用HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中左氧氟沙星和头孢他啶的浓度

目的 建立超高液相色谱串联质谱同时测定人血浆中左氧氟沙星和头孢他啶浓度的方法。方法 用甲醇沉淀蛋白后,以环丙沙星为内标,色谱柱：Agilent Zorbax Eclipse Plus C18(2.1 mm×100.0 mm, 1.8μm),流动相∶水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸)=90∶10,等度洗脱,流速：0.2 mL·min^-1,柱温：40℃,进样量：1μL。电喷雾离子源,多离子反应监测,正离子扫描模式进行检测。考察该方法的专属性、标准曲线和定量下限、精密度与回收率、基质效应及稳定性。结果 血浆样品中左氧氟沙星在0.05～25.72μg·mL^-1线性关系良好,标准曲线为y=4.53x+0.02(r=0.999 6),定量下限为0.05μg·mL^-1;头孢他啶在0.21～107.25μg·mL^-1线性关系良好,标准曲线为y=0.40x+0.02(r=0.999 7),定量下限为0.21μg·mL^-1;2种药物的平均提取回收率均在88.66%～108.21%,日内和...     

LC-MS/MS法同时测定人血清中卡马西平和拉莫三嗪浓度

目的:建立同时测定人血清中卡马西平和拉莫三嗪浓度的方法。方法:采用液-质联用法,以伐地那非和红地那非为内标,血清经乙腈直接沉淀后进样分析。色谱柱为XbridgeTMPhenyl,流动相为含0.02%甲酸的水溶液-含0.02%甲酸的乙腈溶液(60∶40),流速为0.3mL·min-1。电喷雾离子源,正离子多反应监测扫描分析,卡马西平和内标伐地那非的离子对分别为m/z237→194和m/z489→72;拉莫三嗪和内标红地那非的离子对分别为m/z256→43和m/z467→111。结果:卡马西平和拉莫三嗪血药浓度分别在5～500μg·L-1(r=0.9988)和100～10000μg·L-1(r=0.9964)范围内线性关系良好,定量下限分别为5、100μg·L-1。日内、日间RSD均<8%;平均提取回收率分别在88.9%～100.9%和89.5%～100.3%范围内。结论:本方法样品处理简便,适用于临床血药浓度监测及药动学研究。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中艾普拉唑和雷贝拉唑的浓度

目的:建立同时测定人血浆中艾普拉唑和雷贝拉唑浓度的方法。方法:人血浆样本用乙酸乙酯提取后,采用液相色谱串联质谱法进样测定,色谱柱为Zorbax SB-C18,流动相为乙腈-10 mmol/L醋酸铵(80∶20),流速为0.20 ml/min。采用三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)方式进行正离子检测,用于定量分析的离子分别为m/z 367.5→m/z 184.1(艾普拉唑)、m/z 360.0→m/z242.0(雷贝拉唑)和m/z 383.2→m/z 266.8(内标氯雷他定)。结果:艾普拉唑和雷贝拉唑血药浓度均在5~1 500 ng/ml范围内线性关系良好(r分别为0.996 6、0.996 2),最低定量限为5 ng/ml;日内、日间RSD<15%。艾普拉唑、雷贝拉唑提取回收率分别为76.5%~78.8%、86.7%~89.3%。受试者单剂量口服艾普拉唑肠溶片5 mg的主要药动学参数中tmax分别为3、2.5 h,cmax分别为418.09、654.50 ng/ml,AUC0-24 h分别为2 028.48、3 499.18 ng·h/ml;单剂量口服雷贝拉唑肠溶片10 mg后的主要药动学参数中tmax分别为2、3.5 h,cmax分别为342.4、402.5 ng/ml,AUC0-24 h分别为1 018.0、1 196.6 ng·h/ml。结论:该方法快速、灵敏、准确、专属性强、重复性好,可适用于人血浆中艾普拉唑和雷贝拉唑浓度的同时测定。     

LC-MS/MS法同时测定兔血浆中甲硝唑和盐酸克林霉素的浓度

目的 建立同时测定兔体内血浆中甲硝唑和克林霉素浓度的LC-MS/MS法,并进行方法学验证,然后应用于兔体内药动学研究.方法 本试验采用LC-MS/MS法同时测定阴道给予兔复方甲硝唑原位凝胶后血浆中甲硝唑和克林霉素的浓度.采用液-液萃取法对血浆样品进行前处理,色谱柱为 Thermo C18 column(10 mm×4....     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素的质量浓度

目的建立一种简单、快速的同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素质量浓度的LC-MS/MS方法。方法以利奈唑胺为内标,血浆经高氯酸沉淀蛋白,加入2倍量水,离心,上清液用二氯甲烷萃取后进样分析;色谱柱为Hypersil GOLD aQ,1mL·L-1甲酸水溶液-甲醇梯度洗脱,流速为0.3mL·min-1;离子源为可加热电喷雾离子源,正离子检测,扫描方式为选择反应监测(SRM),万古霉素、去甲万古霉素和利奈唑胺的检测离子对分别为m/z725.7→144.2,m/z718.3→144.2和m/z338.3→296.0。结果各样品分析时间均为8min,血浆中万古霉素和去甲万古霉素的质量浓度在0.01～10μg·mL-1范围内线性关系良好,最低定量限均为10ng·mL-1,两药测定的日内和日间精密度RSD值小于15%,日内和日间相对误差在±15%以内。万古霉素和去甲万古霉素的提取回收率分别为74.16%～76.79%和73.01%～81.11%,基质效应分别为98.86%～108.69%和95.97%～109.64%。万古霉素和去甲万古霉素血浆样品在冻融、室温下保存24h和-80℃保存1个月的条件下稳定。结论建立的LC-MS/MS分析方法简便、快速、灵敏、准确,可同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素的质量浓度,并用于临床血药质量浓度的监测。     

LC-MS/MS法同时测定洛匹那韦和利托那韦的血浆浓度

建立液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 测定人血浆中洛匹那韦 (LPV)、利托那韦 (RTV) 的浓度。血浆样品经碱化沉淀蛋白后, 经乙酸乙酯液-液萃取, 以甲醇-0.1%甲酸水溶液 (80∶20) 为流动相, Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈ (150 mm × 4.6 mm ID, 5 μm) 柱分离; 采用电喷雾电离源, 以多反应监测 (MRM) 方式进行正离子检测, 用于定量分析的离子对LPV为629.6→155.2, RTV为721.4→268.2, 内标替米沙坦 (TEL) 为515.2→276.2。测定血浆中LPV线性范围为62.5～10 000 ng·mL⁻¹, 检测限为15 pg·mL⁻¹, RTV的线性范围为12.5～2 000 ng·mL⁻¹, 检测限为8 pg·mL⁻¹, r均大于0.99。日内和日间精密度均小于15%, 提取回收率均大于75%。该法选择性强、灵敏度高、重现性好, 能同时快速、准确测定人血浆LPV和RTV浓度, 为临床治疗药物浓度监测 (TDM) 奠定基础。     

LC-MS/MS法同时测定拉考沙胺和吡仑帕奈的血浆药物浓度

目的 建立同时测定人血浆中2种第三代抗癫痫药拉考沙胺和吡仑帕奈血浆药物浓度的方法并应用于临床。方法 10例癫痫患者的血浆样品经乙腈沉淀蛋白并以乙腈-水(20∶80,V/V)稀释后，以氯氮平为内标，采用液相色谱-串联质谱法测定拉考沙胺、吡仑帕奈的质量浓度，再通过稀释倍数换算得血浆药物谷浓度。以Welch Ultimate XB-C₁₈为色谱柱，以10 mmol/L甲酸铵溶液为流动相A、甲醇-乙腈-异丙醇(0.2%甲酸)混合溶液(7∶1.5∶1.5,V/V/V)为流动相B进行梯度洗脱，流速为0.4 mL/min，柱温为40℃，进样量为5μL；采用电喷雾离子源以多反应监测模式进行正离子扫描，用于定量分析的离子对分别为m/z 251.2→144.1(拉考沙胺)、m/z 350.2→219.2(吡仑帕奈)、m/z 327.2→270.0(内标)。结果 拉考沙胺、吡仑帕奈检测质量浓度的线性范围分别为0.001 25～0.125μg/mL(r>0.99)、0.037 5～3.75 ng/mL(r>0.99)，定量下限分别为0.001 25μg/mL、0.037 5 ...     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中紫杉醇和多西他赛的质量浓度

目的建立一种简单、快速,可同时测定人血浆中紫杉醇和多西他赛药物质量浓度的LC-MS/MS方法。方法以罗红霉素为内标,血浆经乙腈沉淀蛋白、离心后进样分析;色谱柱为Hypersil GOLD aQ;流动相为1mL·L-1甲酸溶液-乙腈;梯度洗脱;流速为0.4mL·min-1;离子源为可加热电喷雾离子源(HESI);检测方式:正离子检测;扫描方式为多反应监测(MRM),紫杉醇、多西他赛和罗红霉素的检测离子对分别为m/z854.3→509.1,808.3→527.1和837.6→679.3。结果每份含紫杉醇和多西他赛的样品分析时间为6min,血浆中紫杉醇和多西他赛的药物质量浓度在0.005~1.000μg·mL-1范围内线性关系良好,最低定量限为0.005μg·mL-1,两药测定的日内和日间精密度RSD<15%,提取回收率分别为94.97%~101.95%和96.07%~112.86%,基质效应分别为101.14%~115.59%和82.40%~95.77%。紫杉醇和多西他赛血浆样品在反复冻融3次、4℃保存2h和-80℃保存1个月的条件下稳定。结论该研究建立的LC-MS/MS分析方法简便、快速、灵敏和准确,能同时测定人血浆中紫杉醇和多西他赛的质量浓度。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆伊曲康唑和羟基伊曲康唑浓度

目的:建立同时测定人血浆伊曲康唑和羟基伊曲康唑浓度的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)。方法:100μL血浆样品经液-液萃取后,以乙腈-水-冰醋酸(60:40:1.5)为流动相,经Neucleosil ODS柱(50 mm×2.0 mm,5μm)分离,采用电喷雾电离源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子分别为m/z 705→m/z 392(伊曲康唑),m/z 721→m/z 408(羟基伊曲康唑)和m/z 383→m/z 337(内标氯雷他定)。结果:测定血浆伊曲康唑和羟基伊曲康唑的线性范围分别为:10～2 500 ng.mL-1和20～4 000ng.mL-1,最低定量限(LLOQ)分别为:10和20 ng.mL-1。日内、日间精密度(RSD)均<15.0%,准确度(RE)在±7.8%以内。结论:该方法分析时间短、灵敏度高、专属性强,适用于伊曲康唑和羟基伊曲康唑的药动学研究。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀酸

目的 采用LC-MS/MS法同时测定人血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀酸.方法 采用BEH C18色谱柱(50 mm ×2.1mm,1.7 μm),流动相为乙腈-0.01 mol·L-1醋酸铵(72∶28),流速0.15 mL·min-1,柱温40℃,进样量8μL.辛伐他汀、辛伐他汀酸及内标洛伐他汀的检测离子对分别为:m/z 419.43→199.12、437.38→303.26、405.45→199.14.结果 辛伐他汀、辛伐他汀酸的线性范围分别为0.241 ～61.76 ng·mL-1(r =0.999)、0.344 ～ 88.16 ng·mL-1(r =0.997).在人血浆基质中,高、中、低浓度(0.482、3.86、30.88 ng· mL-1)的日内、日间RSD均小于15％,方法回收率分别为95％～104％、97％ ～108％.样品预处理方法对血浆中的辛伐他汀和辛伐他汀酸测定无干扰.结论 所用方法处理简单、灵敏、特异性高,定量准确,可为辛伐他汀制剂的药动学研究提供方法.     

LC-MS/MS法同时测定大鼠组织中替格瑞洛及代谢物的质量浓度

目的建立LC-MS/MS法同时测定大鼠组织中替格瑞洛及其代谢物AR-C124910XX质量浓度的方法,并应用于替格瑞洛及其代谢物组织分布的研究。方法组织样品采用乙醚提取,Agilent XDB-C_(18)柱分离;流动相为甲醇-乙腈-体积分数0.1%甲酸水溶液(体积比50∶20∶30),流速为0.7 m L·min~(-1);质谱采用MRM多反应检测模式,正离子方式检测。结果替格瑞洛在0.1~50μg·g~(-1)内线性关系良好,日间、日内精密度RSD均不大于12.7%;AR-C124910XX在0.05~20μg·g~(-1)内呈良好线性关系,日间、日内精密度RSD均不大于10.7%。结论该法适合于测定大鼠组织中替格瑞洛及其代谢物的质量浓度,并为替格瑞洛的进一步临床研究奠定基础。     

LC-MS/MS同时测定人血浆中6种抗真菌药物浓度

目的 建立LC-MS/MS方法同时测定人血浆中氟康唑、伏立康唑、泊沙康唑、伊曲康唑、羟基伊曲康唑、卡泊芬净6种抗真菌药物的浓度。方法 向50 μL血浆样本中加入含同位素内标的甲醇沉淀蛋白后稀释进样分析。色谱柱为Kinetex C₁₈（3 mm×100 mm,2.6 μm）,流动相为0.1%甲酸-水（含5 mmol·L^-1乙酸铵）和0.1%甲酸-甲醇,梯度洗脱,流速为0.6 mL·min^-1,进样量为5 μL,分析时间为5 min。采用电喷雾离子源,正离子多反应监测模式扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 307.0→220.2（氟康唑）、m/z 350.1→224.1（伏立康唑）、m/z 701.4→683.2（泊沙康唑）、m/z 705.2→392.2（伊曲康唑）、m/z 721.5→408.3（羟基伊曲康唑）、m/z 547.4→131.1（卡泊芬净）。结果 6种抗真菌药物在0.1~20 μg·mL^-1内线性良好（r≥0.995 0）,准确度为90.35%~114.94%,仪器精密度RSD均<15%（定量下限处<20%）。提取回收率和基质效应分别为71.99%~90.38%和96.78%~134.17%。稳定性符合生物样本分析方法验证要求。应用本方法测定25例侵袭性真菌感染患者的血浆谷浓度,其中伏立康唑谷浓度0.70~12.94μg·mL^-1,氟康唑4.57~12.64 μg·mL^-1,个体间差异较大。结论 本方法操作简单快捷,准确度和灵敏度高,重现性良好,适用于临床治疗药物监测。     

LC-MS/MS法同时测定血浆中氟马替尼及其代谢产物浓度

目的 建立一种简便、特异、快速的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法同时测定血浆中的氟马替尼及其两种主要代谢物，用于临床治疗药物监测。方法 采用LC-MS/MS法，色谱柱选用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×50 mm, 1.8μm),流动相为乙腈和10 mmol·L^-1甲酸铵(含0.1%甲酸)溶液，梯度洗脱，流速为0.5 mL·min^-1,洗脱时间为6 min,柱温为38℃,在电喷雾离子源正离子模式下采用多反应监测扫描。结果 氟马替尼及其代谢产物N-去甲基氟马替尼(M1)和氟马替尼酰胺水解产物(M3)的质量浓度在考察的浓度范围内线性关系良好，方法的精密度、稳定性良好，精密度均小于15%,相对偏差均在±15%范围内，氟马替尼及其代谢物回收率接近100%。结论 该方法操作简单，灵敏度高，能够准确测定出氟马替尼及其两种主要代谢产物的血药浓度，为氟马替尼及其代谢物的药动学研究提供依据。     

LC-MS/MS法快速测定人血浆中美沙酮的浓度

目的:建立快速测定人血浆中美沙酮浓度的方法。方法:采用高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC-MS/MS)法。色谱柱为AgilentTCC18,流动相为甲醇-5mmol·L-1甲酸铵(90∶10),流速为1mL·min-1,柱温为25℃,提取剂为醋酸乙酯∶二氯甲烷(4∶1)。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对美沙酮(m/z310.0→264.9)和内标地西泮(m/z285.1→154.0)进行测定。结果:美沙酮血药浓度在2.5～500μg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9990),分析方法的最低定量限为2.5μg·L-1;其高、中、低(300、100、5μg·L-1)3种浓度的平均方法回收率分别为100.23%、101.20%和101.39%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均<10%。结论:本方法简单、快速、灵敏、准确、重现性好,可用于美沙酮的临床血药浓度监测和药动学研究。     

LC-MS/MS法追踪测定人血浆中克伦特罗的浓度

目的用液相色谱-质谱串联法测定人血浆中的克伦特罗含量并对其舌下片剂与气雾剂的疗效进行比较。方法血浆离心后过玻璃纤维滤膜,经酶解加入氘代克伦特罗内标溶液,用C18小柱净化后以3%的氨水甲醇溶液对Oasis MCX小柱进行洗脱,吹干,以0.1%甲酸水溶液-甲醇溶液(95:5)溶解残余物,用液相质谱串联法测定,以0.1%甲酸乙腈溶液和0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱。结果克伦特罗在0.25~10.0ng·m L-1与峰面积线性关系良好,定量下限为0.10 ng·m L-1。结论本法灵敏准确、重现性与特异性强、干扰少,作为研究人血浆中克伦特罗浓度变化的检测方法很理想。     

LC-MS/MS法同时测定麻杏口服液中五种成分

目的 建立LC-MS/MS法同时测定麻杏口服液中麻黄碱、甲基麻黄碱、苦杏仁苷、甘草素和阿魏酸5种成分的含量。方法 麻杏口服液甲醇稀释液直接加入内标溶液后经过KLP-SPZ-002色谱柱分离,流动相为甲醇-乙腈-水(含0.1%甲酸,48.75∶16.25∶35,v/v/v),流动相流速为500μL·min^-1,质谱监测器采用ESI源,多反应监测模式,正负离子切换进行扫描。结果 5种成分在测定浓度范围内线性关系良好,回收率在95.6%～106.4%之间。结论 本方法快速,灵敏,可以应用于麻杏口服液的常规质量控制。     

LC-MS/MS法同时分析血液中几种免疫抑制剂浓度

目的：建立LC-MS/MS法同时测定人血浆及全血中霉酚酸（MPA）、环孢素（CsA）、他克莫司（TAC）及西罗莫司（SRL）等几种常用免疫抑制剂的浓度。方法：分别采用蛋白沉淀法与液液萃取法处理血浆与全血：100 μL血浆加入含内标乙腈，涡旋振荡， 离心后取上清液进入LC-MS/MS分析。100 μL全血加入硫酸锌破裂血细胞，加入乙醚萃取，分离有机相，以氮气吹干后流动相复溶分析。色谱柱为 Agilent Eclipse XDB-C₁₈柱（3.5 μm，2.1 mm×100 mm），流动相为 2 mmol·L^-1 甲酸铵水溶液和甲醇，采用梯度洗脱的方式，流速0.3 mL·min^-1，多反应监测定量，ESI 正离子方式进行检测，用于定量分析的检测离子对分别为m/z→274.4/159.2（MPA），m/z→1 219.4/1 202.4（CsA），m/z →821.7/768.5（TAC），m/z →931.6/864.5（SRL），内标m/z→809.6/756.5（子囊霉素），m/z→356.3/312.0（吲哚美辛）。回顾性收集常规监测肾移植患者的全血标本，比较LC-MS/MS 法与 EMIT法的检测结果。结果：CsA、TAC、SRL、MPA的线性范围分别为：4~1 000 ng·mL^-1 （r=0.999 7）、0.2~50 ng·mL^-1 （r=0.999 5）、0.2~50 ng·mL^-1 （r=0.999 8）、0.204~51 μg·mL^-1 （r=0.997 6），血浆和全血日内和日间相对标准差（RSD）均小于15%，提取回收率以及基质效应血浆中为72.38%~98.52%、65.61%~99.19%，全血中为85.34%~99.76%、75.94%~97.67%。不同法检测全血中与血浆中CsA及TAC浓度相关性良好，而血浆中CsA与TAC显著低于全血中水平，MPA血浆浓度大约为全血浓度的2倍。结论：本研究建立的方法具有方便快速的特点，可以同时测定几种免疫抑制剂浓度，对同时监测多种免疫抑制剂具有一定价值。     

LC-MS/MS法同时测定中药肉豆蔻中12种真菌毒素

摘要：目的:建立了中药肉豆蔻中12种毒素的LC-MS/MS测定方法。方法:样品经70%甲醇提取、Myco6in1+免疫亲和柱净化后进样分析。色谱柱为CORTECS UPLC C18（2.1 mm×30 mm,1.6μm）;流动相为水（含有0.1%甲酸）-乙腈（含有0.1%甲酸）,梯度洗脱;流速为0.4 ml·min-1;柱温为30℃;采用电喷雾离子源（ESI）进行正离子模式将样品离子化,多反应监测（MRM）模式下采用基质匹配标准曲线法进行定量分析。结果:12种真菌毒素在一定线性范围内线性关系良好（r>0.995 0）,低、中、高三个添加浓度水平的回收率为66.1%～109.8%,检测限（LOD）和定量限（LOQ）分别为0.10～5.00μg·kg-1和0.30～15.00μg·kg-1。结论:本法灵敏度高、结果准确、重复性好,适用于肉豆蔻中多种真菌毒素成分的测定分析。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中的咖啡因和氯苯那敏

目的 采用LC-MS/MS法同时测定人血浆中咖啡因和氯苯那敏的浓度.方法 人血浆样本经液液萃取后,选用Inertsil ODS-SP色谱柱(75 mm×2.1 mm,3μm),流动相为甲醇-5 mmol·L-1乙酸铵(含0.5％甲酸)(55∶45),流速0.3 mL·min-1,选用API3200型三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测,电喷雾离子化源,正离子方式,选择监测离子反应分别为m/z 195.3→110.2(咖啡因)、m/z 275.2→230.2(氯苯那敏)和m/z256.2→167.3(苯海拉明内标).结果 血浆中咖啡因和氯苯那敏的线性范围分别为4.0～1.2×103、0.05 ～15.0μg·L-1(r＞0.999);批内、批间RSD均小于13％;相对误差(RE)均在±5％的范围内;平均提取回收率分别为67.6％±1.3％、69.1％±3.4％.结论 所用方法快速、灵敏、专属性强、重复性好,适用于人血浆中咖啡因和氯苯那敏的测定,并可用于小儿氨酚烷胺泡腾片的人体生物等效性研究.