内质网应激诱导的细胞凋亡在慢性牙周炎中的作用初探

目的:初步探讨内质网应激诱导的细胞凋亡在慢性牙周炎中的作用。方法:利用光学显微镜和透射电镜观察牙周组织中的凋亡细胞,免疫组化染色法检测慢性牙周炎患者及牙周健康者牙周组织中GRP78和CHOP的分布及含量变化。结果:慢性牙周炎组内浆细胞呈现凋亡状态,且GRP78和CHOP在慢性牙周炎组中的阳性表达明显高于正常组(P<0.05)。结论:内质网应激参与了慢性牙周炎的病理生理过程。     

慢性牙周炎龈组织中Smac和Bax的表达及其对细胞凋亡的作用

目的:通过检测Smac和Bax蛋白在慢性牙周炎龈组织中的表达,旨在探讨二者的相关性及其在细胞凋亡中与牙周炎发生、发展的关系。方法:慢性牙周炎测试组27人,健康对照组27人,利用光镜和透射电镜观察凋亡细胞形态结构,流式细胞仪测定线粒体膜电位。免疫组化检测Smac、Bax在龈组织不同区域的表达。结果:光镜观察慢性牙周炎龈组织中存在有凋亡细胞;电镜观察凋亡细胞中线粒体形态结构改变;慢性牙周炎龈组织线粒体膜电位降低,与健康组比较,两组间有显著性差异(P<0.05);慢性牙周炎组中Smac和Bax在上皮组织、结缔组织的表达增加,与健康组相比具有显著性差异(P<0.05);Smac、Bax二者的表达在慢性牙周炎龈组织具有明显正相关(P<0.05)。结论:慢性牙周炎龈组织中有凋亡细胞存在;Smac、Bax的表达在慢性牙周炎组中呈明显正相关,表明在细胞凋亡过程中起协同作用,这与牙周组织破坏有关。     

慢性牙周炎牙龈组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白Caspase-3的表达

目的:研究慢性牙周炎牙龈组织中细胞凋亡的发生情况和Caspase-3蛋白的表达,探讨其在慢性牙周炎病变发生中的意义。方法:应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL法)、免疫组织化学方法检测21例慢性牙周炎牙龈组织和21例健康牙龈组织中的细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)及Caspase-3蛋白的表达。结果:慢性牙周炎组牙龈组织中细胞凋亡指数明显高于正常对照组(P<0.05)。与正常组相比,慢性牙周炎组牙龈组织中细胞caspase-3表达明显增强,两组间有显著性差异(P<0.05)。结论:慢性牙周炎病人牙龈组织细胞发生凋亡,且通过激活细胞凋亡信号传导途径中的Caspase-3而导致慢性牙周炎发生。     

细胞凋亡在糖尿病大鼠牙周炎中参与牙槽骨吸收的实验研究

目的研究糖尿病伴牙周炎牙槽骨破坏机制,初步探讨牙周组织细胞凋亡在该类疾病中所起的作用。方法采用腹腔注射链脲佐菌素（Streptozocin,STZ）制备SD大鼠糖尿病模型,并利用0.2mm不锈钢丝环扎大鼠磨牙颈部制备牙周炎动物模型。观察牙周组织细胞在高血糖状态及正常血糖状态下的组织形态并检测细胞凋亡情况。结果高血糖状态下大鼠牙周炎发病程度明显高于血糖正常大鼠。牙周组织中成骨细胞及牙周膜成纤维细胞凋亡数量高血糖组高于血糖正常组,而破骨细胞数量则相反。结论高血糖状态下牙周炎病损程度较正常血糖状态下严重,牙周组织细胞凋亡参与和加重病程。     

老年人牙周炎牙龈组织中凋亡细胞免疫组织化学研究

目的 :观察老年人牙周炎牙龈组织中凋亡细胞分布特点。方法 :采用特异性凋亡细胞免疫组织化学染色法 (TUNEL染色 ) ,对 15例老年人牙周炎患者 ,10例慢性成人牙周炎患者 ,10例青少年牙周炎患者和 11例健康老年人牙龈组织中阳性凋亡细胞的分布及计数进行比较研究。结果 :老年人牙周炎组阳性凋亡细胞总例数明显高于健康老年人组和慢性成人牙周炎组 (P <0 .0 5 ) ;慢性成人牙周炎组和青少年牙周炎组阳性凋亡细胞总例数也明显高于健康老年人组 (P <0 .0 5 ) ;老年人牙周炎组阳性凋亡细胞计数明显高于慢性成人牙周炎组、青少年牙周炎组和健康老年人组 (P <0 .0 5 )。结论 :感染性炎症因素和衰老因素均能促进老年人牙周炎时牙龈组织细胞凋亡 ,这两个因素的双重协同作用造成了老年人牙周炎患者局部牙龈组织对刺激做出过强的细胞凋亡反应。     

慢性牙周炎患者和健康人牙龈成纤维细胞细胞活性和凋亡的比较研究

目的:探索慢性牙周炎患者和健康人牙龈成纤维细胞(HGFs)细胞活性和凋亡之间的差异性,为阐明牙周炎的易感性提供实验依据。方法:收集慢性牙周炎患者和健康人的健康牙龈,进行体外培养获得HGFs,采用MTT法比较两组细胞的细胞活性,实时荧光定量PCR检测抗凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Bax在两种细胞中的表达水平及其比值。结果:与健康组相比,慢性牙周炎组HGFs细胞活性在培养4 d后明显下降(P＜0.05),而且在体外培养2 d、4 d细胞中Bcl-2/Bax的比值下降(P＜0.05),具有时间依赖性。结论:慢性牙周炎患者HGFs细胞活性下降,细胞凋亡增强,从细胞水平说明其存在牙周炎易感性。     

慢性牙周炎牙龈组织中细胞凋亡的研究

目的：观察慢性牙周炎牙龈组织中的凋亡细胞,并探讨其发生凋亡的机制。方法：采用透射电镜法观察牙龈组织凋亡细胞的超微结构、利用免疫组化方法检测20例慢性牙周炎患者及20例牙周健康者牙龈组织中凋亡蛋白Casepase-9、Cyt-C的表达并进行统计学分析。结果：慢性牙周炎患者牙龈组织中可观察到凋亡细胞,Case-pase-9、Cyt-C的阳性表达显著高于牙周健康组（P〈0.05）。结论：慢性牙周炎较牙周健康者龈组织发生明显的细胞凋亡现象,并依赖于线粒体途径。     

釉基质衍生物对牙周炎症组织中凋亡发生的影响

目的：探讨釉基质衍生物（EMD）对牙龈卟啉单胞菌脂多糖（Pg—LPS）龈沟内注射形成的牙周炎症组织中细胞凋亡的影响。方法：隔日向SpragueDawley大鼠双侧上颌第一及第二磨牙间腭侧龈沟内注射Pg—LPS2wk建立牙周炎模型;牙周炎形成后,龈沟内注射EMD或磷酸盐缓冲液;截取上颌骨标本,行HE染色观察牙周组织破坏情况,TUNEL染色观察牙周组织中细胞凋亡,免疫组织化学染色观察凋亡酶caspase--3和波形蛋白的表达。结果：在大鼠龈沟内注射Pg—LPS后,牙周组织形成明显的炎症和附着丧失;TUNEL染色显示EMD可以抑制Pg—LPS所致牙周组织中的细胞凋亡;免疫组织化学染色显示EMD降低凋亡酶caspase--3的表达,并且促进牙周组织中波形蛋白的表达。结论：EMD可以抑制Pg—LPS所致牙周组织中的细胞凋亡,从而促进牙周组织再生。     

慢性牙周炎通过PERK-CHOP信号通路介导睾周脂肪细胞凋亡的研究

目的 探讨慢性牙周炎通过蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase,PERK)-C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)信号通路对大鼠睾周脂肪细胞凋亡的影响。方法 将20只雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组。实验组构建大鼠慢性牙周炎模型,对双侧上颌第二磨牙行丝线结扎并龈沟内注射牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis-lipopolysaccharid,P. gingivalis-LPS);对照组大鼠龈沟内注射等量PBS。建模3个月后处死大鼠,通过测量牙龈出血指数(gingival bleeding index,GBI)及牙周袋探诊深度(probing pocket depth,PPD)评价牙周组织炎症,采用Micro-CT分析大鼠第二磨牙牙槽骨吸收程度。原位细胞凋亡检测法(TUNEL)染色观察睾周脂肪细胞凋亡情况。蛋白质印迹法(Western blot)检测PERK、p-PERK、CHOP、Caspase-12、Cleaved-Caspase-3的蛋白表达水平。结果 实验组大鼠GBI、PPD及釉牙骨质界至牙槽嵴顶距离显著高于对照组(P<0.05),出现明显牙龈软组织炎症和牙槽骨破坏吸收,大鼠慢性牙周炎模型建立成功。实验组大鼠睾周脂肪细胞凋亡率显著增加(P<0.05),p-PERK、CHOP、Caspase-12、Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论 慢性牙周炎通过PERK-CHOP信号通路介导大鼠睾周脂肪细胞的凋亡。     

肥大细胞脱颗粒在牙周炎病理中的作用

目的:探讨肥大细胞脱颗粒在牙周炎病理中的意义。方法:将自愿接受研究的受试者分为3组:轻度慢性牙周炎组(轻度组,17例)、重度慢性牙周炎组(重度组,18例)、正常对照组(15例)。取牙龈活检组织制作连续切片,HE染色在光镜下观察各组牙周组织的组织学改变;甲苯胺蓝染色法观察各组肥大细胞的数量及肥大细胞脱颗粒状况;天狼猩红染色法观察各组牙周组织纤维化的程度。结果:与正常对照组相比,各慢性牙周炎组的牙周组织中肥大细胞显著增多(P<0.01);重度组与轻度组相比较肥大细胞数量和脱颗粒率均明显升高(P<0.01),牙周组织纤维化程度更加严重(P<0.05)。结论:肥大细胞的募集、脱颗粒和纤维化程度与牙周炎的严重程度相关,提示肥大细胞可能在牙周炎的发病和疾病进程中起着重要的作用。     

Th17细胞在牙周炎中的研究进展

牙周炎是以牙周组织炎症和牙槽骨破坏为主要特征的慢性炎症性破坏性疾病。近来研究发现Th17细胞存在于牙周炎的病变牙周组织中,提示Th17细胞参与牙周炎的发病过程。本文就Th17细胞在牙周炎发病中的作用进行综述。     

程序性死亡配体1负性调控慢性牙周炎的炎症反应

目的 探讨程序性死亡配体1（PD-L1）在慢性牙周炎中是否有表达,以及与不同程度慢性牙周炎的相关关系,为阐明慢性牙周炎的免疫调控机制、临床治疗和预后提供依据。方法 收集健康人和慢性牙周炎患者的牙龈和牙周膜组织。根据临床探测,分为正常对照组、轻度牙周炎组、重度牙周炎组。运用荧光定量聚合酶链反应（PCR）测定不同组牙周组织中PD-L1 mRNA的表达;免疫印迹（Western blot）以及免疫组织化学方法测定不同组牙周组织中PD-L1蛋白的表达。结合临床影像资料,分析PD-L1的差异表达量和不同程度慢性牙周炎的关系。结果 轻度牙周炎组牙周组织中PD-L1的相对表达量显著高于重度牙周炎组（P<0.01）;正常对照组牙周组织中PD-L1的相对表达量与重度牙周炎组牙周组织相比无统计学意义（P>0.05）。结论 PD-L1在牙周组织的表达可负性调控炎症牙周组织损伤。     

伴放线放线杆菌与牙周病相关细胞凋亡关系的研究

牙周病是口腔的常见病和多发病,但其具体机制至今尚未完全明了。大量研究证实,细胞凋亡在牙周病的发生和发展过程中起重要作用。伴放线放线杆菌是牙周炎主要致病菌之一,可产生多种毒力因子。本文就伴放线放线杆菌的各种毒力因子与细胞凋亡及伴放线放线杆菌与牙周组织内多种细胞凋亡的关系进行综述。     

TNF-α与牙周炎和慢性肺感染的相关性实验研究

目的:观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在牙周组织及肺组织中的表达及变化,从细胞因子的角度探讨牙周炎和慢性肺感染的相互关系。方法:将30只昆明小鼠随机平均分为A组和B组,随机选取其中一组(A组)建立小鼠慢性肺感染动物模型后,将A组小鼠随机分为3个亚组,在原有肺感染的基础上叠加建立牙周炎动物模型,即A1组(慢性肺感染+牙周正常组)、A2组(慢性肺感染+轻度牙周炎组)、A3组(慢性肺感染+重度牙周炎组)。B组小鼠亦分为3个亚组,建立牙周炎动物模型,即B1组(正常对照组)、B2组(轻度牙周炎组)、B3组(重度牙周炎组),采用免疫组化染色观察TNF-α在各组牙周组织及肺组织中的表达,应用计算机图像分析系统半定量分析TNF-α的阳性表达水平。结果:牙周袋深度、牙槽骨吸收总量、肺灌洗液淋巴细胞百分数及牙周组织和肺组织中TNF-α的平均光密度值(OD)在A组各亚组间及B组各亚组间的差异均有统计学意义(P<0.05),且A3>A2>A1、B3>B2>B1。而在A1与B1、A2与B2、A3与B3的比较中牙周袋深度、牙槽骨吸收总量及牙周组织中TNF-α平均光密度值差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TNF-α可能参与了牙周炎和慢性肺感染的发病过程,且在牙周炎与慢性肺感染的关系中发挥作用。     

牙周炎和健康人牙周组织中细胞焦亡水平的比较研究

目的:研究慢性牙周炎和健康人的牙周组织中细胞焦亡水平是否存在差异。方法:分别纳入全身健康、无牙周病史、牙列完整的患者9例作为健康对照组，慢性牙周炎III～IV期患者9例作为牙周炎组。收集患者的牙周组织，免疫组化染色对牙龈组织中消皮素D(GSDMD)、半胱天冬酶-1(caspase-1)、NLRP3炎症小体、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)的表达水平及分布进行定性分析；实时定量PCR检测牙龈组织和牙周膜组织中GSDMD、caspase-1、NLRP3、IL-1β及IL-18 mRNA的表达差异。结果:免疫组化染色显示牙周炎组的牙龈组织中GSDMD、caspase-1、NLRP3、IL-1β、IL-18的阳染色面积均大于健康组(P<0.05)。实时定量PCR检测显示，牙周炎组牙龈组织和牙周膜组织中GSDMD、caspase-1、NLRP3、IL-1β、IL-18 mRNA的表达量明显高于健康组(P<0.05)。结论:慢性牙周炎牙周组织的细胞焦亡水平高于健康人，提示细胞焦亡可能参与了牙周炎的发生发展。     

牙龈卟啉单胞菌感染宿主细胞后对其凋亡调控研究进展

牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis）是证据充分的重要的牙周致病菌之一,参与牙周炎的发生、发展及牙周组织的破坏过程。以往研究表明,牙周感染与全身健康及系统疾病均有着密切关系。P. gingivalis感染多种宿主细胞后,通过干扰相关信号传导及蛋白表达,对宿主细胞凋亡进行调控。现就P. gingivalis感染宿主细胞后对其凋亡调控研究进展做一综述。     

可溶性髓样细胞触发性受体-1在不同牙周状态的龈沟液中表达研究

目的　分析比较可溶性髓样细胞触发性受体-1（soluble triggering receptor expressed on myeloid cells,sTREM-1）在不同牙周状态的龈沟液（gingival crevicular fluid,GCF）中表达情况,探讨sTREM-1在慢性牙周炎发生发展过程中的作用。方法　选取2017年1月至2018年6月于福建医科大学附属口腔医院牙周科就诊的18 ~ 60岁患者85例。根据牙周临床检查,将所有患者分成5组：健康对照组（牙周组织健康者18例）、慢性牙龈炎组（18例）、轻度慢性牙周炎组（14例）、中度慢性牙周炎组（15例）和重度慢性牙周炎组（20例）。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测比较不同牙周状态的GCF中sTREM-1的表达,并与患者的牙龈指数（GI）、牙周袋探诊深度（PD）及附着丧失（CAL）情况进行相关性分析。结果　慢性牙龈炎组患者及轻度、中度和重度慢性牙周炎组患者GCF中sTREM-1的表达水平均高于健康对照组,差异均有统计学意义（均P < 0.05）。与慢性牙龈炎组相比,中度和重度慢性牙周炎组患者GCF中sTREM-1的表达水平均显著增高,差异均有统计学意义（均P < 0.05）;重度慢性牙周炎组患者GCF中sTREM1的表达水平显著高于轻度慢性牙周炎组,差异有统计学意义（P < 0.05）;其余组间两两比较,差异均无统计学意义（均P > 0.05）。此外,sTREM-1的表达水平与牙周临床指标GI、PD及CAL均呈正相关。结论　GCF中sTREM-1的表达水平与牙周组织的炎症程度密切相关。检测GCF中sTREM-1的含量对判断牙周组织的炎症状态具有潜在应用价值。     

实验性糖尿病牙周炎诱导成骨细胞凋亡的研究

目的观察糖尿病牙周炎条件下成骨细胞的凋亡情况。方法选用SD大鼠62只,随机分为糖尿病牙周炎组（DP）、单纯牙周炎组（P）以及空白对照组（N）。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法诱导大鼠糖尿病模型,采用丝线结扎联合口内接种细菌的方法建立牙周炎模型。各组动物分别于DP组、P组丝线结扎后第3、6周时分批处死,取标本进行组织学检测,并计算各组成骨细胞凋亡百分率。结果丝线结扎后3、6周时,成骨细胞凋亡百分率由高至低依次为DP组、P组、N组,组间两两比较均有统计学意义（P＜0.05）。在丝线结扎后3周和6周时,DP组成骨细胞凋亡百分率均达到P组的2倍。结论糖尿病可促进牙周炎条件下牙周组织中成骨细胞的凋亡。     

牙周炎骨丧失与细胞凋亡

牙周炎（periodintitis）是由菌斑微生物引起的牙周组织炎症性破坏性疾病,是口腔领域导致骨质丧失的最常见疾患。骨丧失（bone loss）由骨重建（bone rmodeling）失衡所致,骨组织的病理改变不仅由破骨细胞和成骨细胞的数量决定,而且与凋亡（apoptosis）所调控的这些细胞的生命周期密切相关。近年来,大量研究表明细胞凋亡参与牙周炎的发生、发展过程。已证实,牙周致病菌及其代谢产物能影响白细胞和基质生成细胞（matrix-producing cells）的凋亡。本文主要就牙周炎、骨丧失及细胞凋亡之间的关系进行综述,旨在探讨骨系细胞的异常凋亡影响牙周炎骨丧失的机制。     

可溶性髓样细胞触发性受体-1在不同牙周状态的龈沟液中表达研究

 目的　分析比较可溶性髓样细胞触发性受体-1（soluble triggering receptor expressed on myeloid cells，sTREM-1）在不同牙周状态的龈沟液（gingival crevicular fluid，GCF）中表达情况，探讨sTREM-1在慢性牙周炎发生发展过程中的作用。方法　选取2017年1月至2018年6月于福建医科大学附属口腔医院牙周科就诊的18 ~ 60岁患者85例。根据牙周临床检查，将所有患者分成5组：健康对照组（牙周组织健康者18例）、慢性牙龈炎组（18例）、轻度慢性牙周炎组（14例）、中度慢性牙周炎组（15例）和重度慢性牙周炎组（20例）。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测比较不同牙周状态的GCF中sTREM-1的表达，并与患者的牙龈指数（GI）、牙周袋探诊深度（PD）及附着丧失（CAL）情况进行相关性分析。结果　慢性牙龈炎组患者及轻度、中度和重度慢性牙周炎组患者GCF中sTREM-1的表达水平均高于健康对照组，差异均有统计学意义（均P < 0.05）。与慢性牙龈炎组相比，中度和重度慢性牙周炎组患者GCF中sTREM-1的表达水平均显著增高，差异均有统计学意义（均P < 0.05）；重度慢性牙周炎组患者GCF中sTREM1的表达水平显著高于轻度慢性牙周炎组，差异有统计学意义（P < 0.05）；其余组间两两比较，差异均无统计学意义（均P > 0.05）。此外，sTREM-1的表达水平与牙周临床指标GI、PD及CAL均呈正相关。结论　GCF中sTREM-1的表达水平与牙周组织的炎症程度密切相关。检测GCF中sTREM-1的含量对判断牙周组织的炎症状态具有潜在应用价值。