非小细胞肺癌EGFR和HER2基因状态及相关性

目的探讨EGFR和HER2基因变化在非小细胞肺癌发生发展中的作用及其二者相关性。方法采用PathVysion^TM探针试剂盒和LSI EGFR SpectrumOrange／CEP7 SpectrumGreen探针组合,对31例中国人非小细胞肺癌石蜡切片标本,其中腺癌20例、鳞癌2例、大细胞癌2例、细支气管肺泡癌4例、腺鳞癌3例,分别进行EGFR和HER2基因状态的检测,并统计分析二者之间的相关性。结果EGFR基因扩增者6例;EGFR基因无扩增的25例中4例为四体,5例为多体,EGFR基因拷贝数增加和基因扩增者共15例（15／31）。HER2基因扩增者2例;HER2基因无扩增的29例中4例为三体,1例为四体,9例为多体,HER2基因拷贝数增加和基因扩增者共16例（16／31）。同时为EGFR和HER2基因异常（包括基因扩增和拷贝数增高）者12例（12／31）,而且几乎都是临床Ⅲ期至Ⅳ期的患者。EGFR和HER2基因异常之间的相关性X^2Adj=7．3045,P确切=0．0069。结论EGFR或HER2基因扩增在非小细胞肺癌中的发生率较低,但基因拷贝数增加是较常发生的事件。EGFR和HER2异常有相关性,EGFR和HER2基因都参与了非小细胞肺癌的发生发展,EGFR和HER2二聚体是肺癌常见的异源二聚体形式,而且它们的相互作用可能与疾病进展有关。     

非小细胞肺癌中RET融合基因的研究进展

存在于1%~2%的非小细胞肺癌患者中的RET融合基因具有鲜明的临床病理学特征,且RET抑制剂对其治疗有效,提示RET融合基因已成为该类患者个体化分子靶向治疗的新靶点。本文将对RET融合基因的特点及其在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者中的表达和治疗的研究进展进行阐述。     

AEG-1 基因在NSCLC 中的表达及其临床病理意义

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中星型胶质细胞上调基因1(AEG-1)的表达及其临床意义。方法:选取本院心胸外科手术切除治疗的83 例NSCLC 患者的术后癌组织标本及20 例癌旁组织标本进行研究,采用免疫组化染色法检测两组AEG-1 蛋白的表达水平,并分析AEG-1 蛋白与NSCLC 患者的临床病理学关系。结果:AEG-1 NSCLC 组织中的AEG-1 蛋白高表达46 例(55.42%)显著高于癌旁组织的2 例(10.00%)(P<0.05);NSCLC 组织中的AEG-1 蛋白高表达与患者的T分期、N 分期及发生远处转移具有显著的相关性(P<0.05),与患者年龄、性别、分化程度关系不显著(P>0.05)。AEG-1 高表达NSCLC 患者的中位生存时间15.0 个月显著低于AEG-1 低表达患者的19.0 个月(log-rank 2 =4.19,P<0.05)。结论:NSCLC组织中AEG-1 基因表达上调,并且与患者的临床分期及远处转移有关。     

荧光原位杂交检测非小细胞肺癌EGFR基因拷贝数状况分析

目的 探讨非小细胞肺癌EGFR基因拷贝数状况的临床病理学意义.方法 采用LSI EGFR/CEP 7探针试剂盒对108例非小细胞肺癌石蜡包埋组织标本进行EGFR基因状况的检测,并分析EGFR基因拷贝数与患者临床病理学之间的关系.结果 在108例非小细胞肺癌病例中,64.8%病例判读为EGFR基因低基因拷贝数即FISH阴性,其中二体性21.3%、低度三体性18.5%、高度三体性13.9%、低度多体性11.1%.35.2%病例判读为EGFR基因高基因拷贝数即FISH阳性,其中高度多体性25.9%、基因扩增9.3%.除2例扩增病例(Ratio>2.4)外,所有三体性及多体性,7号染色体与EGFR基因的拷贝数出现一致性的增加,Ratio范围在1.12～1.54之间.EGFR基因状况或EGFR-FISH(-/+)与临床病理特征均无显著相关性.结论 EGFR基因拷贝数增加在非小细胞肺癌是较常发生的事件,可能参与肺癌的发生发展.     

KRAS G12C突变的非小细胞肺癌患者的基因突变谱及临床病理学特征的单中心回顾性研究

目的为了精准地筛选出携带KRAS G12C突变的非小细胞肺癌(NSCLC)患者, 并评估其临床病理学特征、预后影响因素及目前的治疗现状。方法回顾性筛查上海市胸科医院病理科2018年1月至2021年9月的19 410例NSCLC标本, 筛选经二代测序检测为KRAS基因突变的病例, 收集并分析这些病例的临床病理学特征和基因突变数据。结果共1 633例(8.4%)NSCLC病例携带KRAS基因突变, 其中G12C(468例, 28.7%)是最主要的突变亚型;该突变更常见于男性(414/468, 88.5%)、有吸烟史(308/468, 65.8%)、病理类型为肺浸润性腺癌(231/468, 49.4%)的患者。KRAS G12C突变型NSCLC最常见的共突变基因包括:TP53(52.4%, 245/468)、STK11(18.6%, 87/468)和ATM(13.2%, 62/468)。KRAS G12C突变型NSCLC相较于非G12C突变患者, PD-L1表达(≥1%)的比例显著升高[64.3%(90/140)比56.1%(193/344), P=0.014], 且接受免疫检查点抑制剂(I...     

延胡索酸水合酶缺陷型肾细胞癌中PD-L1表达及其临床病理免疫特征

目的探讨延胡索酸水合酶(FH)缺陷型肾细胞癌的细胞程序性死亡配体1(PD-L1)的表达情况、临床病理特征、免疫组织化学表达及分子特征, 探寻免疫治疗在FH缺陷型肾细胞癌中的应用前景。方法对福建医科大学附属第一医院2020年1月至2022年10月收集的6例FH缺陷型肾细胞癌的PD-L1表达情况、临床资料、组织学形态、免疫表型、二代测序基因检测进行总结并随访预后。结果患者均为男性, 年龄37～72岁, 平均年龄45.7岁。4例高级别FH缺陷型肾细胞癌病例均可见2种或2种以上的结构混杂存在, 以乳头状结构最常见, 还可见到腺管状、腺泡状、筛状、巢团状、囊性变、实性结构混杂存在, 癌细胞WHO/国际泌尿病理协会(ISUP)核分级为3～4级。2例低级别FH缺陷型肾细胞癌病例表现为巢团状、腺管状排列, 嗜酸性、絮状胞质及小的胞质内空泡。6例2-琥珀酸半胱氨酸(2SC)均为强阳性, 5例FH表达丢失、GATA3阳性, 4例高级别病例肿瘤浸润的CD4、CD8阳性的T淋巴细胞平均值分别是180.3/mm2、130.5/mm2, PD-L1联合阳性评分(CPS)分别是20、50、5、30, Ki-67阳性...     

外泌体PD-L1在非小细胞肺癌诊断和治疗上的研究进展

外泌体PD-L1(exoPD-L1)可由非小细胞肺癌中癌细胞分泌，参与肿瘤的发生发展。外泌体PD-L1的检测具有无创、稳定等优点，可早期诊断非小细胞肺癌、判断肿瘤分期。外泌体PD-L1与肿瘤组织PD-L1相关，可用于筛选免疫治疗优势人群。动态监测外泌体PD-L1表达水平可评估肺癌患者免疫治疗效果。抑制外泌体PD-L1可辅助免疫治疗，为肺癌晚期患者的免疫治疗提供了较佳的临床价值。     

非小细胞肺癌胸水细胞块ALK融合基因检测分析

目的：探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)胸水细胞块在间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合基因检测中的临床价值。方法：采用突变扩增系统PCR(ARMS-PCR)法检测215例NSCLC细胞块和404例NSCLC组织块中ALK基因的三类融合类型,并检测细胞块同时送检组织块的患者74例的一致性。结果：细胞块ALK基因融合阳性26例,阳性率12.09%(26/215);组织块ALK基因融合阳性25例,阳性率6.19%(25/404);74例有组织块对照的细胞块ALK融合基因结果一致性有67例,一致率达90.54%(67/74),其中细胞块ALK融合基因的阳性率14.86%(11/74),组织块阳性率18.92%(14/74)。结论：NSCLC胸水细胞块ALK融合基因的阳性率略高于组织块;有恶性胸水的NSCLC患者原发灶组织发生ALK融合基因阳性的概率较高。     

子宫内膜透明细胞癌分子分型临床应用及其与PD-L1表达的关系

目的探讨子宫内膜透明细胞癌(endometrial clear cell carcinoma,ECCC)分子分型的临床应用及其与PD-L1表达的关系。方法应用测序法检测15例ECCC根治手术标本中POLE突变情况,有突变者为POLE突变型;应用免疫组化法检测错配修复(mismatch repair,MMR)MLH1、MSH2、MSH6、PMS2蛋白表达,有表达缺失者为错配修复缺陷(mismatch repair-deficiency,MMR-D);免疫组化检测p53表达,将其分为p53突变型和p53野生型。应用免疫组化法检测PD-L1蛋白表达,比较不同分子分型的组间差异。结果15例ECCC中POLE突变型0例,MMR-D为5例,p53突变型5例,p53野生型5例。5例MMR-D者PD-L1均阳性。结论ECCC具有分子异质性,部分与子宫内膜样癌相似,部分与浆液性癌相似。PD-L1可以作为ECCC免疫治疗的重要靶标。     

p63基因在肺癌组织中的表达

目的研究肺鳞状细胞癌、腺癌、大细胞肺癌、小细胞肺癌以及淋巴结或肺内转移性肿瘤标本组织中p63基因的mRNA转录因子和蛋白表达水平,探讨p63基因表达与其定位在3q 27-q29区域改变的关系.方法采用cDNA微阵列技术同时检测72例不同病理组织学类型的原发性肺癌(包括鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌、小细胞癌)和肺癌肺内转移及淋巴结转移灶内的p63基因mRNA水平.另外,利用组织芯片技术构建150例原发性肺癌石蜡包埋标本组织芯片,采用免疫组织化学LSAB法检测p63基因蛋白表达情况.同时应用比较基因组杂交(CGH)技术对70例原发性肺癌标本进行了3号染色体长臂改变的分析.结果p63mRNA转录因子在肺鳞状细胞癌标本表达明显增强,与腺癌、大细胞癌、小细胞癌相比增多10倍以上.肺癌转移灶内p63基因mRNA表达水平明显高于其相对应的原发性灶,差异有统计学意义(P＜0.001).免疫组织化学染色结果显示肺鳞状细胞癌阳性表达率为94.64%;腺癌是1.79%;4例大细胞肺癌中2例为阳性染色;但所有小细胞肺癌标本免疫组织化学染色均为阴性.pT1分期肺癌的p63基因蛋白表达阳性率与pT2分期肺癌相比有统计学差异(P＜0.05).比较基因组杂交结果发现肺鳞状细胞癌3号染色体长臂27-29区域有显著的扩增,腺癌表现为缺失.鳞状细胞癌p63基因的表达增强与3q27-q29区域的显著扩增有明显正相关性(P＜0.000 1),说明定位于3号染色体长臂27-29区域的p63基因的拷贝有明显的扩增.结论p63mRNA转录因子和蛋白在肺鳞状细胞癌较其他肿瘤表达显著增高,转移灶高于原发灶;肺鳞癌p63表达增强与3号染色体长臂3q27-q29区域的扩增显著相关.     

尿路上皮癌429例HER2表达情况及临床病理学分析

目的探讨尿路上皮癌患者HER2表达情况与临床病理特征之间的关系。方法收集2019年1月至2022年6月四川大学华西医院诊断的429例尿路上皮癌, 通过免疫组织化学检测HER2、细胞角蛋白(CK)20、CK5/6的表达情况。HER2评价标准参照"中国尿路上皮癌人表皮生长因子受体2检测临床病理专家共识", HER2 2+及3+定义为HER2阳性。分析本组病例HER2表达与临床病理特征、分子分型之间的关系。结果 (1)本组病例共429例, 其中166例根治标本, 263例经尿道电切/局部整体切除标本。患者年龄范围31～93岁(平均年龄67.6岁, 中位年龄69.0岁), 男女比为2.9∶1.0。HER2总体阳性率为45.7%(196/429), 其中HER2 2+占比最多(172/429, 40.1%)。(2)经尿道电切标本中HER2阳性率为51.7%(136/263), 高于根治标本(36.1%, 60/166, P<0.05)。(3)膀胱尿路上皮癌HER2阳性率为49.1%(157/320), 高于上尿路尿路上皮癌(35.2%, 37/105, P<0.05)。(4)高级别尿...     

非小细胞肺癌MET表达及基因改变与PD-L1表达及免疫微环境的关系

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)MET表达及基因改变与程序性死亡分子配体1(PD-L1)表达及免疫微环境的关系。方法回顾性分析2019年1月—2020年12月医院收治的112例NSCLC患者,收集病理活检或手术切除组织标本。采用免疫组织化学染色法检测MET、PD-L1表达及CD8~+T细胞浸润水平;采用荧光原位杂交法检测MET基因状态;并分析MET表达及基因状态与临床病理特征、PD-L1表达及CD8~+T细胞浸润水平关系。结果 NSCLC组织MET、PD-L1阳性率显著高于癌旁组织;65岁、腺癌、临床分期Ⅲ～Ⅳ期、EGFR突变型、淋巴转移者MET阳性率显著升高;NSCLC组织MET基因扩增率为11.61%;腺癌、淋巴转移者MET基因扩增率显著升高;MET表达及MET基因扩增与PD-L1阳性表达有关;校正影响MET表达及基因状态因素后,MET表达及MET基因扩增为影响PD-L1表达的预测因素;NSCLC原发和转移病灶CD8~+T细胞浸润率分别为64.29%、39.29%;MET基因扩增与CD8~+T细胞浸润水平有关;校正影响MET表达及基因状态因素后,MET基因扩增与CD8~+T细胞浸润水平独立相关。结论 MET表达尤其是MET基因改变可影响NSCLC中PD-L1表达和免疫微环境,其中MET基因扩增与CD8~+T细胞浸润水平独立相关。     

活化的RET和ROS：肺腺癌新的驱动基因

ROS1和RET的基因重排是新发现的肺腺癌驱动基因，各自突变频率约为1%。肺腺癌中RET和ROS1基因重排与其他已知的驱动基因几乎没有重叠，成为独立的新的肺腺癌分子亚型。肺腺癌中ROS1和RET突变基因的临床病理学特征已经阐明，体外实验也证实数种多靶点受体激酶抑制剂能抑制含ROS1和RET突变基因的非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）细胞系。而临床研究显示MET/ALK/ROS抑制剂克唑替尼在ROS1突变阳性的肺癌患者中疗效显著。目前，正开展一些针对肺腺癌ROS1和RET基因的各种激酶抑制剂的早期临床试验。针对这些基因突变的新的肺腺癌亚群的个体化治疗极有可能在不久的将来作为常规的临床治疗措施。     

PD-L1联合Ki67对非小细胞肺癌不同基因突变情况下分期、预后的影响

目的：探究TP53、EGFR和KRAS突变情况下PD-L1或Ki67异质性表达对非小细胞肺癌患者肿瘤分期分级及预后生存的影响。方法：基于TCGA数据库分析非小细胞肺癌TP53、EGFR和KRAS是否发生突变情况下PD-L1或Ki67表达；qRT-PCR和免疫组化（IHC）验证非小细胞肺癌患者肿瘤组织TP53、EGFR和KRAS突变与否情况下PD-L1或Ki67 mRNA和蛋白水平；TCGA数据分析PD-L1或Ki67异质性表达对患者肿瘤分期的影响，R软件绘制KM生存曲线和DCA曲线验证PD-L1或Ki67异质性表达对非小细胞肺癌TP53、EGFR和KRAS突变患者预后生存及临床模型预测效果的影响。结果：TCGA数据、qRT-PCR和IHC结果表明，TP53突变可导致PD-L1显著上调，而EGFR和KRAS突变后组织PD-L1变化不显著；TP53突变导致Ki67水平显著提高，但EGFR或KRAS突变显著降低Ki67水平；Ki67异质性表达对患者肿瘤分期分级具有显著影响，KM生存曲线表明PD-L1或Ki67异质性表达不影响患者预后，但DCA预测模型中Ki67或Ki67联合PD-L1预测模型...     

644例肺癌中HER-220外显子插入突变阳性率及临床病理分析

目的探讨肺癌中HER-2 20外显子插入突变的阳性率,分析其与临床病理特征的相关性。方法采用荧光定量PCR法检测644例肺癌标本中HER-2 20外显子插入、EGFR、ALK、MET、ROS1、BRAF、KRAS、NRAS和PIK3CA基因状态。采用免疫组化法检测HER-2 20外显子插入阳性肺癌标本中PD-L1的表达,分析HER-2 20外显子插入与肺癌患者年龄、性别、分期、分化程度等的相关性。结果肺癌中HER-2 20外显子插入突变的阳性率为4.97%(32/644),且均为腺癌,HER-2 20外显子插入突变与患者年龄、性别、分化程度及分期均相关。HER-2 20外显子插入突变肺癌患者PD-L1阳性率为50%(9/18)。结论利用荧光定量PCR法检测肺癌标本中HER-2 20插入突变,可能对未来临床指导肺癌精准靶向治疗有积极作用。     

非小细胞肺癌p16基因异常与临床病理相关性研究

目的　探讨抑癌基因p16在非小细胞肺癌中的失活方式、mRNA和p16蛋白表达与临床病理因素的相关性。方法　应用对比性多重聚合酶链式反应检测 6 4例非小细胞肺癌中p16基因启动子的甲基化状况 ,同时应用原位杂交和免疫组织化学方法 [链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶 (SP)法 ]检测p16基因的mRNA和蛋白表达水平 ,并将上述结果与非小细胞肺癌之临床病理因素进行了相关性研究。结果　 5 6 3% (36 / 6 4 )的肺癌标本被检出有p16基因启动子甲基化 ,且甲基化与p16蛋白表达呈负相关 (P <0 0 5 ) ;免疫组织化学检测结果显示 ,5 7 8% (37/ 6 4 )的标本呈现p16蛋白表达缺失 ;原位杂交检测有 2 0 3% (13/ 6 4 )的标本被检出p16mRNA表达 ,且这 13例阳性者的p16蛋白也表达。同时具有p16基因启动子甲基化和蛋白表达缺失的非小细胞肺癌患者淋巴结转移率明显增高 ,术后生存期明显降低 (P <0 0 5 )。结论　启动子甲基化是导致非小细胞肺癌p16基因失活的主要方式 ,同时具有p16基因启动子甲基化及p16蛋白表达异常的患者预后不良     

甲状腺乳头状癌中BRAFV599E点突变与RET/PTC融合基因的检测

目的检测甲状腺乳头状癌(PTC)及其他类型甲状腺良恶性肿瘤中BRAFV599E的点突变及 RET/PTC1、3融合基因的表达状况,探讨二者与PTC临床病理学特征的关系.方法用聚合酶链反应(PCR)及逆转录(RT)-PCR分别检测95例石蜡与新鲜甲状腺病变组织中BRAFV599E点突变和RET/PTC1、3融合基因.结果 (1)仅在PTC中检测到BRAFV599E的突变,突变率56%(37/66),在经典型PTC和高细胞型PTC中突变率分别为70%(29/41)和2/3,在滤泡型PTC及其他类型甲状腺病变中未检测到BRAFV599E的突变.统计学分析BRAF突变与性别、年龄、伴慢性淋巴细胞浸润及淋巴结转移无明显关系(P>0.05).(2)PTC中RET/PTC检出率21.2%(14/66),其中5例RET/PTC1阳性(7.6%),9例RET/PTC3阳性(13.6%).RET/PTC融合基因阳性的14例PTC中未检测到BRAFV599E突变.其余29例良恶性病例中未检测到RET/PTC融合基因.RET/PTC融合基因的表达与PTC的临床病理学特征无明显关系(P>0.05).结论 (1)BRAFV599E突变和RET/PTC融合基因是PTC较特征性的遗传学改变,可作为PTC诊断和鉴别诊断提供分子学的依据,BRAFV599E突变可能是甲状腺乳头状癌表型的重要决定因素之一;(2)BRAFV599E突变与PTC的经典型和高细胞型两种主要亚型密切相关;(3)BRAFV599E突变与RET/PTC融合基因可能在PTC中是独立事件.     

非小细胞肺癌中端粒酶催化基团mRNA表达的临床意义及其与P53的相关性

目的:研究非小细胞肺癌与正常肺组织穿刺标本中端粒酶催化基团mRNA表达与肿瘤分期与分级关系,探讨其在非小细胞肺癌早期诊断中的临床意义.观察肿瘤抑制基因P53与hTRT mRNA表达的关系.方法:采用原位杂交技术检测非小细胞肺癌与正常肺组织中端粒酶催化基团mRNA表达;用免疫组化方法检测非小细胞肺癌的P53蛋白表达.结果...     

长链非编码RNAuc.339在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的：分析uc.339在非小细胞肺癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法：非小细胞肺癌新鲜标本及其癌旁肺组织各30例,提取总RNA,采用实时定量PCR方法检测uc.339在非小细胞肺癌组织及其癌旁肺组织中的表达,分析差异性及其与临床病理特征的关系。癌性胸腔积液及非癌性胸腔积液各20例,离心沉淀,提取总RNA,采用实时定量PCR方法检测uc.339在癌性胸腔积液及非癌性胸腔积液中的表达;免疫组织化学检测P53在非小细胞肺癌中的表达。结果：uc.339在非小细胞肺癌组织中的表达低于癌旁肺组织(P<0.05),与临床分期有相关性(P<0.05),与p53的表达呈负相关(P<0.05),而与肿瘤病理类型、年龄、性别无明显相关性(P>0.05);uc.339在癌性胸腔积液中的表达低于非癌性胸腔积液(P<0.05)。结论：uc.339可能作为一种抑癌因子作用于非小细胞肺癌的发生、发展中,其作用机制可能与p53信号通路有关,在作为肿瘤标志物、判断预后及靶向治疗等方面具有应用价值。     

肝细胞癌中p53基因的缺失与HER-2基因的扩增及其意义

目的　检测原发性肝细胞癌中 17号染色体上p5 3基因的缺失与HER 2基因的扩增并探讨其临床意义。方法　分别以不同颜色荧光标记的p5 3基因、HER 2基因和 17号染色体着丝粒为双色探针组 ,应用间期双色荧光原位杂交 (FISH)技术检测 42例肝细胞癌间期细胞核中p5 3基因、HER 2基因和 17号染色体的拷贝数及其相对比例 ,以确定其缺失或扩增 ,结合临床分期、血清甲胎蛋白 (AFP)、肿瘤大小等资料进行统计分析其临床意义。结果　 42例肝细胞癌中p5 3基因缺失 2 7例( 64 3 % ) ;HER 2基因扩增 9例 ( 2 1 4% ) ,其中高拷贝扩增 (HC) 4例 ( 9 5 % ) ,低拷贝扩增 (LC) 5例( 11 9% ) ,同时具有缺失与扩增的 6例 ( 14 3 % ) ;另外 ,17号染色体多倍体有 2 6例 ( 61 9% )。p5 3基因缺失与 17号染色体多倍性呈正相关 ( χ2 =12 2 86,P <0 0 0 1) ,但与HER 2基因的扩增无关 ( χ2 =0 0 0 ,P =1 0 0 )。p5 3基因缺失与肝细胞癌患者AFP水平、肿瘤大小有关 (P <0 0 5 ) ;术后 2年存活率p5 3基因缺失患者 ( 18 5 % )显著低于无缺失患者 ( 60 0 % ,χ2 =7 467,P =0 0 0 6)。结论　原发性肝细胞癌的17号染色体上存在p5 3基因高频缺失和HER 2基因的扩增 ,它们可能与部分原发性肝细胞癌的发生发展有关