PTPN22基因多态性与儿童血小板减少性紫癜易感性的关联分析

[目的]分析非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶22(PTPN22)基因多态性与儿童血小板减少性紫癜(ITP)易感性的关联性.[方法]通过复合PCR和基质辅助激光解电离析飞行时间质谱(PCR-MALDI-TOF-MS)法对120例ITP患儿(观察组)及80例正常儿童(对照组)PTPN22基因-1123G>C(rs2488457)测定.[结果]观察组PTPN22-1123G>C等位基因中C频率62.50%,较对照组的71.25%差异有统计学意义(P<0.05);两组基因型比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组与对照组男童等位基因频率比较差异显著(P<0.05),女童比较无显著差异(P>0.05),两组同一性别基因型比较差异均无统计学意义(P>0.05).[结论]PTPN22-1123G>C多态性与儿童ITP易感性有关,C为优势等位基因,G为风险等位基因,PTPN22-1123G>C等位基因频率分布可能与儿童性别相关.     

白细胞介素-1F7基因rs3811047位点单核苷酸多态性对类风湿关节炎易感性与病情的影响

目的 探讨白细胞介素-1(IL-1)F7 基因中rs3811047 位点单核苷酸多态性(SNP)对类风湿关节炎(RA)易感性和病情的影响.方法 收集RA 患者184 例和同期正常健康献血者184 人为对照组,采用连接酶检测反应(LDR)PCR 方法 检测IL-1 F7 基因rs3811047 位点SNP,比较其等位基因频率及基因型频率在两组中的分布,并比较不同基因型RA 患者临床表现的差别.结果 RA 组和对照组IL-1 F7 基因rs3811047 位点A 等位基因频率分别为(16.21%,17.77%),G 等位基因频率为分别为(83.79%,82.32%),差异无统计学意义(P ＞0.05);AA、AG、GG 基因型分布频率在RA 组为2.20%、28.02%、69.78%,对照组为2.76%、29.83%、67.40%,两组间差异亦无统计学意义(P ＞ 0.05).184 例RA 患者中,含有A 等位基因的患者(AA 和AG 基因型)55 例,其关节肿胀数为(4.60 ±5.52)个、关节肿胀指数为4.89 ±5.70、休息痛为3.57 ±2.46、日常生活能力(HAQ)评分为(0.67 ± 0.70)分,不含A 等位基因的患者(GG 基因型)127 例,上述4 个指标的水平分别为(6.64 ±5.46)个、7.14 ±5.71、4.52 ±2.39、(0.99 ±0.67)分,两组间的差异均有统计学意义(P ＜0.05).结论 安徽籍汉族人群RA 易感性与IL-1 F7 基因中rs3811047 位点SNP 无关;但含有A 等位基因的RA 患者病情好于不含有等位基因A 的RA 患者,提示IL-1 F7 基因rs3811047 位点A 等位基因对RA 患者病情可能有一定的保护作用.     

特发性血小板减少性紫癜患者B细胞活化因子的表达及其基因多态性

目的 检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血浆B细胞活化因子(BAFF)水平及其基因多态性,并探讨二者在ITP中的作用.方法 采用AS-PCR及琼脂糖凝胶电泳法检测133例ITP患者及117名健康对照者的BAFF启动子-871 C/T基因多态性,采用ELISA法测定其血浆BAFF抗原表达水平(BAFF∶Ag).结果 ITP组BAFF基因启动子C/C、C/T、T/T三种基因型分布分别为33.1%、42.1%和24.8%,对照组分别为55.6%、33.3%及11.1%.ITP组T等位基因频率为45.9%,对照组为27.4%,两组比较差异均有统计学意义(P值均＜0.05).初发ITP组、治疗组和对照组BAFF∶Ag分别为875.86、502.59和736.88 pg/ml,两组比较差异均有统计学意义(P值均＜0.05).ITP组和对照组T/T基因型BAFF∶Ag中较C/C、C/T基因型高,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 BAFF过表达可能是ITP发病的危险因素.BAFF启动子-871 C/T基因多态性在ITP发病中具有一定作用,但与BAFF基因表达无关.     

不同PTPN22-1123G>C多态性基因型RA患者间血清GPI的比较

摘要：目的：探讨类风湿关节炎（RA）易感基因PTPN22-1123G>C多态性不同基因型别间血清葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）水平差异。 方法：采用ELISA法检测68例RA患者、69例非RA自身免疫性疾病(AID)患者和77例体检健康者血清GPI水平,PCR-RFLP技术检测PTPN22-1123G>C多态性分布。 结果：RA患者血清中GPI 浓度显著高于非RA AID患者和健康对照组（P均<0.01）。在RA活动组和非活动组,亦有显著差异（P<0.01）。PTPN22-1123G>C多态性位点在RA中的分布为：CC 19例、CG 25例和GG 24例,GG型RA患者的GPI浓度显著高于CC型（P<0.05）。 结论：PTPN22-1123G>C不同基因型RA患者血清GPI浓度具有显著性差异,提示T淋巴细胞的抗原刺激反应性对GPI浓度可能有影响。     

类风湿性关节炎患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性分析

目的分析类风湿性关节炎（rheumatoidarthritis,RA）患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性,探讨其与类风湿性关节炎发病之间的关联。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR．SSP）法,分析90例RA患者和200例健康对照组KIR基因。结果通过对RA病例组与正常对照组的9种KIR基因的分析,比较其基因频率发现：RA病例组KIR2DS4的基因频率显著低于对照组（P〈0．05）,差异具有统计学意义;其余各基因频率与对照组相比,P〉0．05,差异无统计学意义。结论RA患者KIR2Ds4基因可能与RA发病有关。     

我国广东地区汉族人群类风湿性关节炎患者IL-6启动子基因多态性的研究

目的了解我国广东地区汉族人群白细胞介素-6(IL-6)基因启动子-572C/G和-174G/C位点单核苷酸多态性对类风湿性关节炎(RA)的影响。方法应用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)检测168名体检健康者和120例RA患者的IL-6基因启动子-572和-174位点的基因型。结果我国广东地区汉族人群IL-6基因启动子-572位点存在C→G的突变,其基因型和等位基因频率分布在RA组和对照组比较差异有统计学意义(基因型频率:2χ=16.14,P=0.003;等位基因频率:2χ=16.71,P<0.001),其G等位基因在RA患者中明显低于健康对照组[比值比(OR)=0.36,95%可信区间(CI):0.21~0.61];-174位点存在G→C的突变,其基因型和等位基因分布频率在两组间差异亦有统计学意义(基因型频率:2χ=25.75,P<0.01;等位基因频率:2χ=25.99,P<0.01),其C等位基因在RA组明显高于健康对照组(OR=2.26,95%CI:1.91~2.68)。结论我国广东地区汉族人群IL-6基因启动子存在-572C/G与-174G/C的单核苷酸多态性,且这2个位点多态性与RA有关,其中IL-6-572位点的G等位基因可能对RA有保护作用,而IL-6-174位点等位基因C可能与RA发病的易感性有关。     

自噬相关基因5基因多态性及其单倍体型与帕金森病的相关性研究

目的 探讨自噬相关基因5( Atg5)基因3个标签单核苷酸多态性(Tag SNP,rs17587319C/G、rs573775C/T、rs9486315C/T)及其单倍体型与帕金森病(PD)发病的关系.方法 采用病例-对照研究,PD患者80例(病例组)和健康体检者87例(对照组)为对象,应用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性分析方法(PCR-RFLP)检测Atg5 Tag SNP rs17587319C/G、rs573775C/T、rs9486315C/T,并分析其基因型及等位基因频率在正常人群及PD患者中的分布特点.结果 Atg5 Tag SNP rs17587319C/G的C等位基因频率病例组为89.4％ (143/160),对照组为74.7％(130/174),差异有统计学意义(P＜0.01);病例组CC基因型频率为78.7％ (63/80),对照组为58.6％(51/87),差异有统计学意义(P＜0.01).SNP rs573775C/T和rs9486315C/T的等位基因频率及基因型频率在两组问的差异无统计学意义(P＞0.05).Logistic回归分析结果SNP rs17587319C/G的CC基因型与PD的发病有独立相关性(P＜0.01).单倍体型分析结果病例组中H1、H2单倍体型的频率高于对照组(P＜0.05和＜0.01).结论 H1,H2单倍体型和Atg5 Tag SNP rs17587319C/G的C等位基因可能是PD的危险因素.     

DDAH2C-449G基因多态性对脑卒中发病的影响

[目的]探讨DDAH2C-449G基因多态性与脑卒中及其危险因素的关系.[方法]本研究共纳入388例脑卒中患者和181例对照人群,其中动脉粥样硬化性脑梗死236例、脑出血152例,以DDAH2C-449G基因为遗传标记,采用聚合酶链式反应(PCR)和限制性片段长度多态性技术(RFLP)检测DDAH2基因多态性.[结果]动脉粥样硬化性脑梗死组GG基因型、G等位基因频率较对照组高,差别具有统计学意义(P＜0.05);脑出血组三种基因型频率及G和C等位基因频率较对照组无显著性差异(P＞0.05).[结论]DDAH2基因C-449G多态性可能与动脉粥样硬化性脑梗死发病有关,G等位基因可能是动脉粥样硬化性脑梗死易感基因;DDAH2基因C-449G多态性可能与脑出血发病无关.     

TGF-β1-509 C/T基因多态性与类风湿性关节炎相关性研究

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因启动子-509C/T多态性与贵州汉族人群类风湿性关节炎(RA)的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,分析90例RA患者及95例正常对照组的TGF-β1基因启动子-509C/T多态性.结果 RA组与正常对照组-509C/T基因型频率分布有显著差异(P＜0.05),-509 CC基因型RA组高于对照组(33.3%vs 21.1%),而-509TT型明显低于正常对照组(21.1%vs 36.8%);RA患者组-509位点的等位基因频率与正常对照组也有显著差异(P＜0.01),RA组C等位基因频率显著高于对照组(56.1%vs42.1%),T等位基因频率低于对照组(43.9%vs 57.9%).结论 TGF-β1基因启动子-509C/T多态性与贵州汉族人群类风湿性关节炎显著相关.     

补体C1q与类风湿关节炎活动度相关性研究

目的探讨血清补体C1q水平在类风湿关节炎(RA)活动度中的应用价值。方法收集160例RA患者(RA活动组110例,RA缓解组50例)和30例健康体检人群(健康对照组)的外周静脉血,测定其血清补体C1q水平,同时检测与RA疾病活动度相关指标红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)及环瓜氨酸肽(CCP)的表达,采用SPSS19.0软件进行比较分析。结果 RA活动组C1q、ESR、CRP水平高于RA缓解组和健康对照组,差异有统计学意义(P0.05),而RA缓解组与健康对照组C1q水平差异无统计学意义(P0.05),ESR、CRP与C1q比较,差异无统计学意义(P0.05);RA活动组RF阳性率高于RA缓解组和健康对照组,差异有统计学意义(P0.05),CCP阳性率高于健康对照组,但与RA缓解组比较,差异无统计学意义(P0.05),C1q与RF比较差异无统计学意义(P0.05),而与CCP比较差异有统计学意义(P0.05);C1q、ESR、CRP、RF与28-类风湿关节炎疾病活动分数(DAS28)呈显著相关(P0.05),CCP与DAS28无显著相关。结论补体C1q与RA活动度呈显著相关,可作为评价RA活动度的指标。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中趋化因子受体CXCR3 mRNA表达水平变化

目的 探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR3mRNA表达及其与疾病发病机制、疾病活动性的关系.方法 采用逆转录实时荧光定量(FQ-RT)-PCR的方法,在Light Cycler Real time PCR检测仪上检测59例PBC患者(活动期29例、缓解期30例)、结缔组织病(CTD)患者20例(疾病对照组)、健康体检者29名(健康对照组)外周血PBMC中CXCR3 mRNA的表达水平和含量.以Act=Ct(待测基因)-Ct(内参基因)比较基因表达水平的变化.结果 活动期PBC患者CXCR3 mRNA表达水平(Act=5.41±2.69)明显高于缓解期PBC患者(Act=7.77±2.74,t=3.39,P＜0.01);活动期PBC患者CXCR3 mRNA表达水平(Act=5.41±2.69)明显高于正常对照组(Act=7.16±2.76,t=2.45,P＜0.01)和疾病对照组(Act:7.24±2.75,t=2.53,P＜0.01);缓解期PBC患者CXCR3 mRNA表达水平与正常人及疾病对照组的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PBC患者CXCR3 mRNA表达水平显著高于正常人、疾病对照组和疾病缓解期,提示CXCR3的表达与PBC的发生发展存在一定关联性.     

葡萄糖-6-磷酸异构酶在诊断类风湿关节炎中的意义

目的 探讨类风湿关节炎(BA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)mRNA及血清中GPI抗原表达与RA发病机制及活动性的关系,分析比较GPI与抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体、抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体、类风湿因子(RE)在RA诊断中的价值.方法 用实时荧光定量逆转录(FQ-RT)-PCR检测60例RA患者(活动期28例、缓解期32例)、30例其他风湿性疾病患者、30名健康体检者PBMC中GPI mRNA的表达水平和含量[以△Ct=Ct1(待测基因)-Ct2(内参基因)来比较基因表达水平的高低];同时用ELISA检测各组血清中GPI和抗MCV抗体,抗CCP抗体和RF水平.结果 RA患者GPI mRNA表达水平[△Ct=4.21(3.04～7.23)]明显高于其他风湿性疾病组[△Ct=8.42(5.16～9.98),P<0.01]和健康对照组[△Ct=8.66(4.90～10.01),P<0.01],活动期组GPI mRNA表达水平[△Ct=3.78(1.28～6.09)]与缓解期组[△Ct=5.88(3.23～8.94)]的差异有统计学意义(H=11.760,P<0.01);RA组血清GPI水平[3.02(2.02～8.39)mg/L]明显高于其他风湿性疾病组[0.20(0.11～0.32)mg/L]和健康对照组[0.18(0.08～0.30)mg/L],且RA活动期组血清GPI水平[4.84(2.81～10.38)mg/L]与缓解期组[2.12(1.26～4.34)mg/L]差异也有统计学意义(H=9.830,P<0.01).同时检测GPI、抗MCV抗体和抗CCP抗体对RA的敏感度分别为68%(41/60)、57%(34/60)、58%(35/60);特异度分别为95%(57/60)、92%(55/60)、93%(56/60).结论 GPI mRNA可能参与了RA的发病过程,并与疾病的活动性相关,血清中GPI对RA诊断有相对较高的敏感度和特异度,可作为临床诊断RA的辅助指标.     

中期因子在急性白血病中的表达及其意义

目的 检测中期因子(Midkine,MK)基因在白血病患者中的表达,初步探讨其与白血病的关系.方法 应用实时定量逆转录PCR(RQ-RT-PCR)方法,对181例急性白血病(AL)患者、31名正常人骨髓标本进行了中期因子转录本的检测.结果 中期因子在初治和复发AL患者、AL完全缓解(CR)患者及正常人骨髓细胞均有表达.初治和复发AL患者中期因子表达明显高于正常人及CR患者(P＜0.01及P＜0.05).而正常人与CR患者相比差异无统计学意义.中期因子的表达在B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)各亚型(包括pro-B-ALL,common-B-ALL,pre-B-ALL)及各年龄段均有显著升高(P＜0.01),且与T细胞急性淋巴细胞白血病(T-ALL)、急性杂合性白血病及急性髓系白血病(AML)各FAB亚型问差异均有统计学意义(P值均＜0.01);与正常人相比,M2型患者中期因子表达明显升高(P＜0.01),与AML其他FAB亚型相比差异亦有统计学意义(P值均＜0.05);M3患者中期因子表达也较正常人明显升高(P＜0.05),但与除B-ALL和AML-M2外的其他白血病亚型间差异无统计学意义.CD34+患者较CD34-患者中期因子表达显著升高(P＜0.01),AML1-ETO融合基因阳性的M2患者较阴性的M2患者中期冈子表达显著升高(P＜0.05).结论 B-ALL、AML-M2和AML-M3型白血病患者中均存在中期因子基因不同程度的表达升高,为白血病诊断及其发病机制的研究提供了新的方向.     

风湿性心脏病二尖瓣狭窄患者血浆肾素血管紧张素醛固酮系统的变化与左心房重构的关系

目的 研究风湿性心脏病(风心病)二尖瓣狭窄(MS)患者血浆肾素血管紧张素醛固酮系统的变化,并探讨其与左心房重构的关系.方法 MS组患者55例,按有无心房颤动分为2组:窦性心律组(SR组)25例,心房颤动组(AF组)30例.正常对照组(NC组)17例.应用放射免疫方法(RIA)测定清晨空腹卧位循环血浆肾素活性(PRA)、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、醛固酮(Ald)水平.结果 AF组左心房内径与SR组、NC组相比显著增大,分别增大16.9%[(57.71±8.07)mm和(48.48±5.05)mm,P＜0.01)]与87.8%[(57.71±8.07)mm与(30.18±2.86)mm,P＜0.01],且SR组与NC组相比左心房内径亦明显增大,增大60.6%[(48.48±5.05)mm与(30.18±2.86)mm,P＜0.01)].AF、SR组患者循环PRA、AngⅡ、Ald浓度与NC组相比均显著增高(P＜0.01),AF组与SR组相比循环PRA、AngⅡ、Ald浓度亦均明显增高(P＜0.01,P＜0.05).应用Pearson相关分析显示MS患者左心房内径大小与循环PRA、AngⅡ、Ald浓度呈正相关系(r分别为0.277、0.485、0.431,P值分别为＜0.05,＜0.01,＜0.01).经多元线性逐步回归分析表明:循环AngⅡ和Ald与左心房内径呈直线相关(Bate值分别为0.362、0.261,P＜0.01、P＜0.05).结论 MS患者存在循环肾素血管紧张素醛固酮系统(RAAS)的激活,循环AngⅡ和Ald可能与左心房重构有关.     

维生素D受体基因多态性与2型糖尿病的易感性研究

【目的】探讨维生素D受体基因BsmI、ApaI位点多态性与汉族人群2型糖尿病的相关性。【方法】采用PCR-限制性多态性片断长度（RFLP）技术检测83例健康对照（NC）者、96例2型糖尿病（T2DM）患者的维生素D受体BsmI、ApaI位点基因型和等位基因频率。【结果】①T2DM组与NC组BsmI位点基因型、等位基因频率分布差异有统计学意义（均P〈0．05）,两组间等位基因B的相对风险率为2．50。②T2DM组与Nc组Apal位点基因型、等位基因频率分布差异均无统计学意义（x2=0．344,P=0．842;x2=0．090,P=0．765）。【结论】维生素D受体基因BsmI位点与2型糖尿病的发生密切相关,等位基因B可能是2型糖尿病的易感基因。     

探讨MTHFR基因多态性与新疆地区人群唇腭裂发病的关系

目的 探讨亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因C677T和A1298C多态性与新疆地区部分人群非综合征性唇腭裂（NSCL/P）发病的关系.方法 采用病例对照设计,试验组为新疆地区NSCL/P患儿44例（维吾尔族12例,汉族32例）;对照组为非唇腭裂患儿62例（维吾尔族26例,汉族36例）.应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）对MTHFR基因C677T和A1298C进行多态性检测.结果 新疆地区汉族NSCL/P的MTHFR C677T和A1298C位点基因型及等位基因频数与对照组差异无统计学意义（x2=0.07,P ＞0.05;X2 =0.30,P＞0.05）;维吾尔族NSCL/P的MTHFR C677T位点基因型及等位基因频数与对照组差异无统计学意义（X2=0.12,P ＞0.05）,而MTHFR A1298C位点基因型及等位基因频数与对照组比较其差异有统计学意义（X2=8.90,P ＜0.01）.结论 新疆地区汉族MTHFR基因C677T和A1298C位点多态性可能与NSCL/P的发生无关;维吾尔族MTHFR基因C677T位点多态性与NSCL/P的发生可能无关,而A1298C位点多态性与NSCL/P的发生相关,可能是NSCL/P发病的易感因素.     

自身免疫病患者碱性磷酸酶测定的意义

检测了50例自身免疫病患者的血清ALP、免疫球蛋白、补体及ENA多肽抗体。结果显示与对照组相比,自身免疫病患者的ALP活性升高(P＜0.05),IgG显著升高(P＜0.01),IgA、IgM升高(P＜0.05),C     

内皮细胞蛋白C受体基因6936A/G多态性和深静脉血栓形成相关性研究

目的 通过病例对照研究,了解内皮细胞蛋白C受体(EPCR)基因6936A/G多态性和深静脉血栓形成(DVT)的相关性,进一步了解EPCR在DVT形成中的重要性.方法 用ELISA法检测65例DVT患者和71名健康体检者的外周血血浆可溶性EPCR(sEPCR)水平;提取血细胞中的DNA,PCR扩增后将目的 片段EPCR基因直接测序,分析EPCR基因第6936位点的多态性.结果 ①正常对照组中,AG基因型组血浆sEPCR水平[(0.97±0.32)ng/L]明显高于AA基因型组[(0.61±0.24)ng/L](P＜0.01);DVT患者组中AG基因型组[(0.87±0.21)ng/L]亦明显高于AA基因型组[(0.50±0.18)ng/L](P＜0.01).②DVT组的血浆sEPCR水平[(0.68±0.32)ng/L]明显高于正常对照组[(0.54±0.22)ng/L](P＜0.05).③EPCR基因6936位点AG基因型分布频率DVT组高于正常对照组(P＜0.05).④AG基因型患DVT的危险性较AA基因型高(OR=2.75,95%可信区间为1.04～7.30)(P＜0.05).结论 血浆sEPCR水平与EPCR基因6936A/G多态性有关.DVT患者血浆sEPCR水平较正常人增高.EPCR基因6936 AG基因型者可能患DVT的风险高.     

新疆100例HIV／AIDS患者机体细胞免疫与合并机会性感染关系的研究

目的探讨人类免疫缺陷病毒（HIV）感染者和艾滋病（AIDS）患者机体细胞免疫与合并机会性感染的关系。方法总结新疆100例HIV／AIDS患者临床资料,分析CD3^＋、CD4^、CD8^＋细胞水平,及CD4^＋细胞数与发生机会性感染的关系。结果HIV／AIDS患者合并机会感染CD3^＋、CD4^＋细胞数明显低于未合并机会感染组且差异均具有统计学意义（t=-2．073,t=-4．087,P〈0．05）,CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋比值则差异无统计学意义（P〉0．05）。CD3^＋细胞数与CD4^＋细胞数的变化呈正相关（r=0．481,P〈0．05）,与CD8^＋细胞数的变化呈高度正相关（r=0．954,P〈0．05）。CD4^＋细胞含量〈200个／μl时,发生机会性感染高于CD4^＋细胞含量为200—500个／μl时,且差异有统计学意义（r=17．272,P〈0．05）。在CD4^＋细胞含量〈200个μl的HIV／AIDS患者中以PCP的合并感染为最高27．27％,其次弓形虫和结核（22．73％,13．64％）。结论HIV／AIDS患者并发机会性感染与免疫抑制程度有关,CD4^＋的水平是目前监测机会性感染的重要参考依据,不同地区机会性感染疾病谱略有不同,临床可采取相应的预防性治疗措施。