溴苯腈对小鼠肝组织能量代谢的影响及巯基化合物的干预

目的 观察溴苯腈对小鼠肝组织能量代谢的影响,探讨二巯丙磺钠(Na-DMPS)、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)的干预作用.方法 ICR小鼠40只,随机分成正常对照组、溴苯腈急性中毒组、Na-DMPS组、NAC组、NAC联用Na-DMPS组,每组8只;用反相高效液相色谱法测定各组小鼠肝组织三磷腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)含量,并计算总腺苷酸(TAN)及细胞能荷(EC)值;电镜观察肝细胞超显微结构改变.结果 与对照组比较,染毒组肝组织ATP含量[(0.88±0.28)μmol/gl、EC水平[(0.33±0.05)μmol/L]明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与染毒组比较,药物干预组ATP含量[(1.79±0.42)、(1.84±0.35)、(2.02±0.53)μmol/gl、EC水平[(0.47±0.03、0.48±0.02、0.51±0.04)]均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);NAC联用Na-DMPS组EC水平较Na-DMPS组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).药物干预组肝细胞超显微结构改变均较染毒组明显减轻.结论 溴苯腈急性中毒可致小鼠肝组织能量代谢障碍;Na-DMPS、NAC单用及联用均可改善其肝组织能量代谢,减轻肝组织损伤,以两者联用效果最佳.     

人参林蛙油复方制剂对小鼠缓解体力疲劳作用及ATP酶代谢的影响

目的研究人参林蛙油复方制剂对小鼠缓解体力疲劳作用以及对小鼠体内腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)酶代谢的影响。方法将40只雄性ICR小鼠,按体重随机分为低剂量组(175 mg/kg)、中剂量组(350 mg/kg)、高剂量组(1 050 mg/kg)和对照组(蒸馏水)4组,连续灌胃30 d,观察小鼠负重游泳时间、测定血乳酸含量、尿素氮含量、Na~+-K~+-ATP及Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活性。结果高剂量组(1 350 mg/kg)能延长负重小鼠游泳时间(8.41±2.91)min,降低了血清尿素氮(8.06±2.6)nmol/ml和血乳酸(4.88±0.89)U/ml的含量,提高体内Na~+-K~+-ATP(2.50±0.15)μmol/(mg·h)及Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP(0.62±0.11)μmol/(mg·h)酶活性,与对照组比较差异有统计学意义(均P0.05);中剂量组肝中Na~+-K~+-ATP(2.42±0.10)μmol/(mg·h)、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP(0.52±0.09)μmol/(mg·h)酶活性增加,与对照组比较差异均有统计学意义(均P0.05),且高剂量组ATP酶活性增加明显优于中剂量组。结论人参林蛙油复方制剂具有一定的缓解体力疲劳的作用,同时能够提高机体内ATP酶的活性,促进机体能量代谢。     

邻苯二甲酸二甲酯对小鼠肝脏Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶的影响

目的探讨邻苯二甲酸二甲酯(DMP)对小鼠肝脏Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶和Na~+-K~+-ATP酶活力的影响。方法将80只雌雄各半的健康清洁级C57BL/6J小鼠随机分为对照(纯玉米油)组和0.5、1.0、2.0 g/kg DMP染毒组,每组20只,雌雄各半。采用灌胃的方式进行染毒,灌胃体积为10 ml/kg,每天灌胃1次。分别在灌胃20、40 d后,每组选择10只小鼠(雌雄各半)测定肝脏Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶和Na~+-K~+-ATP酶的活力。结果灌胃20 d时,与对照组比较,各剂量DMP染毒组雄性小鼠肝脏的Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活力以及1.0、2.0 g/kg DMP染毒组雄性小鼠肝脏的Na~+-K~+-ATP酶活力均较低,差异有统计学意义(P0.05);0.5、2.0 g/kg DMP染毒组雌性小鼠肝脏的Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活力以及2.0 g/kg DMP染毒组雌性小鼠肝脏的Na~+-K~+-ATP酶活力均较高,差异有统计学意义(P0.05)。灌胃40 d时,与对照组比较,各剂量DMP染毒组雄性小鼠肝脏Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活力无明显变化,0.5 g/kg DMP染毒组雄性小鼠肝脏的Na~+-K~+-ATP酶活力较高,差异有统计学意义(P0.05);各剂量DMP染毒组雌性小鼠肝脏的Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶和Na~+-K~+-ATP酶活力均较低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 DMP经口染毒对小鼠肝脏的Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶和Na~+-K~+-ATP酶活力具有干扰作用,雌性小鼠比雄性小鼠更敏感。     

沥青烟作业工人脂质过氧化水平的观察

目的 探讨沥青烟作业工人脂质过氧化水平和红细胞膜ATP酶活力的改变.方法 选择炭素分厂生阳极车间接触沥青烟工人53名为观察组,选择该厂非沥青烟作业职工50名为对照组,检测血浆中脂质过氧化水平相关指标谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量及总抗氧化能力(T-AOC)、抑制羟自由基能力和红细胞膜Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-ATPase活力.结果 观察组抑制羟自由基能力为(786.03±227.54)U/ml,与对照组[(897.79±153.87)U/ml)]比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).观察组MDA含量为(11.97±4.26)nmol/ml,明显高于对照组[(9.26±4.90)nmol/ml)],差异有统计学意义(P<0.05).观察组红细胞膜Na~+-K~+-ATPase活力为(18.83±9.97)U/ml,明显低于对照组[(27.06±11.62)U/ml)],差异有统计学意义(P<0.05).抑制羟自由基能力、GSH-Px活力与工龄呈负相关(r=-0.320,r=-0.347,P<0.05),MDA含量与工龄呈正相关(r=0.421,P<0.01).红细胞膜Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-ATPase活力与工龄均无明显相关性.结论 沥青烟可引起作业工人脂质过氧化水平和红细胞膜ATP酶活力的改变     

二巯丙磺钠对溴苯腈急性中毒心肌能量代谢影响

目的 探讨溴苯腈急性中毒对小鼠心肌能量代谢的影响及二巯丙磺钠(Na-DMPS)的保护作用。方法 ICR小鼠78只,随机分成5组,对照组、溴苯腈高、低剂量组和Na-DMPS干预组。检测染毒后0.5,3 h心肌腺苷酸含量。结果 溴苯腈高剂量组染毒后0.5,3 h,三磷酸腺苷(ATP)含量分别为(39.62±8.39),(41.19±6.56)mg/g,明显低于对照组(49.96±6.87)mg/g(P<0.05);二磷酸腺苷(ADP)含量在染毒后0.5,3 h高于对照组(11.01±0.93)mg/g(P<0.05);磷酸腺苷(AMP)于染毒后3,6 h高于对照组(1.61±0.20)mg/g;Na-MDPS干预后ATP分别为(51.10±7.10),(58.34±12.34),(52.92±14.15)mg/g,明显高于溴苯腈高剂量组(P<0.05);ADP、AMP含量低于溴苯腈高剂量组(P<0.01)。结论 溴苯腈急性中毒可影响小鼠心肌能量代谢,Na-DMPS干预可改善心肌能量代谢。     

氯仿和邻苯二甲酸二辛酯联合染毒对小鼠肝脏酶的影响

目的观察氯仿(chloroform,CF)和邻苯二甲酸二辛酯(dioctylphthalate,DOP)联合染毒对小鼠肝脏酶的影响。方法选取40只成年ICR小鼠,随机分成8组,即雌性对照组(玉米油)、雌性DOP单独染毒组(1/10 LD_(50),540 mg/kg)、雌性CF单独染毒组(1/10 LD_(50),112 mg/kg)、雌性DOP(1/10 LD_(50),540 mg/kg)+CF(1/10 LD_(50),112 mg/kg)联合染毒组,雄性也做同样分组及处理,每组5只。采用灌胃方式连续染毒15 d,每天1次。测定肝脏组织中乳酸脱氢酶(LDH)、ATP酶活力。结果与对照组比较,DOP组、CF组和联合染毒组小鼠肝脏器系数、LDH活力均升高,Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活力均降低,差异有统计学意义(P0.05)。雄性联合染毒组肝脏器系数均高于DOP单独染毒组、CF单独染毒组,差异有统计学意义(P0.05);雌性联合染毒组与DOP单独染毒组的肝脏器系数无明显差异(P0.05),高于CF单独染毒组,差异有统计学意义(P0.05)。与DOP单独染毒组比较,联合染毒组雌性小鼠的LDH、Na~+-K~+-ATP酶活力均无明显差异(P0.05),Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活力升高,差异有统计学意义(P0.05);与CF单独染毒组比较,联合染毒组雌性小鼠LDH活力升高,Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活力下降,差异均有统计学意义(P0.05),Na~+-K~+-ATP酶活力无明显差异(P0.05)。与DOP单独染毒组比较,联合染毒组雄性小鼠的Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP、Na~+-K~+-ATP酶活力均无明显差异(P0.05),LDH酶活力升高,差异有统计学意义(P0.05);与CF单独染毒组比较,联合染毒组雄性小鼠的LDH活力升高,Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶活力下降,差异均有统计学意义(P0.05)。雄性联合染毒对肝脏器系数的影响尚未表现出联合作用(P0.05),其他各联合组均存在联合作用(P0.05),表现为拮抗作用。结论DOP和CF联合染毒可能对小鼠肝脏系统的无氧糖酵解和能量代谢产生抑制作用。     

溴苯腈急性中毒小鼠骨骼肌能量代谢变化及二巯丙磺钠的干预作用

目的探讨溴苯腈急性中毒对骨骼肌能量代谢的影响及二巯丙磺钠(Na-DMPS)的保护效应。方法选取ICR小鼠78只,随机分成3组:正常对照组(6只)、急性中毒组(36只)和Na-DMPS保护组(36只);后两组均分为高剂量组和低剂量组两组,取中毒后0.5、3.0、6.0 h等各点检测骨骼肌腺苷酸水平变化(6只),并进行统计分析。结果①急性中毒组中,低剂量组小鼠骨骼肌一磷酸腺苷(AMP)在中毒后0.5 h高于正常对照组;高剂量组二磷酸腺苷(ADP)在中毒后0.5、3.0、6.0 h高于正常对照组,AMP在中毒后6.0 h高于正常对照组(P<0.05)。②Na-DMPS保护组中,低剂量组小鼠骨骼肌ADP低于急性中毒组,AMP低于急性中毒组(P<0.05);高剂量组小鼠骨骼肌三磷酸腺苷(ATP)高于急性中毒组,ADP低于急性中毒组,AMP低于急性中毒组(P<0.01)。结论①溴苯腈急性中毒可影响骨骼肌能量代谢,但并不是其骨骼肌损伤的主要原因;②Na-DMPS保护可改善骨骼肌能量代谢。     

高效氯氰菊酯对小鼠肝脏能量代谢的影响及黄芪多糖的保护作用

目的研究高效氯氰菊酯(β-CP)对小鼠肝脏能量代谢的影响及黄芪多糖(APS)的保护作用。方法将50只雄性ICR小鼠随机分为5组,包括对照组(玉米油)、染毒组(β-CP 40 mg/kg)及不同剂量的保护组(在β-CP 40 mg/kg基础上分别加上100、200和300 mg/kg APS),连续灌胃染毒10 d。测定血清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)的活力及肝脏组织匀浆中Na~+,K~+-ATPase、Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase和乳酸脱氢酶(LDH)的活力。结果与对照组比较,β-CP染毒组AST、ALT活力均显著升高,Na~+,K~+-ATPase、Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase、LDH活力均有所降低,差异均有统计学意义(P0.05);与染毒组比较,各剂量保护组AST、ALT活力均有所降低,Na~+,K~+-ATPase、Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase、LDH活力均有所升高,其中,各剂量保护组AST、ALT、Na~+K~+-ATPase、Ca~(2+)Mg~(2+)-ATPase活力及200 mg/kg剂量APS保护组LDH活力与染毒组比较,差异均有统计学意义(P0.05);各剂量保护组中200 mg/kg剂量保护组的Na~+,K~+-ATPase、Ca~(2+),Mg~(2+)-ATPase、LDH活力相对较高,更接近对照组水平。结论 40 mg/kg剂量β-CP对小鼠肝脏能量代谢有影响,APS对其具有保护作用,200 mg/kg剂量APS的保护作用较为明显。     

老年人纯收缩期高血压红细胞Na~+、Ca~(2+)转运特点及硝苯啶干预的研究

老年人纯收缩期高血压(Isolated systolic hypertension. ISH)发生机理不同于普通高血压病(Classical hypertension,CH)。为探讨ISH细胞离子转运的变化及特点,我们观察了硝苯碇治疗前后32例ISH患者(ISH组)、30例普通高血压病患者(CH组)红细胞膜Na~+泵活性、Na~+/H~+交换和~(45)Ca~(2+)内流等。结果显示,服硝苯啶治疗前,ISH组和CH组~(45)Ca~(2+)内流、Na~+/H~+交换增高,Na~+泵活性降低;ISH组红细胞~(45)Ca~(2+)内流、Na~+泵活性高于CH组,Na~+/H~+交换低于CH组;相关分析显示,ISH组Na~+转运、~(45)Ca~(2+)内流与血压无显著相关性,而CH红细胞~(45)Ca~(2+)内流与血压呈显著正相关。治疗后,ISH组和CH组Na~+、~(45)Ca~(2+)转运均有改善,其中CH组血压与Na~+泵变化有显著相关性。结果表明,ISH与CH在细胞膜离子转运方面存在差异,ISH异常主要表现在细胞Ca~(2+)内流增加,而在Na~+转运方面改变较CH少;CH则Na~+、Ca~(2+)转运均有明显异常。提示ISH细胞Ca~(2+)内流增加致大动脉硬化产生高血压;而CH患者Na~+转运异常导致Ca~(2+)内流增加,外周阻力增高产生高血压。Ca~(2+)拮抗剂治疗可部分纠正Na~+、Ca~(2+)转运异常,降低血压。这可能有助于ISH动脉硬化逆转。     

Oncolyn对衰老小鼠脑组织中ATP酶活性和神经生长因子的表达的影响

目的探讨衰老过程神经生长因子的表达和ATP酶的变化以及Oncolyn的调节作用。方法90只昆明种小鼠随机分为对照组、衰老组和Oncolyn组。应用D-半乳糖颈部皮肤注射复制衰老小鼠模型,同时经口给入Oncolyn70天,检测脑组织Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的水平,应用免疫组化的方法检测海马中NGF、BDNF的表达情况。结果与对照组比较,衰老组小鼠脑组织中Ca2+-Mg2+-ATPase和Na+-K+-ATPase由0.27,0.046(U/mg prot)下降到0.022和0.021(U/mg prot),差异有显著性(P<0.05),尤其以Ca2+-Mg2+-ATPase降低严重。而Oncolyn组的Ca2+-Mg2+-ATPase和Na+-K+-ATPase均高于衰老组(分别为0.056,0.117U/mg prot),以Na+-K+-ATPase提高较大。衰老小鼠海马组织中NGF、BDNF表达与对照组比较分别下降了48.28%和43.25%(P<0.05)。而应用Oncolyn干预后组NGF、BDNF表达均增加(分别增加了46.67%和163.64%)。结论Oncolyn在一定程度上可以通过增加ATP酶活性和提高神经生长因子表达来延缓衰老。     

混配农药对家兔诱发电位及脑组织ATP酶的影响

目的研究混配农药对家兔中枢神经系统功能的影响及其机制。方法将家兔随机分为混配农药染毒A组（丙溴磷与氰戊菊酯混配染毒组）、混配农药染毒B组（丙溴磷与灭多威？昆配染毒组）和1个对照组，每组6只。3个染毒组分别给予3种染毒剂量进行染毒，于染毒前后进行家兔体感染诱发电位（SEP）及染毒后大脑组织三磷酸腺苷（ATP）酶活力的测定。结果与对照组比较，2个混配农药染毒组的高剂量组染毒后SEP的N1、P1、N2波潜伏时均显著延长（P〈0．01），2个混配农药染毒组的高中剂量组染毒后的Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶的活力明显下降（P〈0．05。P〈0．01）。结论一定剂量的混配农药可导致家兔中枢神经系统功能的的改变，这种改变可能与大脑组织中N^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2^＋-ATP酶活力的下降有关．     

维生素E对大鼠肝线粒体酶活性的影响

目的观察维生素E（VE）补充对大鼠肝线粒体ATP酶和抗氧化酶活性的影响。方法Wistar大鼠随机分成4组，对照组、VE1、VE2和VE3干预组；对照组给予普通饲料，3个干预组均喂饲添加维生素E的饲料，剂量分别为335，1340，5025mg／kg饲料，喂养10周后，摘取肝脏提取线粒体，测定Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca2^＋-Mg^＋-ATP酶、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性及丙二醛（MDA）的含量。结果VE1组与对照组相比，SOD、GSH—Px、Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca2^＋-Mg2^＋-ATP酶活性显著升高（P〈0．05），MDA水平显著降低（P〈0．05）。VE2、VE3组与对照组相比未见改善。VE2、VE3和VE1组相比，SOD、GSH—Px、Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca2^＋-Mg^＋-ATP酶活性显著降低（P〈0．05），MDA水平显著升高（P〈0．05）。结论补充适量VE（335mg／kg）能显著增强大鼠肝线粒体ATP酶活性及氧化能力；较高剂量VE；（1340，5025mg／kg）组未能改善大鼠肝线粒体ATP酶活性及抗氧化能力。     

人参茎叶总皂甙抗疲劳作用的体内实验研究

目的确定人参茎叶总皂甙抗疲劳作用的有效剂量,探讨人参茎叶总皂甙抗疲劳的作用机制。方法健康成年雄性SD大鼠每日灌胃给予人参茎叶总皂甙水溶液,剂量分别为50、150、250mg/kg,另设未处理组和模型对照组分别灌胃等量蒸馏水,连续30天,于末次灌胃30min后,对大鼠进行力竭游泳实验,测定其力竭游泳时间、肌糖原、肝糖原、肝细胞超氧化物歧化酶(SOD)、肝细胞丙二醛(MDA)、红细胞膜钠-钾三磷酸腺苷酶(Na+-K+-ATP酶)和钙-镁三磷酸腺苷酶(Ca2+-Mg2+-ATP酶)、肌细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)水平。结果力竭游泳实验后人参皂甙中、高剂量组大鼠体重高于模型对照组(P<0.05);模型对照组的部分脏器系数(如脑体比、肾体比、肾上腺系数、胸腺系数)与其它组的相比差异有显著性(P<0.05);高剂量组大鼠力竭游泳时间大于模型对照组(P<0.05);未处理组、中剂量组及高剂量组肝细胞含量大于模型对照组和低剂量组(P<0.05),且肝细胞MDA含量小于模型对照组和低剂量组(P<0.01);未处理组和高剂量组大鼠红细胞膜(Na+-K+-ATP酶)酶活性大于模型对照组(P<0.05),而各组大鼠红细胞膜(Ca2+-Mg2+-ATP酶)酶水平呈趋势性增高,但差异无显著性(P>0.05);模型对照组大鼠肝糖原、肌糖原及肌细胞SDH含量均低于未处理组和高剂量组(P<0.05)。结论人参茎叶总皂甙可以提高大鼠对疲劳运动的耐受力,从而发挥抵抗疲劳的作用。     

右美沙芬和利鲁唑对甲基汞染毒大鼠神经毒性的影响

目的研究右美沙芬(dextromethorphan,DM)和利鲁唑(riluzole)对甲基汞染毒大鼠神经毒性的影响。方法将健康清洁级Wistar大鼠28只按体重随机分为对照组、氯化甲基汞组、右美沙芬+氯化甲基汞组、利鲁唑+氯化甲基汞组,每组7只。对照组和氯化甲基汞组皮下注射生理盐水溶液,右美沙芬+氯化甲基汞组和利鲁唑+氯化甲基汞组分别皮下注射13.5μmol/kg右美沙芬、21.35μmol/kg利鲁唑。注射2h后,对照组腹腔注射生理盐水,氯化甲基汞组、右美沙芬+氯化甲基汞组、利鲁唑+氯化甲基汞组腹腔注射氯化甲基汞溶液12.0μmol/kg,注射容量均为5ml/kg。连续进行4周,每周5天,每天染毒氯化甲基汞1次,每周一、三、五染毒右美沙芬、利鲁唑。测定大脑皮质中汞(Hg)、谷氨酰胺(Gln)、谷氨酸(Glu)含量以及小脑中琥珀酸脱氢酶(SDH)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力。结果与对照组相比,氯化甲基汞组大脑皮质中Hg、Glu含量上升,Gln含量降低,小脑中SDH和Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活力降低,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。与氯化甲基汞组相比,右美沙芬+氯化甲基汞组和利鲁唑+氯化甲基汞组大脑皮质Hg、Glu含量降低,Gln含量升高,SDH、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活力升高,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论甲基汞可扰乱谷氨酸-谷氨酰胺循环,右美沙芬和利鲁唑对甲基汞神经毒性具有一定的拮抗作用。     

马齿苋的抗低氧作用及其机制研究

目的观察不同浓度马齿苋水提液对低氧小鼠的保护作用及其机制.方法以生理盐水和人参总皂苷为对照,观察不同浓度马齿苋水提液对密闭低氧条件下小鼠存活时间的影响,采用生物化学方法测定丙酮酸激酶（PK）和磷酸果糖激酶（PEK）活性,荧光素酶法测定ATP含量,定磷法测定Na＋,K＋-ATP酶活性,分光光度法测定乳酸含量,2,4二硝基苯肼比色法测定乳酸脱氢酶（LDH）活性.结果 （1）0.5,1.0,2.0g/ml 3种浓度的马齿苋水提液分别延长密闭低氧小鼠的生存时间24%,36.5%和27.4%;（2）1g/ml马齿苋水提液可明显增强低氧小鼠心、脑细胞PK、PEK活性,缓解细胞内ATP含量下降幅度,提高Na＋,K＋-ATP、Ca2＋,Mg2＋-ATP和LDH等酶的活性.结论马齿苋水提液可提高小鼠耐低氧能力,机制之一可能是其促进低氧小鼠无氧酵解关键酶的活性,进而缓解因低氧引起能量代谢障碍所致的细胞损伤.     

烟酰胺对人皮肤黑素细胞黑素转运作用研究

目的 研究烟酰胺作用于人皮肤黑素细胞后,对黑素细胞中钙信号、细胞骨架的影响及其与黑素小体运动速率和分布的作用,并探讨其中的相互关系.方法 体外培养的人皮肤黑素细胞中分别加入0.00、0.05、0.25、1.25、6.25 mg/ml烟酰胺后,用荧光抗体染色法检测黑素细胞中游离钙离子浓度,以生化法测定细胞中钙泵活性,以Western Blot蛋白浓度测定法测定动力蛋白Dynein的表达水平,显微镜下观察活细胞中烟酰胺对黑素小体运动速率及黑素小体分布的影响.结果 烟酰胺对人皮肤黑素细胞中游离钙浓度影响显著,并有剂量.效应关系,y=76.4612-5.435x(r=0.97);细胞钙泵活性随烟酰胺浓度的增加而下降;细胞中动力蛋白表达随烟酰胺加入的浓度不同而改变;在烟酰胺浓度为0.05和25 mg/ml时,细胞功能正常的情况下,钙泵活性正常,能够调控细胞中的物质转运,而黑素细胞中Dynein表达却明显减少(P<0.05),而烟酰胺浓度为1.25mg/ml时,钙泵活性减弱(P<0.05),黑素细胞中动力蛋白Dynein的表达增加(P＜0.05).当烟酰胺作用浓度为0.25和1.25 mg/ml时,黑素细胞中黑素小体的运动速率明显增加(P<0.05),同时细胞中黑素小体密集度随烟酰胺浓度增加而下降.结论 烟酰胺参与黑素的转运过程并能加快黑素细胞中黑素小体的运动速率,显示烟酰胺对钙泵、细胞动力蛋白Dynein表达和黑素小体运动具有调控作用,作用浓度为一重要调节因素.

Abstract：

Objective To study the effects of nicotinamide on the human skin melanocytes and try to explore the potential mechanism of nicotinamide on the calcium signal transduction.cytoskeleton.Methods The primary cultured human skin melanocytes from foreskin were selected as the target cells in the present study.0.00,0.05,0.25,1.25 and 6.25 mg/ml nicotinamide were applied respectively.Western blot,fluorescent probes(Flu-3AM),flow cytometry analysis and time-lampse microscope digital skill were used to evaluate the effects of nicotinamide on melanosome motility and the melanosome distribution in melanocytes.Results The results showed that nicotinamide had a potential effect on regulating free calcium concentration in a dose-dependent manner(y=76.461 2-5.435x,r=0.97);The activity of Na~+-K~+-Ca~(2+)-ATPase was down regulated with the increasing concentration of nicotinamide.The expression of cellular dyrnein was also altered by nicotinamide;Na~+-K~+-Ca(2+)-ATPase activity was kept normal when given 0.05,0.25 mg/ml nicotinamide,while the dynein protein expression was inhibited(P＜0.05),Na~+-K~+-ca~(2+)-ATPase activity was decreased significantly when given 1.25 mg/nicotinamide(P<0.05),while the dynein protein expression was increascd (P<0.05).When treated with 0.25 mg/ml and 1.25 mg/concentration of nicotinamide,movement velocity in melanocytes was accelerated and the distribution characters of melanosomes were different among groups.Conclusion Nicotinamide may mediate the melanin transport in melanocytes in vitro.The concentration of nicotinamide plays a key role in the melanin regnladng path.Nicotinamide could be used as a regulator for melanin transport.     

魔芋多糖对小鼠瘦素和Na~+-K~+-ATP酶水平的影响

目的探讨魔芋多糖对高脂饮食小鼠血清瘦素和小肠粘膜Na+-K+-ATP酶水平的影响。方法将实验动物分为正常对照组、高脂对照组和高、中、低剂量魔芋多糖与高脂联合处理组共5个组,连续喂饲20天,用ELISA法测定血清瘦素水平,分光光度法测定小肠粘膜Na+-K+-ATP酶活性以及体重、体脂、血糖等指标。结果第10天高脂对照组的体重和餐后血糖为(31.3±2.11)g和(7.5±1.15)mmol/L,魔芋多糖高剂量组则为(28.0±2.06)g和(4.8±0.73)mmol/L。第20天高脂对照组的血清瘦素浓度和小肠粘膜Na+-K+与高脂联合处理-ATP酶活性为(1078.5±61.69)pg/ml和(16.2±1.48)μmolPi/(mg pro·h),魔芋多糖高剂量与高脂联合处理组则为(820.5±58.52)pg/ml和(11.2±1.10)μmolPi/(mgpro·h)。两组间各项指标差别均有显著性意义(P<0.05)。结论魔芋多糖能够降低高脂饮食小鼠餐后血糖、血清瘦素水平和小肠粘膜Na+-K+-ATP酶活性,抑制体重和体脂的增加。     

沙尘暴细颗粒物对大鼠肺泡巨噬细胞膜损伤

目的探讨扬沙和沙尘暴细颗粒物(PM2.5)对肺泡巨噬细胞(AM)的毒作用机制.方法于2004年3月采集甘肃省武威市和内蒙古包头市正常天气、扬沙天气和沙尘暴天气中大气PM2.5,并测定其质量浓度.以PM2 5悬液体外处理大鼠肺泡巨噬细胞4 h,通过四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率、定磷法检测质膜ATP酶活性、2,4-二硝基苯肼法和4-氨基安替比林法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和酸性磷酸酶(ACP)活性,并以荧光探针1-苯胺基-8-萘磺酸(ANS)和1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)为标记物检测细胞膜脂的流动性.结果与对照(生理盐水组)相比,扬沙和沙尘暴PM2.5样品可剂量依赖性地降低细胞存活率和质膜Ca2 Mg2 -ATP酶、Na K -ATP酶活性、增大细胞膜表层流动性,并使细胞质内LDH和ACP外渗;与正常天气样品相比,对上述指标的影响差异无统计学意义.结论扬沙和沙尘暴PM2.5可影响AM膜通透性和流动性,导致细胞死亡.由于沙尘天气时大气PM2.5质量浓度大大高于正常天气,其对健康危害作用也相应增大.     

砷中毒对小鼠脑细胞内钙离子浓度影响的研究

目的:探讨砷中毒导致脑细胞损伤的机制。方法:采用尾静脉注射亚砷酸钠建立中毒动物模型,以Fluo-3/AM为细胞内游离钙离子的荧光指示剂,用激光扫描共聚焦显微镜测定脑细胞内[Ca2+]i的含量变化,同时采用原子吸收分光光度计测定脑组织中砷(As)、用生化试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的活性水平。结果:实验组小鼠脑细胞内的平均荧光强度明显高于对照组,实验组为116.10±33.75,对照组为42.78±22.66(P<0.001);实验组小鼠脑组织中As含量、MDA水平明显高于对照组,而SOD水平则低于对照组,两组差异有显著性意义(P<0.05)。结论:砷可增加小鼠脑细胞内的游离钙离子浓度,提示脑细胞内钙超载可能是其致脑细胞损伤的分子机制之一。