载Survivin-siRNA和蛇床子素阳离子脂质体纳米粒的制备工艺优化

目的:利用脂质体可同时装载水溶性成分和脂溶性成分的特点,制备载Survivin-siRNA和蛇床子阳离子脂质体纳米粒。方法:以膜材比、药脂比、超声时间和旋蒸温度为考察因素,采用正交试验法优化蛇床子素阳离子脂质体制备工艺。采用控制变量法以电位和粒径为指标,对HA-siRNA与鱼精蛋白体积比和HA-siRNA-鱼精蛋白复合物与脂质体比例进行考察。电位粒径仪测定其粒径和Zeta电位,透射电镜观察其形状;采用酶标仪测定不同浓度FAM-Survivin-siRNA标准溶液吸光度,计算载FAM-Survivin-siRNA与蛇床子素阳离子脂质体纳米粒的包封率。结果:采用薄膜分散法,通过正交试验得载蛇床子素阳离子脂质体最佳工艺为:膜材比3∶1,药脂比1∶5,旋蒸温度30℃,超声时间70 min包封率可达78.34%,通过控制变量法得载FAM-Survivin-siRNA与蛇床子素阳离子脂质体纳米粒最佳工艺为:Survivin-siRNA与鱼精蛋白体积比1∶1,鱼精蛋白复合物25μg,加入50μL阳离子脂质体。经电位粒径仪测得粒径(132.3±0.2)nm,Zeta电位(43.15±0.05)mV,其...     

脂质体作为免疫佐剂的应用进展

目的 概述脂质体作为免疫佐剂的应用进展.方法 检索近十年来国内外关于脂质体作为免疫佐剂的相关文献,并进行分析、归纳.结果 综述了脂质体在黏膜疫苗、DNA疫苗中的应用,以及病毒小体的应用进展.结论 脂质体在黏膜疫苗、DNA疫苗中具有广阔的应用前景,病毒小体在开发预防性和治疗性疫苗中具有巨大的潜能.     

SA脂质体介导GFP／bFGF基因在豚鼠耳蜗中的表达

目的 :观察天然碱性脂 (Stearylamine,SA)脂质体介导绿色荧光蛋白 /碱性成纤维细胞生长因子(GFP/bFGF)基因于不同时间段豚鼠耳蜗中的表达 ,为进一步研究耳聋的基因治疗提供实验基础。方法 :取豚鼠 1 6只 ,分成 4组 ,每组 4只。其中 3只右耳圆窗内注入SA -GFP/bFGF复合物 ,1只同法注入生理盐水作为对照。分别于术后第 2、7、1 4、2 1天取材。在荧光显微镜下观察GFP的表达 ,用免疫组化法检测bFGF的转导情况。结果 :荧光显微镜下见双侧耳蜗于术后第 2天开始部分细胞发出绿色荧光 ,第 7天达到高峰 ,支持细胞及内外毛细胞均显荧光 ,细胞轮廓清晰 ;第 1 4天开始减弱 ,第 2 1天消失。免疫组化染色显示 ,除血管纹外 ,耳蜗各回Corti器、螺旋韧带、螺旋缘及螺旋神经节细胞均有高浓度的表达产物 ,对照动物呈阴性表达。结论 :SA脂质体介导的GFP/bFGF基因单耳给药双侧耳蜗均有高效表达 ,为进一步研究基因治疗耳聋提供了可能。     

包裹碱性磷酸酶免疫脂质体的制备

目的:制备包裹碱性磷酸酶的免疫脂质体并评价实验方法.方法:采用逆相蒸发法、薄膜分散法制备包裹碱性磷酸酶的脂质体,应用戊二醛交联法、抗体衍生化法将脂质体与兔抗人IgG结合,使脂质体既包裹酶又具有免疫活性.对制备方法进行了分析比较.结果:应用逆相蒸发法制备的脂质体数量多,圆整均匀,具有较高的碱性磷酸酶活性;以戊二醛为交联剂结合抗体方便、高效、实用.结论:通过选择适当的实验方法,制备了具有酶和抗体活性的免疫脂质体.     

酸性成纤维细胞生长因子脂质体的制备及体外释药动力学

采用pH梯度法制备酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）脂质体,以包封率为考察指标,单因素筛选最优制备工艺：十八胺用量为0.02 g,柠檬酸缓冲液浓度为0.03 mol/L,aFGF投药量为0.04 mg/mL,内外水相pH差（ΔpH）为3.5,孵育温度为35 ℃,孵育时间为15 min。aFGF脂质体包封率为(78.82±2.56)%,Zeta电位为 9.68 mV,平均粒径 124.03 nm。透析法测定aFGF脂质体的体外释药动力学,研究结果表明aFGF脂质体与 aFGF原液相比具有一定的缓释作用。稳定性研究表明,aFGF脂质体较aFGF原液稳定性得到提高,4 ℃贮存为佳。所制备的aFGF脂质体包封率较高,稳定性较好,具有一定的缓释作用。     

bFGF治疗烧伤残余创面的研究

目的;探讨局部使用bFGF治疗烧伤残余创面的疗效。方法：全组64例患者,其中bFGF组20例,对照组16例;自身对照组28例,比较残余创面平均愈合速度。结果：应用bFGF患者的残余创面较非使用者愈合快。结论：在综合治疗烧伤残余创面的基础上,局部应用bFGF可促进创面愈合,是有一定潜力的方法。     

bFGF在宫颈癌中表达的临床意义

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）在宫颈癌中的表达及与宫颈癌的关系。方法采用免疫组化SABC法检测bFGF在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变（CIN）及正常宫颈组织中的表达。结果 bFGF在宫颈癌中的表达明显高于CIN及正常宫颈组织（P〈0.05）。bFGF的表达与临床分期、组织学分级、淋巴结转移及宫旁浸润有关。结论 bFGF可作为判断宫颈癌生物学行为的客观指标。     

bFGF mRNA在穿孔鼓膜的表达及意义

目的 研究鼓膜穿孔后成纤维细胞生长因子表达的可能变化特征与规律,探讨成纤维细胞生长因子在鼓膜穿孔修复过程中的作用。方法①选择１２０只健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠,随机分为６个序列组,分别为正常对照组,损伤后１、４、６、８、１０ ｄ组,每组动物２０只。③ＲＴ－ＰＣＲ和原位杂交方法检测 ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ在鼓膜的表达。结果①原位杂交方法检测 ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ的表达,定位于上皮下结缔组织层,且急性穿孔组有时效性。②ＲＴ－ＰＣＲ方法检测鼓膜穿孔后 ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ的表达规律,同样具有明显时效性。③ｂＦＧＦｍＲＮＡ的积分光密度值急性穿孔组与正常对照组ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ的表达量差异有显著性（Ｐ＜０．００１）。结论①ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ在急性穿孔后的鼓膜上有明显表达,表明其在急性穿孔鼓膜的愈合过程中可能意义重大。②ｂＦＧＦ ｍＲＮＡ在急性穿孔后鼓膜上的表达具有时序性,为医疗干预时机的选择提供了时间上的可能依据。     

膀胱癌病人血清和尿液中bFGF表达水平的检测

目的检测膀胱癌病人的血清和尿液中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达水平,并探讨其临床意义。方法采用ELISA方法检测36例膀胱癌病人术前和术后1周及14例健康对照者的血清及尿液中bFGF表达水平。结果膀胱癌病人血清和尿液中bFGF水平分别为(8.7±3.3)pg/mL、(4.1±2.0)pg/mL,均分别显著高于正常对照者的(4.6±1.8)pg/mL、(1.9±0.6)pg/mL,P<0.01。膀胱癌病人术后血清和尿液中bFGF水平均显著低于术前。膀胱癌病人术前血清和尿液中bFGF水平均与肿瘤病理分级、分期和复发之间密切相关。结论膀胱癌病人的血清和尿液中bFGF水平显著升高,且可能是膀胱癌诊断和生物学行为评价有价值的标记。     

外源性bFGF治疗兔下肢慢性缺血的研究

目的:探讨bFGF生长因子治疗后肢缺血兔的剂量关系.方法:将48只后肢缺血的兔模型分成四组(每组12只)分别注射rh-bFGF 5μg,10μg,20μg和缓冲溶液.处死前均采用DSA技术观察肢体侧支血管形成,计数侧支血管数.处死动物后取股内侧肌肉制作标本,进行毛细血管密度、微血管/肌纤维束比值检测.结果:(1)注射10μg和20μg bFGF后血管造影可见骨骼肌内、外侧有大量小血管形成.(2)10μg和20μg治疗组微血管密度和微血管/肌纤维束比值较对照组明显增高(P<0.01).结论:rh-bFGF可有效促进兔缺血肢体血管新生.     

阳离子脂质体-重组人内皮抑素腺病毒复合物靶向抗肿瘤治疗研究

目的 探讨阳离子脂质体-重组人内皮抑素腺病毒(lipo+Ad-hEndo)复合物的抗肿瘤效果.方法 制备阳离子脂质体(lipo)、重组人内皮抑素腺病毒(Ad-hEndo)及两者复合物,建立BALB/c裸鼠卵巢癌动物肿瘤模型,并将荷瘤裸鼠随机分为6组:生理盐水组、lipo组、lipo+腺病毒空载体(Ad-null)组、Ad-hEndo、lip+Ad-hEndo高剂量治疗组和低剂量治疗组.每7 d测量各组荷瘤裸鼠肿瘤体积,49 d后处死各组裸鼠剥取肿瘤称重,并将肿瘤组织进行调亡细胞计数及微血管密度检测.体外试验观察腺病毒中和抗体对阳离子脂质体-腺病毒复合物的作用.结果 lip+Ad-hEndo高、低剂量治疗组的瘤重抑制率分别为54.74%,70.65%,与其它各组比较差异有统计学意义(P<0.05);免疫组织化学及TUNEL观察到:两治疗组裸鼠肿瘤组织中,凋亡细胞增多,微血管数减少,与其它组比较差异有统计学意义(P<0.05).体外中和抗体荧光结果 显示:加腺病毒中和抗体的腺病毒感染细胞与未加中和抗体的腺病毒感染细胞比较,前者荧光表达数仅为后者的18.13%;而加腺病毒中和抗体的脂质体-腺病毒组感染细胞与未加中和抗体的脂质体-腺病毒感染细胞比较,前者荧光表达数达后者的70.09%.结论 在人卵巢癌动物模型中,lip+Ad-hEndo能有效抑制肿瘤的生长,且低剂量组的抑瘤效果好,阳离子脂质体可以有效地保护腺病毒不被中和抗体作用,仍然维持其感染活性,为重复注射腺病毒制剂而避免被抗体中和降低药效提供理论基础.     

阳离子脂质体基因载体的研究进展

肿瘤基因治疗的最大挑战之一是研制安全有效的基因转染载体。基因治疗载体一般分为病毒性载体和非病毒性载体。由于病毒型载体存在安全性问题,目前非病毒性载体的研究越来越受到人们的重视。脂质体作为常用的非病毒性载体容易制备,安全性高,但亦存在质控要求高,体内基因导入效率较低,且无靶向性,使得其应用受到限制。pH敏脂质体、阳离子脂质体等大大提高了脂质体的转运效率,也为非病毒载体在临床上的应用开辟了广阔的前景,本文就阳离子脂质体作为基因载体的研究予以综述。     

脂质体-IP10复合物对小鼠4T1乳腺癌的治疗作用

目的 用1,2-二油酰-3-三甲胺基丙烷(DOTAP)+胆固醇(CHOL)脂质体包裹pcDNA3.1-γ干扰素诱导蛋白-10(IP10)制备脂质体质粒DNA复合体即Lip-IP10,观察其对抗小鼠4T1乳腺癌的原位瘤及肺转移瘤的治疗作用,并探讨其作用机制.方法 建立4T1乳腺癌模型,将36只荷瘤小鼠随机分为生理盐水(NS)组、脂质体-pcDNA3.1复合物(Lip-null)组和脂质体-IP10复合物(Lip-IP10)组,尾静脉给药,观察各组肿瘤体积、肺转移结节数及小鼠生存期.原位瘤进行CD31染色,测定微血管密度(MVD).结果 与两对照组比较,Lip-IP10组的肿瘤体积明显较小(P<0.05),肺转移结节显著减少(各组中位数为NS组45个,Lip-null组40个,Lip-IP10组 3个,P<0.05),生存期延长(P<0.05),CD31染色结果 显示,Lip-IP10组的肿瘤MVD值较低(NS组44.25±5.51,Lip-null组 43.45±4.21,Lip-IP10组21.50±5.41,P<0.05). 结论 静脉给予Lip-IP10复合体可抑制小鼠4T1乳腺癌的原位瘤及肺转移瘤,其作用机制与IP10抑制肿瘤血管生成有关.     

枸杞多糖冷冻干燥过程参数优化研究

目的优化枸杞多糖的冻干过程参数,阐明其对所需升华耗时以及冻干率的影响。方法以冻干率与升华耗时为指标,采用正交试验法,考察物料厚度、冻干制品温度、解析温度、解析时间对枸杞多糖冻干过程的影响。结果物料厚度对升华干燥耗时影响较显著,而冻干制品温度影响较少。解析温度升高、解析时间延长有利于提高其制品的冻干率。冻干枸杞多糖的过程参数优化结果为:冻干制品温度-25℃,解析温度35℃,解析时间10 h。结论该冻干曲线可行。     

痰热清佐治慢性阻塞性肺疾病并发呼吸衰竭42例

目的观察痰热清注射液辅助治疗慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)并发呼吸衰竭的疗效。方法将82例COPD患者随机分为两组,治疗组42例,对照组40例,对照组仅予呼吸机及常规方案治疗,治疗组加用痰热清注射液静脉滴注,治疗后比较两组临床疗效、症状体征评分、血气分析指标及机械通气时间。结果治疗组总有效率显著高于对照组(90.47%vs 70.00%,P<0.01);治疗组在降低症状体征评分、使用呼吸机时间及改善血气分析指标方面优于对照组(P<0.01)。结论痰热清联合西医常规治疗在改善COPD患者咳嗽、咳痰、喘息症状,提高动脉氧分压,提高氧合指数,缩短上机时间方面具有较好疗效。     

16层螺旋CT技术参数对肘关节容积重建图像质量的影响

目的探讨16层螺旋CT技术参数对肘关节容积重建(volume rendering,VR)图像质量的影响。方法在CT扫描电压、电流固定的条件下采用不同的技术参数,分别对162例肘关节损伤患者作16层螺旋CT扫描,在CT三维影像工作站上进行容积重建,评估和比较不同技术参数下VR的图像质量。结果螺距相同时的VR,薄层重建的图像明显优于厚层重建的图像,厚层重建的VR图像失去诊断价值;重建层厚相同时,小螺距的VR图像优于大螺距的VR图像;在螺距≤1.2 mm、层厚≤3.0 mm的范围内,螺距及重建层厚相同而探测器不同时,16×0.75探测器的VR图像优于16×1.5探测器的VR图像。结论探测器为16×0.75或16×1.5、螺距≤1.2 mm、重建层厚≤2.0 mm时,16层螺旋CT的肘关节VR图像可以满足诊断要求。     

T2DM患者UAE与vWF：Ag及血小板参数的相关性研究

目的 探讨2型糖尿病患者尿白蛋白排泄量（UAE）与vWF：Ag、血小板参数的相关性.方法 检测172例T2DM（T2DM组）患者UAE,据24h-UAE水平分为3组：①正常白蛋白尿组（NAU）组,②微量白蛋白尿（MAU）组,③临床白蛋白尿（CAU）组.选取60例健康人作为健康对照（NC）组.同时检测各组对象的血浆vWF：Ag水平、血小板计数（PC）、平均血小板体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）.结果 T2DM组患者血浆vWF：Ag、PC水平均明显高于NC组（P〈0.01）,MAU组和CAU组患者UAE,PC,MPV,PDW明显高于NC组（P〈0.01）.多元逐步回归分析表明,T2DM组的UAE及血浆vWF：Ag,PC,MPV,PDW水平与NC组存在明显正相关（r分别为0.829,0.717,0.576,0.632,P值均〈0.01）;T2DM患者的UAE与血浆vWF：Ag,PC,MPV,PDW水平存在明显的正相关性（r分别为0.804,0.678,0.493,0.547,P值均〈0.01）.T2DM患者的血浆vWF：Ag水平与PC,MPV,PDW呈正相关（r分别为0.858,0.784,0.820,P均〈0.01）,与性别无明显相关性（r=0.391,P〉0.05）.结论 T2DM患者UAE与血浆vWF：Ag,PC,MPV,PDW水平呈正相关,随着UAE的增高,血浆vWF：Ag,PC,MPV,PDW水平也均逐渐升高.UAE,vWF：Ag及血小板参数对糖尿病肾病的早期诊断、血管内皮细胞损伤程度、血液高凝状态有重要评价意义.     

Qishen Taohong Granule as Adjuvant Therapy for Improving Cardiac Function and Quality of Life in Patients with Chronic Heart Failure:A Randomized Controlled Trial

Objective:To confirm the improvement of cardiac function and quality of life (QoL) in patients with chronic heart failure (CHF) via Chinese medicine (CM) Qishen...     

耳针辅助治疗社区气阴两虚型2型糖尿50例

目的观察耳针辅助治疗气阴两虚型2型糖尿病的临床疗效。方法将100例气阴两虚型2型糖尿病患者随机分为对照组和干预组,每组50例,对照组给予饮食和运动指导及降糖药口服,干预组辅以耳针治疗,疗程12周。治疗前后分别观察两组中医证候积分、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、餐后2h血糖(2-hour postprandial glucose,2hPG)、糖化血红蛋白A1c(hemoglobin A1c,HbA1c)、三酰甘油(triacylglycerol,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein)、体质量。结果干预组中医证候疗效显著优于对照组;治疗12周末,干预组中医证候积分、FPG、2hPG、HbA1c、TC、TG、LDL均较治疗前显著降低(P0.01),而对照组上述指标与治疗前比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论耳针辅助治疗能明显改善糖尿病患者气阴两虚证候,调节血糖和血脂,减轻体质量。     

科学素养与人文精神融合培养的探索及做法——以宝鸡职业技术学院护理人才培养模式为例

首先阐述了科学素养与人文精神的理论基础及融合培养意义,其次着重分析了该院特色“1234”模式：围绕一个目标,打造过硬的融合型师资队伍;坚持双轨并举,形成独特的融合式培养模式;体现三种能力,建立融合型考核评价体系;突出四位一体教学特色,实施分年级分阶段融合教育途径.