福氏志贺菌中超广谱β-内酰胺酶的基因型分析

目的检测福氏志贺菌中超广谱G内酰胺酶（ESBLs）的基因型别。方法琼脂稀释法测定5株福氏志贺菌对多种抗菌药物的敏感性，并进行接合试验；改良三维试验检测产ESBLs菌株，同时对这些菌株进行脉冲场电泳（PFGE）检测；采用TEM、SHV、CTX-M-1组、CTX-M-2组、CTX-M-9组β-内酰胺酶通用引物以及TEM、CTX-M-9组全编码基因引物进行PCR检测，并对全编码基因PCR产物进行DNA序列分析。结果三维试验结果显示，5株福氏志贺菌均为产ESBLs菌株，对青霉素类、第一代、第二代头孢菌素以及四环素、复方磺胺甲嗯唑显著耐药，对第三代头孢菌素中头孢曲松、头孢噻肟耐药或中度敏感，对亚胺培南、头孢美唑、氟喹诺酮类、头孢噻肟克拉维酸、头孢他啶、头孢他啶一克拉维酸显示敏感。对于β-内酰胺类的耐药性可以通过接合方式发生水平转移；ESBLs基因型别为CTX-M-14，5株菌株的PFGE谱型可分为A、B两种谱型。结论5株福氏志贺菌产生CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶，导致对多种β-内酰胺类抗生素耐药，并存在克隆传播，需加强监控。     

天津地区志贺菌属产超广谱β内酰胺酶及其基因型的检测

目的 了解天津地区志贺菌属产超广谱β内酰胺酶(ESBL)的流行基因型、耐药特征和流行病学特征,探讨产ESBL志贺菌属特性与耐药质粒的关系.方法 136株志贺菌来源于2009年5月至2010年9月在天津市儿童医院、天津医科大学第二医院及天津市第一中心医院门诊就诊的以脓血便为主的腹泻患者粪便标本,纸片扩散法筛选可疑产ESBL志贺菌属;对产ESBL志贺菌进行接合试验,供体菌和接合子进行耐药性测定,以确定耐药性质粒传递;采用TEM、SHV、CTX-M-1组、CTX-M-2组、CTX-M'9组β内酰胺酶通用引物对产ESBL菌株的基因型进行PCR检测.使用肠杆菌科基因间的重复序列PCR(ERIC-PCR)分析产ESBL菌株的分子同源性.采用x2检验.结果 136株志贺菌属中,产ESBL志贺菌20株,检出率为14.7％,未检测出产AmpC酶菌株.其中16株志贺菌基因型为CTX-M-14型,4株为CTX-M-15型;产CTX-M型ESBL菌株对多种抗菌药物耐药,但对亚胺培南的敏感率为100％.18株产ESBL志贺菌接合试验获得成功,其接合子对β内酰胺类抗菌药物耐药.结论 天津地区志贺菌属产ESBL基因型以CTX-M型为主,产ESBL是志贺菌属对β内酰胺类耐药的主要原因,产ESBL菌株的传播机制以质粒介导为主.     

兰州市不同毒力基因型志贺菌致病力研究

目的检测2007年兰州市分离的不同毒力基因型志贺菌株致病力情况,探讨毒力基因型与致病力的关系。方法选用不同毒力基因型的志贺菌,以腹腔注射为感染途径,测定其对昆明种小鼠的半数致死量(LD50)。结果7株不同毒力基因型(分别为virA+ipaH+setlA、virA+ial+ipaH+setlA+setlB+sen、virA+setlA、virA+ial+ipaH+setlA+sen、virA+ipaH+setlA+sen、virA+ipaH+setlA+setlB、virA+ial+ipaH+setlA+setlB)志贺菌LD50分别为:1.422×109cfu/mL、6.653×107cfu/mL、6.653×108cfu/mL、1.422×109cfu/mL、1.422×109cfu/mL、6.653×108cfu/mL、3.062×109cfu/mL;结果表明,不同毒力基因型的志贺菌之间存在致病力差异,其中以基因组合为virA+ial+ipaH+setlA+setlB+sen的福氏志贺菌Ⅳ菌株的LD50最小,致病力最强。结论志贺菌的毒力基因型与致病力密切相关。     

猪源产志贺毒素大肠埃希菌耐药性及超广谱β内酰胺酶基因型分析

目的了解我国猪源产志贺毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)产超广谱β内酰胺酶(Extended-spectrumβ-lactamases,ESBLs)情况及其基因型。方法对22株分离自重庆地区2个规模化养殖场健康猪粪的STEC菌株进行药物敏感性检测、ESBLs表型确证及7种类型(blaSHV,blaLEN,blaOKP,blaTEM,blaCTX-M,blaGES及blaKPC)ESBLs基因型PCR检测和测序分析。结果 22株携带stx2e的STEC菌株中2株对所有23种测试抗生素敏感,其余菌株除对亚胺培南和美罗培南敏感外,对其他抗生素均存在不同程度耐药。10株STEC菌株(占45.45%)产ESBLs酶。PCR检测其中1株为blaCTX-M-1基因型,其余9株为blaCTX-M-9+blaTEM-1基因型。结论重庆地区猪源STEC中存在较高比例的产ESBLs菌株。在加强人和动物STEC感染检测与监测的同时,应进行细菌耐药性监测。     

补锌可帮助营养不良的志贺氏菌痢疾儿童恢复

据医业网8月1日报道（原载Eur J Clin Nutr 2007），志贺氏菌感染通过增加锌和维生素A的丢失可引起严重的营养负担，在营养不良儿童中死亡率较高。孟加拉国的一项研究表明，补锌可缩短营养不良儿童志贺氏菌感染的疾病持续时间并降低发病率。[第一段]     

284株志贺菌菌型分布及耐药谱分析

志贺氏菌属(Shigella)细菌(通称痢疾杆菌)是细菌性痢疾的病原菌,为无荚膜、无鞭毛、有菌毛的革兰阴性菌,由菌体抗原(O)及表面抗原(K)组成,其中O抗原是分类依据,可分为A、B、C、D四个群及39个血清型(包括亚型).     

1 831株宋内志贺菌耐药性调查及其产ESBLs的研究

目的了解分离自腹泻患者的1831株宋内志贺菌的流行趋势及耐药情况,探讨宋内志贺菌多重耐药机制。方法采用志贺菌及沙门菌琼脂培养基培养及K—B法检测14种抗生素的耐药率。多重耐药菌用纸片确认试验检测产超广谱β内酰胺酶（extended-spectrum β-laetamases,ESBLs）,改良三维试验检测ESBLs和AmpC β内酰胺酶（AmpC β-lactamase,AmIpC酶）。结果1831株宋内志贺菌感染腹泻患者中,男女比例为1．25：1。高发季节为7～9月。1～20岁发病人数占总发病人数的71．0％。宋内志贺菌对复方磺胺甲嗯唑、氨苄西林和头孢曲松的耐药率较高,分别达87．7％、23．0％和9．5％,且增高趋势明显;对氟喹诺酮类,头孢吡肟、头孢美唑、氯霉素、磷霉素和庆大霉素的耐药率较低,明显低于头孢曲松、头孢噻肟（P〈0．05）。43株多重耐药菌均为ESBLs阳性株,未发现产AmpC酶株。结论在北京地区,宋内志贺菌感染腹泻患者发病年龄以青少年为主。其存志贺菌属感染的比例中有增高的趋势,对头孢曲松、头孢噻肟、复方磺胺甲嗯唑、氨苄西林的耐药率较高且有上升趋势。宋内志贺菌耐头孢菌素者以产ESBLs为主。     

磷霉素钠在志贺氏菌痢疾治疗中的协同作用

志贺氏菌属的耐药现象日趋严重,为进一步提高志贺氏菌痢疾的疗效,合理交替选用抗菌药物,我们对110例志贺氏菌痢疾患者随机分为3组.分别给予磷霉素钠+丁胺卡那霉素、磷霉素钠+氟哌酸或单用氟哌酸治疗,并进行疗效比较.     

MALDI-TOF-MS鉴定宋内志贺菌的初步应用研究

目的通过扩充基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrixassisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)的数据库研究宋内志贺菌的鉴定。方法用提取法进行宋内志贺菌质谱图的建库,建库后分别使用直接涂抹法和提取法对50株宋内志贺菌野生株进行鉴定。结果提取法的鉴定符合率为100%,而直接涂抹法的鉴定符合率为60%。结论 MALDI-TOF-MS通过数据库的扩充和流程的优化可以鉴定宋内志贺菌到血清学水平,它将会成为临床微生物实验室的诊断和鉴别工具。     

MALDI-TOF-MS鉴定宋内志贺菌的临床应用

目的建立基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定宋内志贺菌的质谱数据库,实现对临床分离宋内志贺菌的快速鉴定。方法建立经提取法处理后鉴定宋内志贺菌的质谱数据库。在分别使用直接涂抹法和提取法处理后对200株宋内志贺菌野生株进行鉴定验证;同时针对宋内志贺菌的不同菌相、不同激光强度和不同样本保存时间分别进行MALDI-TOF-MS鉴定。再选取100株大肠埃希菌,进行MALDI-TOF-MS鉴定,以确定新建数据库的特异性。结果宋内志贺菌经提取法处理后的鉴定符合率为100%,经直接涂抹法处理后的鉴定符合率为71.5%。宋内志贺菌不同菌相和不同激光强度的鉴定结果差异无统计学意义(P>0.05);而样本不同保存时间鉴定结果差异有统计学意义(P<0.05)。使用新数据库后,大肠埃希菌鉴定符合率为96.0%。结论经提取法处理后应用MALDI-TOF-MS鉴定宋内志贺菌建立的质谱数据库,能快速、准确鉴定宋内志贺菌到种水平,满足腹泻病原菌临床分离株的快速诊断。     

猪源产志贺毒素大肠埃希茵耐药性及超广谱β内酰胺酶基因型分析

目的了解我国猪源产志贺毒素大肠埃希菌（Shigatoxin-producingEscherichiacoli,STEC）产超广谱8内酰胺酶（Extended—spectruml β-lactamases,ESBLs）情况及其基因型。方法对22株分离自重庆地区2个规模化养殖场健康猪粪的STEC菌株进行药物敏感性检测、ESBLs表型确证及7种类型（blaSHV,blaLEN,blaOKP,blaTEM,blaCTX-M,blaGES及blaKPC）ESBLs基因型PCR检测和测序分析。结果22株携带stx2e的STEC菌株中2株对所有23种测试抗生素敏感,其余菌株除对亚胺培南和美罗培南敏感外,对其他抗生素均存在不同程度耐药。10株sTEc菌株（占45．45％）产ESBLs酶。PCR检测其中1株为blaCTX-M-1基因型,其余9株为blaCTX-M-9 ＋blaTEM-1基因型。结论重庆地区猪源STEC中存在较高比例的产ESBLs菌株。在加强人和动物STEC感染检测与监测的同时,应进行细菌耐药性监测。     

2002～2003年新疆982株志贺氏菌菌型分布及药敏测定

目的报告新疆2002年、2003年982株志贺氏菌的分型和耐药性测定结果. 方法志贺氏菌的鉴定和血清分型按P.R.爱德华等著的"肠杆菌科的鉴定"进行;耐药性测定参照K-B法进行.结果 982株志贺氏菌中福氏志贺氏菌占97.15%,其次是宋内志贺氏菌、痢疾志贺氏菌和鲍氏志贺氏菌;954株福氏志贺氏菌可分为17个亚型,F4 、FX 、 F2a为优势菌;对13种抗菌素均有不同程度的耐药,耐药率超过80%的有四环素、强力霉素、氨苄青霉素、复方新诺明.结论 2002～2003年新疆志贺氏菌以福氏属中的F4为优势;对抗菌药物的耐药率升高、种类增多.     

志贺氏菌感染的研究进展

志贺氏菌感染的研究进展张开瑞志贺氏菌感染是我国夏秋季常见的以腹泻为主的急性肠道传染病。在环境卫生及卫生习惯不良的情况下，易于流行。因此，积极防治本病，对保障人民健康，具有重要意义。现将其研究进展作一扼要介绍。一、志贺氏菌菌群分布与变迁志贺氏菌属菌型较...     

志贺菌属对氟喹诺酮类药物耐药机制的研究

目的 研究志贺菌属对氟喹诺酮类药物的耐药机制。方法 从临床上收集志贺菌１５７株,进行药敏试验、利血平逆转试验、Ｒ质粒接合试验和细菌内诺氟沙星聚积的测定。对其中８株耐药菌、１株敏感菌和１株福氏标准菌的基因５＾１－末端编码区进行聚合酶链瓜 增并克隆和序列分析。结果 诺沙星耐药菌的Ｒ质粒接合试验阳性率为５１．２％,Ｒ质粒不能传递对氟喹诺酮类药物的耐药物,利血有降低氟喹诺酮类药物对志贺菌的最低抑菌浓度值,     

氟哌酸和黄连素对志贺氏菌耐药性质粒消除研究

用氟哌酸和黄连素对２０株携有接合传递耐药性质粒（Ｒ质粒）及１９株携有非接合传递耐药性质粒（ｒ质粒）志贺氏菌进行体外消除研究。结果显示，可被消除的耐药性质粒大多数在２４小时内被消除。氟哌酸对Ｒ质粒及ｒ质粒消除率分别为５％和５２．６％，黄连素对Ｒ质粒及ｒ质粒消除率分别为１０％和５７．９％，两种药物对ｒ质粒消除率明显优于对Ｒ质粒消除率，其原因可能与ｒ质粒分子量小，非传递性及在药物作用下易于丢失有关。氟哌酸和黄连素均为广谱抗菌药物，因此在临床上治疗感染的同时又能消除耐药性质粒，阻止耐性扩散。     

非O157产志贺毒素大肠埃希菌研究进展

产志贺毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一类能产生一种或一种以上志贺毒素的大肠埃希菌的总称,包括400余种血清型,其中以O157∶H7血清型为主。近年来,非O157STEC在世界范围内引起散发感染和暴发的报道明显增加,但由于非O157STEC血清型多样,菌株间表型差异较大,目前尚无一种有效的能用于所有非O157STEC菌株分离的方法,因此非O157STEC的流行情况可能被低估。本文就非O157STEC的病原学、致病机制、流行病学特征、实验室诊断、治疗和预防等方面的研究进展做一简要综述。     

志贺菌分型方法的研究进展

随着分子生物学技术的进步,针对痢疾杆菌的快速检测方法、分子和基因水平的研究得以迅速发展。本文综述了志贺菌分型方法的研究进展。     

广西宋内志贺菌药敏特性及ESBLs基因检测分析

目的了解广西地区宋内志贺菌的药敏特性及携带超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因与型别特征,为临床合理用药和控制耐药性的传播提供科学依据。方法采用微量肉汤稀释法对宋内志贺菌分离株进行药物敏感试验;采用PCR方法和毛细管电泳方法检测菌株携带相关ESBLs基因;采用近邻相接法构建系统进化树,分析菌株CTX-M型基因型别;对菌株携带ESBLs基因与特定抗菌药物耐药性的关系进行统计学分析。结果90株宋内志贺菌对环丙沙星敏感率为86.67%,无耐药现象;头孢曲松耐药率为96.67%,阿奇霉素耐药率为96.67%,多重耐药率为98.89%。90株宋内志贺菌中50株检出blaCTX-M-9 group基因,检出率为55.56%,经系统发育分析均为CTX-M-14亚型;1株检出blaTEM基因,检出率为1.11%;未检出blaCTX-M-1 group,blaCTX-M-2 group,blaCTX-M-8 group,blaCTX-M-25 group和blaOXA,blaSHV,blaNDM,blaVIM等β-内酰胺酶基因。blaCTX-M-14基因阳性菌株与blaCTX-M-14基因阴性菌株对头孢噻肟的耐药率差异无统计学意义(χ²=0.000,P>0.05);携带blaTEM基因的菌株对头孢他啶不耐药。结论广西地区的宋内志贺菌对主要治疗药物头孢曲松高度耐药,且多重耐药现象严重;菌株普遍携带ESBLs基因,主要为CTX-M-14亚型;携带单一型别的ESBLs基因与菌株对特定β-内酰胺类抗菌药物耐药无明显关联。     

肠产志贺样毒素且具侵袭力的大肠埃希氏菌和肠侵袭性大肠埃？…

目的 比较肠产志贺样毒素且具侵袭力的大肠埃希氏菌（Ｅｎｔｅｒｏ－ＳＬＴｓ－Ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ａｎｄ Ｉｎｖａｓｉｖｅ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ,ＥＳＩＥＣ）和肠侵袭性大肠埃希氏菌的侵袭基因,阐明它们之间的异同。方法 使用质粒酶切图谱分析,侵袭性基因ｉｐａＢ,ｉｐａＣ,ｉｐａＤ的ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交实验,以及利用ＥＩＥＣ８４０１菌株的侵袭性大质粒酶切产物作为探针与ＥＳＩＥ