沙眼衣原体和解脲脲原体检测的临床应用

分析2013-2015年就诊于上海长征医院检测沙眼衣原体(CT)和解脲脲原体(UU)患者的感染特点及差异。对患者样本采用实时荧光核酸恒温扩增检测技术(SAT)进行CT-RNA,UU-RNA的检测。612例CT标本中,总阳性率为9.97%,男性感染率为10.57%,女性感染率为9.56%,男、女感染率无显著差异,各年龄段患者CT感染率无显著差异;804例UU标本中,总阳性率57.96%,女性感染率为71.97%,男性感染率为37.42%,男女感染率差异具有统计学意义(χ2=94.91,P0.01),各年龄段患者UU感染率无显著差异;在各类型标本中,阴道分泌物阳性检出率相对较高。本研究表明在人群中UU的感染率显著高于CT,且更容易感染女性。     

解脲脲原体培养法与荧光定量PCR检测结果对比研究

目的对解脲脲原体液体培养法与荧光定量PCR进行方法学评估. 方法 322例病人标本进行液体微量培养与荧光定量PCR平行检测,采用UU-荧光定量PCR试剂盒,以PE 5700全自动分析仪进行检测和分析. 结果 UU-荧光定量PCR法与液体培养法的一致性系数Kappa=0.6825,χ2=3.843,p<0.05.液体培养法敏感性为0.874,特异性为0.815,准确性为0.841. 结论以荧光定量PCR检测解脲脲原体其敏感性、特异性、准确性均优于液体培养法.采用培养法应考虑恰当标本处理,选择优质的商品培养基以减少假阳性和假阴性的机会.     

解脲脲原体培养法与荧光定量PCR检测结果对比研究

目的：对解脲脲原体液体培养法与荧光定量PCR进行方法学评估。方法：322例病人标本进行液体微量培养与荧光定量PCR平等检测，采用UU－荧光定量PCR试剂盒，以PE5700全自动分析仪进行检测和分析。结果：UU－荧光定量PCR法与液体培养法的一致性系数Kappa=0.6825, χ^2=3.843,p＜0．05。液体培养法敏感性为0．874，特异性为0．815，准确性为0．841。结论：以荧光定量PCR检测解脲脲原体其敏感性、特异性、准确性均优于液体培养法。采用培养法应考虑恰当标本处理，选择优质的商品培养基以减少假阳性和假阴性的机会。     

荧光定量PCR技术对诊治阴道解脲脲原体感染价值的研究

目的　通过荧光定量PCR技术检测阴道内解脲脲原体感染状况 ,用以指导临床正确治疗。方法　对门诊的阴道炎患者 ,采用特制密封棉拭子宫颈管内取样 ,然后采用重量差减法 ,求出分泌物的重量 ,采用荧光定量PCR测定解脲脲原体。FQ -PCRUu的拷贝数 /g分泌物 ,与临床患者不同的症状体征作对照研究。结果　解脲脲原体拷贝数 /g≥ 1× 10 6的患者 ,82 9%具有典型阴道炎症状 ,71 9%具有阴道炎体征。拷贝数 /g <1× 10 6的患者 ,症状体征均不明显 ,二者之间差异显著     

输卵管妊娠患者宫颈拭子解脲脲原体套式PCR检测

近年来，有关解脲脲原体（ＵＵ）感染与盆腔炎症性疾病（ＰＩＤ）的关系报道较多。但生殖道ＵＵ感染与输卵管妊娠的关系研究报道甚少。为此，我们应用更为灵敏、特异的套式ＰＣＲ技术检测了１７例输卵管妊娠患者的宫颈拭子ＵＵ－ＤＮＡ，并以同期５３６例非输卵管妊娠妇科住院病人宫颈拭子为对照组。     

荧光定量PCR检测泌尿生殖道UU感染

解脲支原体(Ureaplasma urealyticum,UU)是引起非淋菌性尿道炎(NGU)的主要病原体之一[1],是男女泌尿生殖道中一种常见的支原体,并且是女性下生殖道的主要定植者[2].近年来,从国内外已有的报道来看,UU感染率呈现逐渐增高的趋势[3,4].为了解泌尿生殖道解脲支原体的感染情况,我们对19449例UU的检测结果进行了分析和总结,现报告如下.     

PCR法解脲脲原体分群和四环素耐药检测

目的 建立解脲脲原体(Ureaplasma urealyxicum，Uu)的分群和四环素耐药PCR检测方法。方法 1．根据Uu的多带抗原(multi—banded antigen，MBA)基因序列自行设计引物(P15′-ATT，TGC，AAT，CTT，TAT，ATG，TT；P25′-TTC，AGC，TGA，TGT，AAG，TGC，AGC，ATT，AAA，T)，并建立分群PCR反应体系。2．根据TetM基因序列自行设计引物(P15′-TTA，TCA，ACG，GTT，TAT，CAG，G；P25′-GCT，ATA，TAT，GCA，AGA，CG)，并建立四环素耐药反应体系。结果 1．MBA基因PCR能将Uul4个血清型正确分为二个生物群，其中生物一群(1、3、6、14等4个血清型)出现404bp的产物带，生物二群(2、4、5、7、8、9、10、11、12、13等10个血清型)出现448bp的产物带。60株Uu临床分离株经MBA基因PCR检测，生物一群53例、生物二群6例、生物一／二群同时存在1例。2.Uu典型株14个血清型，TetM基因PcR扩增的不能出现任何条带；60株Uu临床分离株经TetM基因PCR检测41例出现目的条带。结论 PCR法进行Uu生物分群和四环素耐药检测简单、快速，为相关研究提供了手段。     

解脲脲原体的实验室检测方法的研究现状

解脲脲原体是一种条件致病菌，多与宿主共存，仅在某些条件下引起机会性感染，感染部位常为男女泌尿道，其中更易致病的为U．urealyticum型。近年来检测解脲脲原体的方法主要有液体培养法、固体培养法、免疫学方法和分子生物学方法等等，这些检测方法各有优劣。本文就临床使用较多的液体培养法、固体培养法和分子生物学方法进行重点分析，希望能给临床提供更多的帮助。     

解脲脲原体套式（Nested）PCR检测研究

本文报告解脲脲原体（ＵＵ）的套式（ＮＥＳＴＥＤ）ＰＣＲ检测方法。经方法学考核表明，本法的特异性、灵敏度以及试剂的稳定性和对临检标本的顺应性均较好。９３份各种生殖道炎症患者之宫颈拭子标本套式ＰＣＲ检出２１份阳性（阳性率２２．６％），而市售ＰＣＲ试剂盒仅检出１份阳性（阳性率１．１％）。前者阳性检出率明显高于后者（Ｐ＜０．０１）。     

聚合酶链反应检测丝虫病患者泌尿道沙眼衣原体及解脲支原体的研究

本文采用聚合酶链反应方法,检测了５０ 例丝虫病患者尿中沙眼衣原体（ＣＴ） 及解脲支原体（ＵＵ）ＤＮＡ,同时选择３０ 例正常人作为对照。结果显示,丝虫病患者尿中ＣＴＤＮＡ、ＵＵ ＤＮＡ 和两者混合感染检出率分别为３０ ％ 、２５ ％ 和２０ ％ ,高于正常对３６３％ （Ｐ＜０－０１）,ＣＴ及ＵＵ 感染与病人的病情、病程有一定的关联。提示乳糜尿的发生、发展与泌尿道ＣＴ 和ＵＵ感染有关。     

荧光定量聚合酶链反应检测解脲支原体感染的临床意义

目的　采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)技术 ,准确定量检测待检标本中解脲支原体 (UU)的感染状况。方法　采用FQ -PCR技术 ,检测男女生殖道标本 76 5份 ,并同时用常规PCR技术 ,对比检测了 85例。结果　FQ -PCR检测76 5份标本 ,UU -DNA阳性 2 79份 ,阳性率 36 .5 % ,其DNA平均拷贝数为 2 .4× 10 4。 38例阳性患者治疗两周内复查 ,转阴率仅为 4 4 .7% ,治疗 3w后复查 ,转阴率达 76 % (P <0 .0 0 5 )。常规PCR结果重复检测时 ,2 5例阳性中 2例变为阴性 ,而 6 0例阴性中 4例变为阳性。FQ -PCR结果重复时完全吻合。结论　FQ -PCR检测UU ,具有快速、特异性高、定量准确等优点 ,并可为临床评价疗效提供依据。     

Examination of Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis in 4082 Chinese patients

The objective of this study was to analyze the infection rate and drug resistance of Ureaplasma urealyticum (UU) and Mycoplasma hominis (MH) in the genitourinary tract of Chinese patients. From December 2018 to June 2019, vaginal secretion or urinary secretion of outpatients in our hospital were selected for culture and drug sensitivity analysis of Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis. In 4082 Chinese samples, 1567 Mycoplasma were detected, a detection rate of 38.39%, among which 1366 cases were UU single positive, accounting for 33.47%, 15 cases were MH single positive, accounting for 0.36%, 186 cases were UU and MH mixed positive, accounting for 4.56%. The most affected age groups were 21-30 years and 31-40 years, accounting for 19.09 and 15.05%, respectively. The results of drug sensitivity showed that doxycycline, minocycline, josamycin, clarithromycin, and roxithromycin were more sensitive to mycoplasma infection. The distribution of Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis in the human genitourinary system and their sensitivity to antibiotics is different for sex and age groups.     

解脲脲原体Parvo和T960生物群msr基因的检测

目的 检测解脲脲原体(Uu)是否携带介导对红霉素耐药的msr基因,并分析其在Uu两生物群间分布的差异.方法 采用微量肉汤稀释法测定72株Uu临床株对红霉素的体外耐性,PCR检测msrA、msrB、msrG、msrD基因,并对Uu进行PCR分群.结果 72株Uu的最低抑菌浓度(MIC)范围是≤0.125 μg/ml≥128 μg/ml,MIC_(50)为32 μg/ml,MIC_(90)≥128μg/ml.分群结果示Parvo生物群51株,占70.83%,T960生物群21株,占29.17%.共检测到msrD基因的Uu24株,msrB基因12株,msrA基因1株,没有发现Uu菌株携带msrC基因.5株Uu同时检测到msrB和msrD基因,1株Uu同时检测到msrA、msrB和msrD基因.以MIC≥8μg/ml为耐药判定值时,两生物群对红霉素耐药性无显著差异,msrB基因主要分布在T960生物群.结论 Uu临床菌株携带对大环内酯类耐药的msr基因(包括msrA、msrB、msrP),msrB基因主要分布在T960生物群.     

溶脲型脲原体感染与自然流产关系研究

本文应用聚合酶链反应（PCR）检测自然流产患者组织中溶脲型脲原体（Ureaplasmaurealytlicum，UU），所用引物是按UU尿素酶基因序列设计的，扩增片段为283bp。66例自然流产患者和30例正常人工流产患者作了UU－DNA检测，其阳性率分别为45．5％和13．3％，两者比较P＜0．005。关于流产次数与UU感染的关系，自然流产1、2、3、4次患者UU阳性率分别为30．2％、66．7％、83．3％和100％，与对照组比较，自然流产2次以上，P＜0．005。结果表明UU感染是引起自然流产的重要因素，并且与流产次数密切相关。     

128例原发性不育患者精液解脲脲原体的检测

采用解脲脲原体检测试剂对１２８例原发性不育患者的精液进行解脲脲原体病原学诊断，阳性率为３１．２５％（４０／１２８）。本文结果提示在山西省大同地区，解脲脲原体感染可能是引起男性原发性不育的重要原因之一。     

解脲脲原体生物被膜形成与耐药性的相关性研究

目的 研究解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)标准株及临床分离株体外形成生物被膜的能力及游离状态与形成生物被膜后药物敏感性的差异.方法 对Uu标准株3、8血清型(Uu3、Uu8)及从女性患者宫颈中分离鉴定的21株Uu临床株进行体外培养后,扫描电镜、激光共聚焦显微镜鉴定生物被膜形成,并在生物被膜形成前后进行约敏测定(四环素、红霉素、环丙沙星).配对秩和检验及x2检验分别比较Uu游离状态及形成生物被膜后最低抑菌浓度间及耐药率间的差异.结果 Uu3、Uu8及21株Uu临床株均具有体外形成生物被膜的能力.Uu形成牛物被膜后对四环素、红霉素及环丙沙星的最低抑菌浓度较游离状态明显增高(P<0.001).Uu形成生物被膜后对红霉素及环丙沙星的耐药率增高具有统计学意义(P值分别为<0.001及0.035),但对四环素的耐药率增高无统计学意义(P=0.293).结论 Uu标准株及临床株均具有体外形成生物被膜的能力,Uu形成生物被膜后对抗菌素的抵抗力增加,出现了多重耐药现象.

Abstract：

Objective To study the ability of standard strain and clinical isolates of Ureaplasma spp. to form biofilms in vitro and to compare the antibiotic susceptibility of sessile cells and their planktonic counterparts. Methods A total of 21 Ureaplasma wealyticum(Uu) isolates recovered from female patients diagnosed with cervicitis and Uu serovar 3 and Uu serovar 8( Uu3, Uu8) were included. Scanning electron microscope and confocal scanning laser microscopy were used to identify biofilm formation. Conventional antibiotic susceptibility tests and biofilm susceptibility assays for tetracycline, erythromycin and ciprofloxacin were carried out. The paired rank sum test and was applied to analyze the statistical differences between the MIC and the minimal biofilm inhibitory concentration. The x2 test was applied to analyze the statistical differences of global resistance percentages between planktonic cells and sessile cells. Results Uu3, Uu8 and 21 Uu isolates all can form biofilms in vitro. Minimal inhibitory concentration of sessile cells compared with planktonic cells were obviously higher for tetracycline, erythromycin and ciprofloxacin (P <0.001). Global resistance percentages between planktonic cells and sessile cells were different for erythromycin (9.52% vs 61.90% , P < 0. 001), ciprofloxacin ( 80. 95% vs 100% , P = 0. 035 ) and tetracycline (4. 76% vs 14.29% , P =0.293). Conclusion Uu isolates and Uu1, Uu8 all can form biofilms in vitro, and biofilm formation can strengthen resistance of Uu to antibiotics, even multidrug resistance was observed.     

孕妇解脲支原体、沙眼衣原体感染的诊断与药物干预

目的探讨妊娠期孕妇解脲支原体（UU）、沙眼衣原体（CT）感染的发病率及其对感染者的治疗效果。方法对108例妊娠妇女采用核酸杂交的方法检测宫颈分泌物,对标本UU、CT-DNA进行DNA扩增、核酸杂交检测。结果 108例妊娠早中期孕妇宫颈分泌物UU、CT的阳性率分别是33.33%,7.41%,口服阿奇霉素治疗后检测UU、CT阳性率分别是17.59%,1.85%。两组间有显著性差异（P=0.001或P=0.002）。结论解脲支原体、沙眼衣原体是妊娠期妇女感染的常见病原体,临床治疗效果显著值得推广应用。     

解脲脲原体／HPV共感染与宫颈癌变的相关性探讨

目的 了解宫颈上皮内瘤变（CIN）宫颈癌患者下生殖道解脲脲原体感染情况,初步探讨解脲脲原体（UU）、HPV与CIN/宫颈癌的相关性.方法 选取2005年9月至2009年2月中山大学附属第六医院及第二医院因宫颈上皮内瘤变或宫颈鳞癌住院的患者124例为病例组.随即抽取同期医院体检中心健康体检女性300例为对照组.采用荧光定量PCR方法进行宫颈分泌物解脲脲原体DNA检测.用杂交捕获Ⅱ代和导流杂交基因芯片技术检测HPV感染情况.结果 病例组解脲脲原体阳性率68.5%,对照组解脲脲原体阳性率38.7%.病例组和对照组之间UU阳性率比较,差异有统计学意义.124例行HPV检测病例中,UU和HPV均阳性者占58.9%.结论 女性下生殖道解脲脲原体感染与宫颈上皮内瘤变/宫颈癌有一定的相关性.解脲脲原体感染与宫颈病变程度相关,尤其与高度宫颈上皮内病变和宫颈癌相关.UU对HPV感染导致的CIN/宫颈癌可能存在协同作用.     

解脲脲原体生物膜胞外多糖的检测

目的 研究解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)4个型别标准株在体外形成的生物膜之胞外多糖的分布及结构成分.方法 将Uu标准株Parvo群中4、8血清型和T960群中3、14血清型进行体外生物膜培养后,扫描电镜下观察生物膜组成及结构,并在FITC-ConA/PI及ECA/PI双荧光染色后进行激光共聚焦显微镜观察及测定平均荧光强度.秩和检验及t检验分别比较两种荧光标记物、两生物群的总体平均荧光强度的差异.结果 4个型别Uu标准株均可在体外形成生物膜,生物膜结构主要呈网格状,胞外物质占大部分比例.在激光共聚焦显微镜下,Uu生物膜胞外多糖均可被FITC-ConA和ECA染色,FTTC-ConA呈网格状分布,ECA小片状聚集分布.FITC-ConA的总体平均荧光强度较ECA高,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 Uu体外培养生物膜主要呈网格状结构,胞外多糖中含有葡萄糖、甘露糖、半乳糖、N-乙酰葡聚糖残基,并以葡萄糖、甘露糖残基为主.