致敏受者细胞因子基因多态性与肾移植急性排斥反应的关系

目的研究致敏受者细胞因子基因多态性与肾移植急性排斥反应的关系。方法应用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对97例术前群体反应性抗体阳性肾移植受者的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-10(IL-10)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、白介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)的基因型进行测定,并探讨细胞因子基因型对急性排斥反应发生率的影响。结果97例致敏肾移植受者术后3个月内共有23例发生了急性排斥反应,其中TNF-α和IL-10高产量基因型组受者的急性排斥反应发生率分别高达51.9%和55.5%,显著高于相应的低产量基因型受者的12.9%和13.3%(P<0.01)。联合TNF-α和IL-10发现,高TNF-α产量基因型和高、中IL-10基因型受者的急性排斥反应发生率为62.5%,显著高于两者均为低产量基因型者的8.5%(P<0.01)。未发现TGF-β1、IL-6、IFN-γ细胞因子基因多态性与急性排斥反应的关系。结论TNF-α和IL-10基因多态性对致敏受者肾移植术后的急性排斥反应发生率有明显影响,测定TNF-α和IL-10基因型有利于制订合理的免疫抑制方案。     

IL-17在小鼠肾移植急性排斥反应早期诊断中的作用

目的:研究Th17细胞及相关因子白细胞介素17 (IL-17)在小鼠肾移植排斥反应中的表达及意义.方法:建立小鼠肾移植模型,实验动物随机分为同系移植组和急性排斥反应组;在移植术后3,7d分别应用ELISA检测2组小鼠血清中IFN-γ和IL-17的含量,应用流式细胞技术检测移植肾中浸润淋巴细胞中Th1和Th17细胞数量,取移植肾经10％甲醛固定后行常规病理检查.结果:与同系移植组相比,急性排斥反应组术后第3天血清IFN-γ含量无明显差异而II-17含量显著增高(P＜0.05),术后第7天血清IFN-γ和IL-17含量均显著增高(P＜0.05);急性排斥反应组中血清IFN-γ和IL-17含量术后第7天较第3天均显著增高(P＜0.05);急性排斥反应组移植肾中浸润淋巴细胞中Th1与Th17细胞比例在术后第3天及第7天较同系移植组均明显增多(P＜0.05);急性排斥反应组中移植肾中浸润淋巴细胞中Th1与Th17细胞比例术后第7天明显高于第3天(P＜0.05);病理组织学检查急性排斥反应组随着移植时间的延长,排斥反应逐渐增强.结论:Th17细胞在肾移植排斥反应的发生发展中可能起着非常重要的作用,对受体血清中细胞因子IL-17的检测可作为急性排斥反应早期诊断的预见性和特异性指标.     

监测Th1/Th2细胞因子变化对猪胰腺移植急性排斥反应早期诊断的意义

目的研究Th1／Th2型细胞因子IFN-γ／IL-4变化对胰腺移植手术后急性排斥反应早期诊断的意义。方法杂种长白猪24只,分为对照组、移植组和免疫抑制治疗组。移植组为同种异体胰十二指肠移植,免疫抑制治疗组在进行同种异体胰十二指肠移植手术同时应用环孢素A（CsA）＋霉酚酸酯（MMF）＋甲强龙三联治疗方案。术前1d和移植手术后1、3、5、7d采猪静脉血。检测血糖、胰岛素及胰高血糖素水平,流式细胞仪检测Th1／Th2型细胞因子IFN-γ和IL-4在CD4^＋细胞中的表达,并取移植胰腺组织进行病理学检查及进行评分。结果①术后1～7d移植组IFN-γ表达呈进行性上调,免疫抑制组轻度上调,在术后1、3、5、7d移植组与免疫抑制组IFN-γ的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。②移植组IL-4的表达呈进行性下调,免疫抑制组IL-4表达进行性上调,在术后3、5、7d移植组和免疫抑制组IL-4的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。③与对照组比较,移植组和免疫抑制组血糖、胰岛素及胰高血糖素水平的变化无统计学意义（P〉0．05）。④与移植组相比,免疫抑制组术后5d和7d胰腺排斥反应程度较轻（P〈0．05）。结论监测Th1（IFN-γ）和Th2（IL-4）型细胞因子变化可以早期发现胰腺移植后急性排斥反应。免疫抑制治疗可以下调Th1（IFN-γ）细胞因子表达,上调Th2（IL-4）型细胞因子的表达。     

干扰素γ基因表达在大鼠肝移植急性排斥反应诊断中的作用

目的：探讨肝移植术后急性排斥反应的早期诊断方法。方法：应用RT-PCR技术检测大鼠肝移植术后肝组织中的IFN-γ基因表达，以组织病理学作为急性排斥反应的诊断标准，将肝移植大鼠分为急性排斥组(Rt组)和非急性排斥组(Rf组)，观察肝组织中IFN-γ基因表达与急性排斥反应的关系。结呆：肝组织中IFN-γ基因表达在Rt和础组差异有显著性(P=0．0000)。结论：检测肝组织中IFN-γ基因表达可能是早期诊断肝移植术后急性排斥反应的一个有效指标。     

大鼠肝肠联合移植IL-2、IL-4及IFN-γ基因表达的研究

目的:检测细胞因子白细胞介素2(IL-2)、IL-4和干扰素γ(IFN-γ)在大鼠肝/小肠移植中的变化规律,从细胞因子角度探讨大鼠肝肠联合移植免疫耐受机理。方法:建立大鼠肝肠联合移植(LSBTx组)和单独小肠移植(SBTx组)模型,每组取6只受鼠观察生存期,每组另取6只大鼠于移植后5 d、7 d收集小肠移植物,术后14 d单独收集LSBTx组小肠移植物,分别进行组织病理学检查,同时采用RT-PCR方法检测移植物中IL-2、IFN-γ和IL-4等细胞因子的mRNA表达。结果:LSBTx组大鼠均获得长期存活(>28 d),SBTx组大鼠中位生存期12.7 d。组织学提示SBTx组大鼠死于严重排斥反应,而LSBTx组至术后14 d移植肠排斥反应已明显缓解,SBTx组术后5 d、7 d移植肠排斥反应评分高于LSBTx组,存在显著性差异(P<0.05)。两组间不同时段IL-2基因表达水平未见显著性差异(P>0.05),SBTx组术后5 d IL-4基因表达高于LSBTx组(P<0.05),SBTx组术后5 d、7 d IFN-γ基因表达也高于同时段的LSBTx组(P<0.05)。结论:移植物中IL-2基因转录水平并不能反映术后移植排斥反应强度;术后早期IL-4水平的下调与免疫耐受有关;持续低水平的IFN-γ表达是肝脏诱导小肠耐受的重要原因之一。     

异品系大鼠皮肤移植术后血浆IFN-γ和IL-4水平的检测及意义

目的:探讨大鼠皮肤移植排斥反应发生发展过程中血浆Th1类细胞因子IFN-γ、Th2类细胞因子IL-4的水平以及IFN-γ/IL-4比值的变化。方法:制作大鼠异品系(Wistar→SD)皮肤移植模型,以SD大鼠自体皮肤再植为对照。分别于术后0d、4d、8d、10～13d(排斥反应发生时)心脏取血,分离血浆,用ELISA双抗体夹心法检测血浆IFN-γ和IL-4的水平。结果:异品系皮肤移植后血浆IFN-γ和IL-4水平不断升高,在排斥时显著高于各自0d、4d和8d水平,自体皮肤再植术后两因子水平保持较稳定的低水平;异品系移植组大鼠排斥反应发生时血浆IFN-γ和IL-4均显著高于自体皮肤再植同时间点对照组(P分别<0.01和0.05);且IFN-γ/IL-4比值也显著高于自体皮肤再植对照组(P<0.01)。结论:IFN-γ和IL-4参与了皮肤移植排斥反应,排斥反应的发生与两者的相对含量有关,排斥反应时Th1类细胞因子IFN-γ占明显优势。     

IL-17参与小鼠心脏移植排斥反应的实验研究

目的 研究Th17细胞相关因子白细胞介素17(IL-17)在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义.方法 建立小鼠颈部异位心脏移植模型,实验动物随机分为同系移植组和急性排斥反应组.观察2组供心存活时间,应用RT-PCR检测移植心脏IL-17、核孤独受体γt(RORγt)、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA在移植术后1、2、3、4、5、6、7、8 d的动态表达水平.免疫荧光法观察移植术后第4天移植心脏内CD4+、CD8+T细胞中IL-17的表达情况.结果 RT-PCR检测显示,在急性排斥反应组中,IL-17和RORγt mRNA的表达都早于IFN-γ,在移植术后第2天即可于移植心脏中检测到,其表达量在术后第4天均达到高峰,随后逐渐下降,并分别在术后第6天和第7天无表达.免疫荧光结果显示,急性排斥组移植心脏内有大量CD4+、CD8+T细胞浸润,细胞因子IL-17主要由CD4+T细胞分泌.结论 Th17细胞在移植排斥反应的发生发展中可能起着非常重要的作用,对移植脏器中细胞因子IL-17的检测可作为急性排斥反应早期诊断的预见性和特异性指标.     

非T细胞来源细胞因子在小鼠心脏移植急性排斥反应模型中的表达

目的研究急性排斥反应性细胞因子在小鼠心脏移植中的表达状况,进一步阐明器官移植急性排斥反应的复杂发生机制。方法采用C57BL/6和Balb/c近交系小鼠,建立小鼠腹腔异位心脏移植模型。随机分为Balb/c-Balb/c同基因对照组(A组)和C57BL/6-Balb/c急性排斥反应组(B组)两组,每组26只。分别于移植术后1、3、5、7 d各处死5只小鼠留取移植心脏标本,采用RT-PCR及W estern印迹方法动态检测组织中IL-15、IL-2、TNF-α及IFN-γ的表达状况,同时行HE染色检测。另外,A、B两组各保留6只小鼠设为亚组,观察移植心脏存活时间。结果A组移植心均获长期存活(>100 d),B组移植心存活时间为8.0 d±0.9 d(t=251.95,P<0.01)。A组各个时间点移植心均未发现排斥现象,B组术后第3天开始出现排斥反应。A组各时间点IL-15 mRNA与TNF-αmRNA呈弱表达,IL-2 mRNA与IFN-γmRNA无表达。B组IL-15 mRNA、TNF-αmRNA、IL-2 mRNA及IFN-γmRNA均明显升高,于第5天达到高峰。A组各时间点可见IL-15、TNF-α、IFN-γ和IL-2蛋白的低水平表达;B组IL-15与IL-2自术后第3天始、TNF-α与IFN-γ自术后第1天始,蛋白表达水平开始升高。结论多种细胞因子,包括非T细胞来源细胞因子,参与了同种异体急性排斥反应的发生。     

抑制C5L2表达对Th17细胞功能和小鼠肾移植急性排斥反应的作用

目的：探讨补体C5a关键受体C5L2表达抑制后,对小鼠肾移植急性排斥反应模型中Th17细胞功能以及急性排斥反应的影响。方法：构建特异性C5L2干扰腺病毒,通过小鼠尾静脉注射入小鼠急性肾移植排斥模型,检测其血肌酐,ELSA检测Th17相关细胞因子白细胞介素（interleukin, IL）-6、IL-17以及肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-γ的变化,同时检测小鼠肾组织病理改变。结果：成功建立小鼠急性肾移植排斥模型,将构建的C5L2干扰腺病毒尾静脉注射后,小鼠血清Cr水平下降,IL-6、IL-17以及TNF-γ水平下降,急性排斥反应减轻。结论：特异性C5L2干扰腺病毒可以抑制Th17细胞功能,减轻肾移植急性排斥反应。     

肾移植术后早期急性排斥反应的诊治体会

目的：探讨肾移植术后急性排斥反应的临床诊断与治疗。方法：对5例同种异体肾移植术后患者出现急性排斥反应的诊断及治疗做回顾性总结分析。结果：经正确诊断和及时治疗,5例急性排斥患者全部得到治愈。结论：对急性排斥反应的早期发现、早期诊断及合理的治疗,是肾移植成功的关键,临床意义重大。     

窗体顶端肾移植术后lL-6和C-反应蛋白水平变化及临床意义

目的探讨IL-6、C-反应蛋白在肾移植术后急性排斥反应、感染和CsA中毒时的变化。方法分别采用ELISA法和免疫速率散射比浊法，动态监测68例患者肾移植前后血清IL-6及c-反应蛋白。结果肾移植术前IL-6、C-反应蛋白和对照组差异无显著性，术后第1天明显升高，IL-6和c-反应蛋白分别于1及2周左右降至术前水平。急性排斥反应前1～3d血清IL-6及c-反应蛋白即有不同程度升高，抗排斥治疗有效后迅速下降。并发感染时血清IL-6及c-反应蛋白显著升高，血清肌肝升高不明显，CsA中毒时均无明显变化。结论结合临床动态监测血清IL-6及c-反应蛋白可做为辅助诊断急性排斥反应的免疫生物学指标。     

异品系皮肤移植大鼠γδ T细胞培养液与血浆IFN-γ和IL-4水平观察

-4比值均高于对照组;大鼠外周血γδT细胞培养上清IFN-γ、IL-4含量与血浆IFN-γ、IL-4含量分别呈正相关关系.结论 异品系皮肤移植排斥反应发生过程中γγδT细胞能分泌IFN-γ和IL-4,而γδT细胞IFN-γ/IL-4细胞因子的分泌模式可能影响血浆细胞因子格局,从而参与了移植免疫应答过程.     

尿IL-6监测对肾移植术后急性排斥反应的诊断价值

目的探讨肾移植患者手术前后尿液中IL-6的变化及临床意义。方法采用ELISA法,动态监测患者移植手术前后尿液中IL-6的浓度。结果尿液中IL-6的浓度在肾移植术后第1天明显升高。急性排斥反应前1～2天尿液中IL-6的浓度有不同程度的升高,抗排斥治疗后迅速下降。结论动态监测尿IL-6是早期诊断肾移植术后急性排斥反应的一个较好的参考指标。     

尿IL一6监测对肾移植术后急性排斥反应的诊断价值

目的 探讨肾移植患者手术前后尿液中IL-6的变化及临床意义.方法 采用ELISA法,动态监测患者移植手术前后尿液中IL-6的浓度.结果 尿液中IL-6的浓度在肾移植术后第1天明显升高.急性排斥反应前1～2天尿液中IL-6的浓度有不同程度的升高,抗排斥治疗后迅速下降.结论 动态监测尿IL-6是早期诊断肾移植术后急性排斥反应的一个较好的参考指标.     

异种移植胎肠细胞介导排斥反应的免疫学机制

目的:用大鼠游离胎肠移植于小鼠模型研究细胞介导排斥反应(CMXR)的免疫学机理.方法:观察同种和异种胎肠游离移植各组移植物的病理改变和浸润细胞的表型,并用原位杂交方法检测移植物内Th细胞因子mRNA表达.结果:(1)移植胎肠的存活率同种移植组高于异种移植组(P＜0.01);(2)异种移植胎肠主要发生细胞介导的排斥反应;(3)异种移植物内浸润细胞主要为CD4 T细胞和ED2 MФ,其IL-4、IL-5和IL-10mRNA阳性细胞均明显高于IFN-γmRNA阳性细胞(P＜0.01).结论:CMXR与同种移植急性排斥反应存在本质差异,其特点是排斥程度强烈,异种移植胎肠内以CD4 T细胞和ED2 MФ浸润为主,且Th2细胞功能增强.大鼠至小鼠游离胎肠移植模型是研究CMXR的较为理想的动物模型.     

白介素4单克隆抗体对心脏移植排斥反应中细胞因子表达的影响

为观察白介素4单克隆抗体（IL－4Mab)对同种大鼠心脏移植物存在活时间及局部细胞因子网络的影响,将实验对象分为对照组和实验组,分别静脉给予生理盐水及抗白介素4单克隆抗体（OX81）,采用改良的移植术式建立移植模型,常规监测排斥反应发生情况,应用RT－PCR的方法检测移植物局部细胞因子如IL－1β、IL-2、CD25、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ的表达水平。结果表明,IL－4Mab组移植心存活时间没有显著性变化。IL－1β、IL-2、IL-5、CD25、TNF-α、IFN-γ的表达强,而IL－4、IL－6、IL－10的表达较弱。提示单纯应用抗IL－4单克隆抗体可能调节TH1／TH2类CK的表达,但对于移植物的存活时间却少有影响,其可能的机制为：（1）CK网络中存在其它的独立于IL－4的TH2类CK;（2）亚群中存在除TH1及TH2亚群以外的亚群THX;（3）IL－4本身作用的双重性和复杂性。     

肾移植术后患者排斥反应的观察与护理

肾移植术后急慢性排斥反应的诊断，目前主要依赖于患者的临床表现及彩色B超的检查。若能早期发现，及早诊断肾移植术后排斥反应，对患者的治疗、移植肾的成活及预后均具有较重要的临床意义。我们自1999年5月至2004年1月共成功实施肾移植术36例，通过对36例患者密切观察及精心护理，共有6例患者发生排斥反应。由于诊断及时，早期采取了治疗措施，6例患者均痊愈出院。现将我们的体会介绍如下。     

IL-10对大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的影响

目的:研究IL-10对大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的影响。方法:将18只供体Wistar大鼠和18只受体SD大鼠分为3组,每组各有6只Wistar大鼠和SD大鼠。Ⅰ组:Wistar→SD小肠移植;Ⅱ组:Wistar→SD小肠移植 CsA;Ⅲ组:Wistar→SD小肠移植 rrIL-10。术后3、5、7d观察病理学改变并用半定量RT-PCR方法检测IFN-γ、IL-2mRNA。结果:Ⅰ组术后3 d出现排斥反应,第7 d时最重;Ⅱ组术后7d部分出现轻度排斥反应;Ⅲ组术后5d出现轻度排斥反应,术后7d出现中度排斥反应。Ⅰ组IFN-γ、IL-2mRNA术后明显增高;Ⅱ组术后略升高,与Ⅰ组差异有统计学意义(P<0.01);Ⅲ组术后升高,较Ⅰ组升高程度低,二者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:IL-10可抑制大鼠小肠移植急性排斥反应。     

应用ROC曲线评价SIL-2R,IL-6,L10,CL-Ⅳ对肾移植排斥反应早期诊断的临床价值

目的：评价血清SIL-2R，IL-6，IL-10和CL-IV对早期诊断肾移植排斥反应的价值。方法：检测了34例肾移植病人及20名正常对照者血清SIL-2R，IL-6，IL-10，CL-IV的水平，通过分析特征工作曲线（ROC）评价其对早期诊断肾移植排斥反应的价值。结果：在肾移植排斥组中，SIL-2R，IL-6及IL-10均显著高于肾功能稳定组及正常对照组，而CL-IV在排斥组及肾功能稳定组间无明显差异，但高于正常对照组。通过ROC曲线下面积分析，发现IL-6最为敏感，SIL-2R次之，IL-10与CL-Ⅳ效果较差。结论：SIL-2R和IL-6是监测肾移植早期排斥反应的良好指标。     

IL-12P70及IFN-γ在预测肾移植术后 急性排斥反应中的应用

 【目的】 探讨血清IL-12P70&#65380;IL-4&#65380;IFN-γ在预测肾移植受者早期免疫状态的作用&#65377;【方法】 选取中山大学附属第三医院肾移植科行同种异体尸肾移植患者52例,其中男28例,女24例,平均年龄42.3岁,将患者分为正常组(n = 30)&#65380;急排组(n = 12)和感染组(n = 10)&#65377;分别于术前,术后第1&#65380;5天检测其血清IL-12P70&#65380;IL-4&#65380;IFN-γ这3种细胞因子浓度&#65377;数据统计使用SPSS 15.0,P < 0.05被认为有统计学意义,使用方差分析并加行LSD-t和SNK-q检验以检验3组患者3种细胞因子浓度的组间差异,作 ROC曲线&#65380;计算机处理ROC曲线下面积(Az),以评价这3种细胞因子对急性排斥反应的诊断价值&#65377;【结果】 三组患者术前及术后第1天血清IL-12P70&#65380;IFN-γ&#65380;IL-4浓度和IFN-γ/IL-4均无统计学差异;术后第5天各组患者血清IL-4浓度无统计学差异;急排组血清IL-12P70&#65380; IFN-γ浓度和IFN-γ/IL-4均显著高于正常组和感染组;急排组术后第5天血清IL-12P70&#65380;IFN-γ水平较术前和术后第1天明显上升(9.012 ± 0.736 vs 6.613 ± 0.598;40.402 ± 13.414 vs 31.539 ± 13.323,P < 0.05); IL-12P70&#65380;IFN-γ&#65380;IL-4&#65380;IFN-γ/IL-4在术后第5天的ROC曲线下面积分别为0.975,0.808,0.492,0.708;当IL-12P70浓度取值7.40 pg/mL时或IL-γ取值31.48 pg/mL时,对急性排斥反应预测的敏感度和特异度分别达到100%&#65380;85%或83.3%&#65380;85%&#65377;【结论】 血清IL-12P70&#65380;IFN-γ水平对肾移植受者移植术后早期的免疫状态有较好的预测价值;当血清IL-P70浓度高于7.40 pg/mL或IFN-γ浓度高于31.48 pg/mL时须高度怀疑急性排斥反应发生的可能性&#65377;