虫草菌丝逆转二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化的 有效组分及其作用机制

目的:研究虫草菌丝治疗二甲基亚硝胺(DMN)模型大鼠肝纤维化的有效组分及其作用机制。方法:大鼠ipDMN 5 mg.kg-1,每周连续3d,共4周。造模结束后,模型大鼠随机分组,治疗组分别以虫草菌丝(CsB)及其组分(C12)以生药800,5 mg.kg-1 ig,每日1次,共2周;正常组及模型组以等量生理盐水ig。分别检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性,检测肝组织羟脯氨酸(Hyp)、丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和谷胱甘肽-S转移酶(GST)活性,观察肝组织胶原沉积变化,免疫组织化学和蛋白印迹法(Western)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),转化生长因子-β1(TGF-β1)和图像分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)阳性面积百分比,观察肝组织病理及胶原沉积变化。结果:与模型组比较,CsB及C12治疗组大鼠血清ALT,AST活性显著降低(P<0.05)。与6周模型组比较,CsB及C12治疗组大鼠肝组织Hyp含量显著降低(P<0.05)。模型组大鼠肝组织可见炎性细胞浸润,胶原增生明显,大多数形成较厚的完全间隔,假小叶形成。CsB及C12治疗组的坏死出血、炎性细胞浸润、胶原增生、纤维间隔形成有所改善。与6周模型组相比,CsB及C12治疗组的SOD,GSH-Px活性显著升高,MDA含量,GST活性显著降低(P<0.01)。与6周模型组比较,CsB及C12治疗组大鼠肝组织α-SMA,TGF-β1及TNF-α的蛋白表达显著减少(P<0.01)。结论:CsB及C12能够显著改善肝功能,有显著抗肝纤维化作用。CsB及C12能够显著减轻过氧化损伤,保护肝细胞,减少胶原生成,阻断和逆转二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化。CsB和C12抑制库普弗细胞(KCs)活化和细胞因子TNF-α,TGF-β1的释放,抑制肝星状细胞(HSCs)活化,合成和分泌细胞外基质。     

人工虫草菌丝制剂对慢性乙肝病毒感染者肝纤维化指标的影响

目的观察人工虫草菌丝制剂(心肝宝)对慢性乙肝病毒感染者肝纤维化指标的影响。方法选取HBeAg阴性、肝功能正常、B超提示弥漫性肝病的慢性乙肝病毒感染者44例,服用心肝宝治疗,观察疗效。结果44例B超检查提示:肝胆脾未见明显异常者28例,肝脏回声稍密者16例。肝纤维化四项指标亦明显好转。结论心肝宝对肝功能正常的慢性乙肝病毒感染者肝纤维化指标和影像学改善有良好作用。     

虫草菌丝水煎液及其有效组分C12对肝纤维化大鼠HGF-α及肝细胞凋亡的影响

目的:研究虫草菌丝治疗二甲基亚硝胺(DMN)模型大鼠肝纤维化有效组分及其作用机制.方法:大鼠ip 0.5％DMN 5 mg·kg-1,每周连续3d,共4周.造模结束后,模型大鼠随机分组,治疗组分别以虫草菌丝水煎液(CsB)及其组分(C12)以生药800 mg· kg-ig,每日1次,共2周;正常组及模型组以等量生理盐水ig.疗程结束后,分别检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)及天冬氨酸转氨酶(AST),血清白蛋白(Alb)及血清总胆红素(TBiL)含量,检测肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量、观察肝组织病理及胶原沉积变化,Western印迹法检测肝细胞生长因子α(HGF-α)的表达,TUNEL染色检测大鼠肝细胞凋亡并计算凋亡数量.结果:与6周模型组比较,CsB及C12治疗组大鼠血清ALT,AST活性、TBil含量和大鼠肝组织Hyp含量显著降低,Alb含量显著升高(P＜0.05).与6周模型组比较,CsB及C12治疗组的坏死出血、炎性细胞浸润、胶原增生、纤维间隔形成有所改善.与模型组比较,CsB及C12治疗组大鼠肝组织的蛋白表达量显著升高(P＜0.01).与6周模型组比较,CsB及C12治疗组大鼠肝细胞凋亡数量显著降低(P＜0.01).结论:CsB及C12能够显著改善肝功能,有显著抗肝纤维化作用.CsB和C12能促进HGF-α表达,抑肝细胞凋亡,使肝细胞凋亡和增殖达到平衡状态,阻断和逆转肝纤维化.     

虫草多糖抗免疫损伤性大鼠肝纤维化的作用及其机现研究

采用牛血清白蛋白免疫损伤大鼠肝纤维化模型,以虫草菌丝和秋水仙碱为对照,通过肝组织病理学与Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGFβ1、TGFβR1、Dm阳性细胞免疫组化观察,肝Hyp含量与肝胶原酶活性检测,观察虫草多糖抗肝纤维化的作用与机制.结果显示,虫草多糖与虫草菌丝及秋水仙碱均能减轻肝纤维化程度,降低Hyp含量,减少胶原及TGFβ1生成与分泌,降低TGFβR1表达,减少Dm阳性细胞,其中虫草多糖对Ⅳ型胶原与TGFβR1表达的影响更为明显.提示虫草多糖具有良好的抗肝纤维化作用,可能是虫草菌丝抗肝纤维化的主要有效成分之一,其作用机制可能在于抑制肝星状细胞的活化及其TGFβ1的表达.     

虫草多糖抗免疫损伤性大鼠肝纤维化的作用及其机理研究

采用牛血清白蛋白免疫损伤大鼠肝纤维化模型,以虫草菌丝和秋水仙碱为对照,通过肝组织病理学与Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原及ＴＧＦβ１、ＴＧＦβＲ１,Ｄｍ阳性细胞免疫组化观察,肝Ｈｙｐ含量与肝胶原酶活性检测,观察虫草多糖抗肝纤维化的作用与机制。结果显示,虫草多糖与虫草菌丝及秋水仙碱均能减轻肝纤维化程度,降低Ｈｙｐ含量,减少胶原及ＴＧＦβ１生成与分泌,降低ＴＧＦβＲ１表达,减少Ｄｍ阳性细胞,其中虫草多糖对Ⅳ型胶原与Ｔ     

冬虫夏草及人工虫草菌丝研究概况

本文就冬虫夏草及人工虫草菌丝的生物学特性、化学成份、药理、免疫作用及临床应用等方面比较全面地介绍了国内外研究概况,尤其突出关于免疫、抗肿瘤等方面研究的进展。     

虫草多糖逆转DMN诱导大鼠肝纤维化的作用及机制研究

目的：研究虫草多糖抗肝纤维化作用的机制。方法： 将SD大鼠随机分为正常组、模型组、虫草多糖组。采用二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化模型。经过虫草多糖治疗4周后,大鼠肝脏用丽春红胶原染色观察大鼠胶原纤维沉积的变化,观察大鼠血清肝功能的变化,盐酸水解法检测肝组织羟脯氨酸含量,Envision 两步法测定肝组织Ⅳ型胶原含量和金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP-2）含量；酶图法检测肝组织金属蛋白酶2（MMP-2）活性,同时检测肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量的改变。结果：镜下检查可见模型组大鼠肝脏胶原纤维间隔形成；血清肝功能指标异常,MMP-2含量降低；组织Hyp含量,Ⅳ型胶原含量,I型胶原蛋白表达,TIMP-2,MDA含量,均较正常组均显著增加,SOD活性下降,而虫草多糖组的上述指标较模型组均有不同程度的显著下降,使SOD活性升高,MMP-2含量升高。结论：虫草多糖有显著的抗肝纤维化作用,其机制与促进胶原降解和抗脂质过氧化作用有关。     

虫草菌丝中3种活性成分对血管新生与内皮细胞功能的影响

目的探讨虫草菌丝中的3种活性成分(虫草素、腺苷、麦角甾醇)对血管新生和肝内皮细胞功能的影响。方法采用鸡胚绒毛尿囊膜实验和转基因斑马鱼实验分别观察虫草素、腺苷、麦角甾醇对新生血管面积、功能血管数量及碱性磷酸酶变化的影响;MTT法测定3个化合物对人肝癌SK-HEP-1细胞的细胞毒活性;采用血管内皮生长因子(VEGF)诱导SK-HEP-1细胞增殖为模型,以索拉非尼为阳性对照药,MTT法测定3个化合物对细胞增殖的影响,Transwell法观察细胞迁移,Matrigel管腔形成实验观察细胞管腔形成情况,荧光探针法检测胞内一氧化氮(NO)的量和一氧化氮合酶(NOS)活性。结果虫草菌丝中腺苷、麦角甾醇能够显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管新生、减少转基因斑马鱼功能血管数量,而虫草素能够促进鸡胚绒毛尿囊膜血管新生;与对照组相比,VEGF可诱导SK-HEP-1细胞增殖,促进细胞迁移和管腔形成,并可使其胞内NO水平和NOS活性显著升高;与模型组相比,虫草素、腺苷、麦角甾醇呈剂量依赖性地抑制SK-HEP-1细胞增殖,腺苷、麦角甾醇能抑制SK-HEP-1细胞迁移,3者均可不同程度地抑制SK-HEP-1细胞管腔形成,且剂量依赖性地降低胞内NO水平和NOS活性。结论虫草菌丝中的虫草素、腺苷、麦角甾醇对SK-HEP-1细胞增殖、迁移、管腔形成有不同程度的抑制作用,其中腺苷的作用尤为明显;其机制与抑制细胞内NO水平和NOS活性有关。     

肝豆灵对铜负荷大鼠肝纤维化血清代谢组学的影响

目的探讨肝豆灵治疗肝豆状核变性(WD)肝纤维化的可能作用机制。方法 75只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、肝豆灵组、肝豆灵加青霉胺组、青霉胺组,每组15只。除空白对照组外,其余各组复制铜负荷大鼠模型共12周,从第7周开始肝豆灵组给予肝豆灵0.486g/(kg·d),青霉胺组给予青霉胺0.09g/(kg·d),肝豆灵加青霉胺组给予以肝豆灵和青霉胺联合灌胃,剂量同上。各组均每日灌胃1次,共6周。第13周实验结束后,各组大鼠留取血清标本,运用代谢组学技术检测各组肝纤维化小分子代谢标志物的变化。结果肝豆灵能明显提高铜负荷大鼠血浆亮氨酸、异亮氨酸、胆碱、葡萄糖、3-羟基丁酸的含量,能降低糖蛋白、脂质、乳酸盐、丙酮酸盐的含量。结论肝豆灵对铜负荷大鼠小分子代谢物有明显的调节效应,对代谢异常的修复作用可能是治疗WD肝纤维化的作用机理之一。     

虫草菌丝的生理研究

为了解决冬虫夏草药源问题,使其发酵工艺更加完善,提高菌丝的产量和质量,为虫草菌丝的发酵培养提供理论依据,我们开展了虫草菌丝生理的研究。本文报道虫草菌丝生长与温度、氮源及不同碳氮比的关系。     

灯盏乙素抗大鼠肝纤维化作用的研究

将80只大鼠随机分为空白组、模型组、灯盏乙素(SC)低、中、高剂量组(25,50,100 mg·kg^-1)以及秋水仙碱(Col)组。除空白组外,其余各组大鼠连续13周,每周2次腹腔注射猪血清(0.5 mL/只)诱导大鼠肝纤维化,并于造模第9周末起各给药组分别灌胃给予相应的受试药物,空白组与模型组灌胃等容量的生理盐水,每天1次,共4周。实验结束后,测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、总胆红素(TBIL)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)的含量;取固定部位肝脏组织,HE染色观察病理学改变并对其进行肝纤维化病理分级;免疫组织化学技术测定肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原(CⅠ,CⅢ)的表达并计算其显色指数。与模型组相比,SC低、中、高剂量组(25,50,100 mg·kg^-1)能不同程度地减轻肝纤维化的程度,降低大鼠血清中的ALT,AST,TBIL,HA,LN,CⅣ的含量,升高ALB,TP的含量,并降低大鼠肝组织中CⅠ,CⅢ的含量。总之灯盏乙素对猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化有一定的治疗作用。     

莪术醋制对大鼠胆汁代谢的影响

通过考察莪术醋制前后对由肝脏分泌的胆汁中内源性代谢产物的影响,以期探讨莪术醋制对胆汁内源性代谢物的影响。分别制备生、醋莪术醇提液及生理盐水溶液,灌胃给药0.5 h后做胆总管插管引流术收集12 h内大鼠胆汁;胆汁样品1∶3乙腈沉淀蛋白后进行UPLC-TOF-MS分析;采用单维统计与多元统计相结合,Peak View软件与网络数据库相比对的数据分析方法,鉴定潜在生物标记物。醋制前后莪术提取物对大鼠胆汁代谢谱具显著影响,鉴别出生、醋莪术给药组的大鼠胆汁中具有显著性差异的13个代谢物;再结合化合物网络数据库进行鉴定,得到8个代谢物;进一步把给药组与空白组进行t检验单维统计分析,得到与空白组比较具显著性差异的7个代谢物,推定此7个代谢物为生、醋莪术给药后大鼠胆汁的潜在生物标记物,其中6个潜在生物标记物在醋品组中显示上调,其与磷脂代谢、脂肪代谢、胆汁酸代谢及与调控N-酰基乙醇胺水解反应平衡作用相关的代谢调控相关,提示通过大鼠胆汁内源性代谢物的差异探讨莪术醋制增效的机制。     

芍药苷对大鼠慢性肝损伤及肝纤维化的保护作用

目的观察芍药苷(PF)对四氯化碳(CCl4)所致大鼠慢性肝损伤及纤维化的治疗作用。方法将大鼠随机分为6组,利用高脂低蛋白饲料和CCl4制作大鼠肝损伤模型,并同时给予相应药物灌胃,9周后取材送检。血液生化检测肝功能指标:丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBil);放射免疫法测定肝纤维化指标:透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ);制备肝干粉,分光光度计检测羟脯氨酸(Hyp)。结果模型组大鼠血清ALT、AST、HA、CⅣ和肝组织中Hyp明显高于正常组(P<0.05或0.01);与模型组比较,芍药苷3个剂量组可明显降低肝纤维化大鼠血清中ALT、AST;芍药苷408,0 mg/kg剂量组可明显降低肝纤维化大鼠血清中HA含量及根据肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量计算的胶原蛋白量(P<0.05和0.01)。结论芍药苷对慢性肝损伤及纤维化有保护作用。     

绞股蓝总皂苷对二甲基亚硝胺诱导的大鼠肝纤维化的防治作用

目的:探讨中药组分绞股蓝总皂苷对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化的防治作用。方法:采用腹腔注射DMN诱导大鼠肝纤维化模型。在造模4周后,将造模大鼠随机分为模型组、绞股蓝总皂苷组(200 mg.kg-1)及对照药秋水仙碱组(0.1 mg.kg-1),每组10只,灌胃用药2周后取材。观察检测以下指标:①末次体重、肝脾比值;②肝组织羟脯氨酸含量测定;③肝功能指标:血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷胺酰转肽酶(GGT)活性,血清白蛋白(Alb)、总胆红素(TBiL)含量;④肝组织天狼星红染色及HE染色;⑤肝组织脂质过氧化指标:超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)。结果:模型组出现典型的肝纤维化病理改变,与正常组比较,模型组肝组织Hyp含量、血清ALT,AST,GGT活性及TBiL,MDA含量显著升高,同时血清Alb含量、肝组织SOD活性、GSH含量、GSH-Px活性显著降低;较之模型组,绞股蓝总皂苷肝纤维化程度显著减轻,肝组织羟脯氨酸含量显著降低(P<0.01),与秋水仙碱组效应相当。绞股蓝总皂苷组肝功能指标均有显著改善,同时能显著升高肝组织SOD,GSH-Px活性(P<0.05),降低MDA含量。结论:绞股蓝总皂苷对DMN诱导的大鼠肝纤维化有显著的治疗作用。     

余甘子及其活性成分肝保护作用及机制的研究进展

余甘子来源于余甘子Phyllanthus emblica的干燥成熟果实,是我国重要的药食同源品种,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤和免疫调节等广泛的生物活性.通过对余甘子提取物及其所含没食子酸、鞣花酸及柯里拉京等活性成分的药理作用进行总结,发现其对肝损伤、病毒性肝炎、非酒精性脂肪肝、肝纤维化及肝癌等具有治疗作用,主要通过抑制脂...     

赤芍总苷对大鼠放射性肝纤维化的保护作用及机制

目的:探讨赤芍总苷对大鼠放射性肝纤维化的保护作用及机制。方法:雄性大鼠放射性肝纤维化动物模型,将大鼠随机分为正常对照组、模型组、赤芍总苷组(50 mg/kg、25mg/kg),除正常对照组外,其余各组均制备成放射性肝纤维化模型,造模后各组每天给予相应药物灌胃。于照射后第26周末剖杀大鼠,取血和肝脏标本,ELISA法检测大鼠中TGF-β1、TNF-α、IL-6、HA、PC-Ⅲ、LN含量,碱水法检测大鼠肝脏组织中Hyp含量;光镜下观察肝脏HE染色、MASSON染色病理改变;免疫组化法测肝脏组织TGF-β1、Smad3/4/7蛋白表达情况。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肝脏损伤和胶原纤维增生明显,血清中TGF-β1、TNF-α、IL-6、HA、PC-Ⅲ、LN含量明显增加(P<0.01),肝脏组织中Hyp含量增加(P<0.01),肝脏组织中TGF-β1、Smad3/4/7蛋白表达增加(P<0.01)。与模型组比较,赤芍总苷治疗组(50mg/kg)可显著降低肝纤维化大鼠血清中TGF-β1、TNF-α、IL-6、HA、PC-Ⅲ、LN的含量,同时可降低肝脏组织中Hyp含量及降低肝脏损伤程度及胶原纤维增生程度,还可减少大鼠脏肝组织中TGF-β1和Smad3/4蛋白表达,增加肝脏组织中Smad7蛋白表达。结论:赤芍总苷具有明显的抗肝纤维化作用,其机制可能与其阻断TGF-β1/Smad信号传导通路有关。     

胆腑舒胶囊对实验性胆囊结石胆汁卵磷脂、总胆汁酸、黏蛋白及血清脂代谢的影响

目的：观察胆腑舒胶囊对家兔实验性胆固醇结石的作用及机制。方法：血清脂代谢指标在全自动生化仪上完成,胆汁中总胆固醇、总胆汁酸分别用硫磷铁法、磷钼酸比色法测定,胆汁中卵磷脂、黏2蛋白分别运用硝化-磷钼酸-氨萘磺酸法、磷钨酸沉淀-酚试剂法测定。结果：胆腑舒胶囊可有效降低血清TC、TG、LDL-C及胆汁中胆固醇、黏蛋白浓度,提高胆汁中总胆汁酸,卵磷脂含量。结论：胆碎舒胶囊能较好溶、排胆囊胆固醇结石,其机制与调节脂质代谢,改善致石性胆汁及纠正胆囊动力学等作用有关。     

肝纤维化大鼠血清脯肽酶变化及维生素E治疗的研究

目的　观察肝纤维化大鼠血清脯肽酶 (PLD)变化及维生素E(VE)治疗对其影响。方法　将大鼠分组 ,用 40 %四氯化碳 (CCl4 )诱导其肝纤维化。预防组 (于注射CCl4 时 )和治疗组(于肝纤维化形成后 )分别给予 5 %VE乳剂 10 0mg/kg尾静脉注射 ,2次 /周 ,连续 8～ 10周。定期测定血清PLD ,ALT及AST活性 ,观察VE治疗后肝纤维化大鼠肝组织的病理改变情况。结果　肝纤维化大鼠血清PLD活性显著增高 ,VE预防组和治疗组大鼠血清PLD活性显著低于同期对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。治疗组大鼠肝纤维化组织沉积较对照组减少。结论　肝纤维化大鼠血清PLD持续增高 ,用VE治疗可降低其活性 ,减慢肝纤维化的进程     

虫草多糖对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化大鼠脂质过氧化及肝细胞再生的影响

目的:观察虫草多糖对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化的药理作用.方法:采用DMN大鼠肝纤维化模型,分为正常组(N,n=6)、模型组(M,n=11)、虫草多糖组(C,n=8)、秋水仙碱组(Q,n=9).造模4周,虫草多糖(60 mg·kg-1)和秋水仙碱(0.1 mg·kg-1)灌胃给药3周,模型与正常组国时给予等量灭菌水.观察血清ALT,AST,GGT活性及Alb,TBil含量;肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;肝脏病理及胶原染色;肝组织SOD活性及MDA,GSH,GSH-Px含量;肝脏组织增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达.结果:模型组血清ALT,AST,GGT,TBil显著升高,Alb显著降低,虫草多糖组血清AST,TBil显著降低,Alb显著升高;模型组肝组织Hyp显著升高,虫草多糖、秋水仙碱组则显著降低;HE染色:模型组正常肝小叶结构破坏,肝细胞水肿,汇管区结缔组织增生,虫草多糖及秋水仙碱组上述病理变化显著减轻.胶原染色:模型组肝小叶纤维间隔形成,见较多完整假小叶;虫草多糖、秋水仙碱组胶原沉积减少.模型组肝组织SOD,GSH-Px,GSH显著降低,MDA显著增高,虫草多糖及秋水仙碱组GSH,GSH-Px活性显著增高.模型组肝组织PCNA蛋白表达显著升高,虫草多糖及秋水仙碱组则显著降低.结论:虫草多糖可显著抑制DMN诱导的大鼠肝纤维化及脂质过氧化损伤.