化学发光和生物发光免疫测定法

发光免疫测定法(Luminescence Immu-noassay,LIA)是通过发光反应检测抗原抗体反应的一类分析方法。一般的发光反应是氧化-还原反应,在反应中能量以可见光的形式释放,可用发光计(Luminometer)或合适的仪器测定光发射率。这类发光测定法的灵敏度高,但特异性差。将灵敏度高的化学发光或生物发光反应与特异性高的抗原-抗体反应的免疫测定法相结合,就产生发光免疫测定法。发光免疫测定法是一种超微量的分析法,能分析10~(-12)～10~(-15)mol 浓度的生物样品,应用于医药、生物和生化的微量物质的测定中。在发光免疫测定中,在抗原或抗体上标记     

半合成新型青霉素

自1945年确定青霉素的化学結构后,从不同类型的青霉素中找到作用最强与最稳定的苄青霉素(青霉素G,簡称PC—G、),因而各国大量生产,在临床上用于治疗許多传染病,取得了卓越的成就。但是,PC-G存在的缺点是:1.不耐酸,口服后大部被胃酸破坏,虽使用比注射量大五倍的剂量,其被吸收量还不一定有足够的疗效。2.由于广泛应用PC-G的結果,細菌(特別是     

重组人粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子中氨苄青霉素残留量的 …

采用抗生素微生物测定法宣测定重组人ＧＭ－ＣＳＦ中氨苄青霉素残留量,在测定结果为阳性时用ＨＰＬＣ法作氨苄青霉素鉴别。微生物测定法最低检出量为０．００５μｇ／ｍｌ,ＨＰＬＣ法最低检出量为０．００２μｇ。本法灵敏度高,简便可行。     

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子中氨苄青霉素残留量的测定

采用抗生素微生物测定法定量测定重组人ＧＭ－ＣＳＦ中氨苄青霉素残留量,在测定结果为阳性时用ＨＰＬＣ法作氨苄青霉素鉴别。微生物测定法最低检出量为０．００５ μｇ／ｍ ｌ,ＨＰＬＣ法最低检出量为０．００２ μｇ。本法灵敏度高,简便可行。     

基因重组人白细胞介素-Ⅱ中氨苄青霉素残留量的测定

目的测定基因重组人白细胞介素-Ⅱ中氨苄青霉素残留量.方法采用抗生素微生物学测定法测定基因重组人白细胞介素-Ⅱ中氨苄青霉素残留量,在测定结果为阳性时用HPLC法作氨苄青霉素鉴定.结果微生物学测定法最低检出量为0.005μ/ml,HPLC法最低检出量为0.002μg.结论本法灵敏度高,简便可行.     

基因重组人白细胞介素-Ⅱ中氨苄青霉素残留量的测定

目的:测定基因重组人白细胞介素Ⅱ中氨苄青霉素残留量。方法:采用抗生素微生物学测定法测定基因重组人白细胞介素 Ⅱ中氨苄青霉素残留量,在测定结果为阳性时用HPLC法作氨苄青霉素鉴定。结果:微生物学测定法最低检出量为0 .0 0 5 μg/ml,HPLC法最低检出量为0 .0 0 2 μg。结论:本法灵敏度高,简便可行。     

气相色谱—质谱法测定血中伪麻黄碱

应用毛细管气相色谱一质量选择检测器(GC-MsD),以麻黄碱为内标,测定血浆中伪麻黄碱浓度。选择离子检测方式(SIM)可避免生物样品中许多杂质干扰,且灵敏度高、准确性好,已成功地用于伪麻黄碱的生物利用度和药代动力学研究。     

高效液相色谱-质谱法联用测定人血浆中氟桂利嗪含量及其药代动力学研究

氟桂利嗪(flunarizine)是一种钙通道阻断剂,能防止因缺血等原因导致的细胞内病理性钙超载而造成的细胞损害。临床上用于脑供血不足、脑血栓形成后、耳鸣、头痛、头晕、偏头痛预防及癫痫辅助治疗等。研究多采用高效液相色谱(HPLC)法测定人血浆中氟桂利嗪的浓度[1-3],但这些方法的血浆样品预处理复杂,灵敏度较低。本研究建立了一种简便、快速且灵敏度高的检测方法,简化了样品的处理过程。用此法研究了18名健康志愿者口服氟桂利嗪的药代动力学,并进行生物等效性评价,为临床合理用药提供理论依据。1仪器与试剂1.1仪器:Agilent1100型LC/MSD联…     

《抗生素》第六卷1～6期(1981年)目录检索

青霉素类 球状青霉菌高单位新菌种TPS-6的选育6(6):6 以核酸作为青霉素发酵参数的探讨 6(3):10 一些原材料质量对青霉素发酵单位的影响(简 报) 6(6):63 破乳剂“LP-1231”代 PPB在青霉素提炼中应用6 (6):10 二苄基乙二胺沉淀法提取青霉素G生产工艺(简 报)6(3):42 DBED沉淀法制备青霉素G钾中致敏性杂质分析 6(1):40 DBED沉淀法制备的青霉素临床过敏反应观察 6(1):50     

色谱数据处理机C-R4A的抗生素效价测定数据处理

抗生素效价测定,1990版《中国药典》规定为生物测定法。在实际操作中,微生物测定法的正确性受很多因素影响,为了使测定的结果真实地反映客观情况,符合统计学原理,应将测定结果按生物统计进行可靠性检验、可信限计算,但数据处理比较繁琐,费工费时。为了克服繁琐的计算,根据《中国药典》规定的(2,2)法(1)(2),利用岛津 C-R4A色谱数据处理机编制了 BASIC 程序(1),该程序具有步骤清晰,操作简便等优点,只要按屏幕提示逐项输入已知的数据和测得值,即能报告统计结果、     

抗生素的放射免疫测定法

抗生素的放射免疫测定法是一种超微量分析方法,由于它的特异性而不受类似生物物质的干扰。比同类免疫分析法(如酶标记、荧光标记等)灵敏度高得多,而且容易定量。放射免疫测定法在血、尿中定量已广泛用于抗生素临床,对其他生物液中如眼泪、头发、发酵液、树叶、食品中极微量抗生素也可设计定量测定,并且不受其他抗菌物质的影响,这是微生物测定法所不能胜任的。作者综述了近年文献,对必要的基础知识也作了概括性的介绍,对整个抗生素研究,特别是对临床研究包括临床药理、临床应用等可能都有启发和帮助。     

醋酸铜络合剂用于分光光度法测定药物制剂中的苄青霉素

曾用各种分光光度法测定苄青霉素,但有的专一性差、颜色不稳定,或重视性差。作者用醋酸铜作为发色剂,成功地用于各种药物制剂中苄青霉素的测定。试剂与苄青霉素在pH6～6.8的溶液中按2:1之比形成的绿色络合物于25min 稳定,在650nm 处有最大吸收。苄青霉素浓度在20～1000μg/ml 范围内遵从比尔定律,克分子吸光系数为0.24×10~3lmol/cm。方法简单、快速,20min 内可获得结果。本法与药典方法(碘量滴定法和生物测定法)测得结果一致。方法精密度为1.89%。仪器用Hitachi 139型紫外-可见光分光光度计,1cm 石英比色杯.以蒸馏水溶解标准苄青霉素钾盐(1600U/mg)配成10mg/ml 的标准苄青霉素溶液。用移液管吸取不同体积(0.1～5.0 ml)的苄青霉素溶液(10     

羧苄青霉素二钠制剂中青霉素G钠的测定

羧苄青霉素二钠制剂中混杂有青霉素 G 钠,限量应不得超过5%。英国药典(1968补遗版)用电泳分离-生物法进行检测。本文提出的薄层分离-分光光度测定法,比较快速简便。操作:取20×20厘米铺在铝片上的硅胶(厚0.25毫米)薄层板2块,分别用铅笔划分为7个25毫米宽的长条,每边留出12.5毫米宽。在三个长条     

环孢菌素A的高效液相色谱测定法

环孢菌素A(Cyclosporin A,Cy A)作为一种新型的免疫抑制剂已成功的用于器官移植,此外它对胰岛素依赖性糖尿病以及一些其他疾病也有较好的疗效。CyA的研究过程中,需要测定发酵液和提取分离各步骤样品中CyA的含量。由于样品中含CyA、B、C、D等多种组份,各组份生物活性不同,因而生物测定法不适用。HPLC测定CyA的发酵液和成品已有文献报道。本文报道我们根据前人工作所作的改进。用Beckman 344型高效液相色谱仪,色层柱为Shim-Pack CLC-C_8(6mm×150mm)。柱温67℃,移动相为乙腈:磷酸水溶液(pH2.5)(65∶35),流速2ml/分,以165型紫外检测器,采用214um(使用色谱纯乙腈移动相时)或226nm(用分析纯乙腈)。检测器灵敏度为0.100AUFS。进样量、标准品与样     

高效液相色谱测定庆大霉素类抗生素

庆大霉素(Gentamiein,GM)经典的生物测定法不能区别各个组分。而后,人们采用分离分析法测定各组分的含量。如纸层析法(纸层-微生物法,纸层-原位光密度法,纸层-OPA 荧光法,纸层-生物显影法);硅胶薄层层析法(硅胶薄层-微生物法,硅胶薄层-紫外光密度法);核磁共振谱法及高效液相色谱法(HPLC)等。HPLC 是七十年代发展起来的一种新颖快速分离技术。近几年来,     

BRL25000制剂

BRL25000系羟氨苄青霉素(AMPC)与克拉维酸钾(CVA-K)2∶1的合剂。羟氨苄青霉素Amoxicillin 化学名:(α-氨基-4羟苄基)青霉素三水化合物((α-Amino-4hydroxybenzyl)Penicilin trihydrate)。分子式:C_(16)H_(19)N_3O_5S·3H_2O,分子量:419.45。化学结构式:     

液相色谱-串联质谱法测定辛伐他汀片的人体药动学和生物等效性

目的:建立人血浆中辛伐他汀浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS／MS)测定法,研究健康受试者单剂量口服辛伐他汀受试或参比制剂后的药动学和生物等效性。方法:20名健康男性受试者进行随机双交叉试验,分别单剂量口服20 mg辛伐他汀受试制剂和参比制剂,采用LC-MS／MS以洛伐他汀为内标正离子选择性反应检测测定辛伐他汀血浆浓度,计算两者的药动学参数及相对生物利用度。结果:受试制剂和参比制剂的血药浓度水平一致,主要药动学参数如下:c_(max)分别为(8．0±s 1．9)和(8．1±1．8)μg·L~(-1);t_(max)分别为(1．9±0．3)和(1．9±0．3)h;t_(1/2)分别为(3．7±1．4)和(4．1±2．2)h;AUC_(0～24)分别为(30±8)和(30±6)μg·h·L~(-1);AUC`(0～∞)分别为(30±8)和(31±7)μg·h·L~(-1)。由2种制剂的AUC_(0～24)计算,受试制剂的相对生物利用度为(101±20)%。结论:建立的LC-MS／MS测定法专属、准确、灵敏度适宜。测得辛伐他汀受试制剂和参比制剂生物等效。     

用分光光度法测定青霉烷酸砜钠

青霉烷酸砜钠(CP-45899)是一种β-内酰胺酶抑制剂,它和青霉素、头孢菌素联合使用,具有明显的协同作用。青霉素类抗生素含量测定方法的报道较多,但本品的分光光度测定法至今国内外报道甚少,本文报道用分光光度法测定其CP45899含量。     

测定人血浆中齐多夫定的液相色谱-串联质谱法及生物等效性的应用

目的:建立快速、灵敏的液相色谱-串联质谱法(LC／MS／MS)测定人血浆中齐多夫定,并用于制剂生物等效性研究。方法:血浆样品经液-液萃取后,以甲醇-水(70:30,用1％氨水调节pH至6．0)为流动相, Zorbax Extend C18柱分离,采用电喷雾离子源四极杆串联质谱,以选择反应监测(SRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m／z 268→m/z 127(齐多夫定)和m／z 225→m／z 127(内标,司他夫定)。结果:齐多夫定测定方法的线性范围为1．0-2 500μg·L-1;日内、日间精密度(RSD)均小于8．0％,准确度 (RE)在±2．0％以内。应用此法研究比较了18名健康受试者单剂量口服齐多夫定参比制剂和受试制剂 200 mg后的主要药动学参数。以AUC0-8计算受试制剂相对生物利用度。结论:该法选择性强、灵敏度高,适用于齐多夫定制剂的生物等效性评价及临床药动学研究。     

高效液相色谱用于抗生素分析

应用于抗生素研究生产和质量控制的分析方法早期多数采用经典的液相色谱(LC)、薄层层析(TLC)、逆流分布(CCD)及近期的气相色谱(GC)。在过去十年中由于色谱技术的进展,目前已发展为一种把色谱GC、TLC、LC 优点结