microRNAs参与toll样受体介导内毒素耐受的研究进展

Toll样受体（Toll-Like Receptor,TLR）配体脂多糖（Lipopolysaccharide, LPS）,能诱导机体产生免疫耐受（或交叉耐受）,其信号途径受到多种机制的精密调控,在天然免疫中扮演重要角色。microRNAs是Toll样受体通路中常见信号分子IL-1受体相关激酶（IRAK1、IRAK2）和肿瘤坏死相关因子6（TRAF6）的关键靶向元件,参与了免疫耐受（或交叉耐受）的建立及维持。本综述主要讨论了Toll样受体介导耐受形成的机制,并阐述其配体诱导的microRNAs的调节功能,看是否影响Toll 样受体信号途径的激活以及内毒素耐受的建立、维持,对抗炎症疾病治疗的具有重要指导意义。     

间歇性高容量血液滤过对严重脓毒症患者Toll样受体4的影响

目的 探讨间歇性高容量血液滤过(PHVHF)对严重脓毒症患者外周血单核细胞(PBMC)表面Toll样受体4(TLR4) mRNA表达及血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-10(IL-10)水平的影响.方法 40例严重脓毒症患者应用随机数字表法分成常规治疗组和PHVHF组,20例/组,另选15名健康志愿者为正常对照组.在治疗前、治疗24、48和72 h,检测PBMC表面TLR4mRNA表达及血浆中TNF-α和IL-10的水平.结果 严重脓毒症患者TLR4 mR.NA表达及TNF-α、IL-10的水平,均明显高于正常对照组(P＜0.05).72h治疗后,PHVHF组血浆TNF-α、IL-10水平较治疗前明显下降,分别从(492.2±100.8)ng/L、(253.3±47.7)ng/L下降至(303.6±49.2)ng/L、(84.2±18.8)ng/L(P＜0.05),PBMC表面TLR4 mR-NA表达从1.47±0.10下降至1.28±0.21(P ＜0.01),且与同期常规治疗组比较显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.01),常规治疗组上述指标也呈下降趋势,但治疗前后比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PHVHF可抑制严重脓毒症过度的炎症反应,下调PBMC表面TLR4表达可能是其作用机制.     

Toll样受体家族和内毒素信号转导的研究进展

Toll样受体(Toll_like receptors,TLRs)识别病原体或其产物,启始了宿主固有免疫的激活,并连接固有免疫和适应性免疫。目前研究表明,TLRs家族成员与内毒素的信号转导有密切关系。现已公认内毒素与肝损害可互为因果,因而确切了解内毒素的信号转导途径及TLRs与肝脏疾病的关系,对慢性肝病的治疗具有重大的意义。文中对TLRs家族、内毒素的信号转导及TLRs与肝脏疾病的关系进行了综述。     

重型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞Toll样受体基因表达变化与预后关系的研究

目的探讨重型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞Toll样受体2、4 mRNA的表达和患者血浆内毒素水平与预后的关系。方法分离外周血单个核细胞,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测TLR2、TLR4基因表达的变化,同时利用鲎试剂定量检测血浆内毒素水平的变化。结果死亡组患者治疗前TLR4、TLR2 mR-NA的表达及血浆内毒素的水平稍高于存活组,但治疗后死亡组明显高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05),且与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);TLR4 mRNA、TLR2 mRNA的表达均与血浆内毒素的表达水平呈正相关。结论TLR2、TLR4及内毒素在重型病毒性肝炎的发病机制中起着重要的作用,能较好地预测重型病毒性肝炎的发展趋势,可用作评价重型病毒性肝炎预后的指标。     

治疗前后酒精灌胃大鼠创伤弧菌脓毒症肝组织Toll样受体等的变化

目的 探讨抗生素对酒精灌胃大鼠创伤弧菌(vibrio vulnificus,VV)脓毒症肝组织Toll样受体(Toll like receptor,TLR)等的影响.方法 大鼠设正常对照组(N组,6只)、酒精灌胃大鼠对照组(A组,6只)、酒精灌胃大鼠抗生素对照组(AA组,6只)、酒精灌胃大鼠VV脓毒症组(AV组,24只;分别于染菌后2、6、12、24 h处死,每时相点动物数均为6只)和酒精灌胃大鼠VV脓毒症抗生素治疗组(AVA组,30只;分别于染菌后6、12、24、36 h和1周时活杀,各时相点动物数均为6只).采用逆转录聚合酶链技术检测各组大鼠不同时点肝组织TLR等的变化.结果 AV-6 h组TLR4 mRNA表达量为0.775±0.101,AVA-6 h组TLR4 mRNA表达量为0.600±0.064;AV-12 h组TLR4 mRNA表达量为0.918±0.133,AVA-12 h组TLR4 mRNA表达量为0.583±0.112;AV-24 h组TLR4 mRNA表达量为0.732±0.110,AVA-24 h组TLR4 mRNA表达量为0.512±0.118.AVA组大鼠染菌后6、12、24h TLR4 mRNA,与同时点AV组相比,TLR4 mRNA表达量明显降低,差异有统计学意义(AVA-6 h组与AV-6 h组比较,t=-3.573,P＜0.01;AVA-12 h组与AV-12 h组比较,t=-4.722,P＜0.01;AVA-24 h组与AV-24 h组比较,t=-3.340,P＜0.01).结论 及早联用抗生素可减低酒精灌胃大鼠VV脓毒症肝组织TLR等的表达,有利于机体促、抗炎平衡恢复,对酒精灌胃大鼠VV脓毒症有明显的治疗作用.     

Toll样受体2和Toll样受体4在结直肠癌组织中的表达及其意义

目的 探讨Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)在结直肠癌组织中的表达及其意义.方法 本研究标本来自2019年1月—12月本院接受手术治疗的70例结直肠癌患者,收集肠癌组织标本及其相应癌旁组织标本各70例,采用免疫组化法测定组织中TLR2、TLR4蛋白表达,采用实时荧光定量PCR测定组织中TLR2、...     

Toll样受体4的研究进展和临床意义

Toll样受体(TLR)是天然免疫受体家族.越来越多的研究证实,其中的Toll样受体4(TLR4)与多种疾病的发生、发展相关,有着重要的临床意义.以下就近年来对TLR4的一些相关研究进展和临床意义作一综述.     

儿童原发性肾病综合征肾组织中Toll样受体4及Toll样受体7的表达

目的 探究儿童原发性肾病综合征肾组织中Toll样受体4(TLR4)及TLR7的表达及临床意义.方法 选取陕西省西安市儿童医院自2013年7月至2016年7月收治的300例接受肾活检的儿童原发性肾病综合征肾组织作为观察组,按照病例分型可分为MCD型(78例)、MN型(72例)、MsPGN型(75例)及FSGS型(75例),另选择同期收治的70例肾母细胞瘤患儿的正常肾组织作为对照组,采用免疫组化的方法对两组肾组织中TLR4及TLR7的表达水平进行检测.结果 观察组中的不同病理类型组与对照组相比肾小管组织中TLR4的表达水平较高,不同病理类型组织中MCD型肾小管组织中TLR4的表达水平要明显高于其他组,依次是MN型、MsPGN型及FSGS型,差异具有统计学意义(t=4.56~9.23,均P<0.05).观察组中的不同病理类型组与对照组相比肾小管组织中TLR7的表达水平较高,不同病理类型组织中MsPGN型肾小管组织中TLR7的表达水平要明显高于其他组,依次是MN型、MCD型及FSGS型,差异均具有统计学意义(t=4.82~10.25,均P<0.05).结论 TLR4及TLR7在儿童原发性肾病综合征肾组织中呈现较高的表达水平,且其表达水平在不同病理类型中有一定的差异.     

Toll样受体4在感染性早产患者外周血单个核细胞的表达及意义

目的:观察感染性早产患者外周血单个核细胞Toll样受体4(TLR4)的表达变化,探讨其与感染性早产发生的关系以及在早期预测中的价值。方法:收集31例早产(28～36+6周)患者部分胎盘胎膜组织行病理检查,根据病检有无绒毛膜羊膜炎分为早产感染组(17例)和早产非感染组(14例),门诊进行孕检的同孕周正常孕妇作为正常对照组(10例)。①采用酶联免疫吸附法测定血清中的IL-6水平;②应用流式细胞术观察早产患者和正常对照组孕妇外周血CD14+单个核细胞上TLR4分子的表达率和平均荧光强度(MFI);③检测血常规。结果:①TLR4在早产感染组患者外周血CD14+单个核细胞的阳性率为(39.22±13.17)%,平均荧光强度为(48.45±11.66),显著高于早产非感染组和正常对照组(P0.05);而TLR4分子在早产非感染组和正常对照组外周血CD14+单个核细胞的阳性率和MFI相比,差异无统计学意义(P0.05);②早产感染组孕妇血清中IL-6水平为(2.56±0.36)pg/ml,明显高于早产非感染组孕妇和正常对照组孕妇,差异有统计学意义(P0.05),但早产非感染组和正常对照组血清中IL-6水平比较,差异无统计学意义(P0.05);③感染性早产患者外周血TLR4的MFI与血清中IL-6水平成正相关(r=0.727,P0.05),与血常规中的白细胞总数和中性粒细胞百分比无明显相关性。结论:①感染性早产患者外周血单个核细胞表面TLR4及血清IL-6表达明显增强,提示TLR4的信号通路可能与感染性早产的发生发展密切相关;②TLR4平均荧光强度与血清中IL-6水平成正相关,可作为早期预测早产宫内感染的指标。     

孕早期妇女外周血白细胞Toll样受体表达的研究

目的探讨Toll样受体(Tolllikereceptor,TLR)在人孕早期母胎免疫耐受中的作用。方法应用流式细胞术对28例非妊娠妇女,29例孕早期正常妊娠妇女,25例孕早期妊娠低孕酮妇女,16例孕早期妊娠低孕酮经过黄体酮治疗妇女,15例孕早期自然流产妇女的外周血淋巴细胞、单核细胞、粒细胞TLR2、TLR4检测进行分析。结果妊娠对照组单核细胞TLR2与TLR4的表达(20.37%±14.37%;52.58%±13.65%)显著高于自然流产组(11.25%±13.69%;31.91%±20.03%)(P0.05),却低于非妊娠对照组(29.99%±16.98%;60.69%±8.68%)(P0.05);妊娠对照组淋巴细胞、粒细胞TLR2表达(1.83%±0.83%;2.64%±1.34%)低于自然流产组(3.60%±2.37%;5.55%±3.99%)(P0.05),TLR4无明显差异(P0.05),与非妊娠对照组相比,淋巴细胞、粒细胞TLR2、TLR4的表达均无显著性差异(P0.05)。低孕酮妊娠组与妊娠对照组、黄体酮组相比,单核、淋巴、粒细胞TLR2、TLR4表达均无显著性差异。结论孕早期妇女外周血先天性免疫相关受体TLR2、TLR4表达的改变可能与妊娠免疫耐受有关。     

外周血单个核细胞TLR3信号通路活化在重组乙型肝炎表面抗原免疫应答中的作用

目的探讨外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体3(TLR3)信号通路的活化在重组HBsAg(rHBsAg)免疫应答中的作用及机制。方法收集13名健康献血者外周血制备血液制品时滤除的白细胞, 分离培养PBMC后分别给予TLR3激动剂聚肌苷酸-聚胞苷酸(Poly I:C组)及PBS(对照组)处理, 48 h后收集部分细胞, 采用流式细胞术检测TLR3信号通路蛋白水平;在活化(Poly I:C组)/未活化(对照组)TLR3信号通路后, 采用rHBsAg处理两组PBMC 72 h, 采用流式细胞术检测PBMC中树突状细胞(DC)、T、B淋巴细胞及其亚群比例。采用配对t检验、配对资料的符号秩和检验和典型相关分析进行统计学分析。结果 Poly I:C组PBMC TLR3信号通路中TLR3蛋白阳性细胞百分比(19.21%)、TLR3蛋白表达量(8 983.95)、NF-κB蛋白的表达量(26 193.13)、磷酸化NF-κB(pNF-κB)蛋白阳性细胞百分比(13.73%)及其占NF-κB的比例(16.03%)、磷酸化IRF3(pIRF3)蛋白阳性细胞百分比(12.64%)及其占IRF3的比例(...     

Toll样受体4在人体抗病毒感染中的作用

Toll样受体4(TLR4)是Toll样受体家族的重要成员,能够识别微生物的保守分子,启动机体固有免疫系统,在抗细菌感染过程中起到重要作用.近年研究表明,TLR4与人体抗病毒感染也存在着极为密切的关系.此文就TLR4在人体抗病毒感染过程中起到的重要作用做一综述.     

血清Toll样受体4联合超声血流指标与子痫前期围生儿结局的相关性

目的 探讨血清Toll样受体4(TLR4)联合超声血流指标与子痫前期围生儿结局的相关性.方法 选择2017年2月-2019年6月在南充市中心医院住院分娩的子痫前期孕妇125例作为病例组,同期选择孕期健康和血压正常的孕妇125例作为对照组,所有入选者都给予超声血流检查,检测血清TLR4表达情况,调查病例组围生儿的结局并进...     

脓毒症患者血清IL-6水平检测的临床评价

目的揭示血清白细胞介素6(IL-6)水平在脓毒症患者体内变化规律及意义。方法分别抽取40例APACHEⅡ评分>12分的脓毒症患者和30例正常人的外周血,应用放射免疫分析法检测其血清IL-6水平。将这2组血清IL-6水平进行比较。同时将脓毒症组的IL-6水平与病人的预后、APACHEⅡ评分作相关性分析。结果脓毒症组血清IL-6水平[(152.02±55.77)pg/m l],与正常对照组IL-6[(85.79±30.96)pg/m l]比较差异有统计学意义(P<0.01)。脓毒症组血清IL-6水平与病人的预后呈正相关(r=0.667,P=0.000),与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.485,P=0.002)。40例感染患者中有20例死亡,他们的血清IL-6水平[(186.20±48.74)pg/m l]较生存病例[(117.84±39.36)pg/m l]高(t=4.880,P=0.000)。结论脓毒症时,血清IL-6水平升高,其升高反应了感染的严重程度,与预后有较好的相关性。     

双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎肠道黏膜Toll样受体表达的影响

目的:研究双歧杆菌对新生鼠坏死性小肠结肠炎模型中肠道组织Toll样受体(TLR)2、4、9表达的影响。方法:出生24 h内Sprague-Dewley新生鼠随机分为对照组、实验组、治疗组,每组12只。对照组由母鼠喂养,实验组采取人工喂养+缺氧冷刺激进行造模,治疗组采用人工喂养+缺氧冷刺激并添加喂养双歧杆菌处理(2次/日,1×108cfu/次)。每日定时称体重做记录,在实验第3天处死新生鼠。用HE染色病理切片观察新生鼠肠道病理变化,RT-PCR方法检测肠道黏膜TLR2、TLR4、TLR9的mRNA表达量。结果:3组小鼠体重比较均具有统计学意义,对照组体重增长高于实验组及治疗组,治疗组体重增长高于实验组(P<0.05);实验组病理评分高于对照组及治疗组,治疗组高于对照组(P<0.05);TLR4 mRNA相对表达量实验组高于对照组及治疗组(P<0.05),治疗组的TLR2 mRNA、TLR9 mRNA相对表达量均高于实验组,TLR4 mRNA相对表达量低于实验组,这两组的3种受体mRNA相对表达量比较均具有统计学意义(P<0.05)。结论:双歧杆菌可减轻新生鼠坏死性小肠结肠炎肠道组织病理变化,作用机制可能与双歧杆菌能降低肠道黏膜的TLR4表达及增加TLR2、TLR9表达有关。     

外周血单核细胞髓样分化因子88与Toll样受体4在早产儿窒息后多器官功能障碍综合征中的表达及其意义

目的 探讨外周血单核细胞髓样分化因子88(MyD88)与Toll样受体4(TLR4)在早产儿窒息后多器官功能障碍综合征(MODS)中的表达,为早产儿窒息后MODS的早期诊断及预后评估提供新思路.方法 连续性纳入2019年1月—2020年12月唐山市妇幼保健院新生儿科收治的115例窒息早产儿进行前瞻性研究,按照1 min...     

重症脓毒症患者外周血单核细胞表面膜CD14及炎性因子的表达及意义

目的 观察重症脓毒症患者外周血单核细胞(PBMC)表面膜CD14(mCD14)、人类白细胞抗原( HLA)-DR及炎性因子的表达及意义.方法 选取重症脓毒症患者35例(病例组)和健康志愿者15例(对照组).于入院后第1、3、5天检测其PBMC表面mCD14、HLA-DR表达,血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10浓度及急性生理学和慢性健康状况Ⅱ评分(APACHEⅡ)、全身性感染相关器官功能衰竭评分(SOFA评分).结果 病例组患者PBMC表面mCD14、HLA-DR表达分别为(2.61±1.59)％、( 10.25±5.35)％,明显低于对照组的(5.57±1.53)％、(59.28±14.76)％,血清TNF-α、IL-10浓度分别为(96.66±45.38)、( 149.79±77.15) ng/L,明显高于对照组的(0.12±0.00)、(5.67±2.16) ng/L,差异均有统计学意义(P＜ 0.05或＜0.01).病例组患者死亡10例,存活25例,28d病死率28.6％(10/35),死亡患者与存活患者PBMC表面mCD14、HLA-DR表达及SOFA评分、APACHEⅡ在入院后第1、3天比较差异均无统计学意义(P＞0.05),第5天存活患者PBMC表面mCD14、HLA-DR表达明显高于死亡患者[(5.12±2.03)％比(2.75±0.67)％;(35.12±9.29)％比(13.06±5.87)％ ](P＜ 0.01或＜0.05),SOFA评分、APACHEⅡ明显低于死亡患者[(4.48±1.71)分比(10.70±3.16)分;(9.36±5.57)分比(25.60±10.88)分](P＜0.01),而两者血清TNF-α、IL-10浓度在入院后第1、3、5天比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 重症脓毒症患者PBMC表面mCD14、HLA-DR表达与患者预后密切相关,血清TNF-α、IL-10浓度在入院后5d内的动态变化不能反映患者疾病的演变和预后.     

高糖对肾小管上皮细胞Toll样受体4表达的影响

目的本实验旨在探讨高糖对。肾小管上皮细胞Toll样受体4（TLR4）表达的影响及其在糖尿病。肾病中的意义。方法体外培养。肾小管上皮细胞（NRK-52E），分成LG组（给予5mmol／L葡萄糖的DMEM培养）和HG组（给予25mmol／L葡萄糖的DMEM培养），不同时间收集细胞，采用细胞免疫化学、Rt—PCR、WesternBlot检测TLR4蛋白和mRNA表达情况，同时取细胞培养上清液用Elisa法检测IL-6、TNF-α水平。结果在高糖刺激6hTLR4mRNA出现表达明显增高，维持较高表达至274h，而48h后表达有所下降（P〈0．05）。HG组培养24hTLR4蛋白升高，48hTLR4蛋白表达进一步升高，与LG组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。HG组NRK-52E上清液IL-6、TNF一仅的表达较LG组明显升高（P〈O．05），并与TLR4蛋白呈正相关（r=0．799，0.820）。结论高糖可能通过上调NRK-52E的TLR4的表达，导致TNF-α、IL-6等炎性因子表达升高，TLR4参与了糖尿病肾病的进展。