miR-149-5p靶向FGF21对大鼠心肌细胞的缺氧/复氧损伤的促进作用

目的 探究miR-149-5p与成纤维细胞生长因子21(FGF21)的靶向关系,及其对大鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响。方法 将10只C56BL/6J雄性小鼠构建缺血再灌注(I/R)模型,qRT-PCR法检测I/R小鼠心脏组织中miR-149-5p表达水平的变化。将培养至生长对数期的H9c2大鼠心肌细胞分为对照组、H/R组、H/R+miR-149-5pinhibitor组、H/R+miR-149-5p NC组、H/R+miR-149-5p mimics组、H/R+miR-149-5p mimics+FGF21组,并诱导H/R模型及转染处理。ELISA法检测H9c2细胞中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的活性;MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡情况;qRT-PCR检测细胞中miR-149-5p的表达水平;Western blotting检测Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3、FGF21蛋白的表达水平;双荧光素酶测定miR-149-5p与FGF21的靶向关系。结果 与假手术组比较,I/R小鼠心脏组织中miR-149-5p表达水平明显升高(P&l...     

创伤性脑损伤患者高压氧治疗后血清miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p水平及其与预后的关系

目的:探讨创伤性脑损伤患者高压氧治疗后血清miR-3195、miR-328-5p和miR-6867-5p水平及其与预后的关系。方法:选取2018年5月至2020年8月在山西医科大学第一医院就诊的124例创伤性脑损伤患者作为研究对象,根据患病后6个月患者的格拉斯哥预后评分(GOS),将其分为预后良好组( n＝...     

miR-218-5p抑制NRAS表达调控非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡

目的 探究miR-218-5p靶向调控NRAS基因表达在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）细胞增殖和凋亡中的作用及其机制。方法 qRT-PCR和Western blot分别检测组织和细胞中miR-218-5p和NRAS的表达。取NSCLC细胞A549进行分组和转染：Blank组、NC组、miR-218-5p mimic组、miR-218-5p inhibitor组、si-NRAS组、oe-NRAS组、miR-218-5pmimic+oe-NC组和miR-218-5pmimic+oe-NRAS组。荧光素酶报告实验验证miR-218-5p与NRAS基因的靶向关系。MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 miR-218-5p在NSCLC组织及NSCLC细胞株中呈低表达,而NRAS呈高表达（均P<0.05）。与Blank组、NC组比较,miR-218-5p mimic组NSCLC细胞增殖活力降低,凋亡率上升（均P<0.05）;miR-218-5p inhibitor组NSCLC细胞增殖活力增高,凋亡率下降（均P<0...     

放疗对血清miR-150-5p和miR-23a-3p表达水平的影响

目的 通过采集肿瘤患者放疗前后外周血,探讨照射对人外周血血清miR-150-5p、miR-23a-3p表达的影响,以期为寻找辐射生物标志物提供科学依据。方法 以2021年10月至2022年3月63例行放疗的肿瘤患者为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法,检测患者放疗前后外周血血清miR-150-5p与miR-23a-3p的相对表达水平。比较两种miRNAs放疗前后在患者外周血血清中的差异表达变化,分析其与肿瘤类型等因素的关系。结果 放疗后,患者外周血血清miR-150-5p与miR-23a-3p的相对表达量明显低于放疗前(t=4.97,Z=-2.77,P<0.05)。不同的肿瘤类型中,乳腺癌、食管癌和其他消化道肿瘤患者放疗后miR-150-5p的相对表达量降低(t=3.47、2.47、2.87,P<0.05),消化道肿瘤患者放疗后miR-23a-3p相对表达量下降(Z=-1.99,P<0.05)。在放疗前、后miR-150-5p的表达改变均不受性别、年龄、化疗和肿瘤类型等因素影响(P>0.05),而miR-23a-3p的表达改变在放疗后受性别、年龄和化疗等因素影响(t=2.04、 -3.34、-2.29,P<0.05)。结论 放疗可影响肿瘤患者血清中miR-150-5p的表达,其有作为辐射生物学标志物的潜力。     

尿液miR-17-5p检测对膀胱癌的诊断价值

目的探讨膀胱癌患者尿液中微小核糖核酸17—5p（miR-17-5p）表达及其诊断价值。方法运用荧光定量PCR检测miR-17-5p在膀胱癌患者尿液中的表达水平,采用△△CT方法计算膀胱癌患者与正常人尿液中miR-17．5p表达量的比值,结合术后病理参数,统计分析miR-17-5p与临床病理资料的相关性。结果膀胱癌患者尿液中miR-17-5p表达较正常人明显升高。26例膀胱癌患者中18例（69．2％）的miR-17-5p表达较正常人显著升高,且与肿瘤大小和恶性程度相关,肿瘤越大、恶性程度越高,尿液中miR-17-5p的表达量越高。结论尿液中高表达miR-17—5p可能成为诊断膀胱癌的重要标志物,并与膀胱癌的临床病理密切相关,可能对膀胱癌的诊断提供新的思路。     

miR-138-5p通过调控Survivin表达对食管鳞癌细胞活性的影响

目的 探究miR-138-5p通过调控Survivin表达对食管鳞癌细胞活性的影响。方法 将实验分为W组（无转染组）、C组（食管鳞癌细胞转染NC组）、Z组（转染miR-138-5p组）。RT-PCR检测Survivin、miR-138-5p水平;Western blot检测Notch1、HIF-1α、MMP-9的表达;Transwell小室测迁移能力;CCK-8检测增殖能力;流式细胞仪检测凋亡情况;双荧光素酶报告基因检测miR-138-5p与Survivin靶向关系。结果 miR-138-5p在食管鳞癌组织中的水平低于癌旁组织（P<0.05）;食管鳞癌组织中Survivin水平较癌旁组织高（P<0.05）。miR-138-5p、Survivin在W组与C组中的水平较为接近（P>0.05）;与C组相比,Z组miR-138-5p的水平有所上升、Survivin水平有所下降（P<0.05）,由此可看出,miR-138-5p转染成功。W组与C组中Notch1、HIF-1α、MMP-9水平较为接近（P>0.05）;与C组相比,Z组中Notch1水平有所升高、HIF-1α、MMP-9水平有所下降（P<0.05）。W组食管鳞癌细胞迁移数量（282.67±27.65）与C组细胞迁移数量（279.31±28.22）相差较小（P>0.05）;与C组相比,Z组的迁移数量（76.57±6.71）有所降低（P<0.05）。W组与C组在各时间点的OD值较为接近（P>0.05）;Z组在各时间点的OD值均较W组与C组低（P<0.05）。W组食管鳞癌细胞凋亡率（2.47±0.11）%与C组食管鳞癌细胞凋亡率（2.45±0.13）%较为接近（P>0.05）;Z组食管鳞癌细胞凋亡率（13.32±1.23）%高于W组与C组（P<0.05）。双荧光素梅报告基因检测实验结果显示Survivin′-UTR-WT在miR-NC组表达水平为（0.79±0.09）、miR-138-5p组表达水平为（0.59±0.07）,组间比较差异有统计学意义（P＜0.001）;Survivin′-UTR-MUT在miR-NC组（0.91±0.11）及miR-138-5p组（1.02±0.12）表达无显著差异（P＞0.05）。与食管癌组比较,miR-138-5p组大鼠移植瘤的瘤体积、瘤质量降低,抑瘤率升高（P<0.05）。结论 miR-138-5p可通过降低Survivin的表达,抑制食管鳞癌细胞的增殖及迁移,并促进其凋亡。     

下肢动脉硬化闭塞症患者介入治疗后血清miR-342-5p水平及其意义

【摘要】 目的 探讨下肢动脉硬化闭塞症患者介入治疗后血清miR-342-5p水平及其意义。方法 选取2015年3月至2018年3月甘肃省中医院诊治的195例下肢动脉硬化闭塞症患者作为研究对象。根据患者预后情况,分为预后良好组（n=160）和预后不良组（n=35）。检测介入治疗前后患者血清miR-342-5p相对表达,分析其与预后的关系。结果 介入治疗后两组患者血清miR-342-5p相对表达均降低,预后良好组降低幅度高于预后不良组（P＜0.05）。Logistic多因素回归分析结果显示,伴糖尿病、伴高脂血症、吸烟史、泛大西洋学会联盟（TASC）分型、C反应蛋白（CRP）、miR-342-5p与下肢动脉硬化闭塞症患者介入治疗预后密切相关。二元回归分析显示,模型B评估介入治疗预后曲线下面积（AUC）高于miR-342-5p和模型A,差异均有显著统计学意义（Z=2.683,P=0.007;Z=4.624,P＜0.001）。结论 miR-342-5p与介入治疗后下肢动脉硬化闭塞症患者预后密切相关,检测血清miR-342-5p相对表达有助于评估患者介预后。     

p53在调节细胞周期阻滞和细胞凋亡中的作用及其机制

p53作为抑癌基因,在各种应激情况下(包括电离辐射所致DNA损伤、核苷酸缺失、低氧或癌基因激活)调控细胞周期进程和细胞凋亡过程。本文综述了p53及其下游分子在细胞周期和细胞凋亡中的作用,在此基础上探讨p53在选择细胞周期阻滞和细胞凋亡中的影响因素。     

miR-125b-5p靶向ΔNp63α对角质形成细胞分化的影响及其机制

目的 探讨miR-125b-5p靶向ΔNp63α对角质形成细胞分化的影响及其机制.方法 用1.8 mmol/L氯化钙诱导角质形成细胞HaCaT,于氯化钙处理0、1、5、7 d,采用qRT-PCR检测miR-125b-5p、ΔNp63α、细胞角蛋白10( CK10 )、外皮蛋白( Inv )、谷氨酰胺转移酶1( TG1 ...     

miR-214-5p通过靶向调控PTEN的表达对破骨分化和骨质疏松的影响

 目的 探讨miR-214-5p通过靶向调控PTEN的表达对破骨分化和骨质疏松的影响。方法 选取2019-03至2020-05在空军军医大学唐都医院外科进行脊柱手术的骨质疏松患者20例(骨质疏松组),同时选取非骨质疏松症患者20例为对照组,抽取两组骨髓血。将miR-214-5pmimics(miR-214-5pmimics组)、miR-214-5p空质粒(miR-214-5pvector组)、shZFAS1载体(sh PTEN组)、shZFAS1空载体(sh vector组)转染到骨质疏松患者细胞,对照组细胞不进行任何转染处理。采用RT-qPCR 检测骨髓单个核细胞中的miR-214-5p和PTEN mRNA及 Raw264.7单核巨噬细胞中NFaTc1、MMP9、TRAP、CTSK的mRNA水平;通过TRAP染色检测TRAP染色的阳性率;通过Western blot 检测PTEN、NFATc1、AKT和PI3K蛋白水平。结果 骨质疏松组miR-214-5p水平的表达明显高于对照组(P＜0.001),骨质疏松组PTEN的表达显著低于对照组(P=0.009);miR-214-5pmimics组中TRAP表达阳性率明显高于对照组和miR-214-5p vector组(P＜0.001);sh PTEN组中TRAP表达阳性率明显高于对照组和sh vector组(P＜0.001);miR-214-5p mimics组中的NFaTc1、MMP9、TRAP和CTSK水平显著高于对照组(P<0.001);sh PTEN组中的NFaTc1、MMP9、TRAP和CTSK水平显著高于对照组(P<0.001);与miR-214-5p mimics组相比,miR-214-5pmimics+PTEN组中TRAP表达阳性率显著降低(P＜0.001)。结论 骨质疏松症患者的骨髓单个核细胞中miR-214-5p表达上调,miR-214-5p可以调控PTEN表达,过表达miR-214-5p可能通过靶向PTEN促进破骨细胞分化。     

p53在调节细胞周期阻滞和细胞凋亡中的作用及其机制

p53作为抑癌基因，在各种应激情况下（包括电离辐射所致DNA损伤、核苷酸缺失、低氧或癌基因激活）调控细胞周期进程和细胞凋亡过程。本综述了p53及其下游分子在细胞周期和细胞凋亡中的作用，在此基础上探讨p53在选择细胞周期阻滞和细胞凋亡中的影响因素。     

miR-7-5p/FGFR4轴与胆囊癌患者预后的关系

目的 探究miR-7-5p/FGFR4轴与胆囊癌(gall bladder cancer,GBC)患者预后的关系.方法 选取武警特色医学中心2016-06至2018-06住院手术的GBC患者47例,收集胆囊癌组织(GBC组)及癌旁组织(PCLT组),选择同期良性胆囊疾病患者43例,收集良性胆囊组织(NC组),用RT-q...     

苯并芘体外对人胎盘滋养细胞增殖和凋亡的影响及其机制

 目的 探讨苯并芘对滋养细胞的损害作用及其机制。方法 通过观察苯并(a)芘[benzo(a)pyrene, BaP]体外对人胎盘滋养细胞系JEG-3细胞增殖和凋亡的影响,并观察对芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor, AhR)及其核转位蛋白(aryl hrdrocarbon receptor nuclear translocator, ARNT)表达的作用。将BaP染毒浓度分成四组:空白对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,应用不同浓度的BaP处理人胎盘滋养细胞系JEG-3细胞24 h,四甲基偶氮唑盐(3-(4,5-dimethyl-2-thiazoly)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide, MTT)比色法检测JEG-3细胞增殖率,流式细胞术检测JEG-3细胞凋亡率。实时荧光定量PCR方法检测细胞AhR和ARNT基因mRNA的表达,Western blot检测细胞AhR和ARNT蛋白表达。结果 细胞增殖率BaP中剂量组和BaP高剂量组低于空白对照组和BaP低剂量组(P＜0.05),凋亡率BaP中剂量组和BaP高剂量组高于空白对照组和BaP低剂量组(P＜0.05)。BaP低、中、高剂量组AhR基因mRNA表达(1.71±0.15、2.10±0.17和2.29±0.16)和ARNT基因mRNA表达(1.57±0.13、1.96±0.17和2.36±0.15)均高于空白对照组(1.41±0.13、1.28±0.11)(P＜0.05),呈浓度依赖; BaP低、中、高剂量组AhR蛋白表达(29.54±2.34、34.64±2.35和39.96±2.36)和ARNT蛋白表达(39.94±2.37、45.62±2.41和51.52±2.66)均高于对照组(23.22±2.31、34.28±2.24、39)(P＜0.05),呈浓度依赖。结论 BaP体外可抑制JEG-3细胞增殖和诱导细胞凋亡,激活AhR通路可能是BaP损伤胎盘滋养细胞的机制之一。     

高压氧调控miR-153-3p/Bcl-2轴缓解大鼠脑梗死的作用机制

目的:探究高压氧(HBO)调控miR-153-3p/Bcl-2轴缓解大鼠脑梗死的作用及其机制。方法:将32只Sprague-Dawley大鼠按照数字表法随机分为假手术组、模型组、HBO组和HBO+mimic组,每组8只。采用大脑中动脉闭塞(MCAO)方法构建大鼠脑梗死模型。再灌注48 h后,将大鼠安乐死,并收集海马和大...     

α-生育酚对TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的影响及机制

目的研究α-生育酚对TRAIL凋亡诱导作用的影响及机制。方法采用碘化丙啶（PI）染色和流式细胞仪检测胃癌细胞SGG7901和MKN28的细胞周期及凋亡率;Western blot检测凋亡相关基因NF-κB、bcl-2和Survivin的表达。结果单用TRAIL 300ng／ml作用24h,胃癌细胞SGC-7901和MKN28的凋亡率分别为11．80％和36．05％;单用廿生育酚60μmol／L作用24h,SCG-7901和MKN28细胞的凋亡率分别为8．5％和9．0%。α-生育酚60μmol／L与TRAIL 300ng／ml联用24h后,SGG-7901和MKN28细胞的凋亡率分别升高至48．1％和63．7％。Western blot显示TRAIL可使SGC-7901和MKN28细胞survivin及NF-κB表达下调,但对bcl-2的表达无影响;α-生育酚对bcl-2和survivin的表达无明显影响;TRAIL与α-生育酚联用可使细胞中NF-κB、survivin和bcl-2的表达均明显下调。结论α-生育酚可增强TRAIL对胃癌细胞的凋亡诱导能力,其机制可能与survivin、NF-κB和bcl-2的表达下调有关。     

甲氨蝶呤对妊娠小鼠滋养细胞bcl-2/bax表达的影响

目的探讨甲氨蝶呤（MTX）促进滋养细胞凋亡、抑制滋养细胞增生的机制。方法建立正常妊娠小鼠模型、MTX妊娠小鼠模型,运用免疫组化方法检测两组小鼠孕13 d滋养细胞bax、bcl-2的蛋白表达;同时运用原位细胞凋亡（TUNEL）检测两组小鼠孕13 d的滋养细胞凋亡情况。结果与正常妊娠模型小鼠相比,MTX妊娠模型小鼠滋养细胞bax蛋白表达较强（P〈0.01）,bcl-2蛋白表达减弱（P〈0.01）;MTX妊娠模型小鼠滋养细胞凋亡指数明显高于正常妊娠模型小鼠（P〈0.01）。结论 MTX抑制滋养细胞增生、促进滋养细胞凋亡,可能是通过调节bax、bcl-2蛋白的表达实现的。     

miR-302a在胃癌中表达及其对胃癌细胞凋亡与细胞周期影响

目的研究微小RNA-302a(miRNA-302a)在胃癌标本中的表达水平与临床病理特征的关系,以及其对胃癌细胞的凋亡和细胞周期调控作用,以探讨将miR-302a用于胃癌生物靶向治疗的可能性。方法采用实时PCR(RT-PCR)方法检测胃癌组织和正常胃黏膜组织中miR-302a的相对表达水平,并分析其与对应患者的临床病理资料的相关性。同时,采用RTPCR方法检测miR-302a在胃癌细胞株SGC-7901、MGC-803和BGC-823及正常胃黏膜细胞GES-1中的表达情况;选取miR-302a表达水平最低者为癌细胞,并转染过表达miR-302a的真核重组质粒p CDNA3.1-miR-302a;转染后,采用流式细胞仪Annexin V/PI双染法和PI单染法检测miR-302a对细胞凋亡和细胞周期的影响。结果胃癌组织中miR-302a的相对表达水平显著低于癌旁正常胃癌黏膜组织(P<0.05),且其表达与临床分期、病理分级和转移均有密切关系(P<0.05)。同时,在胃癌细胞SGC-7901、MGC-803和BGC-823中miR-302a的相对表达水平显著低于正常细胞GES-1中的表达(P<0.05),且在BGC-823中表达水平最低。p CDNA3.1-miR-302a质粒转染组与空白组和p CDNA3.1质粒转染组比较,miR-302a质粒转染后48 h后细胞凋亡水平显著升高,且G2/M期细胞数显著增高(P<0.05)。结论在胃癌组织和细胞中miR-302a均呈现低水平表达,当miR-302a过表达后,能显著增高胃癌细胞的凋亡水平并使细胞出现G2/M期阻滞,可能成为胃癌治疗的新靶点。     

p53 K370位乙酰化调控紫外线诱导的p53活化及细胞凋亡反应

目的探讨p53 K370位乙酰化修饰反应在紫外线B（UVB）诱导p53活化及细胞凋亡反应中的作用。方法体外培养野生型和p53基因缺陷型小鼠胚胎成纤维细胞（wt-MEFs和p53-/-MEFs）。以UVB为刺激源,双荧光素酶报告基因法分析wt-MEFs细胞中p53的转录诱导活化情况;Western印迹检测UVB诱导p53在K370位发生乙酰化修饰反应及p53总蛋白表达情况;构建p53点突变体K370R并在p53-/-MEFs细胞中比较UVB诱导wt-p53和p53 K370R的转录活化情况及野生型和突变体蛋白介导细胞凋亡反应的差异。结果 UVB刺激wt-MEFs细胞后p53转录激活活性呈剂量和时间依赖性明显上调;同样条件下UVB能够有效诱导p53在K370位发生乙酰化修饰反应;p53 K370位突变后并不影响UVB刺激作用下p53的蛋白质稳定性,但其转录激活活性显著下降;同时K370位突变后能够有效抑制UVB诱导的细胞凋亡反应。结论 p53 K370位乙酰化修饰反应在UVB诱导的p53活化及细胞凋亡反应中具有重要作用。