中国内江猪胰腺组织异种抗原的研究

为获取临床猪→人异种胰腺移植的基础资料, 分别采用植物凝集素BSIB4 、健康人血清、人类血型抗原A、B、H物质单克隆抗体免疫组化法检测10头内江猪胰腺组织中异种移植抗原的表达.结果显示:内江猪胰腺组织中血管内皮、导管上皮细胞表达α-Gal;部分胰岛细胞、胰腺外分泌细胞和所有导管上皮细胞均表达人类血型A抗原.结论:人体内存在抗内江猪胰腺组织部分细胞的天然抗体;内江猪胰腺组织异种移植抗原的表达情况有可能与已报道的其它猪种不同.     

中国内江猪胰腺组织异种抗原的研究

为获取临床猪→人异种胰腺移植的基础资料，分别采用植物凝集素ＢＳＩＢ４，健康人血清，人类血型抗原Ａ，Ｂ，Ｈ物质单克隆抗体免疫组化法检测１０头内江猪胰腺组织中异种移植抗原的表达。结果显示：内江猪胰腺组织中血管内皮，导管上皮细胞表达α－Ｇａｌ；部分胰岛细胞，胰腺外分泌细胞和所有导管上皮细胞均表达人类血型Ａ抗原。结论；人体内存在抗内江猪胰腺组织部分细胞的天然抗体；内江猪胰腺组织异种移植抗原的表达情况有可能     

猪-人椎间盘异种移植的可行性研究

目的 探讨异种椎间盘移植的可能性。方法 观察成人新鲜尸体颈椎和近交系版纳小耳猪腰椎椎间盘的解剖形态、组织形态、生物化学、生物力学及猪椎间盘组织中异种抗原α-Gal的分布。结果 近交系版纳小耳猪的腰椎椎间盘既有适当的接触面积和高度，又有维持活动度的生化、组织基础，虽然猪与人椎间盘中的纤维比例和生化成分有所差异，但就是基于这种组织基础上，猪的腰椎椎间盘仍可在所承受的载荷上提供稳定性，而且猪椎间盘组织中异种抗原分布少。结论 猪椎间盘组织可能成为临床损伤修复移植的材料来源。     

异种移植超急性与急性排斥反应及其对策研究进展

器官移植作为治疗终末期器官衰竭患者的一种比较有效的方法,在临床上得到了越来越广泛的应用,然而这也使人类器官供体相对缺乏的状况越来越严重,激起人们对异种移植的强烈兴趣。考虑到器官的功能特点、形状和大小,基因调控和控制病毒传播的难易程度等因素,使得猪成为理想异种移植供体之一。     

中国近交系版纳微型猪α1,3-半乳糖基转移酶基因剪接变异体的克隆及其在人类细胞中的表达

目的克隆中国近交系版纳微型猪(Chinese Banna Minipig Inbred Line,BMI)的α1,3-半乳糖基转移酶(α1,3-GT)基因并分离其剪接变异体,构建其真核表达载体并观察BMIα1,3-GT基因在人肺腺癌A549细胞中的表达和功能。方法提取BMI肝组织总RNA,RT-PCR扩增全长的α1,3-GTcDNA,并克隆到pMD18-T载体,挑选15个阳性克隆进行测序,获得GT1、GT2两种基因剪接变异体。将GT1、GT2克隆到pEGFP-N1上构建其真核表达载体,分别命名为pN-GT1、pN-GT2。将pN-GT1、pN-GT2分别转染人肺腺癌A549细胞,RT-PCR检测转染细胞中α1,3-GT mRNA的表达,倒置荧光显微镜和流式细胞术观察转染细胞上α-半乳糖基(α-Gal)的表达,流式细胞术检测人血清中IgM抗体和补体C3与转染细胞上α-Gal的结合。结果在BMI中发现了碱基长度为1116bp和1080bp的两个α1,3-GT基因剪接变异体,后者缺失了外显子5。pN-GT1或pN-GT2转染的A549细胞中,均检测到了α1,3-GT mRNA和α-Gal的表达,转染细胞膜上也检测到IgM和C3的沉积,且两种转染细胞中α-Gal的表达及IgM和C3的沉积没有差异(P>0.05)。结论成功克隆了BMI的α1,3-GT基因,并发现两种α1,3-GT基因剪接变异体。两种基因剪接变异体转染的细胞中,均检测到α1,3-GT mRNA的表达且α1,3-GT能催化合成具有生物学效应的α-Gal,这为BMI用于异种移植中涉及α1,3-GT基因操作的研究提供了基因背景资料。     

异种心脏移植的研究进展

<正>心脏移植是终末期心力衰竭的有效治疗方式,但捐献供体短缺是困扰临床心脏移植的瓶颈问题。根据世界卫生组织的统计,全球每年约有200万人需要器官移植,但每年仅有3万人接受移植手术。虽然机械辅助装置（如心室辅助装置、人工心脏）可作为心脏移植的临床替代选择,但相关的出血、血栓、感染及生活质量等问题限制了其临床应用。猪因具有与人亲缘关系远、感染传染性疾病的风险低,     

转基因克隆猪与人类异种器官移植

利用猪的器官来解决当前人源器官严重短缺，为解决移植器官短缺的可行的途径，直接并准确地对α-1，3半乳糖苷转移酶(a-1，3GT)基因进行同源重组，使a-1，3GT失活，再结合猪体细胞克隆技术，对其进行人源化改造，减弱或消除排异反应。然而，猪内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus，PERV)为异种器官移植的主要障碍。因此，既要剔除导致人类排异反应的排斥基因，又要确保猪器官异种移植的安全性。     

胸腺移植诱导猪源性异种移植物免疫耐受的研究进展

临床器官移植中，同种器官供体来源的严重不足，使异种器官移植成为解决这一问题的可能途径。猪成为异种器官移植的理想供体[1]。目前，在攻克猪→人异种器官移植的第一道障碍——超急性排斥反应方面已经取得了突破性进展[2,3]。但异种移植后以细胞免疫为主的排斥反应较同种移植中除抗体介导的血管性排斥（）外的另一主要障碍，目前的DXR免疫抑制治疗尚难解决这一问题。而通过诱导人免疫活性细胞（主要是细胞）对异种移植物的耐受则可消除或减轻T急、慢行排斥反应，还可以免除或减少免疫抑制剂的使用，避免或减轻其毒副作用，是临床异种器…     

不同方法保存猪软骨异种移植的实验研究

为了探索不同方法保存猪肩胛软骨对异种移植的影响，为临床应用提供科学依据。采用４种方法保存猪肩胛软骨，并按保存方法及保存时间分７组移植到日本大耳白兔背部皮下，每组５只动物，共３５只进行观察比较。①γ－射线辐射处理，４℃保存３个月为Ａ组，１个月为Ｂ组；②　（戊二醛）＝０．５％磷酸缓冲液浸泡，４℃保存３个月为Ｃ组，１个月为Ｄ组；③深低温－８０℃保存３个月为Ｅ组，１个月为Ｆ组；④新鲜软骨为Ｇ组。移植术后每周１次活体检查软骨位置及大小，术后１周、１个月、３个月、６个月，每只动物取一块软骨行大体标本和光学显微镜观察，术后６个月取软骨标本行电子显微镜观察。实验结果显示：　（戊二醛）＝０．５％浸泡、γ－射线辐射处理可降低软骨抗原性，４℃保存时间≤１个月为最佳保存时间，按软骨被吸收卒大小，依次为Ｅ、Ｆ、Ａ、Ｂ、Ｇ、Ｃ、Ｄ组。结果提示：①猪肩胛软骨可作为异种移植代用材料的最佳供体之一；②猪肩胛软骨异种移植到家兔皮下，可长期存留６个月；③本实验４种猪软骨保存方法相比较，按异种移植后软骨抗原性降低和被吸收、变形程度轻重，以　（戊二醛）＝０．５％磷酸缓冲液浸泡保存方法为最佳条件，γ－射线辐射处理次之；④　（戊二醛）＝０．５％磷酸缓冲     

中国版纳小型猪近交系动脉异种移植靶抗原研究

目的　研究中国版纳小型猪近交系动脉的异种靶抗原α -Gal的分布和半定量分析 ,为研究异种移植超急性排斥反应和异种生物材料提供资料。方法　通过亲和免疫组织化学法和图象分析对 10头版纳小型猪的四级动脉进行α Gal的分布和半定量研究。结果　 (1)各级血管组织中血管内皮细胞阳性表达明显 ,弹性纤维、胶原纤维和平滑肌细胞未见表达 ,外膜有微弱表达 ;(2 )图象分析显示 ,管径越细 ,其内皮细胞的表达越高 (P <0 .0 1) ,各级动脉内皮细胞阳性表达的面积密度比的组间差异显著 (P <0 .0 1) ,t检验发现每两组间的动脉内皮细胞阳性表达面积密度比相差显著 (P <0 .0 1)。结论　 (1)版纳小型猪动脉内皮细胞均有异种抗原α Gal分布 ,但是分布不均匀 ;(2 )微血管血栓是异种移植超急性排斥反应中的重要环节 ,小型猪的异种器官移植、彻底解决异种移植超急性排斥反应的关键是防治微血管栓塞     

抗结肠癌细胞单克隆抗体的制备及相应抗原免疫组化鉴定

离子显微镜是一种类似断层扫描的原理进行原子水平研究的先进设备。用微细离子束轰击组织表面,使特定的原子溅射出来成次级离子。每个离子都带有分析象素,经影象处理在荧光屏或底片上显示出来。     

Crouzon综合征发病机制研究进展

Crouzon综合征是一种导致颅缝早闭的常染色体显性遗传病,颅缝过早闭合,从而继发颅腔狭小、眼眶浅和眼球突出、鹰钩鼻、上颌骨发育不良和下颌相对前突等,可引起颅内高压、失明等并发症。绝大部分Crouzon综合征病例的基因定位于染色体10q25~q26的成纤维细胞生长因子受体2的基因区域。可能参与发病过程的调节因子有成纤维细胞生长因子2、碱性成纤维细胞生长因子、肿瘤坏死因子β、(成)头蛋白等。Crouzon综合征中散发患者占相当比例,发病可能与患者父亲年龄偏大有关。     

甲状腺相关眼病发病机制研究进展

甲状腺相关眼病(TAO)的具体发病机制不清,目前研究认为该病是一种器官特异性自身免疫性疾病,具有一定的遗传易感性,淋巴细胞、眶后成纤维细胞、眶后脂肪细胞、细胞因子和自身抗原抗体及吸烟是TAO发病的重要因素。     

隐睾患者的不育因素研究进展

隐睾是男性泌尿生殖系常见的畸形之一,并可导致不育、睾丸肿瘤。隐睾患者的不育率较正常人高。隐睾的病因很复杂,近几年认为这些因素是性激素及受体水平、胰岛素样因子3及受体水平、基因因素。可导致隐睾的因素同样也可导致患者不育。隐睾继发不育因素包括激素治疗、手术治疗的损伤、治疗时间过迟。本文对影响隐睾患者生育的相关因素的研究进展予以综述。     

近交系小鼠H-2抗原单克隆抗体的对比研究

目的 对比研究进口抗近交系小鼠H-2抗原单克隆抗体和国产抗近交系小鼠H-2单克隆抗体的免疫反应是否一致，以尽快推广国产抗体的使用。方法 利用微量细胞毒法，通过倒置显微镜观察死亡细胞（阳性细胞）的百分比来判定国外抗近交系小鼠H-2抗原单克隆抗体和国产抗近交系小鼠H-2单克隆抗体的免疫反应结果。结果 进口抗体：H-2D^b（27-11-13）、H-2D^d（34-5-8S）、H-2D^k（15-5-5．3）、H-2K^k（16-3．22．4）与相应品系抗原反应，脾细胞死亡数达到60％以上。国产抗体：H-2D^b（2）、H-2D^d（4）、H-2D^k（32）、H-2K^b（33）、H-2K^d（31）、H-2K^k（23）分别与相应品系抗原反应，致脾细胞死亡数达60％以上。国产和进口单抗最终免疫反应结果一致。结论 国产抗近交系小鼠H-2抗原单克隆抗体可以用于检测小鼠H-2D区和H-2K区。     

乳猪心钠素单克隆抗体的研究

以乳猪ＡＮＰ作为免疫原，通过杂交瘤技术建立了３株稳定分泌特异ＡＮＰ单克隆抗体的细胞株，对其所分泌单抗的生物学特性进行了鉴定，单抗滴度为（１～６）×１０－７，两种为ＩｇＧ１型，一种为ＩｇＧ２ａ型，所分泌的单抗能识别不同的抗原表位。     

协调性异种移植物存活时间与受体IgM型诱生抗体水平的关系

目的　采用仓鼠到大鼠移植模型 ,观察移植物存活时间与受体血清IgM型诱生抗体水平的关系。 方法　仓鼠心脏移植于SD大鼠颈部 ,按不同剂量及配对方案给予免疫抑制剂 ,单磷酸肌苷 (次黄嘌呤苷 )脱氢酶抑制剂(ERL) 10～ 30mg/(kg·d)、雷帕霉素 (RAD) 1 0～ 1 5mg/(kg·d)、环孢素A (CyA) 5～ 10mg/(kg·d)。观察移植心存活时间 ,ELISA法测定移植心被排斥时血清IgM型诱生抗体水平 ,计算两者的相关系数。 结果　对照组移植心平均存活时间为 (3 7± 1 1)d。单用ERL和CyA组移植心存活时间无延长 ,RAD组有一定的延长 (6 0± 0 9)d ,P <0 0 1;联合用药组可见移植物存活时间明显延长 (P <0 0 1) :ERL CyA、ERL RAD、RAD CyA及RAD ERL CyA组的移植物平均存活时间分别为 (8 0± 3 5 )d、 (10 3± 4 7)d、 (12 8± 2 9)d及 (10 0± 2 2 )d。排斥时大鼠抗仓鼠IgM反应显著受抑制 ,且平均抗体水平与平均移植物存活时间呈负相关 (r =- 0 86 2 ;P <0 0 5 )。结论　仓鼠移植物存活时间与受体血清IgM型诱生抗体水平呈显著的负相关 ,ERL、RAD与CyA配合使用能有效抑制大鼠抗仓鼠IgM并明显延长异种移植物的存活时间。     

抗旋毛形线虫单克隆抗体的制备和抗原定位研究

作者用旋毛形线虫感染期幼虫免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与SP2/0骨髓癌细胞进行杂交。融合率92.1％,抗体阳性率16.6％,通过克隆化已初步建立分泌抗幼虫可溶性抗原的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞18株。采用间接过氧化物酶法,以证实能特异地识别此虫感染期幼虫抗原组分的3株McAb定位抗原,揭示相关抗原组分主要位于幼虫的角度层、杆状体,其次为肠道。     

应用纯化抗原检测尿液和血清抗幽门螺杆菌抗体的比较

目的 :对幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)感染患者尿液和血清抗Hp抗体进行比较研究 ,探讨尿液抗Hp抗体检测的临床意义。方法 :分别以多株Hp超声上清、重组Hp热休克蛋白A亚单位 (rHspA)纯品和重组Hp热休克蛋白尿素酶B亚单位 (rUreB)纯品混合物为抗原 ,采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法对 12 6例患者的尿液抗HpIgG和血清抗HpIgG、抗HpIgA同时进行检测。结果 :使用rHspA和rUreB混合纯品进行检测 ,其特异性和敏感性明显优于Hp超声上清。诊断Hp感染的优劣顺序为 :血清IgG、尿液IgG、血清IgA。结论 :尿液的抗体检测可用于Hp感染诊断 ,尤其是尿液抗HpIgG是一个诊断Hp感染的敏感、特异指标。