒复制的影响

目的：探讨2型登革病毒（DENV2）感染能否诱导RAW264.7细胞凋亡,并初步探讨凋亡对病毒复制的影响。方法：用DENV2感染RAW264.7细胞,MTT检测细胞活性,Hoechst33342染色检测细胞核变化,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,Westernblotting检测caspase-3和caspase-8活化片段的变化,比色法检测caspase-9活性变化,JC-1染色检测线粒体膜电位变化,Z-VAD-FMK抑制细胞凋亡后以TCID50检测感染细胞上清病毒滴度。结果：DENV2感染RAW264.7细胞24h、36h及48h后细胞活性受到抑制,免疫荧光检测有核固缩现象,流式细胞术检测发现病毒感染诱导了细胞凋亡,Westernblotting检测发现活化caspase-3和caspase-8的表达增加,caspase-9活性也增加,JC-1染色发现病毒感染诱导RAW264.7细胞线粒体膜电位降低,用Z-VAD-FMK抑制凋亡后感染细胞上清病毒滴度增加。结论：登革病毒感染可以通过内、外源性途径诱导RAW264.7细胞发生凋亡;凋亡发生抑制了病毒的产生。     

登革病毒Ⅱ型对人脐静脉血管内皮细胞通透性的研究

目的 研究登革病毒Ⅱ型(DENV-2)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)通透性的影响.方法 DENV-2病毒滴定,DENV-2接种HUVEC单层细胞,用间接免疫荧光法动态观察DENV-2感染HUVEC的情况(30 min,l、3、6、12、24、30、36、42、48、72 h),实时定量荧光PCR方法检测病毒载量,transwell法检测DENV-2对HUVEC通透性的影响,透射电镜观察细胞超微结构的改变.结果 DENV-2对HUVEC通透性的影响30 min时作用最为明显,其次为42 h时.且病毒载量与HUVEC通透性改变呈正相关.透射电镜结果显示有细胞微绒毛脱落,胞质溶解,部分核膜间隙增宽,甚至是细胞核中也存在裂隙,部分线粒体嵴消失甚至空化,线粒体髓样变,包膜不完整.结论 DENV-2对HUVEC通透性有影响,为探究登革病毒的发病机制提供一定的理论依据.

Abstract：

Objective To research Dengue virus type 2 (DENV-2) to human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) permeability. Methods The titration of DENV-2 was detected and HUVEC infection DENV-2 layer of cells. At different time points after infection (30 min, 1 h, 3 h, 6 h, 12 h, 30 h,36 h, 24 h, 42 h, 48 h,72 h), the permeability in HUVEC were detected after Dengue virus infection. The virus load in HUVEC was detected by quantitative real-time PCR. And ultrastructure in HUVEC was observed by electron microscope. Results The permeability in HUVEC was changed after Dengue virus infection by time lasting. The most permeability in HUVEC was changed after Dengue virus infection at 30 min and 42 h. And at the same time the virus load were most value in all of time. The results of the cell membrane were changed by electron microscope. The deciduous cell microvillus and dissd endochylema were founded. And some of nuclear membrane blank was wided by Dengue virus. Even the leakage was founded in cell nucleus. The other change included that disappearance mitochondrial and vacuolization crista, elder pith change mitochondria. In addition, the complete of cell membrane were dissolved. Conclusion The permeability of HUVEC was changed by DENV-2. To explore the pathogenesis of Dengue virus provide certain theoretical basis.     

过敏性紫癜患儿血管内皮细胞凋亡与血清IgA水平关系探讨

目的:探讨过敏性紫癜(HSP)患儿血管内皮细胞(VEC)凋亡与其血清IgA水平关系.方法:采用皮肤环钻行皮肤组织活检,TUNEL法检测HSP患儿皮肤VEC凋亡,ELISA法检测血清IgA含量,Pearson分析HSP患儿VEC凋亡与IgA表达的关系.另分离HSP患儿血清中IgA,观察其诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的情况.结果:显微镜下凋亡的VEC细胞核呈现棕黄色,HSP患儿普通、肾、腹型VEC凋亡细胞数目与健康对照组比较有统计学意义(P<0.01),且VEC凋亡与IgA高水平表达有关,同时HSP患儿血清中分离的IgA可以诱导培养的HUVEC凋亡.结论:VEC凋亡在HSP血管内皮损伤中起着重要作用,HSP患儿血清IgA可能是导致其VEC凋亡的重要因素.     

登革病毒感染对血管内皮细胞ICAM-1表达的影响

目的探讨登革病毒2型（DV2）体外感染对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）表达细胞间黏附分子（intercellular adhesion molecule，ICAM-1）的影响。方法原代分离培养HUVEC，用生长良好的2、3代细胞进行实验。用CCK-8法测定DV2感染前后的细胞活性。流式细胞仪测定DV2感染组和对照组细胞在不同实验时间点细胞表面ICAM-1蛋白表达的情况。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法和图像定量分析技术分析DV2感染组和对照组在不同实验时间点HUVEC内ICAM-1 mRNA水平。结果病毒感染HUVEC对细胞活力的影响与对照组相比差异无统计学意义。DV2感染HUVEC促进ICAM-1 mRNA转录，DV2组与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。其中，正常状态下HUVEC有一定水平ICAM-1 mRNA转录，但感染后显著增加（P〈0．05），24—72h维持于高水平，与其他时间表达差异有统计学意义（P〈0．05）。DV2感染HUVEC，细胞表达ICAM-1蛋白在12～72h显著升高，与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论DV2感染上调HUVEC的ICAM-1 mRNA水平和蛋白表达，从而诱发并加重血管内皮局部的损伤，破坏血管的屏障功能，促进血管渗漏的形成与发展。这可能是DV2感染诱发患者血管通透性升高和血浆渗漏的重要分子机制之一。     

蜂胶水提液对体外培养的血管内皮细胞凋亡的影响

目的：探讨泰山蜂胶水提液对一定浓度的肿瘤坏死因子-α诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的作用。方法:用消化灌注法收集人脐静脉内皮细胞进行体外原代培养,用终浓度为50μg/L的肿瘤坏死因子-α诱导其凋亡,培养液中分别加入终浓度为50mg/L、100mg/L和200mg/L的蜂胶水提液干预,共同孵育24h,用流式细胞仪和缺口末端标记技术TUNEL检测细胞凋亡率。结果:模型组内皮细胞凋亡率均明显高于对照组,不同浓度蜂胶组内皮细胞凋亡率明显低于模型组（P＜0.01）。结论:泰山蜂胶水提液能抑制肿瘤坏死因子-α诱导的人脐静脉内皮细胞的凋亡,从而起到保护血管内皮细胞的作用。     

人胶质瘤干细胞趋化因子受体CXCR4活化促进血管生成的作用

目的从人恶性胶质瘤细胞系U87中分离、培养和鉴定胶质瘤干细胞,观测其CXCR4表达情况及其活化后促血管生成因子分泌的变化。方法通过流式细胞术检测U87细胞中CD133阳性细胞的比例。使用CD133免疫磁珠分离试剂盒通过磁性细胞分选系统分离胶质瘤干细胞。采用间接免疫荧光标记、激光共聚焦扫描显微术观测胶质瘤干细胞中神经巢蛋白（nestin）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、趋化因子受体CXCR4的表达;以CXCR4配体刺激通过钙流试验检测受体功能,采用酶联免疫吸附试验（EIJSA）检测培养上清中血管内皮生长因子（VEGF）和白细胞介素-8（IL-8）的含量。建立裸鼠皮下移植瘤模型,观察胶质瘤干细胞成瘤情况及瘤体内VEGF表达情况。结果U87细胞系中CD133阳性细胞的比例为0．5％,这些细胞具有干细胞增殖和生长特性;它们表达CXCR4,用其相应配体激活后导致胞内钙流增加、分泌VEGF和IL-8增多。与CD133阴性细胞相比,CD133阳性细胞在体外分泌VEGF、IL-8多,在体内成瘤率高,形成的移植瘤生长迅速,表达更多VEGF。结论人恶性胶质细胞瘤细胞系U87中含有极少量胶质瘤干细胞,表达功能性CXCR4、分泌更多促血管生成因子,提示这些干细胞也直接参与胶质瘤血管生成。     

The pathology of dengue hemorrhagic fever

An estimated 2.5 billion people are at risk of dengue infection, and of the 100 million cases of dengue fever per year, up to 500,000 develop dengue hemorrhagic fever (DHF) or dengue shock syndrome (DSS), the life-threatening forms of the infection. The large majority of DHF/DSS occurs as the result of a secondary infection with a different serotype of the virus. While not completely understood, there is evidence that the target cells include dendritic reticulum cells, monocytes, lymphocytes, hepatocytes, and vascular endothelial cells. Viral replication appears to occur in dendritic cells, monocytes, and possibly circulating lymphoid cells, and damage to these and other target cells occurs through immune-mediated mechanisms related to cross-reacting antibodies and cytokines released by dendritic cells, monocytes, and vascular endothelium. There is evidence of a concomitant cellular activation as well as immune suppression during the infection. The activation of memory T cells results in cascades of inflammatory cytokines, including tumor necrosis factor-alpha, interleukins (IL-2, IL-6, and IL-8), and other chemical mediators that increase vascular endothelial permeability or trigger death of target cells through apoptosis. Pathological studies in humans are uncommon, and a suitable animal model of DHF/DSS does not exist. The current treatment of DHF/DSS is symptomatic, and prevention is through vector control. As such, there is a great impetus for the development of vaccines and novel therapeutic molecules to impede viral replication in infected cells or counteract the effects of specific inflammatory mediators on target cells. The role of genetics in relation to resistance to DHF/DSS also requires clarification.     

Endothelial expression of CXCR7 and the regulation of systemic CXCL12 levels

The concentration of CXCL12/SDF‐1 in the bloodstream is tightly regulated, given its central role in leucocyte and stem/progenitor cell egress from bone marrow and recruitment to sites of inflammation or injury. The mechanism responsible for this regulation is unknown. Here we show that both genetic deletion and pharmacological inhibition of CXCR7, a high‐affinity CXCL12 receptor, caused pronounced increases in plasma CXCL12 levels. The rise in plasma CXCL12 levels was associated with an impairment in the ability of leucocytes to migrate to a local source of CXCL12. Using a set of complementary and highly sensitive techniques, we found that CXCR7 protein is expressed at low levels in multiple organs in both humans and mice. In humans, CXCR7 was detected primarily on venule endothelium and arteriole smooth muscle cells. CXCR7 expression on venule endothelium was also documented in immunodeficient mice and CXCR7^+/lacZ mice. The vascular expression of CXCR7 therefore gives it immediate access to circulating CXCL12. These studies suggest that endothelial CXCR7 regulates circulating CXCL12 levels and that CXCR7 inhibitors might be used to block CXCL12‐mediated cell migration for therapeutic purposes.