重症肌无力患者IL-18、TGFβ-1的表达

目的探讨白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)、转化生长因子β-1(transforming growth factorβ-1,TGFβ-1)在重症肌无力发病机制中的作用。方法采用基因芯片技术对30例重症肌无力患者和30名正常人外周血单个核细胞TGFβ-1、IL-18mRNA表达水平进行分析,采用酶联免疫吸附试验的方法检测血清IL-18、TGFβ-1水平,对重症肌无力患者病情按临床绝对评分法进行评分,并比较其临床意义。结果 MG患者外周血清IL-18、TGFβ-1水平显著高于正常组水平(t=6.18,P0.01),MG患者基因芯片检测IL-18Ratio值为2.026,TGFβ-1Ratio值为2.34,结果具有一致性,Ⅱ型、Ⅲ型MG患者IL-18水平高于Ⅰ型患者,与患者临床绝对评分呈正相关(r=0.827,P0.05)。结论 IL-18、TGFβ-1均参与重症肌无力发病机制,IL-18血清水平可能与重症肌无力病情轻重程度相关。     

重症肌无力患者外周血FOXP3、TGF-B1的变化及其与血清AChR抗体的关系

目的 探讨重症肌无力(MG)患者外周血叉头样转录因子P3(FOXP3)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)三者之间的关系,揭示MG的发病机制.方法 利用RT-PCR技术检测41例MG患者和20例体检健康者外周血单个核细胞FOXP3 mRNA的表达,ELISA技术检测外周血清TGF-β1浓度、抗AChR抗体水平,分析三者之间的关系.结果 (1)FOXP3 mRNA的表达水平在MG患者组明显低于正常对照组(P<0.01),在25例眼肌型患者与16例全身型患者中的表达无差异性(P>0.05);(2)MG患者组外周血清TGF-β1浓度在MG患者组明显低于正常对照组(P<0.01),但在25例眼肌型患者与16例全身型患者中的表达无差异性(P>0.05);(3)41例MG患者中有30例患者血清中可检测出IgG型AChR抗体,其中眼肌型18例,全身型12例,两亚型的AChR抗体阳性率和抗体水平无显著差异(P>0.05);(4)各组外周静脉血单个核细胞FOXP3 mRNA的表达与血清TGF-β1浓度成正相关,相关系数为0.84(P<0.01);与lgG型AChR抗体水平呈负相关,相关系数为-0.77(P<0.01);血清TGF-β1浓度与IgG型AChR抗体水平呈负相关,-0.81(P<0.01).结论 FOXP3 mR-NA、TGF-B1低表达可能通过增加AChR抗体的产生,在MG的发病中起到重要作用.

Abstract：

Objective To explore the further pathogenesis of MG,the correlations among the expression of FOXP3 in peripheral blood mononuelear cells(PBMNCs) ,and the levels of TGF-β1 and anti-AChR bodies in serum of MG were analyzed. Methods The expressions of FOXP3 mRNA in PBMNCs from 40 MG patients and 20 healthy controls were detected by RT-PCR and the levels of TGF-β1 and anti-AChR antibodies in serum of MG group and HC were tested by ELISA,furthermore the relationships among them we analyzed. Results (1) The relative expression of FOXP3 mRNA in PBMNCs were significant lower in MG patiens group than that of health control group( P < 0. 01 ) ,while there is no different between 25 ocular MG patients and 16 general MG patients ( P > 0.05 ) ; ( 2 ) The levels of TGF-β1 in serum were significant lower in MG patients group than that of health control group(P <0. 01 ) ,while there is no different between 25 ocular MG patients and 16 general MG patients ( P > 0. 05 ) ; ( 3 ) From 41 MG patients, serum anti-AChR-IgG could detected in 30 patient including 18 ocular MG and 12 general M G, there are no different of the anti-AChR-IgG positive rate and coneentation between ocular MG subgroup and general MG subgroup ; (4) Relative expression of FOXP3 mRNA in PBMNCs was positive correlation with the level of TGF-β1 in serum of each group r = 0.84 ( P < 0. 01 ) , and negitive correlation with level of anti-AChR-IgG in serum of MG group r = -0.77(P <0.01 ) ;And in serum of MG group,the level of TGF-β1 was negatively correlation with the level of anti-AChR-IgG r = - 0.81( P < 0.01 ) . Conclusions Lower expression of FOXP3 mRNA in PBMNCs and TGF-β1 in peripheral blood may lead to more anti-AChR antibodies that cause MG.     

新发病重症肌无力患者外周血IL-18、TGFβ-1水平与糖皮质激素疗效的研究

目的探讨糖皮质激素（GC）对新发病重症肌无力（MG）患者外周血白介素18（IL-18）、转化生长因子β-1（TGFβ-1）水平及临床疗效的影响。方法采用ELISA法检测26例新发病重症肌无力患者GC治疗前、治疗2月后和30名健康对照组血清IL-18、TGFβ-1水平,肌无力严重程度和临床疗效判定采用临床绝对和相对记分法。结果 MG患者外周血清IL-18、TGFβ-1水平均高于健康对照组（P〈0.05）;GC治疗2月后MG患者IL-18水平显著下降（t=8.92,P〈0.01）,TGFβ-1水平升高（t=-6.66,P〈0.05）;GC治疗前后预后差的全身型MG患者IL-18水平始终高于预后好的眼肌型MG患者（P〈0.05）,MG患者IL-18、TGFβ-1变化值与临床相对评分无明显相关性（r=0.301、r=-0.386,P〉0.05）。结论 GC可通过抑制IL-18、提高TGFβ-1血清分泌水平而有效调节MG患者细胞免疫功能。     

重症肌无力患者外周血Foxp3和CD152表达变化及其相关性分析

目的研究重症肌无力(MG)患者经全胸腺切除治疗外周血中调节性T细胞(CD4~+ CD25~+ Treg)中Foxp3及CD152(CTLA-4)的表达情况。方法采集重症肌无力经手术切除胸腺患者50例术前和术后6个月外周血为实验组,对照组为25例健康志愿者的外周血。应用流式细胞分析方法检测患者手术前后和健康志愿者外周血中的调节性T细胞Foxp3及CD152(CTLA-4)的表达情况。结果患有MG患者术前外周血中调节性T细胞Foxp3及CD152(CTLA-4)表达水平与对照组相比显著降低(P0.05);全胸腺切除6个月后CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞及CD152(CTLA-4)表达比例与手术前比较升高(P0.05),与健康对照组比较水平低(P0.05);调节性T细胞中Foxp3表达水平与CD152(CTLA-4)表达水平呈现一定的正相关性(P0.001)。结论重症肌无力患者外周血调节性T细胞中Foxp3和CD152(CTLA-4)表达水平较低,手术治疗能够明显提高Foxp3及CD152(CTLA-4),然而与正常人比较还不能达到正常的水平,为重症肌无力发病机制与胸腺切除治疗提供了理论依据。     

TNFAIP3基因rs2230926多态性与重症肌无力的相关性研究

目的探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(TNFAIP3)基因rs2230926位点多态性与重症肌无力(MG)的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性内切酶(PCR-RFLP)技术分析125例MG患者与143名健康对照者rs2230926位点基因型。结果在中国北方地区汉族人群中TNFAIP3 rs2230926位点仅有T/T和T/G两个基因型。发病年龄≥40岁的MG患者中T/G基因型及G等位基因出现频率较发病年龄40岁的MG患者高(P0.05)。结论 TNFAIP3 rs2230926位点与中国北方地区晚发型MG患者发病相关。     

重症肌无力患者血清TNF水平变化及其与AChRab产生的相关性研究

为了探讨肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）在重症肌无力（ＭＧ）发病机理中的作用及其临床意义以及受糖皮质激素（ＧＣ）治疗的影响，应用ＭＴＴ法检测了４２例ＭＧ患者血清ＴＮＦ水平，同时检测了其中３６例ＭＧ患者血清乙酰胆碱受体抗体（ＡＣｈＲａｂ），并观察了２０例ＭＧ患者ＧＣ治疗前后ＴＮＦ水平及ＡＣｈＲａｂ的变化。结果显示：眼肌型、全身型ＭＧ患者血清ＴＮＦ水平皆明显高于正常对照组，ＴＮＦ水平变化与ＡＣｈＲａｂ产生以及与ＭＧ临床类型、病情密切相关，ＧＣ治疗后血清ＴＮＦ水平及ＡＣｈＲａｂ阳性率明显降低。我们认为ＴＮＦ在ＭＧ发病机理上发挥了重要作用，检测血清ＴＮＦ水平对指导ＭＧ临床有重要价值，ＧＣ可抑制ＴＮＦ合成及ＡＣｈＲａｂ产生     

胸腺瘤患者胸腺淋巴细胞Fas表达与重症肌无力的相关性

目的 探讨胸腺瘤患者发生重症肌无力(myasthenia gravis,MG)的机制及Fas基因在MG发病中的作用.方法 收集131例胸腺瘤患者,按是否合并MG分为合并MG组(70例)和不合并MG组(61例)两组.应用免疫组织化学、蛋白电泳、聚合酶链反应和酶联免疫吸附等方法检测两组患者胸腺淋巴细胞Fas蛋白表达和血清可溶性Fas(sFas)水平,应用DNA测序技术检测Fas基因结构变异.结果 胸腺瘤合并MG组患者胸腺淋巴细胞Fas表达水平明显低于胸腺瘤不合并MG组,sFas含量[(3879.06±706.51) pg/mL]明显高于胸腺瘤不合并MG组[(1868.18±391.46) pg/mL] (P＜0.01);胸腺瘤合并MG组胸腺淋巴细胞Fas基因第6外显子16和21位点T→G置换突变发生率分别为65％和75％,明显高于胸腺瘤不合并MG组(两位点均为5％)(P＜0.05).结论 胸腺淋巴细胞Fas基因外显子6某些位点发生突变,所编码的Fas蛋白跨膜区变异或缺乏跨膜区而导致Fas结构和功能的改变可能是MG发生的主要原因.     

FcγRⅡB在重症肌无力中的表达及其与抗AChR抗体的关系

目的探讨免疫球蛋白IgG的Fc段受体ⅡB(FcγRⅡB)在重症肌无力(myasthenia gravis,MG)发病中的作用。方法采用逆转录-聚合酶链技术和流式细胞术,检测26名血清乙酰胆碱受体(AChR)抗体阳性MG患者和26名正常对照组外周血B淋巴细胞中FcγRⅡBmRNA和FcγRⅡB蛋白的表达水平,ELISA检测血清AChR抗体水平,分析三者之间的关系。结果 MG组外周血B细胞中FcγRⅡBmRNA的表达明显低于正常对照组(P0.01),但在眼肌型患者和全身型患者的表达无统计学差异(P0.05)。MG患者外周血B细胞上FcγRⅡB的表达低于对照组(P0.05)。IgG型AChR抗体水平与B细胞中FcγRⅡB1mRNA和FcγRⅡB2mRNA表达水平呈负相关(P0.01),与FcγRⅡB的表达亦为负相关(P0.05)。结论 MG中B细胞上FcγRⅡB在转录和蛋白水平表达均降低,负调控作用减弱,造成B细胞过度活化,产生大量抗AChR自身抗体,可能是MG发病的一个重要环节。     

重症肌无力患者血清补体和乙酰胆碱受体抗体的浓度变化及其相关性

目的探讨重症肌无力(MG)患者血清补体和乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)的浓度变化及其相关性。方法对22例MG患者进行糖皮质激素规范化治疗,在治疗前、后检测其血清补体、AChRAb的浓度,并与14例非MG对照组(NC组)作对照,分析两组血清补体和AChRAb变化之间的关系。结果MG组在糖皮质激素治疗前补体C3浓度明显低于NC组(P<0.01),治疗后MG组补体C3明显增高(P<0.05),但仍低于NC组;AChRAb浓度在治疗前MG组明显高于NC组(P<0.01),治疗后MG组AChRAb浓度明显降低(P<0.05),但仍高于NC组。C5浓度MG组和NC组差异无显著性(P>0.05)。但补体(C3、C5)浓度和AChRAb浓度在治疗前(r=0.326、r=0.102,均P>0.05)和治疗后(r=0.114、r=-0.0146,均P>0.05),以及二者治疗前后变化值之间(r=-0.346、r=0.058,均P>0.05)相关性不显著。结论糖皮质激素治疗后MG患者C3浓度增加、AChRAb浓度下降,二者之间无明显相关性,补体和AChRAb在MG发病过程中可能起协同作用。     

补体C3基因rs7951位点多态性与重症肌无力的相关性研究

目的 探索补体C3基因rs7951位点多态性与重症肌无力(MC)的易感性和严重程度的相关性.方法 纳入475例MG患者和487例健康对照组,采用SNPscanTM多重SNP分型技术对C3基因rs7951位点进行基因分型,比较等位基因和基因型频率在MG组及各亚组(性别、发病年龄、胸腺情况、首发受累范围以及最严重时的Osserman分型和Osterhuis评分)间的分布.结果 rs7951位点检测到CC、CT、TT3种基因型,MG组T等位基因(118/950,12.4％)高于对照组(92/974,9.4％),差异有统计学意义(P=0.036,OR=1.360,95％ CI 1.019～1.815).分别在共显性、隐性、显性和加性模型下分析MG组与对照组的基因型频率,发现基因型差异(与CC相比)在显性模型(P =0.044,OR=1.38,95％CI1.01 ～1.89)和加性模型(P=0.037,OR =1.36,95％CI 1.02 ～ 1.82)下有统计学意义.除了在15 ～50岁MG亚组与对照组之间,rs7951位点的基因型在其他各MG亚组分布频率的差异无统计学意义.结论 补体C3基因rs7951T等位基因可能与MG易感性相关.     

重症肌无力患者胸腺切除后体液免疫变化与临床疗效关系

目的探讨重症肌无力(MG)患者胸腺切除后体液免疫变化与临床疗效的关系。方法测定21例胸腺未切除(非手术组)、25例胸腺切除(手术组)MG患者外周血细胞因子(IFN-γI、L-4),乙酰胆碱受体抗体(AChRAb)、免疫球蛋白(IgGI、gMI、gEI、gA)、补体(C3、C4)变化。以性别、年龄相匹配的健康者作对照。结果手术组MG患者IFN-γ水平显著低于非手术组(P<0.01),但仍显著高于对照组(P<0.01)。MG手术组无效者IFN-γ水平显著高于完全缓解和部分缓解者(分别为P<0.01,P<0.05),部分缓解者显著高于完全缓解者(P<0.01)。手术组、非手术组与对照组间IL-4水平差异均无显著性(P>0.05)。MG手术组患者AChRAb显著低于非手术组(P<0.05),但仍显著高于对照组(P<0.05);手术组、非手术组及对照组间,以及手术组不同疗效者间外周血免疫球蛋白、补体水平差异均无显著性(P>0.05)。结论MG患者胸腺切除后体液免疫紊乱可得到一定程度纠正但未完全恢复正常。     

Enhancement of T Follicular Helper Cell-Mediated Humoral Immunity Reponses During Development of Experimental Autoimmune Myasthenia Gravis

Myasthenia gravis(MG) is a prototypical antibody-mediated neurological autoimmune disease with the involvement of humoral immune responses in its pathogenesis. T follicular helper(Tfh) cells have been implicated in many autoimmune diseases. However, whether and how Tfh cells are involved in MG remain unclear.Here, we established and studied a widely-used and approved animal model of human MG, the rat model with acetylcholine receptor alpha(AChRa) subunit(RAChR97–116)-induced experimental autoimmune myasthenia gravis(EAMG). This model presented mild bodyweight loss 10 days after the first immunization(representing the early stage of disease) and more obvious clinical manifestations and body-weight loss 7 days after the second immunization(representing the late stage of disease). AChR-specific pre-Tfh cells and mature Tfh cells were detected in these two stages, respectively. In cocultures of Tfh cells and B cells, the number of IgG2 bsecreting B cells and the level of anti-AChR antibodies in the supernatant were higher in the cultures containing EAMG-derived Tfh cells. In immunohistochemistry and immunofluorescence assays, a substantial number of CD4?/Bcl-6?T cells and a greater number of larger germinal centers were observed in lymph node tissues resected from EAMG rats. Based on these results, wehypothesize that an AChR-specific Tfh cell-mediated humoral immune response contributes to the development of EAMG.     

重症肌无力患者临床绝对评分和电生理检查的相关性研究

目的研究重症肌无力(MG)患者临床绝对评分和电生理检查结果的相关性。方法61例MG患者在进行临床绝对评分之后依次进行桡、腋、副和面神经低频重复电刺激(RNS)和伸指总肌单纤维肌电图(SFEMG)检查。通过SPSS10．0软件分析临床绝对评分与RNS和SFEMG结果的相关性。结果临床绝对评分与桡、腋、副和面神经低频RNS的波幅衰减程度之间均呈显著正相关；临床绝对评分与SFEMG结果中的平均jitter值、异常电位对比例和阻滞电位对比例之间呈非常显著正相关，而与正常电位对比例之间呈非常显著负相关。结论临床绝对评分的高低与电生理的检查结果间有很好的一致性，能够比较准确、客观地反映MG病情的严重程度。     

重症肌无力合并胸腺瘤患者手术疗效（附26例）

目的 :研究重症肌无力 (MG)合并胸腺瘤患者胸腺切除术的疗效。方法 :按Masaoka分期将 2 6例MG合并胸腺瘤者分为Ⅰ期 6例 ,Ⅱ期 13例 ,Ⅲ期 6例 ,Ⅳ期 1例。全部行胸腺切除术。结果 :术后 4例发生危象。随访 2年 ,19例 ( 73 1% )的患者术后病情明显改善 ;7例 ( 2 6 9% )没有变化或者疗效差。结论 :MG合并胸腺瘤的患者应早期适时进行胸腺切除手术。     

重症肌无力的免疫疗法

目的　回顾性分析重症肌无力 (MG)免疫疗法的方法和效果。方法　在 2 385例重症肌无力大样本基础上 ,对不同免疫疗法进行疗效评估 ,并设相应对照组。结果　泼尼松中剂量冲击、小剂量维持疗法治疗 60 0例MG患者 ,总有效率为 94 .6% ;中西医结合治疗组基本痊愈率明显高于对照组 ,复发率显著低于对照组 (P<0 0 1) ;胸腺切除治疗MG ,按围术期处理后 ,死亡率和近期加重反应出现率显著低于对照组 (P <0 0 5)。结论　按患者情况选用不同的免疫疗法 ,可获较好疗效 ,中西医结合治疗MG有良好的治疗前景。     

重症肌无力的发病机制

重症肌无力(MG)是一种神经-肌肉接头传递功能障碍的自身免疫性疾病。MG的发病机制主要涉及免疫因素和遗传因素。免疫因素包括多种致病抗体、细胞免疫、细胞因子、补体及胸腺等。随着免疫学研究的不断进展,MG的发病机制也有了更深入的研究。     

肌球蛋白抗体在重症肌无力病人血清中的表达及其在发病机制中的作用

目的:探讨myosin-Ab在MG发病机制中所起的作用。方法:采用ELISA法检测重症肌无力(MG)组54例,正常人组92例及其他疾病对照组28例血清中myosin-Ab的表达。结果:Myosin-Ab在血清中的正常值P/N(病人与正常人OD值之比)范围:0~2.98。高于2.98则为阳性。Myosin-Ab阳性率与肌无力严重程度呈正相关。Myosin-Ab效价与AChR-Ab呈正相关。结论:Myosin-Ab虽然不是诱发MG的必要条件,但由于myosin与AChR存在抗原交叉性,myosin-Ab在MG的发病机制中可能起重要作用。     

中国北方地区老年重症肌无力患者的临床特点

目的 总结中国北方地区60岁以后发病的老年重症肌无力(MG)患者的临床特点.方法 回顾性总结47例老年MG患者的性别构成、首发症状、病情严重程度、胸腺改变、伴发疾病、治疗情况、发生危象比例等,并与中青年MG患者进行比较.结果 老年MG患者占所有住院MG患者的23.04%,男女比例为0.96∶1.00;老年MG患者以上睑下垂为主要首发症状,病情最重时约68.09%的患者进展为全身型MG,这一比例低于中青年组(P<0.05);该组老年MG患者合并胸腺瘤的比例为22.5%,低于中青年组(P<0.05); 59.57%的患者合并糖尿病、原发性高血压、冠心病等内科疾病,高于中青年组(P<0.05);除应用溴吡斯的明治疗以外,72.34%的患者应用了免疫抑制剂治疗,仅19.15%的患者应用激素治疗,应用激素治疗的比例低于中青年组(P<0.05);12.76%的老年MG患者出现肌无力危象,与中青年组比较差异无统计学意义.结论 老年MG患者并不少见,男女比例相近,以上睑下垂为最常见首发症状,病情最重时大多数患者会发展为全身型MG,故仍需要给予免疫调节治疗;老年MG患者合并胸腺瘤比例低于中青年患者,但合并其他内科疾病比例高于中青年患者,其治疗以免疫抑制剂为主,而激素应用和胸腺切除术受到限制.     

Correlation between a patient-derived functional questionnaire and abnormal neuromuscular transmission in Myasthenia Gravis patients.

OBJECTIVE: To correlate the patient-derived physical function score, as measured by the disease specific Myasthenia Gravis Questionnaire (MGQ), and the score obtained with commonly used generic 36-item questionnaire, the Short-Form health survey (SF-36), with the degree of abnormal neuromuscular transmission measured by Single-Fibre EMG (SFEMG) and repetitive nerve stimulation (RNS) in Myasthenia Gravis (MG) patients. METHODS: SFEMG and RNS were performed in the deltoid muscle and SFEMG was also performed in the orbicularis oculi muscle in 45 MG patients. The patients were asked to fill out the MGQ, which has been translated and validated into Swedish, and the SF-36. The sum of MGQ items generates a global MGQ score. Items are also divided into 3 muscle specific domains: generalized, bulbar and ocular. RESULTS: The global MGQ score and generalized domain score of MGQ were strongly correlated with the degree of abnormal neuromuscular transmission, as measured by SFEMG in the deltoid muscle. Scores from ocular and bulbar domains of MGQ were not related to neurophysiological findings. Physical composite scores of SF-36 correlated significantly with the abnormal SFEMG findings in the deltoid. CONCLUSIONS: The degree of disturbed neuromuscular transmission in a proximal limb muscle correlates with a patient's subjective experience of generalized myasthenic dysfunction. SIGNIFICANCE: The observed correlation adds a new dimension to neurophysiological examinations in patients with MG.