睾丸移植的发展历程与研究进展

睾丸移植作为治疗高位腹腔型隐睾、男性性腺功能减退及男性不育的有效手段,在吻合血管的自体、异体睾丸移植,睾丸组织及精原干细胞移植,睾丸间质细胞移植方面取得了较大进展。与此同时,也遇到诸多制约其发展的问题,其中最主要的当属移植术后难以持续、稳定地产生成熟的生殖细胞。联合移植方法的使用使包括胰岛和神经元在内的细胞在移植后可以较长时间存活,从而为糖尿病或者帕金森病的治疗提供了新的出路。     

家兔卵巢移植入自体角膜板层模型的建立

1　材料和方法1.1　材料　 1雌家兔 (本校实验动物中心提供 )体质量 2 .0～ 2 .5 kg,双眼正常无病变 ,卵巢未排卵 ;2试剂 2 0 0 g· L- 1乌拉坦 ,5 g· L- 1 丁卡因 ,绒毛膜促性腺激素 (9911172 ,上海生物化学制药厂 ) ;3 Alcon板层刀 ,裂隙灯照像显微镜为德国 Opton公司生产 .1.2　方法　 1取卵巢皮质 2 0 0 g· L- 1 乌拉坦麻醉 ,固定 ,常规消毒铺单 ,行剖腹术 ,取新鲜卵巢组织 ;2同一只家兔用丁卡因滴眼作局部麻醉 ,在角巩缘内侧上方处用眼科弯剪刀切开结膜 ,约 90°,分离结膜及结膜下组织 ,做角膜板层分离 ,建立隧道接近瞳孔区 ,大小 …     

兔深低温保存同种带瓣主动脉移植模型的研究

目的建立兔颈动脉移植深低温保存同种带瓣主动脉模型。方法成年中国白兔20只作为受体,1个月龄的中国白兔40只作为供体,取其带瓣主动脉深低温保存后,移植于受体的两侧颈动脉,术后28 d取出观察血管通畅情况、有无血栓形成及组织学变化。结果受体17只存活,两侧颈动脉85%搏动良好、血流通畅,大体标本无血栓形成。结论建立兔颈动脉移植模型对动物损伤小、位置表浅易于操作,是一种实用、稳定可靠和易于复制的带瓣血管移植动物模型。     

睾丸灌注超低温冷冻对家兔移植睾丸功能的影响

目的 研究睾丸灌注超低温冷冻对家兔睾丸功能的影响,探讨移植睾丸的保存方法.方法 通过自体或异体移植,比较低浓度冷冻保护剂活体灌注或体外灌注、高浓度冷冻保护剂活体灌注或体外灌注对兔睾丸冷冻后的完整率、移植成功率、睾酮分泌及精子生成的影响.结果 高浓度冷冻保护剂活体灌注效果最好,冷冻后睾丸完整率为29.3%,血流再通率为79.2%,睾酮分泌接近正常水平,精子生成持续时间可达2个月.结论 采用高浓度冷冻保护剂行活体灌注的方法可有效地保护部分睾丸结构及功能,移植后可产生接近正常水平的睾酮和保持较长时间的生精.     

改良后的家兔动脉深低温保存实验研究

目的：为探讨家兔动脉在改良的深低温保存后，其作为血管材料替代物的优越性。方法：无菌条件下取新鲜兔动脉，分别给予改良后的营养液经慢速深低温冷冻和快速深低温冷冻处理，6个月后异体和自体移植，12周后，取移植的血管组织，观测其组织活性，组织形态、血管通畅率。结果：改良的营养液保护的血管经慢冻法处理后与自体血管活性相近，经改良的营养液保护的血管，移植前后血管内膜的连续性，血管的组织结构良好；慢冻法处理的血管通畅率比速冻法处理的高，与自体移植组相当。结论：复方氨基酸可以替代传统冷冻保护液中的小牛血清用于血管的深低温保存，降低了该保存技术的成本；快速深低温冷冻保存的动脉血管活力移植效果不如慢速冷冻处理的异体动脉好。     

睾丸及其细胞组织移植的研究进展

睾丸具有生精功能和分泌睾酮维持性征及性功能的作用。睾丸性不育症和内源性睾酮分泌不足症在临床上很常见，目前临床上主要通过各种辅助生殖方法和外源性激素替代疗法进行治疗。随着器官和细胞移植技术的发展，人们尝试通过睾丸及其细胞和组织的移植，探寻治疗男性不育症和男性性功能障碍的新途径。目前，有关这一领域上的研究已取得了可喜的成果，展现出良好的临床应用前景。笔者就近年来国内外的相关研究综述如下。     

移植部位对小鼠睾丸移植效果的影响

目的 比较不同的移植部位对睾丸移植效果的影响,以探索建立疾病模型小鼠安全保存的新方法。方法 按移植部位的不同分为3组：背部皮下组,睾丸白膜内组和肾包膜下组。移植后处死受体鼠回收移植物。测试和分析受体精囊的重量,移植物存活率,回收物增重的倍数和生殖细胞的分化情况。结果 不同实验组移植睾丸的生殖细胞分化差异显著。睾丸白膜内组的分化情况最好与假移植对照组相似;背部皮下移植组睾丸的分化率为29.2%;肾包膜下组未见分化。结论 睾丸白膜内移植最利于精子的发生;背部皮下移植是睾丸移植的次优选择;肾包膜下睾丸移植不适合用于小鼠雄性生殖器官的安全保存。     

去势大鼠睾丸间质细胞移植的实验研究

目的：探讨对去势大鼠动物模型行睾丸间质细胞（Leydig细胞）移植的可行性。方法：随机选择SD大鼠离体睾丸进行Leydig细胞的体外培养及同种异体去势鼠大腿内侧肌群Leydig细胞移植，并进行绒毛膜促性腺激素（hCG)激发试验，监测其血清睾酮分泌情况的变化，结果：体外培养的Leydig细胞对hCG的刺激敏感，能分泌大量睾酮，而一旦进入机体后虽然短期内仍然成活，但分泌功能明显受阻，结论：通过施行同种异体睾丸Leydig细胞移植以提高血清睾酮含量的前景值得商榷。     

胎儿睾丸移植治疗男性性腺功能减退症的临床研究

目的探讨胎儿睾丸移植在男性性腺功能减退症治疗中的临床应用价值.方法利用显微外科技术,以胎儿睾丸作移植体,为9例男性性腺功能减退症患者施行了胎儿睾丸移植术.结果术后5个月,除1例失访外,8例患者的血清睾酮水平明显升高,性欲、性功能及第二性征明显改善,移植睾丸体积较术前增大.结论胎儿睾丸移植治疗男性性腺功能减退症是有效的,且胎儿睾丸免疫原性低,具有较高的临床应用价值.     

改良自制低钾右旋糖酐液用于犬肺移植肺保存质量的观察

目的 探讨改良自制低钾右旋糖酐液(LPD液)的配制方法及对移植肺的保存质量.方法 参照Per-fadex液公开配方加入前列腺素E1(PGE1)和硝酸甘油(NTG)进行改良,自行配制LPD液.于2007年4月至2008年8月通过动物实验验证LPD液对移植肺的保存质量.32只家犬随机分成供体组和受体组,每组16只.完成16...     

不同方法保存猪软骨异种移植的实验研究

为了探索不同方法保存猪肩胛软骨对异种移植的影响，为临床应用提供科学依据。采用４种方法保存猪肩胛软骨，并按保存方法及保存时间分７组移植到日本大耳白兔背部皮下，每组５只动物，共３５只进行观察比较。①γ－射线辐射处理，４℃保存３个月为Ａ组，１个月为Ｂ组；②　（戊二醛）＝０．５％磷酸缓冲液浸泡，４℃保存３个月为Ｃ组，１个月为Ｄ组；③深低温－８０℃保存３个月为Ｅ组，１个月为Ｆ组；④新鲜软骨为Ｇ组。移植术后每周１次活体检查软骨位置及大小，术后１周、１个月、３个月、６个月，每只动物取一块软骨行大体标本和光学显微镜观察，术后６个月取软骨标本行电子显微镜观察。实验结果显示：　（戊二醛）＝０．５％浸泡、γ－射线辐射处理可降低软骨抗原性，４℃保存时间≤１个月为最佳保存时间，按软骨被吸收卒大小，依次为Ｅ、Ｆ、Ａ、Ｂ、Ｇ、Ｃ、Ｄ组。结果提示：①猪肩胛软骨可作为异种移植代用材料的最佳供体之一；②猪肩胛软骨异种移植到家兔皮下，可长期存留６个月；③本实验４种猪软骨保存方法相比较，按异种移植后软骨抗原性降低和被吸收、变形程度轻重，以　（戊二醛）＝０．５％磷酸缓冲液浸泡保存方法为最佳条件，γ－射线辐射处理次之；④　（戊二醛）＝０．５％磷酸缓冲     

Morphology of rat testis preserved in three different fixatives

Histopathological examination of testes is important in assessing spermatogenesis and testicular function. Modified Davidson’s fluid (mDF) has been proposed as a superior substitute for Bouin’s fluid (BF) for fixation of adult animal testes. Besides, 4% paraformaldehyde (PFA) has been commonly used to fix testes with convenience. We compared the morphology of the rat testis fixed in 4% PFA, mDF, or BF using hematoxylin and eosin (HE)-stained sections. Fixation in 4% PFA resulted in obvious tissue shrinkage artifacts, especially between seminiferous epithelium cells. Shrinkage artifacts were also observed in the central area of the testes fixed in BF. Use of mDF did not cause shrinkage artifacts between seminiferous tubules, though a small amount can be observed in seminiferous tubules between germ cells. Clarity of nuclear detail in testes fixed in mDF and BF is better compared to 4% PFA. Our study demonstrated that fixation in mDF provided better morphologic details in the rat testis as compared with 4% PFA and BF.     

温血停搏液诱导和再灌注对兔心长期保存效果的影响

目的:探讨温血停搏液诱导和再灌注对长期保存兔心的心肌保护作用。方法:成年健康家兔20只, 随机分为对照组和实验组,每组10只动物,采用Langendorff离体心脏灌注模型,实验组采用37℃温血停搏液, 对照组采用4℃St.Thomas液,观察温血停搏液诱导和保存末再灌注后工作心状态心率、冠脉回流量、左室收缩 压、左室舒张末压、心肌组织中CK MB、6 k PGF1α含量及心肌含水量的变化。结果:温血停搏液诱导和再灌注 后兔心左室收缩压、左室舒张末压、工作心状态心率、冠脉回流量较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01); 与对照组比较,实验组心肌组织中CK MB、6 k PGF1α含量升高,心肌含水量下降,差异亦有统计学意义(P< 0.001)。结论:温血停搏液诱导和再灌注有利于减轻长期保存后心肌损害,有利于心功能的恢复,且因方法简便 而有广阔临床应用前景。     

桥式交叉吻合血管游离组织移植术远期疗效分析

目的 探讨桥式交叉吻合血管游离组织移植术的远期治疗效果。方法 对１９８２年５月至１９９５年４月期间施行的６０例手术患者进行问卷调查和门诊随访，测定移植组织和血管供区肢体的血流量、氧饱和度和皮肤温度。结果 问卷调查２２例得到反馈，门诊随访１５例。移植组织与受区组织之间、血管供区肢体与对照肢体之间，血流量、氧饱和度及皮肤温度均无明显差异。结论 桥式交叉吻合血管游离组织移植术远期效果良好，说明该手术即有     

显微外科技术建立兔异体原位肾脏移植模型

目的建立并发症少、成活率高的兔原位肾脏移植模型。方法健康成年新西兰白兔24只,随机分为两组,每组12只,Ⅰ组为对照组,术中行右肾动、静脉暂时夹闭做为对照;Ⅱ组为异体原位肾移植组,采取配对方式将甲兔左肾切取并经过4 ℃H-CA 液灌洗后利用显微外科技术将甲、乙两兔动、静脉及输尿管端端吻合。结果吻合口无血栓形成及狭窄,12只接受异体原位肾移植的兔子存活率为91.7%(11/12)。结论此模型具有并发症少、存活率高的特点,并且稳定、可靠、实用。     

兔自体原位肺移植模型的建立

目的 :为深入研究供肺保护中缺血 再灌注的损伤机制 ,建立模拟的兔肺自体原位移植模型。　方法 :选用新西兰大白兔 35只 ,阻断左肺门 2h后 ,依次开放左肺静脉和动脉 ,阻断右侧肺门 ,监测实验过程中动脉血氧分压 (PaO2 )、动脉血二氧化碳分压 (PaCO2 )、动脉血氧饱和度 (SaO2 )、平均动脉压 (MAP)、中心静脉压 (CVP)的变化。　结果 :实验过程循环稳定 ,再灌注前、后的PaO2 差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。　结论 :该模型用于研究供肺的缺血 再灌注损伤简便易行、经济实用 ,是一种理想的小动物肺移植模型。     

低水温潜水时机体中心温度的变化

目的：研究无加热保暖条件下低水温潜水时机体中心体温的变化。方法：潜水员着干式潜水服，潜入平均温度13．6℃的水中，实时监测潜水员机体中心体温，每5min记录1次，观察体温的变化，描绘温度变化曲线。结果：累计潜水时间155min，机体中心温度由37．25℃下降至35．80℃，曲线呈现缓慢上升后迅速下降，并有后降现象出现。结论：无加热保暖条件下的低水温潜水只能维持较短时间。应加强较长时间低水温潜水的医学防护研究。     

三袖套法与经典血管吻合法在大鼠异位小肠移植中的应用比较

目的 探讨三袖套血管吻合法行大鼠小肠移植的效果。方法 将60只Wistar 大鼠作为受体随机分为实验组(30例)和对照组(30例),实验组给予三袖套法血管吻合法,对照组给予经典血管吻合法,比较两组手术效果。结果 三袖套法血管吻合法的手术时间、动脉吻合时间、移植肠温缺血时间3项指标均优于经典血管吻合法。结论 与经典血管吻合法比较,三袖套血管吻合法更安全、省时,值得推广。