微管微丝交联因子1与细胞骨架

微管微丝交联因子1(MACF1)是一种在哺乳细胞中普遍表达的细胞骨架蛋白,既能与微管交联,又能与微丝交联。MACF1在细胞极化、细胞迁移、信号转导以及维持组织的完整性中发挥着重要作用。本文基于MACF1能够与微丝微管交联的特点,就其通过细胞骨架间的相互作用对细胞生理功能的调节做一综述。     

体外LAK细胞杀伤人直肠腺癌细胞时的细胞骨架变化

应用免疫荧光细胞化学和透射电镜观察体外ＬＡＫ细胞杀伤人直肠腺癌细胞时效靶细胞内细胞骨架的变化。结果表明：两种细胞相互识别后均出现趋向运动，趋向运动的细胞突起内含有丰富的微丝，微丝的排列与细胞运动的方向一致。效靶细胞相互接触后，两种细胞浆内的微管均出现重排现象。两种细胞质膜接触处可见成束的微丝及微管，微丝及微管集中处含有丰富的溶酶体颗粒。微丝及微管抑制试验均不出现上述变化。结果提示：微丝可能在效靶细     

抑制骨架蛋白对正常大鼠肾细胞力学性能的影响

目的确定正常大鼠肾细胞内骨架蛋白的变化对细胞力学性能的影响。方法通过微管吸吮技术对正常大鼠肾细胞用细胞松弛素D、秋水仙素和blebbistatin进行处理,然后分析细胞的杨氏模量和黏弹性的变化。结果经过骨架蛋白抑制剂的处理,细胞的弹性模量表现出显著的下降;与对照组相比,秋水仙素处理后细胞的黏弹性没有显著变化,而细胞松弛素D和blebbistatin处理后细胞的黏弹性显著降低。结论Blebbistatin对正常大鼠肾细胞力学特性的影响不依赖于细胞骨架的改变;抑制肌动蛋白聚合或抑制肌球蛋白IIATP酶的活性能够大幅降低细胞杨氏模量和黏弹性,微管蛋白是否正常聚合与细胞杨氏模量相关而对细胞黏弹性没有显著影响。     

阪崎杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞对细胞骨架的影响

目的观察阪崎杆菌侵袭人脑血管内皮细胞后,细胞骨架中微丝和微管的变化。方法用荧光染色技术观察阪崎杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞后,细胞骨架中的微丝和微管的变化,观察微丝和微管的抑制剂对阪崎杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞的影响。结果阪崎杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞后,细胞骨架结构发生明显的改变,微丝和微管部分断裂,模糊,散在分布,微丝抑制剂(细胞松弛素D)和微管抑制剂(秋水仙素)可以抑制阪崎杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞。结论阪崎杆菌侵袭人脑血管内皮细胞破坏细胞骨架结构,微丝和微管抑制剂抑制阪崎杆菌侵袭。     

人血淋巴细胞亚群杀伤K562细胞活性的比较及其相互作用

应用单克隆抗体盤选法,从人外周血中分离出CD4、CD8、CD19(B)和CD57(NK)四种淋巴细胞亚群,发现各群细胞对K562肿瘤细胞均有杀伤活性,其中以CD57细胞的杀伤活性最强.CD4和CD57细胞混合培养后的杀伤活性超过两者之和,而CD8、CD19分别与CD57细胞混合培养后,杀伤活性与两者单独培养之和相比无显著性差异.结果表明,人外周血杀伤K562细胞活性受到多种亚群细胞的影响,因此常规用K562作靶细胞测定外周血NK活性所反映的可能并非单纯NK细胞的杀伤活性.     

小鼠皮肤角质细胞在电场中的移动及其机理的研究

研究小鼠皮肤角质细胞在电场中的移动以及微管、微丝和钙离子通道在细胞移动中的作用.制作直流电场干预细胞装置,以不同强度的电流作用于小鼠皮肤角质细胞,并在培养基中加入L-型钙离子通道阻断剂硝苯地平、微管抑制剂秋水仙碱和微丝抑制剂细胞松弛素B观察小鼠皮肤角质细胞运动的变化.结果表明:小鼠皮肤角质细胞在1.6 mA电流刺激下向阴极方向移动,移动速率为29.966 μm/h.加入硝苯地平,对小鼠皮肤角质细胞移动的抑制作用不明显.而秋水仙碱和细胞松弛素B对小鼠皮肤角质细胞移动有明显抑制作用.小鼠皮肤角质细胞在电场中可以向阴极定向移动,微管和微丝参与调解这一运动,而L-型钙离子通道与此运动无关.     

LPS对体外枯否细胞吞噬功能的影响

目的:探讨LPS对体外培养枯否细胞吞噬功能的影响和机制。方法:胶原酶灌流消化肝脏, 密度梯度离心分离枯否细胞。在不同剂量脂多糖作用不同时间, 分别用聚苯乙烯乳珠吞噬实验、荧光染色法、荧光光度法和流式细胞分析检测枯否细胞的吞噬功能、微丝和微管表达及凋亡情况。结果:小剂量短时间作用时, LPS显著增强体外培养枯否细胞吞噬能力, 但随作用时间延长和剂量的增加, 吞噬能力反而下降;LPS使枯否细胞微丝和微管表达增强, 肌动蛋白含量和微管荧光灰度显著增加, 但剂量过大表达反而减弱;大剂量LPS可导致枯否细胞凋亡。结论:LPS可以增强体外培养枯否细胞的吞噬能力, 但剂量过大、时间过长反而抑制其吞噬能力。这可能与枯否细胞微丝、微管的变化和凋亡有关。     

TPS、CEA表达与肺癌细胞粘弹特性的相关性

目的:探讨组织多肽特异性抗原(TPS)、癌胚抗原(CEA)表达对肺癌细胞粘弹特性的影响,力图从生物力学角度揭示肺癌细胞侵润转移的某些生物学特性.材料与方法:体外培养的低转移人肺腺癌(PAa)细胞和高转移人肺巨细胞癌(PG)细胞经TPS、CEA检测试剂孵育后,应用酶联免疫吸附试验检测其孵育液中TPS、CEA表达水平,并采用微管吸吮技术定量测定癌细胞粘弹特性.结果:PG细胞的TPS表达高于PAa细胞,而PAa细胞的CEA表达高于PG细胞.肺癌细胞粘弹性,在未使用TPS、CEA检测试剂孵育组,为PAa细胞大于PG细胞;在TPS检测试剂孵育组,PAa、PG细胞粘性系数降低,弹性系数K1,K2增高;在CEA检测试剂孵育组,PAa、PG细胞仅弹性系数增高.结论:TPS、CEA为肺癌的重要肿瘤标志物,TPS、CEA表达与PAa、PG细胞的粘弹特性有关,TPS表达与PG细胞的高转移性能有关.     

微管-微丝系统的改变对培养的MGc80-3人胃癌细胞粘液分泌的影响

本工作用PAS反应显示粘液蛋白的方法对细胞内微管微丝变化时人胃腺癌MGc 80-3细胞粘液分泌活动进行了研究。秋水仙酰胺、低温(2～4℃)及细胞松弛素B(CB)处理后,细胞内微管微丝解聚,粘液分泌活动受到抑制,当细胞从低温回置37℃温育,微管重新组装后,粘液分泌又得到恢复。Taxol短时间处理对MGc 80-3细胞粘液分泌有促进作用、但长时间处理后,由于细胞内微管的高度浓集化,从而破坏了细胞内微管网络结构(CMTC),使粘液分泌活动停止,说明人胃腺癌MGc80-3细胞的粘液分泌活动依赖于细胞内CMTC和微丝的存在。毛果芸香碱能直接刺激培养的MGc 80-3细胞的粘液分泌,提示人胃腺癌MGc 80-3细胞膜也可能存在类胆碱能受体。硫杂脯氨酸对人胃腺癌MGc 80-3细胞的增殖具有抑制作用,但对其粘液分泌具有强烈的刺激作用,这种刺激作用可通过加速粘液的排放而实现。毛果芸香碱和硫杂脯氨酸对MGc 80-3细胞粘液分泌的刺激作用也依赖于细胞内微管微丝的存在,一旦微管微丝解聚,其刺激粘液分泌的作用便消失。db-cAMP对MGc 80-3细胞的粘液分泌也有促进作用。CB单独处理或CB与秋水仙酰胺同时处理,都能抑制MGc 80-3细胞的粘液分泌,但CB单独处理后,分泌颗粒多聚集于细胞边缘,而CB与秋水仙酰胺同时处理后,分泌颗粒则散在分布于胞质中,提示在MGc 80-3细胞内微丝对粘液的排放,而微管对分泌颗粒的输送起主要作用。     

整合素beta1亚单位对肝癌细胞与IV型胶原黏附与趋化行为的影响

采用微吸管实验技术 ,测定肝细胞癌 (Hepatocellular carcinom a,HCC)细胞与 IV型胶原裱衬表面的黏附力 ;进一步加入针对整合素 beta1亚单位 (CD2 9)的单克隆抗体 (Anti- CD2 9)处理 HCC细胞 ,观察 Anti- CD2 9对细胞与 IV型胶原裱衬表面的黏附力的影响。采用双微吸管实验法进行 HCC细胞趋化实验 ,在两侧微管内加入相同浓度 (6 0 0μg/ ml )的 IV型胶原 ,并引导微管尖端与同一细胞紧密接触 ,动态观察细胞两侧伪足形成过程 ;在一侧微吸管内加入 2 0μg/ ml Anti- CD2 9,考察 beta1整合素亚单位阻断对 HCC细胞伪足形成的影响。利用流式细胞仪对 HCC细胞表面整合素 beta1亚单位的表达进行分析。结果表明 ,HCC细胞与 5μg/ ml IV型胶原裱衬表面之间的黏附力为 932± 134(× 10 - 1 0 N ,n=6 0 ) ,加入 5μg/ ml Anti- CD2 9黏附力减小到 4 4 9± 119(× 10 - 1 0 N,n=6 0 ) ;加入 10 μg/ ml Anti- CD2 9时黏附力减小到 2 2 0± 78(× 10 - 1 0 N,n=5 5 )。双微吸管趋化实验表明 :两侧微吸管加入相同浓度 IV型胶原 ,细胞向两侧微吸管均有伪足形成 ;在此基础上 ,微吸管加入 Anti- CD2 9的一侧 ,HCC细胞伪足生长曲线呈现明显的抑制 ,而未加入 Anti- CD2 9的微吸管一侧与加入的对侧相比 ,该侧细胞的伪足明显增     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.