蛇床子素通过抑制小鼠心肌成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路降低胶原表达的研究

目的 研究蛇床子素降低真核载体pcDNA3.1(+)-TGF-β1转染的小鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts，CFs)胶原的表达是否与抑制TGF-β1/Smad信号通路相关。方法 用真核表达载体pcDNA3.1(+)-TGF-β1转染小鼠CFs，然后在TGF-β1受体抑制剂SB431542预处理或不预处理的情况下，用不同浓度的蛇床子素处理CFs 24 h。ELISA检测上清TGF-β1水平，Western blotting检测细胞内α-SMA、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ、Smad2/3、p-Smad2/3、Smad4和Smad7的蛋白表达。结果 真核表达载体pcDNA3.1(+)-TGF-β1转染CFs后，TGF-β1释放量增加，提示建立了TGF-β1过表达的细胞模型。TGF-β1过表达的CFs经蛇床子素(5~20 μmol·L^-1)处理24 h后，TGF-β1、α-SMA、collagenⅠ、collagenⅢ、p-Smad2/3和Smad4蛋白表达降低，Smad7蛋白表达上升。TGF-β1受体抑制剂SB431542预处理2 h后，蛇床子素对α-SMA、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ、Smad2/3、p-Smad2/3和Smad4蛋白表达的抑制作用进一步增强。结论 蛇床子素可以通过直接抑制TGF-β1的产生和Smad通路下调α-SMA和胶原蛋白的表达，这可能是其抗纤维化的机制之一。     

外源性装饰蛋白在组织修复中对胶原形成的抑制作用

目的观察转化生长因子 β(TGF β)的拮抗剂装饰蛋白 (decorin)对瘢痕中胶原形成的抑制作用。 方法手术造成家兔结膜瘢痕 ,即刻和d 1、3、7在结膜瓣下注射decorin 1 0 0 μl(0 .1mg/ml) ,30d后用天狼星红 偏振光法检测胶原的合成情况 ,同时用免疫组化法检测TGF β1 的表达。结果用药后Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维较瘢痕组密度降低 (P<0 .0 1 ) ,与正常结膜中Ⅰ、Ⅲ型胶原排列状况相似 ,并且TGF β1 表达的阳性率降低非常显著 (P <0 .0 1 )。结论decorin通过降低TGF β1 的表达明显减少Ⅰ、Ⅲ型胶原合成量 ,从而减轻局部的纤维化反应 ,可作为抑制瘢痕形成的辅助药物     

扁桃体术后应用外用重组人碱性成纤维细胞生长因子的效果观察

目的观察扁桃体术后应用外用重组人碱性成纤维细胞生长因子的效果。方法择取2016年10月~2017年9月我院收治的78例扁桃体术后患者,随机平均分成对照组与研究组,对照组术后未作其他处理,研究组在术后涂抹rh-bFGF,对两组患者的临床效果进行分析和比较。结果研究组患者术后4~6d局部创面颜色恢复至正常状态,且白膜生长状态良好,并未出现糜烂、红肿等症状,对照组患者术后5~6d局部创面仍存在糜烂症状,直至术后10~14d创面颜色才恢复至正常状态。研究组创面愈合时间均值为(5.23±1.89)d,对照组创面愈合时间均值为(12.67±12.75)d,研究组明显少于对照组(P0.05);研究组患者在术后6h就提出进食要求,且术后24h内疼痛程度等级为Ⅰ级的占比比较高,对照组术后24小时疼痛程度等级Ⅱ~Ⅲ级的占比比较高,且无进食要求,术后3~4d仍存在Ⅰ级疼痛,术后24~48h有进食要求。研究组术后24h疼痛程度比对照组低(P0.05),研究组术后疼痛持续时间为(2.11±0.93)d,对照组术后疼痛持续时间均值为(5.21±1.89)d,研究组明显低于对照组(P0.05);两组患者术后体温以及并发症发生概率比较均无统计学意义(P0.05)。结论在扁桃体术后应用rh-bFGF不仅可以减轻患者疼痛程度,还可以促进创面愈合,不会出现严重不良反应,具有显著临床价值。     

集束护理干预在腹泻患者肛周皮炎护理中的临床意义

目的 探讨腹泻患者肛周皮炎实行集束护理对疗效的影响。方法 120例腹泻致肛周皮炎患者,随机分为对照组(采用常规护理)和研究组(实施集束护理),每组60例。对比两组患者肛周皮炎发生例数、程度以及愈合时间。结果 对照组发生16例肛周皮炎,Ⅰ度5例,Ⅱ度7例,Ⅲ度4例,皮炎平均愈合时间(5.6±2.1)d;研究组发生3例肛周皮炎,Ⅰ度2例,Ⅱ度1例,Ⅲ度0例,皮炎平均愈合时间(1.8±1.1)d,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 对于腹泻致肛周皮炎的患者在实行了集束护理后,比传统的常规护理能显著提高疗效,值得临床推广。     

SD 大鼠抗青光眼滤过术后热休克蛋白47表达的动态观察

目的：探讨 SD 大鼠采用抗青光眼滤过术处理后热休克蛋白47（heat shock protein 47,HSP47）在滤过泡中的表达变化及其意义。方法选取健康成年 SD 大鼠24只,雌雄各半,采用随机数字表法分为2 d 组、4 d 组、6 d组、10 d 组、14 d 组、正常组6组（每组4只）,2 d、4 d、6 d、10 d、14 d 组大鼠均行右眼抗青光眼滤过术处理,术后采用裂隙灯观察各组大鼠滤过泡及眼前节情况,分别于术后第2、4、6、10、14 d 处死相应组大鼠,检测滤过泡中 HSP47及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、mRNA 的表达情况。结果2 d 组大鼠 HSP47及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、mRNA 在滤过泡中的表达略微上升,但与正常组比较差异无统计学意义（P ﹥0.05）,4、6、10、14 d 组大鼠滤过泡中的 HSP47及Ⅲ型胶原蛋白、mRNA表达水平较正常组显著升高（P ﹤0.05）;6、10、14 d 组大鼠滤过泡中的Ⅰ型胶原蛋白、mRNA 表达水平较正常组显著升高（P ﹤0.05）。结论 SD 大鼠抗青光眼术后 HSP47及 mRNA 的表达水平变化基本与Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、mRNA 表达变化一致,表明 HSP47在大鼠眼滤过泡瘢痕形成过程中可能起重要作用。     

槲皮素通过调节TGF-β1/Smad抑制增生性瘢痕的形成

目的：探讨槲皮素对人增生性瘢痕成纤维细胞（HSFb）及其介导的TGF-β₁/Smad信号通路中相关蛋白表达的影响。方法：提取人增生性瘢痕成纤维细胞进行原代培养并鉴定;采用CCK-8法检测不同浓度的槲皮素（50~600 μmol·L^-1）处理后的HSFb细胞活力;Western blot检测α-SMA、COL-Ⅲ、TGF-β₁、Smad2、Smad7的蛋白表达,免疫荧光检测α-SMA的表达以及HSF和HSFb中波形蛋白的表达。结果：与模型组相比,槲皮素（250,500 μmol·L^-1）可降低α-SMA蛋白的表达（P<0.05）并显著下调COL-Ⅲ蛋白的表达（P<0.05或P<0.01）,其中500 μmol·L^-1槲皮素组对HSFb细胞Ⅲ-型胶原分泌的抑制作用最强,并显著降低TGF-β₁和Smad2的蛋白表达;显著上调Smad7蛋白表达并且呈浓度依赖性,差异均具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论：槲皮素主要通过抑制COL-Ⅲ、α-SMA、TGF-β₁/Smad通路的活化从而抑制增生性瘢痕的形成。     

紫花地丁烫伤酊治疗大鼠烫伤模型试验

目的评价紫花地丁烫伤酊治疗大鼠浅Ⅱ度烫伤和深Ⅱ度烫伤作用及机制。方法预试验确定浅Ⅱ度烫伤和深Ⅱ度烫伤标准;SD大鼠分组后连续给药21 d,与给药后第7、14和21天观察创面结痂时间、测定创面结痂面积、计算创面愈合率和脱痂愈合时间,免疫组化法检查创面组织修复中Ⅰ和Ⅲ型胶原表达。结果紫花地丁烫伤酊可减少浅Ⅱ度及深Ⅱ度烫伤创面结痂面积、提高烫伤创面愈合率;减少浅Ⅱ度和深Ⅱ度烫伤创面脱痂时间;升高深Ⅱ度烫伤创面组织中Ⅲ型胶原蛋白表达;降低深Ⅱ度烫伤创面组织中Ⅰ型胶原蛋白表达。结论紫花地丁烫伤酊具有治疗浅Ⅱ度和深Ⅱ度烫伤作用,其作用机制与升高创面组织中Ⅲ型胶原表达,降低Ⅰ型胶原蛋白表达有关。     

冲和膏促进肿疡消散的体内外机制研究

目的 探究冲和膏促进肿疡消散的机制。方法 采取打孔法检测冲和膏对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色葡萄球菌、肺炎链球菌的抑菌作用。采用皮下注射金黄色葡萄球菌的方法建立皮下软组织感染大鼠模型,考察冲和膏（复方多黏菌素B软膏为阳性对照）干预14 d对其皮下软组织病理学变化,皮下软组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达量,血清中转化生长因子β(TGF-β)、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）含量的影响。结果 冲和膏对上述4种细菌（肺炎链球菌除外）均有不同程度的抑菌效果,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好。与模型组相比,给药第7天,冲和膏组大鼠胶原纤维排列有序,脓液消散较快,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原蛋白的表达量和TGF-β、bFGF含量均显著升高,MMP-2、MMP-9蛋白的表达量均显著降低（P<0.05）;给药第14天,冲和膏组大鼠胶原沉积明显,皮下各附属器逐渐形成,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原蛋白的表达量和TGF-β、bFGF含量均显著降低,MMP-2、MMP-9蛋白的表达量均显著升高（P<0.05）。结论 冲和膏具有抑菌作用,可能通过调控胶原...     

曲尼司特对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合及瘢痕形成的作用

目的探讨曲尼司特在大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合及瘢痕形成中的作用。方法制作大鼠深Ⅱ度烫伤模型,并随机分为曲尼司特组和对照组,分别在伤后14 d和创面愈合时取标本,比较两组创面的愈合时间、Ⅰ/Ⅲ型胶原的含量及比例、胶原的总含量及创面愈合时成纤维细胞的超微结构。结果两组创面痊愈时间无明显差别,实验组的Ⅰ/Ⅲ型胶原含量及比例和总胶原含量明显降低、成纤维细胞超微结构呈现功能降低改变。结论曲尼司特对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合无明显影响,但可降低创面胶原含量,对大鼠烧伤创面愈合后早期瘢痕形成具有一定抑制作用。     

研究纳米银敷料与重组人表皮生长因子联合治疗Ⅱ度烧伤的疗效

目的观察分析银离子抗菌功能性敷料联合重组人表皮生长因子治疗Ⅱ度烧伤的临床疗效。方法收集2016年5月至2017年5月来我院接受诊治的98例Ⅱ度烧伤患者作为研究对象,回顾性分析根据不同用药将病例分为研究组、对照组各49例,对照组单纯银离子抗菌功能性敷料换药,研究组在此基础上联合重组人表皮生长因子换药治疗,观察对比两组患者治疗20d后的愈合率和平均愈合时间。结果研究组患者伤口愈合时间明显短于对照组(P<0.05);治疗20d后研究组治愈率100%明显高于对照组的87.7%(χ~2=6.391,P=0.011)。结论银离子抗菌功能性敷料与重组人表皮生长因子联合治疗Ⅱ度烧伤,患者伤口愈合快,疗效好值得推广。     

转化生长因子Ⅱ型受体和Smad4在外阴鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨转化生长因子Ⅱ型受体(TβRⅡ)和Smad4蛋白与外阴鳞癌的发生发展关系。方法采用免疫组织化学方法检测TβRⅡ和Smad4在25例外阴鳞癌及15例外阴正常皮肤中的表达情况,并收集外阴鳞癌患者的临床病理资料进行分析。结果 TβRⅡ和Smad4蛋白在外阴鳞癌中的表达明显低于外阴正常皮肤(P<0.05);在外阴鳞癌Ⅲ期中表达明显低于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05),在有淋巴结转移中明显低于无淋巴结转移,在中低分化中表达明显低于高分化(P<0.05)。Pearson相关性分析结果表明:TβRⅡ和Smad4在外阴鳞癌中的表达呈正相关。结论 TβRⅡ和Smad4的低表达与外阴鳞癌的发生和发展有关。     

鬼针草总黄酮对免疫性肝纤维化大鼠胶原代谢的影响及机制

目的探讨鬼针草总黄酮(TFB)对免疫性肝纤维化大鼠胶原代谢的影响及机制。方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、TFB大、中、小剂量组和秋水仙碱阳性药对照组,采用腹腔注射猪血清诱导肝纤维化模型,造模后灌服相应的受试药物。ELISA法测定大鼠血清Ⅲ型前胶原酶(PCⅢ)、Ⅳ型胶原酶(CⅣ)含量;免疫组化法测定肝组织中Ⅰ型胶原蛋白的表达;RT-PCR技术检测肝组织中Ⅰ型胶原、α-SMA、TGF-β1 mRNA的表达情况;Western blot检测肝组织中Smad2蛋白的表达。结果与模型组相比,TFB能明显降低肝纤维化大鼠血清中PCⅢ、CⅣ含量,抑制肝组织中Ⅰ型胶原、α-SMA、TGF-β1 mRNA及Ⅰ型胶原、Smad2蛋白的表达。结论 TFB能明显降低免疫性大鼠肝纤维化胶原含量,其机制可能与降低TGF-β1表达进而抑制肝星状细胞活化减少胶原生成有关。     

积雪苷霜软膏对兔耳增生性瘢痕组织中S mad4蛋白表达的影响

目的：探讨积雪苷霜软膏对兔耳增生性瘢痕组织中Smad4蛋白表达的影响。方法新西兰大耳白兔18只,随机分为正常对照组、模型组、积雪苷霜软膏组。模型组和积雪苷霜软膏组建立兔耳腹侧面增生性瘢痕模型,术后21 d,积雪苷霜软膏组瘢痕局部涂抹积雪苷霜软膏,每天2次,连续用药28 d;正常组和模型组涂抹软膏基质。每周观察并拍照记录瘢痕的生长情况,于术后49 d处死动物,进行病理、羟脯氨酸和Smad4蛋白检测。结果模型组瘢痕以较快速度生长,积雪苷霜软膏组,瘢痕生长显著被抑制。病理检测显示,模型组增生性瘢痕组织纤维化明显,而积雪苷治疗可显著改善纤维化。羟脯氨酸定量显示,增生性瘢痕组织中羟脯氨酸（Hyp）含量显著升高（P＜0．01）,而积雪苷治疗显著降低瘢痕组织中Hyp水平（P＜0．01）。免疫印迹结果显示增生性瘢痕组织中Smad4蛋白水平显著上调,而积雪苷治疗显著降低Smad4蛋白表达（P＜0．01）。结论积雪苷霜抗增生性瘢痕作用可能与调控Smad4蛋白表达有关。     

重组牛碱性成纤维细胞生长因子对面部手术Ⅰ类切口愈合影响的临床观察

目的:探讨重组牛碱性成纤维细胞生长因子对面部手术Ⅰ类切口愈合的影响。方法:将826例患者按随机化原则分为2组,实验组413例,用0.5%强力碘消毒后,再用生理盐水清洗,擦干后在切口表面涂布重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶,bid,至伤口拆线;对照组413例,用0.5%强力碘消毒后,再用生理盐水清洗然后擦干。每天2次,至伤口拆线。结果:术后切口平均愈合时间,实验组4.8 d,对照组5.9 d,2组比较差异有统计学意义(P<0.01);术后切口平整率,实验组(388/413)93.94%,对照组(371/413)89.83%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶对Ⅰ类手术切口有缩短愈合时间、抑制瘢痕增生的积极作用。     

生长激素在大面积深Ⅱ度烧伤患者中的应用

目的探讨重组生长激素(rhGH)对大面积深Ⅱ度烧伤患者的血浆总蛋白、白蛋白及创面愈合的影响。方法将38例大面积烧伤患者随机分为重组人生长激素组和对照组各19例,在常规治疗的基础上,重组人生长激素组伤后5d开始加用rhGH,给予剂量0．2U·kg~(-1)·d~(-1),疗程14d,比较两组血浆总蛋白、白蛋白浓度、创面愈合的时间及愈合后瘢痕的情况。结果重组人生长激素组血浆总蛋白、白蛋白浓度明显增高,创面愈合时间提前5d,瘢痕增生明显减轻。结论rhGH能有效促进大面积烧伤患者血浆蛋白质的合成,加速烧伤创面的愈合,减少瘢痕的增生。     

小干扰RNA抑制TIEG基因对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β信号通路的影响

目的用小干扰RNA(siRNA)封闭瘢痕疙瘩成纤维细胞中转化生长因子(TGF)-β诱导早期基因(TIEG)的表达,观察对成纤维细胞TGF-β/Smads信号通路基因表达的影响。方法采用小分子RNA干扰(RNAi)技术,用脂质体将pSUPER.gfp/TIEG2转染原代培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测阻碍内源性TGF-β/Smads信号转导的条件下瘢痕疙瘩成纤维细胞TIEG、Smad2、Smad7以及α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、胶原ⅠmRNA表达水平。结果 pSUPER.gfp/TIEG2可有效干扰瘢痕疙瘩成纤维细胞中TIEG的表达,并使Smad2mRNA表达减弱,Smad7mRNA表达增强;同时α-SMA和胶原ⅠmRNA表达减弱。结论针对TIEG基因的siRNA干扰质粒转染瘢痕疙瘩成纤维细胞后能明显抑制TIEGmRNA表达,并使其调控TGF-β/Smads信号通路,一定程度上抑制了瘢痕疙瘩中成纤维母细胞转分化及细胞外基质的合成。     

黄芪总苷液对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长作用研究

摘 要 目的：探讨黄芪总苷液对人瘢痕疙瘩成纤维细胞的抑制作用。方法: 以正常皮肤为对照,用免疫组化检测瘢痕疙瘩组织标本中转化生长因子 β（transforming growth factor-β,TGF-β）及其转导因子(SMAD family member,Smad)的表达情况;不同浓度黄芪总苷液干预HFF-1人皮肤成纤维细胞后,MTT法检测其最适浓度;Real time PCR 测定成纤维细胞TGF-β的转导因子Smad2（SMAD family member 2）,Smad3（SMAD family member 3）,Smad4（SMAD family member 4）,Smad7（SMAD family member 7）mRNA的表达;Western blot 检测成纤维细胞TGF-βRⅡ,Smad2,Smad3,Smad4,Smad7的蛋白水平表达。结果: 与正常皮肤组织相比,瘢痕疙瘩组织Smad蛋白表达水平明显提高（P<0.05）,TGF-βRⅡ蛋白的表达水平在两组中没有明显差异（P>0.05）。MTT检测最适给药浓度为0.5 μg·mL^-1。两组细胞TGF-β/Smad信号通路相关蛋白表达量比较,给药组Smad2的表达水平明显提高,Smad3的表达水平明显降低（P<0.05）。结论:黄芪总苷液可能通过过表达Smad2以及抑制Smad3的表达来影响TGF-β/Smad 通路过程从而抑制成纤维细胞的形成。     

Ⅰ期切除缝合术治疗低位肛瘘临床分析

目的探讨低位肛瘘Ⅰ期切除缝合术的适应证、方法和效果。方法对160例低位肛瘘患者行Ⅰ期切除缝合术,对患者的临床资料进行回顾性分析。结果 160例患者全部治愈,创面愈合时间5～16 d,平均8 d。其中3例术后创口感染,经引流换药后愈合。所有病例愈合后瘢痕平而小,均未发生大出血、肛门狭窄、肛门失禁等并发症。本组随访150例,随访3个月～3年,未见复发。结论选择好适应证,规范进行操作,低位肛瘘Ⅰ期切除缝合术可缩短创面愈合时间、减轻患者痛苦和术后水肿、减少皮下积液、消灭死腔、防止术后感染,同时由于手术对正常组织损伤小,便于创面Ⅰ期愈合,术后复发率及创口感染率较常规肛瘘切除术低。     

芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞的增殖作用及其机制研究

目的研究芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞增殖的影响及其作用机制。方法体外培养人皮肤成纤维细胞,MTT法测定芦荟凝胶作用后人皮肤成纤维细胞的增殖能力,用实时荧光定量PCR法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA水平,用免疫蛋白印迹法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果 MTT检测结果表明,芦荟凝胶对人皮肤成纤维细胞具有促增殖作用,且呈现时间依赖性和剂量依赖性。芦荟凝胶作用于人皮肤成纤维细胞72h后,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及蛋白的表达显著增加(P<0.05,P<0.01)。结论芦荟凝胶可通过促进人皮肤成纤维细胞增殖以及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白的表达加速创面愈合。