外周神经损伤对脊髓背角与中枢-外周移行区星形胶质细胞反应的影响

目的 应用免疫组化技术及电镜观察外周神经损伤后脊髓背角中枢--外周移行区星形胶质细胞反应。方法 51只成年wistar大鼠随机分为3组：A组（n=7）正常对照组;B组（n=24）背根压榨伤组;C组（n=20）坐骨神经压榨伤组。损伤组按存活期不同各分为4个亚组,每亚组5例,大鼠分别于伤后3天、2周、1月和2月处死取材。A组、B组3天、2月时相点各取2例用于电镜标本制作。免疫组化染色观察L5脊髓背角及中枢-外周移行区胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）的表达,电镜观察中枢-外周移行区星形胶质细胞反应。结果（1）背根和坐骨神经损伤可引起脊髓背角GFAP的显著表达,其中后者的GFAP表达随时间延长而减弱,而前者整个观察期持续高水平表达;（2）坐骨神经损伤不引起中枢-外周移行区GFAP的表达增强,但背根损伤可导致该区域GFAP的显著表达且持续整个观察期;（3）超微结构观察示背根压榨伤后中枢-外周移行区星形胶质细胞突起大量增生,占据了背根传入纤维的径路。结论 外周神经损伤引起的脊髓背角及中枢-外周移行区的反应性胶质化可能是背根再生不能重建脊髓和外周联系的重要原因。     

加味桃红四物汤敷脐结合艾灸治疗运动员原发性痛经的临床研究北大核心CSCD

目的:观察加味桃红四物汤敷脐结合艾灸治疗运动员原发性痛经的临床疗效,为临床开展此疗法提供理论依据。方法:选取60例原发性痛经运动员,采用随机数字表方法分为中药+艾灸组(加味桃红四物汤敷脐+艾灸疗法)、中药组(加味桃红四物汤敷脐)和艾灸组(艾灸疗法),以上3种治疗方法均于经前5天至月经来潮第2天,每天1次,连续治疗3个月,观察治疗前、治疗后及治疗后3个月3组患者痛经症状评分、疼痛程度评分及子宫弓动脉搏动指数(PI)和阻力指数(RI)的变化,并判定各组临床疗效计算有效率和治愈率。结果:1.三组治疗后的痛经症状评分均显著低于治疗前(P<0.05),治疗后3个月各组评分均显著高于治疗后(P<0.05),但仍显著低于治疗前(P<0.05);中药+艾灸组在治疗后和治疗后3个月的评分显著低于艾灸组(P<0.05),但与中药组间并无显著性差异。2.三组治疗后的疼痛程度评分均显著低于治疗前(P<0.05),治疗后3个月各组评分均显著高于治疗后(P<0.05),但仍显著低于治疗前(P<0.05);中药+艾灸组在治疗后和治疗后3个月的评分均显著低于艾灸组和中药组(P<0.05)。3.与治疗前比较,中药+艾灸组和艾灸组在治疗后RI值和PI值均有显著下降(P<0.05),中药组经治疗后仅有PI值有显著下降(P<0.05);治疗后3个月,三组的RI值和PI值均显著高于治疗后(P<0.05),但仍显著低于治疗前(P<0.05)。无论是治疗后还是治疗后3个月,中药+艾灸组的RI值和PI值均显著低于其他两组(P<0.05)。4.治疗后,中药+艾灸组有效率为100%,中药组83.33%,艾灸组76.47%;中药+艾灸组治愈率为31.25%,中药组5.56%,艾灸组5.88%,中药+艾灸组的治愈率优于其他两组(P<0.05),有效率无显著性差别。结论:加味桃红四物汤敷脐结合艾灸疗法能显著改善痛经症状,有效缓解疼痛程度,显著降低子宫弓动脉搏动指数和阻力指数,改善子宫微循环,提高有效率和治愈率。近期疗效肯定。此疗法疗效确切,操作简便,适合在运动队中推广。     

四物汤不同部位对辐射小鼠外周血象的影响

目的观察四物汤不同分离部位对3.5 Gy照射小鼠外周血象的影响,发现四物汤补血作用的活性部位。方法60只小鼠常规饲养适应环境后,采用60Co-γ射线3.5 Gy全身一次照射,照射后立即给予四物汤不同分离部位,连续给药7 d,在照射后1、3、5、7、9、11、13、15、17、19 d检测其对外周血象的影响。结果与模型对照组相比,四物汤不同洗脱分离部位在不同时间点可以升高辐射致血虚证小鼠外周血白细胞、红细胞和血小板,其中水洗脱部分对辐射致血虚证小鼠补血效果较佳。结论四物汤补血作用的主要物质为多糖、单糖等大极性成分。     

“四物汤”对辐射危害的辅助保护作用研究

目的 研究传统方剂“四物汤”对急性辐射损伤的辅助保护作用.方法 根据国家食品药品监督管理总局对抗辐射保健品的规定进行功效评价,包括外周血白细胞数、股骨有核细胞数;检测了小鼠30 d存活率.结果 照射后3d与照射前1d比较,对照组的白细胞数、红细胞数和血红蛋白量均明显降低;照射后14d,与对照组比较,低剂量给药组(0.5 g/kg)的白细胞数、红细胞数及血小板数均有升高,差异有统计学意义;小鼠30 d存活率的实验表明,与对照组比较,3个给药组均延长了小鼠的存活天数.结论 笔者制备的“四物汤”提取液在推荐剂量对辐射损伤具有辅助保护作用.     

间歇性热量限制对辐射所致认知障碍的保护作用

目的探讨间歇性热量限制对辐射所致小鼠认知功能障碍的作用及可能机制。方法将36只7周龄c57BL/6J雄性小鼠按随机数表法分为假辐射+随意饮食组(sham-irradiation and ad libitum,Sham-AL)、辐射+随意饮食组(irradiation and ad libitum,IR-AL)、辐射+间歇性热量限制组(irradiation and intermittent fasting,IR-IF),每组12只。采用新旧事物识别实验检测各组小鼠认知功能;Western blot分别检测小鼠海马自噬相关基因5(ATG5)、微管相关蛋白1轻链3-II(LC3II)、自噬接头蛋白P62、线粒体阴离子通道蛋白1(VDAC1)、白介素1(IL-1β)、突触囊泡膜蛋白(SYP)、突触蛋白1(SYN-1)、突触后致密物-95(PSD95);免疫荧光法确定VDAC1在小鼠海马中定位。结果与Sham-AL组新事物识别指数(30.02±9.05)相比,IR-AL组小鼠新事物识别指数(-22.45±16.76)下降,两组比较差异有统计学意义(t=3.03,P<0.05)。与Sham-AL组相比,IR-AL组自噬标记蛋白ATG5和LC3II表达下降,抗自噬蛋白P62表达升高,VDAC1蛋白表达下降,IL-1β蛋白表达上升,SYP、SYN-1、PSD95蛋白表达降低(t=2.49、2.19、2.40、3.47、2.87、2.25、2.17、2.31,P<0.05)。与IR-AL组新事物识别指数(-22.45±16.76)相比,IR-IF组小鼠新事物识别指数(21.22±5.62)上升,两组比较差异有统计学意义(t=2.70,P<0.05)。与IR-AL组相比,IR-IF组自噬标记蛋白ATG5和LC3II表达上升,抗自噬蛋白P62表达降低,VDAC1蛋白表达升高,IL-1β蛋白表达下降,SYP、SYN-1、PSD95蛋白表达升高(t=2.88、2.71、3.18、3.18、3.11、3.30、3.35、2.53,P<0.05)。免疫荧光显示,VDAC1与离子钙接头蛋白分子1(IBA-1,小胶质细胞标记物)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP,星形胶质细胞标记物)共表达,但与神经元核抗原蛋白(NEUN,神经元标记物)不共表达。结论间歇性热量限制可改善小鼠放射性认知功能障碍,其机制可能与上调海马区VDAC1蛋白表达、诱导自噬发生,最终抑制炎症因子释放和保护神经元突触可塑性有关.     

加减桃红四物汤联合湿润烧伤膏对带状疱疹后遗神经痛患者临床疗效、生活质量及情绪的影响研究

目的研究探讨加减桃红四物汤联合湿润烧伤膏对带状疱疹后遗神经痛患者临床疗效、生活质量及情绪的影响。方法按照随机数表法将2017年5月至2018年5月黑龙江中医药大学附属第一医院皮肤科门诊收治的90例带状疱疹后遗神经痛患者随机分为治疗组(45例患者参与本试验研究,最终完成全程试验者42例)和对照组(45例患者参与本试验研究,最终完成全程试验者43例),其中治疗组患者在口服加减桃红四物汤的同时外用湿润烧伤膏治疗,对照组患者单纯口服加减桃红四物汤治疗,对比观察两组患者的不良反应发生情况及治疗28 d后的局部疼痛程度、生活质量及焦虑程度。结果治疗过程中,两组患者均无不良反应及刺激性皮损发生,治疗前后血常规、尿常规、肝功能、肾功能、心电图等检查均未见明显异常;治疗28 d后,治疗组患者局部疼痛评分为(1.57±0.74)分、生活质量评分为(5. 99±2. 76)分、焦虑评分为(24. 71±10. 07)分,明显低于对照组患者的局部疼痛评分(3. 34±1.77)分、生活质量评分(12. 19±4. 92)分、焦虑评分(36.69±12.66)分,两组对比,P均0.01,差异具有统计学意义。结论加减桃红四物汤联合湿润烧伤膏治疗带状疱疹后遗神经痛,可有效缓解患者的局部疼痛及焦虑情绪,提高患者的生活质量,疗效显著,且无不良反应发生,安全性较高。     

大麻二酚对大鼠非酒精性脂肪肝的治疗作用及机制

目的 观察大麻二酚(CBD)对蛋氨酸/胆碱缺乏饲料(MCD)诱导的大鼠非酒精性脂肪肝(NASH)的治疗作用并探讨其分子机制.方法 63只成年雄性SD大鼠随机分为对照组(给予正常饲料)、MCD组(给予MCD喂养)和MCD+CBD组[给予MCD,同时给予2mg/(kg·d)CBD腹腔注射].10周后,组织染色法观察大鼠肝脏病理变化及纤维化情况,采用全自动生物化学分析仪检测血清丙氨酸转氨酶(AST)、天冬氨酸转氨酶(ALT)水平,生化试剂盒检测肝脏中胆固醇和甘油三酯水平,Western blotting法观察肝细胞自噬活性的变化.结果 MCD喂养的大鼠给予CBD后,肝脏的病理改变明显减轻(4.7±1.1 vs.2.2±0.5,P<0.05),血清ALT(214.5±54.1U/L vs.92.1±36.0U/L,P<0.05)和AST(175.9±55.2U/L vs.70.8±24.9U/L,P<0.05)水平明显下降,肝脏/体重比(%)降低(4.2±0.6 vs.3.1±0.6,P<0.05),肝脏中胆固醇(182.4±42.7mmol/mg protein vs.101.0±33.8mmol/mg protein,P<0.05)和甘油三酯(71.4±12.5mmol/mg protein vs.38.7±11.1mmol/mg protein,P<0.05)含量减少;肝脏的纤维化程度降低(1.4%±0.4%vs.0.8%±0.3%,P<0.05),Ⅰ型α1胶原(Col1A1)mRNA水平明显下降(2.9±0.4 vs.1.6±0.3,P<0.05).CBD治疗后,MCD大鼠肝脏中Ⅱ型微管相关蛋白1轻链3(LC3-Ⅱ)/LC3-Ⅰ比值增加(37.1±10.8 vs.71.2±17.1,P<0.05),可溶性死骨片1(p62)蛋白水平降低(202.4±40.9 vs.125.8±32.7,P<0.05).结论 CBD减轻了MCD诱导的大鼠NASH症状,CBD对肝细胞自噬流的促进可能是其肝脏保护作用的机制之一.     

高压氧对化疗相关外周神经痛的预防作用及其机制

目的:探讨高压氧可否预防化疗相关外周神经痛(CIPNP),同时,以脊髓大麻素受体(CBRs)为主要靶点,探讨其作用机制。方法:75只雄性SD大鼠按随机数字表法分为5组,即空白对照组、模型对照组、高压氧干预组、高压氧＋AM630组及高压氧＋AM251组,每组15只。CIPNP模型采取紫杉醇腹腔注射法建立,所有干预组从第1...     

靶肌肉注射甲钴胺对大鼠周围神经损伤再生的作用

目的　通过靶肌肉 (腓肠肌 )注射不同剂量的甲钴胺 ,观察其对大鼠坐骨神经损伤的再生作用 ,为临床肌肉局部注射甲钴胺促进周围神经再生探讨较佳的用药剂量和方法。　方法选用健康Wistar大鼠 30只 ,左侧坐骨神经横断后即刻行外膜缝合 ,制备大鼠坐骨神经损伤模型。随机分为A、B、C三组 ,每组 1 0只 ,A组注射甲钴胺 30 0 μg kg,B组注射甲钴胺 1 0 0 μg kg ,C组注射同体积的等渗盐水 1ml,术后靶肌肉注射 1次 d。术后第 4周、第 8周每组分别提取 5只大鼠 ,以左小腿三头肌湿重、光镜和电镜坐骨神经形态学观察并图像分析作为检测指标 ,分析不同剂量甲钴胺对大鼠坐骨神经损伤的影响。　结果　术后 4周左小腿三头肌湿重 ,A组为 (1 .36 7± 0 .0 1 2 )g ,B组为 (1 .1 6 4± 0 .0 1 1 )g,C组为 (0 .95 0± 0 .0 0 9)g ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;术后 8周 ,A组为 (2 .2 0 5± 0 .0 1 5 )g ,B组为 (1 .6 1 1± 0 .0 1 3)g ,C组为 (1 .2 30± 0 .0 1 4 )g ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。术后 4周和 8周行光镜和电镜观察 ,图像分析坐骨神经髓鞘的横截面积、壁厚度 ,A组优于B组 ,B组优于C组。　结论　靶肌肉注射甲钴胺可以促进周围神经的再生 ,高剂量的甲钴胺可以更好地发挥其对损伤神经的营养诱导作用 ,值     

卡络磺钠对脓毒症大鼠急性肺损伤的作用及机制

目的 探讨卡络磺钠对脓毒症大鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制.方法 125只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、脓毒症组及卡络磺钠低剂量组(8 mg/kg)、中剂量组(40 mg/kg)、高剂量组(80 mg/kg),每组25只.另取大鼠20只,随机分为自噬抑制剂组(3-MA组)与卡络磺钠中剂量(40 mg/kg)...     

四物汤有效成分配伍组方对电离辐射所致氧化损伤的防护作用

目的 观察四物汤有效成分配伍组方对电离辐射所致人淋巴母细胞AHH-1细胞氧化损伤的辐射防护作用,并初步探讨其作用机制。方法 4.0 Gy ⁶⁰Co γ射线单次照射AHH-1细胞,造成电离辐射损伤。观察不同浓度的四物汤有效成分配伍组方(果糖、阿魏酸、芍药苷、川芎嗪质量比为9 008:53:721:267)对于电离辐射损伤的AHH-1细胞活力、凋亡情况、活性氧(ROS)水平的影响,以及对pGL4-ARE报告基因载体的激活作用。结果 四物汤有效成分配伍组方在10 mg/L的浓度下抗辐射效果最为显著,可以减缓受照AHH-1细胞活力下降(t=-8.152,P<0.05),缓解早期细胞凋亡(t=12.777,P<0.05),降低ROS水平(t=3.465,P<0.05),诱导报告基因pGL4-ARE荧光表达倍数提高(t=-19.752,P<0.05)。结论 四物汤有效成分配伍组方具有体外抗辐射活性,可能通过激活Nrf2-Keap1-ARE抗氧化通路、降低辐射所致氧化损伤,从而发挥辐射防护作用。     

西维来司钠对高原颅脑损伤大鼠中性粒细胞弹性蛋白酶的影响及神经损伤的保护作用

目的探讨中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)对大鼠高原颅脑损伤的影响及NE抑制剂西维来司钠对高原颅脑损伤的神经保护作用。方法取雄性SD大鼠48只,随机分为6组。即平原对照组,平原颅脑创伤组,平原颅脑创伤+西维来司钠治疗组,高原对照组,高原颅脑创伤组,高原颅脑创伤+西维来司钠治疗组。创伤组按Feeney自由落体撞击法制作大鼠高原与平原颅脑损伤模型,对比观察高原与平原颅脑创伤前后以及给予西维来司钠治疗后血清NE浓度变化,并通过病理学观察西维来司钠治疗对高原颅脑损伤的神经保护作用。结果大鼠高原颅脑创伤前后NE浓度均明显高于平原颅脑创伤前后(P0.05),脑组织病理形态结果显示,高原大鼠颅脑创伤后立即给予NE抑制剂西维来司钠治疗,颅脑损伤程度较未治疗组明显减轻。结论NE是加重大鼠高原颅脑损伤后神经组织损伤的重要因素,西维来司钠治疗对高原颅脑损伤的神经组织具有明显的保护作用。     

红毛五加多糖对辐射损伤小鼠的保护作用及其机制

目的研究红毛五加多糖（AGP）对辐射损伤小鼠的保护作用及其机制。方法小鼠腹腔注射（ip）AGP125—250ms／kg，^60Coγ射线全身均匀照射，观察小鼠30d存活率，检测AGP对外周血WBC、PLT、网织红细胞数、骨髓有核细胞数、血清ALT、AST、SOD、全血GSH-PX活性、血清和肝MDA含量以及肝、脾DNA、RNA含量的影响。结果辐射损伤后小鼠体重减轻、脱毛明显、尾部出现多个出血斑，30d存活率明显降低；外周血WBC、PLT、网织红细胞数、骨髓有核细胞数明显减少，ALT、AST活性增强，SOD、GSH-PX活性降低，MDA含量增加，DNA、RNA含量减少。AGP可促进上述指标的恢复。结论AGP对辐射损伤小鼠有明显保护作用，其机理可能与抗氧化作用及减轻DNA、RNA损伤有关。     

microRNA-22对调控软骨细胞自噬的影响及其在骨关节炎发病中的作用机制

目的 探讨microRNA-22对软骨细胞自噬的影响及其在骨关节炎(OA)发病中作用机制。方法 原代培养人健康、OA软骨细胞,荧光定量PCR检测microRNA-22在健康、OA软骨细胞中的表达水平;Western blot检测健康、OA软骨细胞中自噬相关蛋白LC3B-Ⅱ、Ⅰ的表达水平;软骨细胞转染microRNA-22模拟物、抑制物,平板克隆形成实验检测microRNA-22对软骨细胞活性的影响,Western blot检测软骨细胞自噬相关蛋白LC3B-Ⅰ、LC3B-Ⅱ及Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)的表达水平。结果 荧光定量PCR检测结果显示,OA软骨细胞(14例)中microRNA-22表达含量(2.50±0.39)显著增高(P<0.01),约为健康软骨细胞(12例)(0.98±0.25)的2.5倍。Western blot检测结果显示,与健康软骨细胞相比,OA软骨细胞自噬相关蛋白LC3B的Ⅱ类亚型含量降低;OA软骨细胞(4例)LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值为1.25±0.13,健康软骨细胞(4例)LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值为1.85±0.21,差异具有统计学意义(P&...     

大鼠视神经损伤一氧化氮合酶的分布及其意义

目的观察视神经损伤前后一氧化氮合酶（NOS）的分布,探讨一氧化氮（NO）在视神经损伤中的变化。方法采用大鼠球后视神经横断伤及钳夹伤模型,利用组化NADPH-黄递酶法,于术后1、3、7、14天检测视神经NOS的分布。结果NOS正常情况分布于视神经鞘膜、神经胶质细胞、血管内皮细胞,损伤后神经胶质细胞NOS活性增加,同时局部浸润的炎性细胞也表现出NOS活性。结论视神经损伤NOS的活性增高,提示NO在视神经损伤的病理生理过程中起一定的作用,可能介导了视神经损伤的继发性损害。