随机引物多聚酶链反应对革兰氏阴性分型的影响因素研究

随机引物多聚酶链反应对革兰氏阴性分型的影响因素研究高瞻ＫａｔｈｙＪａｃｋｓｏｎＤａｖｉｄＥ．Ｌｅｓｌｉｅ江苏省卫生防疫站（２１０００９南京）随机引物多聚酶链反应（ＲａｎｄｏｍＡｍｐｌｉｆｉｅｄＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃＤＮＡＰＣＲ，简称ＲＡＰＤＰＣＲ）是...     

PCR检测水中致病微生物的研究进展

ＰＣＲ检测水中致病微生物的研究进展军事医学科学院卫生学环境医学研究所李凤义综述张符光审校ＰＣＲ（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，多聚酶链反应）是一种体外核酸扩增技术，由美国学者Ｍｕｌｌｉｓ等人于１９８５年在Ｃｅｔｕｓ公司发明并命名。Ｐ...     

多聚酶链反应技术在医学微生物学中的应用

多聚酶链反应技术在医学微生物学中的应用华北煤炭医学院微生物学免疫学教研室（唐山０６３０１１）马立人，裴银辉多聚酶链反应（Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术是由ＭｕｌｌｉＳ等［１］于１９８５年首先创建，基本原理是先将目的ＤＮＡ...     

PCR,EIA对乙型肝炎病毒检测的比较

多聚酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）是近几年发展起来的先进的快速体外基因扩增技术，已经在很多医学领域得到应用，目前ＰＣＲ技术已逐渐推广至病毒性疾病的诊断和研究中。为了寻找比目前常用的ＥＩＡ技术更敏感更有效的检测方法，...     

多聚酶链反应及其在流行病学研究中的应用

多聚酶链反应及其在流行病学研究中的应用陈添胜综述谭丽霞审阅多聚酶链反应技术（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，简称ＰＣＲ）自１９８５年问世以来迅速作者单位：广东省流行病防治研究所５１０３００在生物医学各领域得到推广应用。我所从１９９２年...     

用Logistic回归模型预测血清中HBV—DNA的活动性

多聚酶链反应（简称ＰＣＲ）技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性具有很高的敏感性，但因自身的特点，应用受到限制。结合乙肝三系检测结果，用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型配合ＰＣＲ检测结果具有较好的配合适度，在没有条件开展ＰＣＲ检测项目的情况下根据乙肝三系检测结果用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型预测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性。     

用Logistic回归模型预测血清中HBV－DNA的活动性

多聚酶链反应（简称ＰＣＲ）技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性具有很高的敏感性，但因自身的特点，应用受到限制．结合乙肝三系检测结果，用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型配合ＰＣＲ检测结果具有较好的配合适度，在没有条件开展ＰＣＲ检测项目的情况下根据乙肝三系检测结果用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归模型预测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ的活动性。     

一步法提取RNA反转录－多聚酶链反应检测汉坦病毒RNA

用反转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测汉坦病毒（Ｈａｎｔａｖｉｒｕｓ）的基因ＲＮＡ，同时与细胞分离病毒的敏感性进行比较。用异硫氰酸胍－载体吸附法，一步提取汉坦病毒ＲＮＡ。将脑腔接种汉坦病毒频临死亡的乳鼠脑制成１０％的悬液，并系列稀释，从１０（－１）到１０（－１２）的１２梯度。结果表明，该引物能够扩增出汉坦病毒Ｈ８２０５株的ＲＮＡ，说明汉坦病毒Ｈ８２０５株与７６－１１８株在Ｍ片段上具有共同的保守序列。ＲＴ－ＰＣＲ可以检测出４．６４×１０（－３）ＴＣＬＤ（５０）／ｍｌ的病毒，而用Ｖｅｒｏ－Ｅ６细胞只能分离检测出４．６４×１０（－２）ＴＣＬＤ（５０）／ｍｌ，所以ＲＴ－ＰＣＲ检测病毒比细胞分离检测病毒敏感。     

生奶中小肠结肠炎耶尔森菌和嗜水气单胞菌的复合和半巢穴PCR检测方法

建立单引物 (ｓｌ)、复合 (ｍ)和半巢穴 (ｓｎ)聚合酶链反应 (ＰＣＲ)法检测生奶样品中小肠结肠炎耶尔森菌和嗜水气单胞菌。设计 2对寡核苷酸引物 ,采用ＰＣＲ方法扩增小肠结肠炎ｙｓｔ基因片段和嗜水气单胞菌Ａｅｒ基因片段 ,其长度分别为 1 4 5ｂｐ和 2 0 9ｂｐ。检测接种的生奶中两种病原体 ,ｓｌＰＣＲ和ｍＰＣＲ方法的检出限约为每毫升 1× 1 0 2 ｃｆｕ(每个ＰＣＲ反应 0 .5ｃｆｕ) ;检测自然感染的生奶 ,ＰＣＲ和培养法小肠结肠炎耶尔森菌的检出率分别为53%和 36 % ,检出嗜水气单胞菌分别为 2 3%和 1 4 %。结果表明 ,直接ＰＣＲ分析…     

柯萨奇B组病毒感染与扩张型心肌病发病关系的研究

为探讨柯萨奇Ｂ组病毒（Ｃｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓ ｇｒｏｕｐ Ｂ，ＣＢＶ）与扩张型心肌病（ｄｉｌａｔｅｄ ｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙ，ＤＣＭ）发病的关系，应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检查３９例扩张型心肌病患者（ＤＣＭ组）外周血中ＣＢＶ－ＲＮＡ、血清中ＣＢＶ－ＩｇＭ。结果表明，ＤＣＭ组中血ＣＢＶ－ＣＢＶ－ＲＮＡ、血清中ＣＢＶ－ＩｇＭ。结果表明，ＤＣＭ组     

天津汉族类风湿性关节炎患者某些易感基因初探

类风湿性关节炎 (ＲＡ)是一种慢性全身性的自身免疫性疾病。近年来 ,国内外学者对人类白细胞抗原 (ＨＬＡ)与ＲＡ的相关性进行了研究 ,初步发现ＨＬＡ—ＤＲ4 基因与ＲＡ密切相关。我们采用序列特异性引物多聚酶链反应 (ＰＣＲ/ＳＳＰ)技术 ,对天津地区汉族ＲＡ患者中ＨＬＡ—ＤＲ4 进行了检测 ,并同时检测了ＤＲ3 和ＤＱ3 ,以了解天津地区汉族ＲＡ患者中ＨＬＡ的表达特点 ,探讨它们之间的相关性。1　对象与方法　 (1)对象 :为 5 2例本院门诊或住院的ＲＡ患者 ,其中男 2 0例 ,女 32例 ;年龄最小 2 1岁 ,最大 70岁。所有患者均符合 1987年美…     

肾综合征出血热病毒分型的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对４株肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）病毒进行了分型。ＨＦＲＳ病毒的ＲＮＡ经逆转录为ＣＤＮＡ后用ＮＴＮ（野鼠型）、ＳＥＯ（家鼠型）两种引物进行体外扩增，经琼脂糖凝胶电泳，ＰＣＲ产物的ＮＤＡ片段与Ｍａｒｋ对照，证实扩增出的产物为ＨＦＲＳ病毒ＤＮＡ片段。ＰＣＲ分型与物异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）间接免疫荧光法分型作比较，结果相符合。     

耐甲氧西林葡萄球菌感染基因诊断的实验研究

目的探明沈阳地区ＭＲＳＡ感染状况及耐药机理。方法采用酶标－多聚酶链式反应（ＥＤ－ＰＣＲ）方法对沈阳地区３所医院分离的７６株葡萄球菌耐甲氧西林（ＭｅｃＡ）基因进行检测。结果ＭｅｃＡ基因阳性２３株，耐甲氧西林葡萄球菌（ＭＲＳ）的检出率为３０．３％，其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）检出率占金黄色葡萄球菌总数的２１．７％。采用微量液体稀释法、琼脂稀释法以及ＭＲＳＡ鉴别培养法等３种方法与之相比较，经统计学处理ＥＤ－ＰＣＲ法与其它３种方法的一致性非常有意义（Ｐ＜０．０１）。以ＭＲＳＡ鉴别培养法作为诊断ＭＲＳ的参考标准，ＥＤ－ＰＣＲ法敏感性为９５．５％，特异性为９６．３％。结论ＥＤ－ＰＣＲ法与其它３种方法相比，具有简便、快速、敏感性高、特异性强等优点     

从性病患者中分离培养沙眼衣原体

经多聚酶链反应及荧光标记的沙眼衣原体单克隆抗体染色初筛试验显示沙眼衣原体阳性的１４份性病患者泌尿生殖道标本，用ＤＥＡＥ－葡聚糖及放线菌酮处理的ＭｃＣｏｙ细胞进行沙眼衣原体分离培养，通过荧光标记的抗单克隆抗体染色及ＰＣＲ试验证实。其中９份标本阳性。其余阴性。从而首次在福建省从泌尿生殖道分离出沙眼衣原体。     

多聚酶链反应技术及其临床应用

多聚酶链反应技术及其临床应用江西省九江市传染病医院（江西３３２０００）魏孟贵，陈春晖１多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术原理分子探针技术相当敏感，可以测到Ｐｇ水平；但是，最近发展起来的ＰＣＲ更为敏感，可以使ＤＮＡ检测的灵敏度达到Ｆｇ水平。ＰＣＲ扩增ＤＮＡ的过...     

应用AC／PCR检测粪便中HAV RNA

应用ＡＣ／ＰＣＲ检测粪便中ＨＡＶＲＮＡ钱浩，吴少慧，王玉珍辽宁省卫生防疫站甲型肝炎传染性强，发病率高，严重危害人类健康。为满足临床和流行病学研究的需要，我们建立了应用抗原捕捉多聚酶链反应（ＡＣ／ＰＣＲ）检测粪便中ＨＡＶＲＮＡ的方法。并对甲型肝炎病人粪...     

逆转录多聚酶链反应技术及其在丙型肝炎病毒核酸检测中的研究进展

逆转录多聚酶链反应技术及其在丙型肝炎病毒核酸检测中的研究进展河北省卫生防疫站（保定０７１０００）牛建章（综述）孟宗达刘树贤（审校）多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术首先由Ｍｕｌｉｓ于１９８５年发明建立。１９９０年，Ｗｅｉｎｅｒ等［１］将该技术用于丙型肝炎病毒...     

一步法提取RNA反转录—多聚酶链反应检测汉坦病毒RNA

用反转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测汉坦病毒（Ｈａｎｔａｖｉｒｕｓ）的基因ＲＮＡ。同时与细胞分离病毒的敏感性进行比较，用异硫氰酸胍－载体吸附法，一步提取汉坦病毒ＲＮＡ，将脑腔接种汉坦病毒频临死亡的乳鼠脑制成１０％的悬液，并系列稀释，从１０＾－１到１０＾－１２的１２梯度，结果表明，该引物能够扩增出汉坦病毒Ｈ８２０５株的ＲＮＡ，说明汉坦病毒Ｈ８２０５株与７６－１１８株的Ｍ片段上具有共同的保守序列     

mRNA差异显示技术在维生素研究中的应用

ｍＲＮＡ差异显示技术是 1992年由Ｌｉａｎｇ等[1] 建立的 ,这种方法被称为ｍＲＮＡ差异显示 (ｍＲＮＡｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙＰＣＲ)或差异显示反转录ＰＣＲ(ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ,ＤＤＲＴ ＰＣＲ)。该方法的建立与成熟为评价维生素调控细胞功能开辟了新的途径。1 ＤＤＲＴ ＰＣＲ技术基本原理 :有关ＤＤＲＴ ＰＣＲ技术的资料很多 ,这里只作简单描述。高等生物细胞内约含有 10 5个不同的基因 ,而对于每一个特定的细胞仅表达其中的 15 % ,约 15 0 0 0种ｍＲ…     

日本血吸虫31／32KDa蛋白质基因扩增及克隆

目的 克隆日本血吸虫３１／３２ＫＤａ蛋白质的编码基因，用于血吸虫病免疫诊断和预防，方法 以日本血吸虫成虫ＲＮＡ为模板逆转录合成ｃＤＮＡ链，参照Ｓ．ｍ３１／３２编码序列设计合成引物，用ＰＣＲ法扩增３１／３２ＫＤａ蛋白质基因编码序列，将其克隆入ｐＧＥＭ－Ｔ载体。并用双酶切和以质粒为模板的ＰＣＲ进行鉴定。结果 ＲＴ－ＰＣＲ扩增出一条约１２７０ｂｐ大小的特异性条带，重组质粒的双酶切和以质粒为模板的ＰＣＲ均