细胞色素C氧化酶在慢性阻塞性肺疾病中的表达及其与肺血管内皮细胞凋亡的关系

目的 观察COPD患者肺组织中细胞色素C氧化酶(COX)和血管内皮细胞凋亡的变化,探讨COPD的发病机制.方法 2007年9月至2008年5月在中南大学湘雅二医院行肺切除术的周围型肺癌患者20例,参照COPD的诊断标准和患者的吸烟状况分为对照组(7例)、吸烟非COPD组(7例)和吸烟并COPD组(6例),取远离病变的肺组织.采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测肺血管内皮细胞凋亡,采用分光光度法、半定量逆转录PCR法和Western blot法分别检测肺组织中COX活性、COXⅡ亚基(COXⅡ)mRNA和蛋白表达,免疫组织化学法检测肺血管内皮细胞COXⅡ蛋白的分布和表达.多组间比较采用单因素方差分析,用LSD-t检验进行两两比较.结果 吸烟并COPD组肺血管内皮细胞凋亡指数为(13.8±1.9)%,明显高于吸烟非COPD组[(9.6±0.8)%]和对照组[(5.9±1.0)%];吸烟并COPD组肺组织中COX活性为(4.4±0.7)×105U/kg,COXⅡmRNA相对表达量为0.76±0.17,肺血管内皮细胞中COXⅡ蛋白相对表达量为14.5±1.6,明显低于吸烟非COPD组[(6.0±0.6)×105 U/kg、0.81±0.15和18.6±2.1]和对照组[(7.6±0.4)× 105U/kg、0.86±0.20和23.8±3.4],差异均有统计学意义(t值为-13.66～13.27,均P＜0.05);COX活性与FEV1占预计值%和FEV1/FVC呈显著正相关(r值分别为0.84和0.91,均P＜0.01),与吸烟指数呈显著负相关(r=-0.78,P＜0.01);肺血管内皮细胞凋亡与COXⅡ蛋白表达呈显著负相关(r=-0.75,P＜0.01).结论 COPD患者的肺血管内皮细胞凋亡增加,COX表达和活性下降,且均与吸烟有相关性.COX可能参与介导COPD肺血管内皮细胞凋亡过程.     

重度慢性阻塞性肺疾病稳定期患者血循环内皮细胞的变化

目的观察重度慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者血循环内皮细胞（CEC）值的变化。方法重度COPD（稳定期）组36例与正常对照组30例分别检测血CEC,重度COPD患者利用超声心动图测肺动脉平均压。结果重度COPD（稳定期）组血CEC值[（18.42±10.87）个/mm^3]明显高于对照组[（6.87±4.42）个/mm^3],差异有统计学意义（P〈0.01）;血CEC值与血氧分压呈显著性负相关（r=-0.235,P=0.021）,与肺动脉平均压呈显著性相关（r=0.183,P=0.015）。结论重度COPD患者血CEC值明显增加,肺血管内皮细胞（VEC）结构明显受损,缺氧是导致血管内皮细胞受损的主要原因。     

前列环素在慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中的表达

目的 研究前列环素在慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中的表达变化.方法 分别采集湘雅二医院2008年6-10月因肺癌、肺大疱入院行肺叶切除术的患者22例的肺组织标本,分为COPD组(12例)和对照组(10例).采用缺口末端标记法定量测定肺血管内皮细胞凋亡,免疫组织化学法检测前列环素合酶(PGI_2-S)蛋白表达,酶联免疫吸附试验测定6-酮前列腺素F_(1α)含量变化.两组间比较采用t检验.结果 COPD组肺中型血管和微小型血管内皮细胞凋亡指数[(12.9±2.0)%和(11.4±1.4)%]明显高于对照组[(6.1±1.2)%和(5.9±0.4)%],PGI_2-S蛋白表达率[(55.2±9.8)%和(42.3±5.1)%]明显低于对照组[(95.4±2.1)%和(82.3±7.4)%],气道上皮细胞中PGI_2-S蛋白表达率[(31.8±5.2)%]明显低于对照组[(95.5±2.2)%],6-酮前列腺素F_(1α)含量[(2.6±0.4)μg/L]明显低于对照组[(16.2±2.8)μg/L],差异均有统计学意义(t值为9.6～173.6,均P<0.01).结论 COPD患者肺血管内皮细胞存在异常凋亡现象,PGI_2-S蛋白表达下降,肺组织中前列环素生成明显减少,这些变化可能是COPD患者肺血管内皮细胞功能异常的组织学标志,并参与COPD的发生与发展.     

细胞凋亡与慢性阻塞性肺疾病

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)定义为气道的慢性炎症、肺实质进行性的破坏.大部分由抽烟引起.涉及到以下几个机制:气道的慢性炎症、蛋白酶/抗蛋白酶失衡、氧化应激.最近的文献提及COPD第4个重要的机制肺内结构细胞的凋亡,血管内皮生长因子在其中起重要作用.凋亡的途径:如caspase-3、神经酰胺等,可以作为预防凋亡和肺气肿发生的靶途径.本篇综述就COPD凋亡机制的相关文献进行讨论.为COPD和肺气肿的凋亡机制提供一些新的文献.     

肺血管内皮细胞在慢性阻塞性肺疾病发病机制中的作用

慢性阻塞件肺疾病的发病机制是目前研究热点,肺血管内皮细胞存符种学说中均占有重要地位,本文概述了肺血管内皮细胞在慢性阻塞性肺疾病发病机制中的作用,以期指导临床找到早期诊断慢性阻塞性肺疾病的敏感指标.     

慢性阻塞性肺疾病膈肌细胞凋亡的实验研究

目的观察烟雾和内毒素对大鼠膈肌细胞凋亡的影响,为探索COPD发生机制提供新的思路。方法 30只Wistar大鼠随机分为COPD组和对照组,采用烟雾暴露和气管内注入内毒素法建立COPD大鼠模型。第1、14、28天分别采集大鼠膈肌和肺组织标本,HE染色评估肺部病理改变,原位缺口末端标记法检测膈肌细胞凋亡,免疫组化法检测膈肌细胞Fas蛋白和半胱氨酸蛋白酶表达,RT-PCR测定Fas基因表达水平,第28天检测大鼠肺功能。结果第28天,COPD组大鼠的肺组织病理符合慢性支气管炎、肺气肿改变,肺功能均较对照组明显下降;第14、28天,COPD大鼠膈肌细胞凋亡率[（23.40±1.72）%和（34.60±1.25）%]明显高于对照大鼠[（1.04±0.10）%和（1.07±0.11）%],膈肌细胞Caspase-3表达、Fas蛋白及Fas基因表达COPD组也显著增高（P〈0.01）。结论在COPD的发生过程中存在膈肌细胞过度凋亡,Caspase-3和Fas/FasL途径参与了膈肌细胞凋亡的调控。     

实验性吸烟小鼠气道上皮细胞凋亡与慢性阻塞性疾病发生 …

细胞凋亡是细胞接受某种信号或受到某些因素刺激后主动参与的一种细胞死亡过程 ,它与疾病发生密切相关。我们采用脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记 (ＴＵＮＥＬ)技术 ,并结合透射电镜的形态学观察 ,探讨吸烟致小鼠气道上皮细胞凋亡在慢性阻塞性肺疾病 (ＣＯＰＤ)发生过程中的作用。材料与方法　 (1)动物香烟烟雾吸入实验 :健康昆明小白鼠 80只 ,体重 18～ 2 0ｇ ,每组 8只 ,共分 10组。设未吸烟对照组 3组 ,香烟烟雾吸入实验组 6组 ,余下一组动物在首次吸烟前处死作为正常对照组。实验用烟为市售红双喜牌过滤嘴香烟 (武汉卷烟厂制 ) ,尼…     

细胞色素C氧化酶-2/前列腺素E2信号通路对老年慢性阻塞性肺疾病患者肺血管内皮细胞凋亡的作用

目的探讨细胞色素C氧化酶(Cox)-2/前列腺素E2(PG)E2信号通路对老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺血管内皮细胞凋亡的作用。方法该行肺叶切除术的老年患者20例,根据吸烟情况和COPD诊断标准分为非吸烟非COPD组(对照组)6例,吸烟非COPD组(非COPD组)7例,吸烟且COPD组(COPD组)7例,取癌旁正常肺组织为研究标本。TUNEL法检测肺血管内皮细胞凋亡情况;免疫组化染色观察细胞中Cox-2、PGE2蛋白分布情况;RT-PCR检测Cox-2、PGE-2 mRNA表达;Western印迹检测Cox-2、PGE2蛋白的表达。结果肺血管内皮细胞凋亡指数由高到低依次为COPD组、非COPD组、对照组;Cox-2、PGE2蛋白呈棕色或棕黄色表达于肺血管内皮细胞质并在对照组中表达丰富。非COPD组、COPD组肺组织中Cox-2、PGE2 mRNA表达量明显低于对照组,COPD组明显低于非COPD组(P<0.05)。非COPD组、COPD组肺组织中Cox-2、PGE2 mRNA蛋白表达量明显低于对照组,COPD组明显低于非COPD组(P<0.05)。结论 COPD患者Cox-2、PGE2表达下调,肺血管内皮细胞凋亡增加且与吸烟相关;Cox-2/PGE-2信号通路参与介导COPD患者肺血管内皮细胞凋亡,呈负向调节。     

凋亡和凋亡细胞清除在慢性阻塞性肺疾病发病机制的地位

吸烟是导致慢性阻塞性肺疾病（CODP）气道炎症的主要原因，但戒烟并不能减轻气道炎症，且炎症持续存在，疾病进行性发展和恶化。肺内凋亡细胞清除（胞葬作用：Efferocytosis）缺失可能与其有关，这种现象在COPD发生发展起重要作用。专职和非专职吞噬细胞识别凋亡细胞的过程具有抗炎、抗免疫和抗蛋白水解的作用，并诱导维持肺泡细胞生长因子产生和分泌，其功能缺失将导致凋亡细胞清除降低。一旦凋亡细胞识别缺失，这些作用也随之紊乱，这将对COPD发病机制起重要的作用。凋亡细胞清除缺失这一关键问题如何被发现和如何被控制？至今未有答案。     

内皮祖细胞与慢性阻塞性肺疾病

内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是造血干细胞一支骨髓衍生群.目前EPCs的鉴定是结合多方面的综合鉴定.在慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)中,低氧刺激、正常迁移的趋化因子增加、外周循环过度消耗、反应性凋亡、营养缺乏,以及炎症因子刺激等综合因素导致EPCs数量改变,最终使组织修复能力和血管再生能力耗竭.干/祖细胞治疗在COPD中拥有一定的运用前景,其移植过程中的安全性评估意义重大.     

血内皮祖细胞与降钙素基因相关肽在慢性阻塞性肺疾病并发肺动脉高压中的变化及意义

目的 观察慢性阻塞性肺疾病(chronie obstructive pulmonary disease,COPD)并发肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)患者外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)数量和功能及降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的变化,并探讨其在COPD并PAH发病中的作用.方法 选择聊城市人民医院住院的COPD患者60例,其中COPD并PAH(COPD+PAH组)患者30例,COPD非PAH患者30例(COPD组);正常对照20名(非COPD组)、用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,培养7 d后对贴壁细胞进行细胞化学分析.通过集落形成试验、改良的Boyden小室和黏附能力测定实验计数EPC的数量、测定EPC的迁移和黏附能力.用放射免疫法检测人选患者血浆CGRP水平.结果 与正常对照组及COPD组相比,COPD+PAH组外周血EPC数量明显减少,黏附和迁移能力显著降低(F＝9.52～14.35,q=3.36～8.12,P＜0.05),且EPC数量及黏附、迁移能力与肺动脉压力呈负相关(r＝0.73、-0.79、-0.81,P＜0.01).COPD+PAH组患者血浆CGRP水平明显低于对照组(P＜0.01),CGRP浓度与循环EPC数量及迁移能力呈正相关(γ=0.71,0.73),与循环血EPC黏附能力无相关性.结论 COPD患者PAH的发生可能与循环EPC数量减少、迁移和黏附能力降低有关,这种变化可能与血浆CGRP水平减少有关.     

脂多糖对慢性阻塞性肺疾病患者气道上皮细胞Toll样受体4表达的影响

目的探讨脂多糖(LPS)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者原代培养的气道上皮细胞Toll样受体4(TLR4)介导的炎症反应及其作用机制。方法华中科技大学同济医学院同济医院胸外科2004年1月至10月因肺部肿瘤而行肺叶切除术的患者24例,体外分离其肺标本并培养气道上皮细胞,根据肺功能检查结果及有无吸烟史分为COPD组、非COPD吸烟对照组及非COPD不吸烟对照组,每组8例。用100μg／L LPS刺激原代培养的气道上皮细胞;采用流式细胞仪(FCM)检测原代培养的气道上皮细胞表面的TLR4,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测其TLR4 mRNA表达。结果FCM检测显示,COPD组的气道上皮细胞表面TLR4荧光阳性细胞数[(10．23±0．58)％]与非COPD吸烟对照组及非COPD不吸烟对照组比较差异均有统计学意义[(1．52±0．06)％、(1．78±0．06)％, q=5．61、5．38,P均<0．05];LPS刺激后,非COPD吸烟对照组及非COPD不吸烟对照组气道上皮细胞表面TLR4荧光阳性细胞数显著升高[(10．69±0．74)％、(11．28±0．68)％,q=9．58、8．98,P均< 0．05],荧光强度增强,而COPD组则未见明显升高[(11．89±0．89)％,q=1．95,P>0．05]。LPS刺激前,COPD组气道上皮细胞TLR4 mRNA(吸光度值)水平(0．359±0．032)与非COPD吸烟对照组及非COPD不吸烟对照组比较差异均有统计学意义(0．147±0．008、0．152±0．013,q=5．12、4．99,P均< 0．05);LPS刺激后,非COPD吸烟对照组及非COPD不吸烟对照组TLR4 mRNA水平显著升高(0．425±0．037、0．418±0．035,q=4．58、4．65,P均<0．05),而COPD组无显著变化(0．398±0．028, g=0．86,P>0．05)。结论慢性炎症和LPS刺激导致原代培养的COPD患者气道上皮细胞表面TLR4和TLR4 mRNA水平升高可能是COPD发病的一个关键因素。     

无症状慢性阻塞性肺疾病患者特点分析

目的了解北京市农村地区无症状慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的流行病学特点。方法对北京市延庆县5个自然村40岁以上1624名进行入户调查。进行问诊、体检,填写流行病学调查问卷并进行肺功能检查。结果该地区40岁以上COPD患者148例,总患病率为9.1%(148/1624),其中无症状组62例(42%),有症状组86例(58%);无症状COPD的患病率为3.8%(62/1624)。无症状组和有症状组患者性别、年龄、职业、婚姻状况、受教育程度和吸烟情况比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。肺功能检测显示,有症状组第一秒用力呼气容积(FEV1)、第一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1占预计值%)为(1.3±0.7)L、(61±23)%,与无症状组[(1.5±0.6)L、(70±22)%]比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论COPD在该地区患病率较高,其中无症状COPD的比例也较高。由于COPD的诊断需要依靠肺功能测定,而早期肺功能受损不太严重时临床症状不明显,因而造成COPD的漏诊和对疾病危害的低估。     

慢性阻塞性肺疾病评估测试中文版临床应用意义的评价

目的 研究COPD评估测试(CAT)中文版用于评估我国COPD患者生命质量的信度和效度,观察其用于评估生命质量的作用和价值.方法 选择北京协和医院COPD稳定期患者,应用CAT中文版评估患者的生命质量,同时测定肺功能,对结果进行相关性分析,评价CAT内部一致性的信度和效度.根据CAT评分对患者进行分级,并与根据肺功能的分级进行比较,观察其对病情严重程度的评估价值.结果 135例COPD患者中,男105例,女30例,年龄45～84岁,平均(65±10)岁.CAT评分随患者病情加重而逐渐增加,CAT量表的总克龙巴赫α系数为0.805,CAT总分与FEV1占预计值%呈显著负相关(r值为-0.567,P＜0.01).病情严重程度不同的4组COPD患者,其CAT总分分别为(10±5)分、(16±6)分、(21±7)分和(23±6)分,组间比较的差异有统计学意义(x2值为48.437,P＜0.01).根据CAT分级和根据肺功能COPD严重程度分级比较,两者具有高度一致性.结论 CAT中文版用于我国COPD患者,具有良好的内部一致性信度和效度,可用于患者生命质量的评估,是一种简易、可靠、有效的标准化测量方法.

Abstract：

Objective To determine the reliability and validity of the COPD assessment test (CAT)Chinese version in patients with chronic obstructive pulmonary disease ( COPD ), and to study its value in evaluating quality of life in Chinese patients.Methods One hundred and thirty-five patients with COPD in stable condition from Peking Union Medical College Hospital were assessed by interview with CAT Chinese version,and underwent pulmonary function test on the same day.The validity was documented by performing correlation analysis, and Pearson' s correlation coefficients were calculated.The stages of COPD determined by CAT score and lung function were compared to observe the value of CAT in determining disease severity.Results Cronbach' s alpha of CAT Chinese version was 0.805.CAT score increased with the severity of the disease, and was negatively correlated to FEV1 % of predicted ( r = - 0.567, P ＜ 0.01 ).CAT score varied significantly in patients ( 10 ± 5, 16 ± 6, 21 ± 7 and 23 ± 6 ), with different severity of COPD ( x2 =48.437, P ＜0.01 ).There was a high degree of consistency between the stages of COPD determined by CAT score and lung function.Conclusions The Chinese version of the CAT had good internal consistency reliability and validity, and can be used to assess the quality of life for Chinese COPD patients.It provided a simple, valid and standardized measurement of COPD health status.     

非编码RNAs在慢性阻塞性肺疾病所致肺动脉高压致病机制中的作用

慢性阻塞性肺疾病所致肺动脉高压(COPD-PH)的发病率和病死率高,患者3年生存率仅为41%。目前COPD-PH的常规对症治疗以及针对PH的靶向治疗,效果均不理想。非编码RNAs作为重要的内源基因调节因子,严格调控生理和病理过程。COPD-PH患者中存在非编码RNAs表达的改变,且发现其在COPD-PH发病机制中发挥重...